检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2002年第1期23卷 64-66页

作者：周雍金慧英冯伟华胡惠民郑尊印木泉第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝... 详细信息

目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝、睾丸两器官均发生严重的氧化损伤 ,细胞的抗氧化能力明显降低。但两者的变化规律不同 :肝脏在 6 h组 MT大量表达 (达正常值的 6 .7倍 )后 ,上述损伤逐渐减轻 ;而睾丸 MT表达的氧化损伤尽管在前 3h并不严重 ,但此后不断加剧。结论 :急性镉中毒时睾丸与肝氧化损伤规律明显不同 ,MT在睾丸中不能被诱导表达是睾丸对镉极其敏感的原因之一。

关键词：镉中毒氧化还原金属硫蛋白大鼠睾丸损伤

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氟烷、七氟醚肝毒性与肝细胞钙平衡

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 1-5页

作者：俞卫锋冯伟华俞凤珍魏尧梅郑唯强沙继宏第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科 200433 第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学长海医院烧伤科第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学基础医学部中心实验室

目的:研究卤代类吸入麻醉药肝毒性与肝细胞钙平衡的关系。方法：应用酶诱导缺氧大鼠模型、Ca(2＋)细胞化学定位法、EDX电镜微量元素分析、离体大鼠肝细胞及肝脏微粒体Ca(2＋)摄取及释放、肝脏显微病理的体视学分析及肝脏超微病理的电子... 详细信息

目的:研究卤代类吸入麻醉药肝毒性与肝细胞钙平衡的关系。方法：应用酶诱导缺氧大鼠模型、Ca(2＋)细胞化学定位法、EDX电镜微量元素分析、离体大鼠肝细胞及肝脏微粒体Ca(2＋)摄取及释放、肝脏显微病理的体视学分析及肝脏超微病理的电子计算机图像处理等技术，从生化及形态学角度探讨肝脏细胞钙平衡的改变在氟烷性肝炎发生发展中的重要作用，并与七氟醚进行对比研究，观察其与氟烷的异同。结果：在酶诱导缺氧条件下，吸入氟烷可造成明显的肝损害，而同样情况下吸入七氟醚则无明显肝损害。氟烷可致肝细胞胞浆及线粒体钙负荷增加。结论：提示肝细胞Ca(2＋)平衡的改变在氟烷性肝炎的发生发展中起着重要作用。七氟醚对肝细胞钙平衡影响较小．亦无明显肝毒性。

关键词：麻醉药氟烷七氟醚肝毒性钙平衡

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重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a研究的综合报告

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 121-124页

作者：焦炳华娄永华王梁华朱玉平周丙荣第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发... 详细信息

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发生的程度 ; 期临床试验观察人体可耐受的安全剂量 ; - 期临床试验观察其对肿瘤患者的临床疗效。结果 :rh- TNFα-D3a体内抑瘤的 ED50 为其野生型的 2 / 3;L D50 为野生型的 11倍 ;恒河猴长期毒性的安全剂量为日本同类产品 PT0 5 0的 6 4倍 ; 期临床试验表明 ,≤ 2× 10 6 IU/ (m2· d)× 7d为人体可耐受的安全剂量 ,本品与野生型药物比较 ,其毒性反应的发生率及反应程度远远降低 ; - 期临床试验表明 ,胸腔内注射对恶性胸水 ,静脉途径对多种实体瘤包括恶性淋巴瘤、乳腺癌、恶性黑素瘤和肾癌等均有较好的疗效。结论 :研制新一代高效。

关键词：抗肿瘤药临床试验重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a rh-TNFα-D3a

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重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a的克隆与表达

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 125-128页

作者：娄永华焦炳华周丙荣王梁华余伟民朱玉平第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p B... 详细信息

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p BL载体 ,转化大肠杆菌 DH5α,获得表达 rh- TNFα- D3a的工程菌。结果 :经巨引物二轮 PCR获得表达 TNFα突变蛋白的基因突变 ,经序列测定结果与设计一致 ,重组蛋白表达量占细菌总蛋白 18.0 % ,大部分为可溶性 ,占 rh- TNFα- D3a总量的 6 0 %以上。重组蛋白经纯化 ,纯度 >98%。 rh- TNFα- D3a对 L 92 9细胞表现出较高的细胞毒性 ,比活性大于 5× 10 8IU / mg。与野生型的 rh- TNFα相比 ,rh- TNFα- D3a的毒性降低为野生型的 1/ 10 ,同时其保留了 TNFα的抗肿瘤活性。结论 :rh- TNF-αD3a是一个毒性较低。

关键词：点突变聚合酶链反应重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a 克隆 rh-TNF α-D3a

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全反式维甲酸对大鼠棕色脂肪线粒体上解偶联蛋白活性和含量的影响

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 683-684页

作者：苗振春邹大进王学敏第二军医大学长海医院内分泌科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的 :探讨全反式维甲酸 (t RA )对大鼠棕色脂肪组织线粒体上解偶联蛋白 (UCP)活性和含量的影响。方法 :将大鼠分为 t RA组和对照组 ,用 3H标记的鸟嘌呤核苷酸 (3H- GTP)与线粒体上解偶联蛋白相结合 ,用液体闪烁仪测定其放射性活性 ,经 ... 详细信息

目的 :探讨全反式维甲酸 (t RA )对大鼠棕色脂肪组织线粒体上解偶联蛋白 (UCP)活性和含量的影响。方法 :将大鼠分为 t RA组和对照组 ,用 3H标记的鸟嘌呤核苷酸 (3H- GTP)与线粒体上解偶联蛋白相结合 ,用液体闪烁仪测定其放射性活性 ,经 Scatchard Plot测定出两者结合的解离常数 (Kd)和最大结合量 (Bmax)。结果 :t RA组 Bmax比对照组增加 1.48倍 ,Kd 值两组无明显差别 ,t RA组大鼠体重下降 ,棕色脂肪体积变小 ,白色脂肪变成淡红色。结论 :t RA能使棕色脂肪组织线粒体中U CP含量增加 ,但不改变其活性 ;能增加棕色脂肪组织中脂肪消耗 ,可能在白色脂肪组织中诱导产生 UCP。

关键词：维甲酸棕色脂肪代谢解偶联蛋白嘌呤核苷酸类 tRA UCP BAT

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人内皮-单核活化多肽-2的重组表达及其活性鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2008年第3期15卷 259-263页

作者：高云王梁华任娜孙铭娟郭爱云焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:采用原核表达系统重组表达抗肿瘤细胞因子——人内皮-单核活化多肽2(endothelail monocyte-activating polypeptideⅡ,EMAP-Ⅱ),并探讨重组EMAP-Ⅱ的抗肿瘤生物学活性。方法:采用pMAL-p2x表达系统和BL-21菌株克隆表达人EMAP-Ⅱ_(14... 详细信息

目的:采用原核表达系统重组表达抗肿瘤细胞因子——人内皮-单核活化多肽2(endothelail monocyte-activating polypeptideⅡ,EMAP-Ⅱ),并探讨重组EMAP-Ⅱ的抗肿瘤生物学活性。方法:采用pMAL-p2x表达系统和BL-21菌株克隆表达人EMAP-Ⅱ_(147-312),对表达产物进行纯化。以发光底物法测定重组EMAP-Ⅱ介导人脐静脉内皮细胞ECV-304产生组织因子的活性;以流式细胞术测定其增强ECV-304细胞对于TNFα致凋亡的敏感性;以MTF法检测定其对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制效果。结果:测序证实EMAP-Ⅱ编码序列被正确克隆进表达载体,经诱导表达、纯化,获得重组EMAP-Ⅱ产物,每克菌体(湿重)可获得约500μg的重组蛋白,纯度为电泳纯。重组EMAP-Ⅱ在体外培养条件下可使ECV-304细胞产生TF因子;并可增强ECV-304细胞对于TNFα介导凋亡的敏感性,使凋亡率明显增加[(16.6±2.5)% vs(25.6±2.3)%,P<0.01];在一定的质量浓度(1μg/ml)下,EMAP-Ⅱ对SW1990细胞的增殖有一定抑制作用(P<0.05)。结论:本研究采用原核表达系统pMAL-p2x可表达高纯度的重组EMAP-Ⅱ,该因子具有良好的抗肿瘤生物学活性。

关键词：内皮-单核活化多肽2 克隆表达抗肿瘤增殖抑制凋亡

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大鼠肝再生过程中线粒体氧化磷酸化的调控

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中国病理生理杂志 1999年第5期15卷 398-401页

作者：缪明永蔡在龙刘鹏飞王学敏毛积芳陈克明第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学东方肝胆外科医院

目的：探讨肝部分切除后肝再生过程中线粒体能量代谢的调控。方法：用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠施行肝部分切除复制肝再生模型，肝部分切除后分别观察０５、１、２、４和７ｄ５个肝再生组以及５个相应的对照组，差速离心法分离肝线粒体并... 详细信息

目的：探讨肝部分切除后肝再生过程中线粒体能量代谢的调控。方法：用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠施行肝部分切除复制肝再生模型，肝部分切除后分别观察０５、１、２、４和７ｄ５个肝再生组以及５个相应的对照组，差速离心法分离肝线粒体并用氧电极极谱法测定其氧化磷酸化活性。结果：肝部分切除后肝再生过程中线粒体呼吸控制率（ＲＣＲ）明显高于相应对照组，其中肝部分切除后０５ｄ和４ｄ为二个峰值，７ｄ时降至对照组水平，早期ＲＣＲ的升高主要是Ｒ３升高的所致，１ｄ后ＲＣＲ升高是Ｒ４下降所致。磷氧比值（Ｐ／Ｏ）的变化类似于ＲＣＲ。结论：肝部分切除后肝再生过程中线粒体通过氧化磷酸化偶联增强来适应肝再生的能量需求，这种增强机制很可能主要是通过降低线粒体内膜通透性实现的。

关键词：肝再生线粒体氧化磷酸化大鼠

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血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 777-779页

作者：顾洪蔡在龙陈少萍邹鲁峰宋春桥毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学教研室上海200433 第二军医大学长海医院心血管内科

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体，为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体，构建原核表达质粒，转染大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导表达，Ｗｅ... 详细信息

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体，为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体，构建原核表达质粒，转染大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定表达产物。在此基础上构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ３／ｈＶＥＧＦ１６５，脂质体介导转染ＣＨＯ－Ｋ１细胞，Ｇ－４１８筛选，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎｂｌｏｔ分别检测其在细胞内的转录和表达情况，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测表达蛋白的活性。结果：实验组的Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ出现特异性条带，而对照组在相应部位未出现条带。实验组的大鼠心肌血管内皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）。结论：本实验所构建的ＶＥＧＦ真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达，其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性。

关键词：血管内皮细胞生长因子哺乳动物基因治疗

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失血性休克大鼠IL－1活性呈双峰型变化

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第二军医大学学报 1996年第5期17卷 444-446页

作者：石汉平徐仁宝高瀚龚肖琦缪明永第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第一军医大学南方医院外科第二军医大学长征医院普通外科第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：观察大鼠失血性休克后血浆白细胞介素１（ＩＬ－１）活性及巨噬细胞分泌ＩＬ－１能力的动态变化。方法：ＳＤ大鼠失血后（３０％，按体重折算）１ｈ回输失血，不同时间采血或收集腹腔巨噬细胞，用改良ＬＡＦ法检测ＩＬ－１活性。... 详细信息

目的：观察大鼠失血性休克后血浆白细胞介素１（ＩＬ－１）活性及巨噬细胞分泌ＩＬ－１能力的动态变化。方法：ＳＤ大鼠失血后（３０％，按体重折算）１ｈ回输失血，不同时间采血或收集腹腔巨噬细胞，用改良ＬＡＦ法检测ＩＬ－１活性。结果：失血性休克后２～３ｈ及２４～７２ｈ血浆ＩＬ－１活性显著升高，１～２ｈ及２４～７２ｈ腹腔巨噬细胞分泌ＩＬ－１的能力也明显增强，与第１峰相比，第２峰峰值更高，持续时间更长。结论：大鼠失血性休克后ＩＬ－１活性呈双峰型升高，推测第１峰为应激峰，β－内啡肽、糖皮质激素起重要调控作用；第２峰为炎症峰，肠道内毒素入血及细菌移位起主要作用。

关键词：失血性休克白细胞介素1 血循环巨噬细胞

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阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNs转染巨噬细胞条件的优化

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 856-858,F004页

作者：王建李金宝任绪义邓小明第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ... 详细信息

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ;荧光显微镜观察细胞内荧光分布 ;测定细胞上清乳酸脱氢酶 (L DH)观察细胞损伤情况。结果 :lipofectin介导转染显著提高 J774 .1细胞对 NF- κB“decoy”ODNs的摄取 ;在 2 4孔培养板中 ,NF- κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时 ,转染效率最佳而细胞毒性相对较低 ;lipofectin介导转染 6 h后 ,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中 ,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论 :lipofectin可增加 NF-κB“decoy”ODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布 ;NF-κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时可获得最佳转染效率。

关键词：阳离子脂质体 NF-κB“decoy”ODNS 基因转染巨噬细胞

来源：评论

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