检索结果-内蒙古大学图书馆

第九次全国生物制品学术会议

作者：朱亚祝婧烨吴腾捷黄海武赵春女瞿爱东上海生物制品研究所第一研究室上海200052

目的：为人源化狂犬病毒抗体提供高亲和力的具有中和活性的单抗细胞株。方法：按细胞融合技术制备抗狂犬病毒G蛋白的McAb，并对其特异性、相对亲和力以及中和活性等进行了鉴定。结果: 获得10株单克隆抗体，一株为IgM，一株为Ig... 详细信息

目的：为人源化狂犬病毒抗体提供高亲和力的具有中和活性的单抗细胞株。方法：按细胞融合技术制备抗狂犬病毒G蛋白的McAb，并对其特异性、相对亲和力以及中和活性等进行了鉴定。结果: 获得10株单克隆抗体，一株为IgM，一株为IgG2a，其余都为IgG1，其中6株：4A12，7E11，11D5，1B8，8G11，2A1，具有中和抑制狂犬病毒复制的活性。结论: 成功获得具有中和活性的抗Rabies G蛋白单抗的细胞株，为进一步获得人源化抗狂犬病毒抗体奠定了基础。

关键词：狂犬病 G蛋白纯化单克隆抗体细胞融合技术制备方法生物制品

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

百日咳毒素S1亚单位截短片段在大肠杆菌中的表达纯化与初步应用

百日咳毒素S1亚单位截短片段在大肠杆菌中的表达纯化与初步应用

引用

第九次全国生物制品学术会议

作者：杨瑜朱为应通峰徐帆洪黄帼英瞿爱东上海生物制品研究所第一研究室上海200052

目的：克隆百日咳毒素S1亚单位C端截短片段S146，构建表达蘑组子，在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白，利用其自制抗体进行包被初步建立特异性检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA方法。方法: PCR扩增得到S146基因产物，将其亚克隆入载体... 详细信息

目的：克隆百日咳毒素S1亚单位C端截短片段S146，构建表达蘑组子，在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白，利用其自制抗体进行包被初步建立特异性检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA方法。方法: PCR扩增得到S146基因产物，将其亚克隆入载体pUC18，通过转化测序，筛选到阳性重组体pUC18-S146，双酶切获得S146编码基因，连接入载体pET16b，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达。表达产物经镍离子亲和层析柱纯化，并用SDS-PAGE和Western blot鉴定。纯化S146蛋白免疫家兔获得抗血清，经Protein G柱纯化后，作为包被抗体与抗天然百日咳毒素抗体联合特异性检测无细胞百日咳原液中的百日咳毒素。结果: 成功表达和纯化S146蛋白，用纯化PT S146片段免疫家兔产生的抗体可特异性识别天然PT;将抗S146抗体与抗天然PT抗体联合组建双抗体夹心ELISA法能够检测天然PT，而与白喉类毒素、破伤风类毒素和FHA无交叉反应，为研制特异性检测试剂，提供一种疫苗的质量控制方法奠定基础。

关键词：百日咳毒素 S1亚单位基因克隆诱导表达 ELISA PCR扩增疫苗生物制品

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型重组结核抗原亚牛痘病毒的构建及其免疫原性研究

新型重组结核抗原亚牛痘病毒的构建及其免疫原性研究

引用

第九次全国生物制品学术会议

作者：楼觉人张群朱琳上海生物制品研究所第二研究室上海200052

目的：构建5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组亚牛痘病毒，并研究其特异免疫原性。方法：运用同源DNA重组技术将带有结核分泌抗原Ag85A和ESAT6的基因片段插入表达质粒pgpt ATA-18中。重组表达质粒导入牛痘病毒Ankara(MVA)后... 详细信息

目的：构建5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组亚牛痘病毒，并研究其特异免疫原性。方法：运用同源DNA重组技术将带有结核分泌抗原Ag85A和ESAT6的基因片段插入表达质粒pgpt ATA-18中。重组表达质粒导入牛痘病毒Ankara(MVA)后，使用MPA选择培养基挑取空斑，经Western blot鉴定后，得到5个种类的带有结核抗原基因的重组病毒单克隆。用构建的5种重组亚牛痘病毒免疫小鼠，采用MTT法检测免疫后小鼠脾淋巴细胞对特异结核抗原的增殖反应;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ的含量;采用结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)皮内试验以检测重组亚牛痘病毒引发的针对结核抗原的特异细胞免疫应答。结果: 构建的5种结核抗原重组亚牛痘病毒介导的细胞表达产物经Westernblot鉴定发现与结核抗原一致的表达条带。免疫小鼠两次后，5种重组病毒免疫组脾淋巴细胞体外与Ag85-ESAT6融合蛋白共培养后表现出明显的增殖活性，而同组细胞与生理盐水共培养后无增殖表现(P＜0.01);与空亚牛痘病毒或生理盐水免疫后小鼠相比，5种重组MVA免疫组脾淋巴细胞与Ag85-ESAT6融合蛋白共培养后同样表现出明显的增殖活性(P＜0.01)。5种重组MVA免疫组脾细胞经Ag85-ESAT6融合蛋白刺激后的培养上清液中IFN-γ的浓度均较同组细胞经生理盐水刺激明显增高(P＜0.05);与空亚牛痘病毒和生理盐水免疫组小鼠相比，5种重组MVA免疫组脾淋巴细胞与Ag85-ESAT6融合蛋白共培养的细胞上清液中IFN-γ的浓度均升高(P＜0.01)。与空亚牛痘病毒或生理盐水免疫后小鼠相比，5种重组MVA免疫组小鼠对PPD都表现出显著的迟发型超敏反应应答(P＜0.05)。结论: 成功构建了5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组亚牛痘病毒疫苗，其免疫小鼠后可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫。

关键词：结核分枝杆菌重组亚牛痘病毒疫苗免疫原性重组表达检测方法生物制品

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HIV-1核衣壳蛋白p24在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化

HIV-1核衣壳蛋白p24在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化

引用

第九次全国生物制品学术会议

作者：陆瑾徐帆红瞿爱东上海生物制品研究所第一研究室上海200052

目的：用基因工程方法获得HIV-1 p24蛋白编码区基因片段，构建重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达目的蛋白。方法：设计带有酶切位点的引物，扩增p24基因，分别连接到pET-11c和pET-16b载体上，将二种表达载体转化到B121(DE3)中，诱... 详细信息

目的：用基因工程方法获得HIV-1 p24蛋白编码区基因片段，构建重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达目的蛋白。方法：设计带有酶切位点的引物，扩增p24基因，分别连接到pET-11c和pET-16b载体上，将二种表达载体转化到B121(DE3)中，诱导表达。选择离子交换层析和分子筛层析纯化p24。结果: p24在大肠杆菌中高效表达，p24在非还原性电泳中呈单一条带，提示有较好的立体结构，p24-pET-16b的表达量占到总蛋白表达量的30％。经纯化后蛋白纯度达到90％以上。

关键词： HIV-1核衣壳蛋白 p24基因片段 Gag 基因扩增蛋白表达蛋白纯化生物制品

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水痘减毒活疫苗的研制及免疫效果观察

引用

国际生物制品学杂志 2006年第3期29卷 97-100页

作者：陈志慧王宪明殷月娣王亮沈谊清徐建军吕国贞王树巧上海生物制品研究所生技中心 200052 上海生物制品研究所质保部 200052 上海生物制品研究所流行病研究室 200052

目的观察由日本大阪大学微生物病研究会（BIKEN）提供的Oka株水痘病毒研制的水痘减毒活疫苗的稳定性、安全性和免疫原性。方法按WHO规程要求建立主种子批和工作种子批，检测病毒的生物学特性和疫苗稳定性。在上海市、江苏省进行临床试验... 详细信息

目的观察由日本大阪大学微生物病研究会（BIKEN）提供的Oka株水痘病毒研制的水痘减毒活疫苗的稳定性、安全性和免疫原性。方法按WHO规程要求建立主种子批和工作种子批，检测病毒的生物学特性和疫苗稳定性。在上海市、江苏省进行临床试验，5批疫苗共接种468名2～6岁易感儿童，观察接种者的不良反应，测定抗体阳转率及抗体几何平均滴度。结果Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上传10代，其生物学特性相似，疫苗在2～8℃保存2年，病毒滴度下降0．3～0．51gPFU／剂。易感儿童接种后皮疹发生率为0．21％；低、中、高发热反应率分别为21．79％、10．68％、0．64％。抗体阳转率平均为92．03％。结论研制的水痘减毒活疫苗的质量与国外同类产品相似，在易感儿童中的安全性与免疫原性良好，宜推广应用。

关键词：疱疹病毒3型,人水痘疫苗疫苗,减毒稳定性免疫效果

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

破伤风类毒素非磷脂脂质体疫苗的实验研究

引用

上海免疫学杂志 2000年第1期20卷 25-28页

作者：沈诚诚刘庆良卫生部上海生物制品研究所免疫研究室上海200052

以二氧乙烯十六烷醚、胆固醇和油酸为原料制备非磷脂脂质体 ,试验证明其包裹率高、稳定性好。与破伤风类毒素(TT )铝佐剂疫苗相比较 ,TT非磷脂脂质体疫苗二针免疫小鼠产生的抗体应答水平高一倍左右 ,抗体亚类以IgG1为主 ,加入IFN γ可增... 详细信息

以二氧乙烯十六烷醚、胆固醇和油酸为原料制备非磷脂脂质体 ,试验证明其包裹率高、稳定性好。与破伤风类毒素(TT )铝佐剂疫苗相比较 ,TT非磷脂脂质体疫苗二针免疫小鼠产生的抗体应答水平高一倍左右 ,抗体亚类以IgG1为主 ,加入IFN γ可增加IgG2a亚类应答。但免疫脾细胞IL 2产量不高。此外 ,该疫苗鼻粘膜接种可诱导显著的血清抗体应答。因而这种新型脂质体值得疫苗工作者重视。

关键词：破伤风类毒素非磷脂脂质体疫苗粘膜免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国幽门螺杆菌cagA克隆和基因序列分析

引用

世界华人消化杂志 1999年第8期7卷 669-672页

作者：钟平吴昆详徐帆洪许春娣上海瑞金医院小儿内科徐家裕上海生物制品研究所诊断试剂研究室上海市2000522 上海瑞金医院小儿内科上海市200025

目的　了解和分析中国幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）菌株细胞毒素相关基因Ａ（ｃａｇＡ）的核苷酸序列特性．方法　从两位患胃溃疡儿童的胃粘膜中分离两株Ｈｐ菌株，用ＰＣＲ方法扩增ｃａｇＡ基因... 详细信息

目的　了解和分析中国幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）菌株细胞毒素相关基因Ａ（ｃａｇＡ）的核苷酸序列特性．方法　从两位患胃溃疡儿童的胃粘膜中分离两株Ｈｐ菌株，用ＰＣＲ方法扩增ｃａｇＡ基因的５○端和３○端的两个片段并作克隆和序列分析．结果　两株中国Ｈｐ菌株ｃａｇＡ基因之间的同源性为９４％～９５％．中国Ｈｐ菌株与国外菌株相同区段比较，５○端的同源性为８９％～９２％，３○端的同源性为６９％．结论　中国Ｈｐ菌株与国外Ｈｐ菌株ｃａｇＡ基因５○端序列部分区域的同源性较好，可以作为分子检测Ｈｐ感染的靶基因序列，而ｃａｇＡ基因３○端序列部分区域的同源性较差，可以作为Ｈｐ分子流行病学研究的靶基因序列．

关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A 序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立