检索结果-内蒙古大学图书馆

肝脏 2004年第2期9卷 73-76页

作者：刘传苗张欣欣陆志檬上海第二医科大学瑞金医院传染科临床病毒研究室 200025

目的　观察慢性乙型病毒性肝炎 (CHB)患者应用拉米夫定治疗前后 ,YMDD野毒株及变异株的动态变化 ,并分析其临床意义。方法　取 5例CHB患者治疗前与治疗 48周的 10份血清标本 ,先用PCR法扩增包括YMDD基序的乙型肝炎病毒 (HBV )部分核苷... 详细信息

目的　观察慢性乙型病毒性肝炎 (CHB)患者应用拉米夫定治疗前后 ,YMDD野毒株及变异株的动态变化 ,并分析其临床意义。方法　取 5例CHB患者治疗前与治疗 48周的 10份血清标本 ,先用PCR法扩增包括YMDD基序的乙型肝炎病毒 (HBV )部分核苷酸序列 ,然后进行DNA序列测定 ,同时分别进行克隆 ,每份标本随机挑选 2 0～ 2 4株单克隆 ,用实时荧光PCR法检测YMDD野毒株及其变异株。结果　 5例CHB患者治疗前PCR产物直接测序结果未检出YMDD变异 ,治疗 48周时有 4例检出YMDD变异 ,但对每株克隆的分别检测显示 :治疗前YMDD变异株 (YIDD/YVDD)所占比率分别为 0 %、9.5 %、0 %、4.5 %、5 .6%;治疗 48周时所占比率分别为 10 0 %、10 0 %、65 %、10 0 %、0 %。其中 1例患者治疗前检出YIDD变异株 ,而治疗 48周时YVDD变异株则变成优势株。治疗 5 2周时 ,4例YMDD变异患者中 2例HBVDNA和血清丙氨酸转氨酶 (ALT)突破 ,1例患者ALT突破 ,但HBVDNA为阴性。结论　YMDD变异株在拉米夫定治疗前的血清中已存在 ,在服用拉米夫定后 ,由于选择性抑制了野毒株 ,使YMDD变异株由弱势株变成优势株 ,部分患者可导致拉米夫定临床耐药。

关键词：拉米夫定治疗乙型肝炎病毒 YMDD野毒株变异株

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干扰素信号传导相关蛋白和基因检测方法的初步建立和应用

引用

诊断学理论与实践 2004年第1期3卷 12-16页

作者：孔晓飞张欣欣张申英张东华金根娣陆志檬上海第二医科大学附属瑞金医院感染科临床病毒研究室上海200025

目的:建立α鄄干扰素(IFN鄄α)信号传导蛋白和基因检测的方法。方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系。体外分别用不同浓度的... 详细信息

目的:建立α鄄干扰素(IFN鄄α)信号传导蛋白和基因检测的方法。方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系。体外分别用不同浓度的IFN鄄α(0、100、1000、10000IU/ml)刺激细胞,用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测IFN活化的干扰素刺激基因因子3(ISGF鄄3)和γ鄄干扰素活化因子(GAF);设计特异的引物和探针,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IFN诱导抗病毒蛋白MxA、OAS1、PKR的相对表达。结果:成功建立了EBV转化的B淋巴细胞系。建立了EMSA检测ISGF鄄3和GAF转录蛋白的方法,用实时荧光定量PCR能够准确地检测样本中MxA、OAS1和PKR的表达。结论:建立了IFN信号传导蛋白和基因检测的方法,为进一步研究IFN治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效提供依据。

关键词：干扰素信号传导蛋白基因检测

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实时荧光聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒聚合酶基因变异

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中华检验医学杂志 2003年第1期26卷 37-39页

作者：刘传苗张欣欣张东华陆志檬上海第二医科大学瑞金医院传染科临床病毒研究室 200025

目的　建立一种在拉米夫啶治疗过程中的聚合酶酪氨酸蛋氨酸天冬氨酸天冬氨酸(YMDD)基序变异的检测方法。方法　根据寡核苷酸探针与模板结合时 ,不匹配碱基显著影响熔解温度的原理 ,设计合成 2条荧光标记的特异性探针 ,用实时荧光... 详细信息

目的　建立一种在拉米夫啶治疗过程中的聚合酶酪氨酸蛋氨酸天冬氨酸天冬氨酸(YMDD)基序变异的检测方法。方法　根据寡核苷酸探针与模板结合时 ,不匹配碱基显著影响熔解温度的原理 ,设计合成 2条荧光标记的特异性探针 ,用实时荧光聚合酶链反应 (PCR)方法对 2 97例患者的 35 4份标本进行YMDD变异检测。结果　 35 4份标本中 ,检出YMDD变异株 15 6份 ( 44 1% ) ,其中混合株占 34% ( 5 3/15 6 ) ;有 9份血清标本同时进行了DNA序列分析 ,测序结果同本试验检测的结果完全一致 ;同时发现YMDD变异与血清谷丙氨酸转氨酶异常相关 (P <0 0 1)。结论　本研究建立的实时荧光PCR方法简便、快速、灵敏、经济 ,可用于临床拉米夫啶治疗中YMDD变异的检测。

关键词：乙型肝炎病毒聚合酶基因变异聚合酶链反应

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丙型肝炎病毒体外感染HepG2细胞模型的建立

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诊断学理论与实践 2003年第1期2卷 50-52页

作者：徐晓刚季育华金根娣陆志檬上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室上海第二医科大学附属瑞金医院检验科 200025

目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型。方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%... 详细信息

目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型。方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%CO2条件下培养,以后每3～4d传代一次,定期收集培养上清液和细胞。应用RT鄄nested鄄PCR、免疫组化及Westernblot进行病毒核酸和蛋白质的检测。结果:RT鄄nested鄄PCR法检测发现在接种病毒后第4～16天的细胞标本中可检测到HCVRNA正链,接种病毒后第4～24天的细胞标本则可检测到HCVRNA副链。通过免疫组化和Westernblot检测,病毒蛋白(NS3)能在第4天检出。结论:HCV体外感染HepG2细胞模型的建立,可望用于HCV吸附肝细胞机制研究及疫苗中和试验。

关键词：丙型肝炎病毒体外感染 HepG2 细胞模型

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拉米夫定治疗前后乙型肝炎病毒YMDD变异株的演变

拉米夫定治疗前后乙型肝炎病毒YMDD变异株的演变

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中华医学会第十一次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：张欣欣刘传苗陆志檬上海第二医科大学瑞金医院传染科临床病毒研究室

拉米人定是有效的抗乙型肝炎病毒(HBV)药物,已在临床广泛应用,但可因YMDD变异而耐药.对拉米夫定的耐药机制,国外学者从不同的角度进行了研究:有些学者认为拉米夫定治疗过程中出现YMDD变异后HBVDNA多聚酶的结构发生改变,与拉米夫定的结... 详细信息

拉米人定是有效的抗乙型肝炎病毒(HBV)药物,已在临床广泛应用,但可因YMDD变异而耐药.对拉米夫定的耐药机制,国外学者从不同的角度进行了研究:有些学者认为拉米夫定治疗过程中出现YMDD变异后HBVDNA多聚酶的结构发生改变,与拉米夫定的结合能力下降而致它的耐药;而且在未进行拉米夫定治疗的患者的血清中检测出YMDD变异株,但未见拉米夫定治疗患者的病毒株组成分析的报导.本文克隆分析了拉米夫定治疗前和治疗48W时病毒株的变化与临床之间的关系,进一步探讨拉米夫定的耐药机制.

关键词：乙型肝炎病毒拉米夫 YMDD变异株

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聚合酶链反应检测丙肝产妇乳汁丙型肝炎病毒

引用

检验医学 1995年第2期 70-70页

作者：陆建春陆志檬张东华仇德琪王耆煌郑亚芬常州市妇产医院检验科上海第二医科大学瑞金医院临床病毒研究室

聚合酶链反应检测丙肝产妇乳汁丙型肝炎病毒上海第二医科大学瑞金医院临床病毒研究室（２０００２５）陆建春，陆志檬，张东华，仇德琪，王耆煌常州市妇产医院检验科郑亚芬聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术应用于丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣ... 详细信息

聚合酶链反应检测丙肝产妇乳汁丙型肝炎病毒上海第二医科大学瑞金医院临床病毒研究室（２０００２５）陆建春，陆志檬，张东华，仇德琪，王耆煌常州市妇产医院检验科郑亚芬聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术应用于丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ）检测业已证明是诊断ＨＣＶ...

关键词：乳汁产妇丙型肝炎病毒丙肝病毒聚合酶链反应

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326例急性病毒性肝炎病原学分型及临床特点分析

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江苏医药 1988年第9期 468-468页

作者：金根娣陆志檬王耆煌陈宝龙杨士安陈明娟黄浦区传染病医院南市区传染病医院卢湾区中心医院肝隔病房上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室

326例于1985年1～4月住院的急性病毒性肝炎病人,除51例(15.6%)非甲非乙型肝炎(NANBH)采用排除法外,其余均经特异性血清学检测(包括HBsAg、抗HBs、抗HBc,HBeAg、抗HBe、抗HA-IgM、抗HBc-IgM 及EBV 抗体)确诊,甲型肝炎(HA)135例(41.4%),... 详细信息

326例于1985年1～4月住院的急性病毒性肝炎病人,除51例(15.6%)非甲非乙型肝炎(NANBH)采用排除法外,其余均经特异性血清学检测(包括HBsAg、抗HBs、抗HBc,HBeAg、抗HBe、抗HA-IgM、抗HBc-IgM 及EBV 抗体)确诊,甲型肝炎(HA)135例(41.4%),乙型肝炎(HB)109例(33.4%)携带乙肝病毒合并甲肝感染者31例(9.5%),后者发病特点及临床表现与HA 或HB 相似,但病情严重,预后也更差.我国乙肝病毒感染率较高,在甲肝流行

关键词：临床特点分析 HB 三型 EBV 甲肝肝炎肝疾病

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临床病毒研究室工作进展

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上海交通大学学报(医学版) 1987年第S1期 81-83页

作者：陆志檬王耆煌上海第二医科大学临床病毒研究室附属瑞金医院传染病科

我室近十多年来,一直围绕着病毒性肝炎这个主题开展了一系列工作,培养了五名硕士研究生,先后发表论文数十篇,在国际国内肝炎学术会议上获得好评,其中三项获科研成果。寻找快速、特异、敏感的病毒性肝炎病原血清学诊断方法是临床上急待... 详细信息

我室近十多年来,一直围绕着病毒性肝炎这个主题开展了一系列工作,培养了五名硕士研究生,先后发表论文数十篇,在国际国内肝炎学术会议上获得好评,其中三项获科研成果。寻找快速、特异、敏感的病毒性肝炎病原血清学诊断方法是临床上急待解决的问题。我们从巨球蛋白血症病人和正常人的血清中提纯了IgM、IgG,进而以化学还原法折链获得了人μ链及γ链,制备了抗γ的多克隆抗体和抗μ的单克隆抗体,建立了五种检测特异性IgM、IgG

关键词： HBcAg 血清学诊断 IgM HBC IgG 正常人病人血清诊断病毒传染性肝炎病毒病病毒性肝炎乙肝病毒急性乙肝慢乙肝

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检测抗-HBc-IgM、抗-HBc-IgG在诊断乙型病毒性肝炎中的意义

引用

中华传染病杂志 1986年第4期4卷 202-204页

作者：陆志檬王玉琴张东华王耆煌李文干潘钰卿上海第二医科大学临床病毒研究室上海第二医科大学附属瑞金医院传染病科

一般采用抗HBc-IgM或总抗HBc检测来评价乙型肝炎(乙肝)感染者中的诊断价值[1],已知抗HBc-IgM在急性乙肝中呈高滴度10～5～10-7,慢性肝炎滴度为10-3[2,3].国外最近已采用抗γ来测定特异性IgG抗体[4].本文建立了ELISA用抗μ及抗γ来检测... 详细信息

一般采用抗HBc-IgM或总抗HBc检测来评价乙型肝炎(乙肝)感染者中的诊断价值[1],已知抗HBc-IgM在急性乙肝中呈高滴度10～5～10-7,慢性肝炎滴度为10-3[2,3].国外最近已采用抗γ来测定特异性IgG抗体[4].本文建立了ELISA用抗μ及抗γ来检测特异性抗HBc-IgM及抗HBc-IgG,并对其意义作了初步的评价.

关键词：检测特异性诊断价值乙型病毒性肝炎乙型肝炎急性乙肝评价慢性肝炎滴度感染者抗体测定

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