检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2019年第18期27卷 3319-3322页

作者：蔡恒刘文静薛一雪刘云会中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属第一医院老年医学科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110122

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)是血管依赖性实体肿瘤中一种无内皮细胞的"血管样"结构,是肿瘤在高度侵袭过程中的一种特殊的供血模式。VM广泛存在于多种人体恶性肿瘤中,与肿瘤的进展、转移、侵袭和复发密切相关。本... 详细信息

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)是血管依赖性实体肿瘤中一种无内皮细胞的"血管样"结构,是肿瘤在高度侵袭过程中的一种特殊的供血模式。VM广泛存在于多种人体恶性肿瘤中,与肿瘤的进展、转移、侵袭和复发密切相关。本文将就胶质瘤血管生成拟态的发生机制、信号通路途径以及分子调控机制等作一综述,并探讨目前研究中面临的问题,旨在为胶质瘤基因治疗的新切入点提供理论依据。

关键词：脑胶质瘤血管生成拟态胶质瘤干细胞

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阿尔茨海默症转基因小鼠模型Tg6799的鉴定及白藜芦醇对其的作用

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神经解剖学杂志 2018年第4期34卷 509-514页

作者：陈悦梁志满石广为彭立梁艳玲王亚苹王方张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515 南方医科大学第一临床医学院广州510515 南方医科大学珠江医院康复科广州510282

目的:鉴定转基因小鼠模型Tg6799,探究该模型对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)症状及病理特征的模拟情况及白藜芦醇(resveratrol,RES)对该模型的作用。方法:分别对Tg6799转基因小鼠进行基因鉴定、β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)... 详细信息

目的:鉴定转基因小鼠模型Tg6799,探究该模型对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)症状及病理特征的模拟情况及白藜芦醇(resveratrol,RES)对该模型的作用。方法:分别对Tg6799转基因小鼠进行基因鉴定、β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)免疫荧光染色、硫黄素S斑块染色、水迷宫行为学测试等检测。20只3月龄转基因小鼠随机分为空白对照组和白藜芦醇治疗组,每日连续灌胃40 d(60 mg/kg),Western Blot检测小鼠海马β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)表达,水迷宫检测小鼠学习记忆能力。结果:对Tg6799转基因小鼠基因鉴定可得到两条扩增条带;Aβ免疫荧光结果与基因鉴定结果一致;3月龄转基因小鼠脑内开始出现斑块沉积,且随年龄增长斑块数量越多,野生型小鼠9月龄仍未出现斑块沉积;水迷宫测试结果显示转基因小鼠组学习记忆能力低于野生型组。与对照组相比,白藜芦醇治疗组小鼠APP表达减少且空间记忆能力提高。结论:Tg6799是一种有效的AD动物模型,白藜芦醇能显著减少该模型APP表达并改善其学习记忆能力。本研究的结果为进一步探究白藜芦醇对AD的治疗作用及机制奠定了基础。

关键词：阿尔茨海默病白藜芦醇 β-淀粉样前体蛋白

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HCG11靶向结合miR-543调节血肿瘤屏障通透性

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解剖科学进展 2018年第6期24卷 588-592页

作者：郭吉喆赫倩茹刘丽波阮雪蕾马珺薛一雪中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110122

目的研究HCG11和miR-543对血肿瘤屏障通透性的作用及可能机制。方法应用Real-time PCR检测人脑微血管内皮细胞(endothelial cells, ECs)和人胶质瘤微血管内皮细胞(glioma endothelial cells, GECs)中HCG11和miR-543的表达以及二者的结... 详细信息

目的研究HCG11和miR-543对血肿瘤屏障通透性的作用及可能机制。方法应用Real-time PCR检测人脑微血管内皮细胞(endothelial cells, ECs)和人胶质瘤微血管内皮细胞(glioma endothelial cells, GECs)中HCG11和miR-543的表达以及二者的结合作用。应用Lipo3000将HCG11表达沉默和/或miR-543过表达质粒载体分别转染GECs,验证转染效率后,通过测量跨内皮细胞阻抗值(transendothelial electric resistance, TEER)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)渗透量,检测血肿瘤屏障通透性。应用Real-time PCR和Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5的表达。荧光素梅报告基因系统分析miR-543与HCG11的结合作用。结果 HCG11在GECs中表达显著增加,miR-543在GECs中表达显著降低;HCG11表达沉默、miR-543过表达均显著降低TEER值,增加HRP渗透量,降低ZO-1、Occludin和Claudin-5的蛋白表达水平。MiR-543与HCG11存在靶向结合作用。HCG11表达沉默显著增加miR-543的表达,增加血肿瘤屏障通透性。结论 HCG11通过靶向结合miR-543调节血肿瘤屏障通透性。

关键词： HCG11 miR-543 血肿瘤屏障紧密连接

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内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ上调LINC00263增强血肿瘤屏障通透性

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解剖科学进展 2018年第1期24卷 41-44,48页

作者：许鑫刘啸白薛一雪马珺刘丽波中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110122 中国医科大学附属盛京医院神经外科沈阳110004

目的研究LINC00263在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增加血肿瘤屏障通透性的作用及可能机制。方法应用Real-time PCR检测人脑微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)和人胶质瘤微血管内皮细胞(glioma endothelial cells,GECs)中LINC00263的表达以及EMAPII处理后LINC00263的表达。应用Lipo3000将LINC00263过表达和沉默质粒载体分别转染GECs,验证转染效率后,通过测量跨内皮细胞阻抗值(transendothelial electric resistance,TEER)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)渗透量,检测血肿瘤屏障通透性。应用Real-time PCR和Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1(zonula occludens-1)、Occludin和Claudin-5的表达。结果与ECs组相比,LINC00263在GECs中表达显著降低;EMAPII作用后GECs中LINC00263的表达显著上调;与对照组相比,LINC00263(+)组TEER值显著降低,HRP渗透量显著升高,ZO-1、Occludin和Claudin-5的m RNA和蛋白表达水平显著降低;LINC00263(-)组的结果与之相反。结论EMAPII增强血肿瘤屏障的通透性可能与上调LINC00263的表达,降低ZO-1、Occludin和Claudin-5的表达相关。

关键词：内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ 血肿瘤屏障 LINC00263 紧密连接

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核酸适配子结合无机纳米材料在肿瘤研究中的应用

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生物技术通报 2017年第11期33卷 48-53页

作者：彭立张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域... 详细信息

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域诊疗制剂中重要的组成部分;利用核酸适配子与靶标结合的特性将其与无机纳米材料结合后,可将靶向结合、生物成像及药物递送等特点集于一体,综合应用于肿瘤研究,同时有力于促进核酸纳米技术的发展。综述了近年不同无机纳米材料结合核酸适配子在肿瘤研究领域中的研究进展,以及对无机纳米材料在医学应用的安全性思考,以期早日实现新型靶向肿瘤治疗策略的开发。

关键词：核酸适配子纳米材料肿瘤

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嗜酸乳杆菌GGDEF和EAL结构域相关蛋白的表达、纯化及活性分析

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南方医科大学学报 2017年第5期37卷 633-639页

作者：何嘉辉孙洁丽闫文娟王方南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的鉴定嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)中含GGDEF和EAL结构域相关蛋白的功能。为进一步研究环二鸟苷酸(c-di-GMP)在该菌株中的调控机制奠定基础。方法从嗜酸乳杆菌ATCC4356基因组中PCR扩增出NH13_07045-GGDEF、NH13_07050和NH13_07055这3个基因片段,分别构建其重组表达质粒。经鉴定后,转入大肠杆菌表达宿主中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经直链淀粉树脂纯化后进行体外酶活性实验,再通过高效液相色谱检测反应产物。结果通过PCR扩增的目的基因片段经重组质粒双酶切后其大小与预期相符,测序结果与Gen Bank中嗜酸乳杆菌ATCC4356基因序列一致,表明重组质粒构建成功。SDS-PAGE和Western Blot检测表达的重组蛋白相对分子质量分别约为59000(含GGDEF结构域)、67000(含EAL结构域)和72000(含EAL结构域),与预期大小吻合。经树脂亲和柱纯化及浓缩获得目的蛋白。高效液相色谱分析结果显示,NH13_07045-GGDEF的表达产物体外无明显双鸟苷酸环化酶(DGC)活性,NH13_07050的表达产物体外具有磷酸二酯酶(PDE)活性,而NH13_07055的表达产物在体外无明显PDE活性。结论在本研究的3种基因中,NH13_07050的表达产物在体外具有磷酸二酯酶(PDE)的活性。为研究环二鸟苷酸在嗜酸乳杆菌中的调控机制提供了实验依据。

关键词：嗜酸乳杆菌环二鸟苷酸 GGDEF结构域 EAL结构域酶活性检测高效液相色谱

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支架蛋白RACK1小干扰RNA抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖、迁移和侵袭

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中国老年学杂志 2017年第2期37卷 263-266页

作者：孙静任丽莉张晓玉刘超锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的观察支架蛋白RACK1小干扰RNA(siRNA)对卵巢癌CAOV3细胞增殖、迁移和侵袭的影响和基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达变化。方法体外培养CAOV3细胞,实验分scramble siRNA组和RACK1 siRNA组;Lipofectamine 2000转染CAOV3细胞,Western印迹检测RACK1的干涉效能;MTT法测定CAOV3细胞的增殖率;划痕实验和transwell迁移和侵袭实验研究RACK1对细胞体外增殖、迁移和侵袭运动能力的影响;Western印迹检测CAOV3细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果与scramble siRNA组比较,RACK1 siRNA组RACK1的蛋白表达水平降低,明显抑制CAOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,降低MMP-2和MMP-9蛋白表达。结论下调RACK1表达可抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与改变MMP-2和MMP-9蛋白表达相关。

关键词： RACK1 siRNA 卵巢癌 CAOV3

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橄榄苦苷与Aβ1-42的亲和效应及对Aβ1-42诱导的Neuro-2a细胞凋亡的保护作用

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中风与神经疾病杂志 2018年第12期35卷 1087-1090页

作者：胡光强余录杜曦高小青秦大莲余崇林西南医科大学基础医学院解剖学教研室四川泸州646000 西南医科大学基础医学院化学教研室四川泸州646000 西南医科大学神经生物学研究室四川泸州646000 西南医科大学药学院药理教研室四川泸州646000

目的探讨橄榄苦苷对β淀粉样蛋白1-42(amyloidβ1-42,Aβ1-42)的抑制能力和亲和效应,以及其对Aβ1-42诱导的Neuro-2a细胞凋亡的保护作用。方法通过37℃孵育制备Aβ1-42纤维,利用Th-T荧光检测橄榄苦苷抑制Aβ1-42纤维的能力,用生物膜层干... 详细信息

目的探讨橄榄苦苷对β淀粉样蛋白1-42(amyloidβ1-42,Aβ1-42)的抑制能力和亲和效应,以及其对Aβ1-42诱导的Neuro-2a细胞凋亡的保护作用。方法通过37℃孵育制备Aβ1-42纤维,利用Th-T荧光检测橄榄苦苷抑制Aβ1-42纤维的能力,用生物膜层干涉(biolayer interferometry,BLI)技术实时检测橄榄苦苷与Aβ1-42纤维的亲和效应。进一步用MTT和流式细胞技术检测橄榄苦苷对Aβ1-42诱导的Neuro-2a细胞毒性和凋亡的影响。结果橄榄苦苷降低Aβ1-42与Th-T反应的荧光强度,抑制Aβ1-42纤维。另外BLI检测显示其与Aβ1-42具有较好的亲和力。并且,橄榄苦苷成剂量依耐性地减轻Aβ1-42诱导的Neuro-2a细胞毒性,降低Aβ1-42诱导的细胞凋亡。结论研究结果表明,橄榄苦苷可能通过结合并抑制Aβ1-42纤维保护阿尔茨海默病的细胞凋亡。

关键词：橄榄苦苷 Aβ1-42 Th-T BLI 亲和力 Neuro-2a 细胞凋亡

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支架蛋白活化蛋白激酶C受体1在胃癌细胞中的表达及其与胃癌细胞增殖的关系

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解剖学报 2017年第5期48卷 545-549页

作者：刘超任丽莉王一曌刘乙蒙肖建英锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学教务处辽宁锦州121001

目的探讨活化蛋白激酶C受体1C(RACK1,GNB2L1)在胃癌细胞HGC27中的表达及过表达RACK1对HGC27生长增殖的影响。方法体外培养胃癌未分化细胞HGC27和正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,收集细胞48 h后,提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR检测RACK1 mRNA在HG... 详细信息

目的探讨活化蛋白激酶C受体1C(RACK1,GNB2L1)在胃癌细胞HGC27中的表达及过表达RACK1对HGC27生长增殖的影响。方法体外培养胃癌未分化细胞HGC27和正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,收集细胞48 h后,提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR检测RACK1 mRNA在HGC27和GES-1细胞中的表达;利用Western blotting法检测RACK1蛋白在两种细胞中的表达;以人胚肾HEK293细胞c DNA为模板,构建pc DNA3.1Aflag-RACK1重组质粒,利用Lipo2000转染入HGC27细胞中,Western blotting法检测质粒的转染效率,MTT法检测过表达RACK1对HGC27胃癌细胞系生长增殖的影响。结果 HGC27胃癌细胞中RACK1的mRNA和蛋白水平表达低于GES-1细胞(P<0.01)。双酶切鉴定和测序分析表明,pc DNA3.1A-flag-RACK1重组质粒构建成功。将该质粒转入HGC27细胞后,与未转染组相比,空载转染组RACK1蛋白表达无明显区别(P>0.05),pc DNA3.1-RACK1转染组RACK1蛋白表达明显升高(P<0.01);转染pc DNA3.1A-flag-RACK1转染组细胞存活率在72 h和96 h明显少于pc DNA3.1空载对照组(P<0.01)。结论支架蛋白RACK1的mRNA和蛋白水平在HGC27细胞中低表达,上调RACK1的表达可明显抑制HGC27细胞增殖。

关键词：蛋白激酶1活化受体胃癌细胞增殖 HGC27细胞免疫印迹法

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应用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Pkmyt1相互作用的候选分子

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解剖学报 2017年第1期48卷 48-53页

作者：刘超孟智超栾治东任丽莉刘乙蒙肖建英锦州医科大学锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学基础医学实验教学中心辽宁锦州121101 锦州医科大学神经生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学教务处辽宁锦州121101

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组... 详细信息

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组织c DNA为模板,构建p GBKT7-Pkmyt1诱饵质粒,转化酵母感受态细胞后,分别接种于SD/-Trp(SDO)、SD/-Trp/X-α-Gal(SDO/X)和SD/-Trp/X-α-Gal/Ab A plates(SDO/X/A)培养板,检测其对酵母的毒性和自身激活能力,Western blotting法检测p GBKT7-Pkmyt1在酵母细胞中的表达。将人卵巢c DNA文库与含有p GBKT7-Pkmyt1的酵母感受态细胞融合,PCR筛选出阳性克隆,提取质粒,测序鉴定,再次检测其对酵母自激活能力,利用生物信息学分析筛选蛋白与胚胎发育的关系。结果酶切鉴定和Blast分析表明p GBKT7-Pkmyt1质粒构建成功。将该质粒转入Y2H golden中,在SDO板上克隆均匀生长,在SDO/X/A平皿上无克隆生长,Western blotting检测Pkmyt1在酵母细胞中有表达。PCR验证融合后的阳性克隆质粒有插入片段。通过初步筛选得到182种能够与Pkmyt1相互作用的蛋白质,经回复性实验进一步验证有46个与Pkmyt1之间存在相互作用的蛋白。结论通过筛选发现46个蛋白可能通过与Pkmyt1相互作用调控小鼠卵母细胞成熟和受精卵早期发育。

关键词： Pkmyt1 酵母双杂交蛋白-蛋白相互作用免疫印迹法小鼠

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