检索结果-内蒙古大学图书馆

前列腺素E2不同受体对足月妊娠子宫肌细胞分泌炎性细胞因子的不同调节作用（英文）

生理学报 2019年第2期71卷 248-260页

作者：张友义刘伟娜游兴姬古航徐晨倪鑫海军军医大学(第二军医大学)生理学教研室中国人民解放军第413医院妇科上海市长海医院妇产科复旦大学基础医学院生理学与病理生理学系中南大学湘雅医院分子代谢组学研究中心

前列腺素E2（prostaglandin E2, PGE2）在妊娠维持和分娩启动中起着关键作用。愈来愈多的研究表明,人类妊娠的维持和分娩启动是一个炎症过程。本研究用原代培养的足月妊娠人子宫平滑肌细胞（human uterine smooth muscle cells, HUSMCs... 详细信息

前列腺素E2（prostaglandin E2, PGE2）在妊娠维持和分娩启动中起着关键作用。愈来愈多的研究表明,人类妊娠的维持和分娩启动是一个炎症过程。本研究用原代培养的足月妊娠人子宫平滑肌细胞（human uterine smooth muscle cells, HUSMCs）作为研究对象,观察PGE2四种受体亚型（EP1、EP2、EP3和EP4）对妊娠HUSMCs分泌炎性细胞因子的影响。用药物处理和/或转染各受体siRNA后,使用ELISA试剂盒检测HUSMCs培养液中炎性分泌因子的浓度。结果显示,PGE2可剂量依赖性促进白细胞介素6 （interleukin 6, IL-6）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα, TNFα）分泌,而抑制趋化因子（c-x-c基序）配体8（CXCL8）释放,但对IL-1β和趋化因子（c-c基序）配体2 （CCL-2）的分泌没有影响。EP1/EP3激动剂17-苯基-trinor-PGE2刺激IL-6和TNFα的分泌,抑制IL-1β和CXCL8的分泌。转染EP3siRNA能逆转17-苯基-trinor-PGE2对IL-6和TNFα分泌的影响,但是17-苯基-trinor-PGE2对IL-1β和CXCL8的作用仍然存在。敲低EP1可阻断17-苯基-trinor-PGE2对IL-1β分泌的抑制效应,而17-苯基-trinor-PGE2促进IL-6和TNFα分泌的作用仍然存在。EP2和EP4激动剂均可刺激IL-1β和TNFα分泌,这种效应可分别被EP2siRNA和EP4 siRNA所逆转。磷脂酶C （phospholipase C, PLC）和蛋白激酶C （protein kinase C, PKC）的抑制剂可阻断17-苯基-trinor-PGE2对TNFα和CXCL8分泌的影响。PI3K抑制剂LY294002和P38抑制剂SB202190可分别阻断17-苯基-trinor-PGE2诱导的IL-1β和IL-6分泌。腺苷酸环化酶和PKA的抑制剂均能逆转EP2和EP4激动剂促进IL-1β和TNFα分泌的作用,而PLC和PKC抑制剂则可阻断EP2和EP4诱导的TNFα分泌,但不能阻断IL-1β的分泌。以上结果表明,PGE2不同受体对子宫肌细胞分泌炎性细胞因子具有不同作用,提示PGE2可能通过不同受体的精细调节来调控妊娠期子宫肌层中的炎性微环境。

关键词：子宫肌层前列腺素E2 促炎细胞因子妊娠

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长学制临床医学专业病理生理学自主设计性实验教学探讨

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基础医学教育 2017年第6期19卷 434-436页

作者：张海曹冬梅魏纯纯任安经李忆东章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

病理生理学在医学教学中是联系基础医学和临床医学的"桥梁"课程。实验教学在病理生理课程教学过程中占据着非常重要的地位。传统的验证性实验是一种"从书本来,到书本中去"的教学模式,不利于发挥学生的主观能动性和... 详细信息

病理生理学在医学教学中是联系基础医学和临床医学的"桥梁"课程。实验教学在病理生理课程教学过程中占据着非常重要的地位。传统的验证性实验是一种"从书本来,到书本中去"的教学模式,不利于发挥学生的主观能动性和培养创造性思维。自主设计性实验教会学生如何发现问题、提出假说、搜集资料、设计实验、实验步骤与方法等技能,培养学生创新、实践能力。第二军医大学在长学制临床医学专业开设病理生理学自主设计性实验,锻炼了学生的创新思维能力,也暴露了课程设置上的不足,为之后课程的优化提供参考。

关键词：病理生理学实验教学自主设计性实验教学整合

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甾类激素对原代培养附睾头部上皮细胞中Bin1b表达的影响

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第二军医大学学报 2016年第1期37卷 22-26页

作者：苏杰卢建黄高翔曹冬梅第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的探讨甾类激素对原代培养的大鼠附睾头部上皮细胞中Bin1b表达的影响。方法不同浓度(10^(-9),10^(-8),10^(-7) mol/L)的二氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)、(10^(-9),10^(-8) mol/L)雌二醇(estradiol,E2)及(10^(-8),10^(-7) mol/L)地塞米松(dexamethasone,Dex)处理原代培养的附睾头部上皮细胞0~5d,分别采用1.2%琼脂糖凝胶电泳和PCR的方法检测Bin1b mRNA的表达。结果原代培养的附睾上皮细胞中Bin1b mRNA的表达呈时间依赖性减少,培养第2天Bin1b mRNA水平下调约40%,第3天下调约70%,5d时附睾上皮细胞中几乎检测不到Bin1b mRNA的表达。不同浓度的DHT对Bin1b mRNA表达的下降有不同程度的减缓,10-9 mol/L的DHT使Bin1b mRNA表达较对照细胞增加约37%(P<0.05),10^(-8) mol/L及10^(-7) mol/L DHT处理后Bin1b mRNA表达进一步的增加。不同浓度的E_2和Dex对Bin1b mRNA表达的下降无明显调节作用。结论雄激素能上调原代培养的附睾头部上皮细胞中Bin1b的表达,而雌激素和糖皮质激素没有明显的调节作用。

关键词：附睾 β防御素 Bin1b 性腺甾类激素

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以转化医学的理念指导病理生理学教学探讨

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基础医学教育 2016年第12期18卷 960-962页

作者：张海曹冬梅李忆东张晔任安经章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

病理生理学是联系基础医学和临床医学的桥梁课程,为临床课程的学习打下坚实的基础。转化医学是以临床上的需求来确定基础研究的方向和内容,再将研究的成果用于临床实践。它涉及基础医学、临床医学等多学科,是跨学科的研究。病理生理学... 详细信息

病理生理学是联系基础医学和临床医学的桥梁课程,为临床课程的学习打下坚实的基础。转化医学是以临床上的需求来确定基础研究的方向和内容,再将研究的成果用于临床实践。它涉及基础医学、临床医学等多学科,是跨学科的研究。病理生理学与转化医学的核心理念都是将基础医学与临床医学紧密联系。在病理生理学的教学中充分体现转化医学的思想,以提高教学质量。

关键词：病理生理学转化医学临床思维

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翻转课堂在病理生理学实验教学中的应用

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基础医学教育 2016年第12期18卷 991-993页

作者：许熊飞魏纯纯师建辉杨瑞彭骏章卫平第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学训练部数字化课程中心上海健康医学院图书馆

为探讨翻转课堂教学模式在病理生理学实验教学中的应用效果,通过比较传统教学模式和翻转课堂教学模式的教学效果,发现翻转课堂可有效提升学员开展实验的兴趣和效率,培养学员自主学习能力,显著提高病理生理学实验教学效果。

关键词：病理生理学实验教学翻转课堂教学模式

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受磷蛋白重组腺病毒的制备与鉴定

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医学研究杂志 2016年第10期45卷 48-53页

作者：刘梦娜汪凯任安经章卫平吕建新温州医科大学检验学院、生命科学学院 325035 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法将RT-PCR获得的受磷蛋白PLB cDNA克隆至pShuttle-CMV载体,PmeⅠ酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从... 详细信息

目的构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法将RT-PCR获得的受磷蛋白PLB cDNA克隆至pShuttle-CMV载体,PmeⅠ酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从而获得重组腺病毒载体,PacⅠ酶线性化该重组载体,转染293细胞进行病毒的包装和扩增,经超离心对重组病毒Ad-PLB进行纯化;测定病毒效价后,体外感染大鼠心肌细胞H9C2,Western blot法验证腺病毒病毒介导的重组PLB蛋白表达。结果成功构建了重组腺病毒载体,体外包装制备了PLB的重组腺病毒,扩增纯化后的病毒效价达6.25×10^(10)/ml,能有效介导PLB在心肌细胞中的重组表达。结论过表达受磷蛋白PLB的重组腺病毒载体构建成功,为之后受磷蛋白PLB的相关生物学功能研究奠定了基础。

关键词：受磷蛋白腺病毒心肌肌质网

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糖皮质激素与miRNA关系的研究现状

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生命的化学 2016年第3期36卷 315-321页

作者：李于鑫杜安通丁宇陈玉霞上海市第六人民医院麻醉科上海200233 中国人民解放军第二军医大学学员旅上海200433 中国人民解放军第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

糖皮质激素(glucocorticoid,GC)因具有抗炎、抑制免疫反应、调节能量代谢和细胞增殖凋亡等作用而广泛使用于临床。作为非编码RNA,内源性miRNA通过影响靶基因的表达水平在机体发育和疾病发生中发挥广泛的调控作用。目前研究发现,糖皮质... 详细信息

糖皮质激素(glucocorticoid,GC)因具有抗炎、抑制免疫反应、调节能量代谢和细胞增殖凋亡等作用而广泛使用于临床。作为非编码RNA,内源性miRNA通过影响靶基因的表达水平在机体发育和疾病发生中发挥广泛的调控作用。目前研究发现,糖皮质激素能通过糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)介导调节miRNA的表达,而miRNA也能通过影响糖皮质激素受体的表达水平调节细胞对糖皮质激素的反应性。在许多疾病模型中,miRNA和糖皮质激素受体之间通过密切互作关系共同影响疾病的发生发展。

关键词： miRNA 糖皮质激素癌症炎症神经系统功能应激

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利用细菌内同源重组技术构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体

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第二军医大学学报 2014年第2期35卷 185-190页

作者：李玲国蓉常绪生印慨张晔刘志民章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学长征医院内分泌科上海200003 第二军医大学长海医院普通外科上海200433

目的构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体,最终获得胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入小鼠,为胰岛β细胞功能研究提供良好的基因敲除动物模型。方法以低拷贝质粒pBR322-2s为骨架构建取获载体(retrieving vect... 详细信息

目的构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体,最终获得胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入小鼠,为胰岛β细胞功能研究提供良好的基因敲除动物模型。方法以低拷贝质粒pBR322-2s为骨架构建取获载体(retrieving vector),应用λ噬菌体Red重组酶介导的缺口修复(gap-repair)方法,通过细菌内的同源重组克隆长度约为12kb的小鼠胰岛素2(Ins2)基因组DNA,同时构建1个带有内部核糖体进入位点(IRES)序列、Cre重组酶序列和正负向筛选标记基因的微型打靶载体(mini-targeting vector),最后通过同源重组获得Ins2-Cre打靶载体。结果以Ins2基因的第3外显子为靶点,成功构建了受内源性Ins2基因启动子严格调控的表达Cre重组酶的基因敲入型打靶载体。结论成功构建了在胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入型打靶载体,为获得胰岛β细胞中基因特异性敲除小鼠模型提供了关键材料。

关键词：胰岛分泌细胞 Cre重组酶基因打靶打靶载体同源重组内部核糖体进入位点

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锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

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中国病理生理杂志 2014年第5期30卷 876-880页

作者：朱晓彤杨瑞周露婷张晔李玲章卫平施广霞陈玉霞第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 大连医科大学病理生理学教研室辽宁大连116044

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-... 详细信息

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。

关键词：含锌指和BTB区蛋白20 重组腺病毒甲胎蛋白类转录调节

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军医院校生物技术本科生实践教学改革探讨

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西北医学教育 2014年第1期22卷 20-20,34页

作者：周立宁李密许劲松任安经第二军医大学训练部教务处上海200433 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

实践教学是生物技术专业人才培养的关键一环,本文从改革生物技术实践教学体系、建立本科导师制、拓宽校外实践教学交流平台、优化毕业考评机制等方面对加强和完善实践教学体系进行了研究和探讨。

关键词：生物技术专业实践教学毕业实习

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