检索结果-内蒙古大学图书馆

东北林业大学学报 2011年第10期39卷 101-104,116页

作者：张岩王玉成吴英杰王超林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

从白桦(Betula platyphylla Suk.)形成层相关组织cDNA文库中获得一个木聚糖内糖基转移酶XET基因全长cDNA序列,其ORF全长882 bp,编码由293个氨基酸残基组成的多肽,编码蛋白的分子质量为33.1 ku,理论等电点为5.49。运用生物信息学方法对... 详细信息

从白桦(Betula platyphylla Suk.)形成层相关组织cDNA文库中获得一个木聚糖内糖基转移酶XET基因全长cDNA序列,其ORF全长882 bp,编码由293个氨基酸残基组成的多肽,编码蛋白的分子质量为33.1 ku,理论等电点为5.49。运用生物信息学方法对该蛋白进行理化性质分析及保守区预测,确定其属于糖基水解酶16超家族;进一步模拟蛋白空间结构,得到了可靠的分子生物学模型;利用sqRT-PCR分析白桦组培苗不同器官内XET基因的表达情况,结果显示XET在发育中的根茎叶内都有较高的表达水平。

关键词：白桦木聚糖内糖基转移酶序列分析基因表达

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白桦BpSOC1基因的克隆及时序表达分析

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东北林业大学学报 2011年第4期39卷 1-4页

作者：刘菲菲李慧玉王姗刘桂丰林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

根据NCBI中已注册的近缘树种的SOC1同源基因序列设计引物,采用RT-PCR技术在4年生白桦茎尖中分离得到1条SOC1-like cDNA序列,命名为BpSOC1。该序列编码区长660 bp,编码220个氨基酸,蛋白质相对分子质量为25 367.77 D,理论等电点为9.32。... 详细信息

根据NCBI中已注册的近缘树种的SOC1同源基因序列设计引物,采用RT-PCR技术在4年生白桦茎尖中分离得到1条SOC1-like cDNA序列,命名为BpSOC1。该序列编码区长660 bp,编码220个氨基酸,蛋白质相对分子质量为25 367.77 D,理论等电点为9.32。蛋白结构预测分析表明,BpSOC1具有典型的MADS-box结构域和K-box结构域,同时具有多处DNA结合位点、糖基化位点和磷酸化作用位点,属于MADS家族转录因子。系统发育分析表明,BpSOC1属于MADS-box家族的SOC1/TM3亚家族。采用实时定量PCR技术研究不同树龄白桦BpSOC1从5月初至9月在茎尖的时序表达规律,结果显示:BpSOC1无论在2年生苗期的营养生长阶段还是进入3、4年生的生殖生长阶段均有表达,表达高峰均在7月初和9月初。但2年生苗期的BpSOC1表达量最高的7月初和9月初间无显著差异,而进入生殖生长期后9月初的BpSOC1表达量显著高于7月初的表达量,表明Bp-SOC1既参与白桦的营养生长,又参与生殖生长。

关键词：白桦 BpSOC1 基因克隆时序表达

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杨树幼茎特异表达基因及PsnLAC基因的克隆

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东北林业大学学报 2011年第4期39卷 5-7,23页

作者：吴丽丽高福玲王雷郑威杨传平姜廷波林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

利用cDNA-AFLP技术对小黑杨茎、叶基因的差异表达进行分析。结果表明,64对引物组合在茎和叶中共扩增出4 192条带,其中差异条带2 275条。通过对茎中特异表达基因的克隆和测序,获得了4条cDNA序列。经Blast-x比对分析表明,它们分别是类伸... 详细信息

利用cDNA-AFLP技术对小黑杨茎、叶基因的差异表达进行分析。结果表明,64对引物组合在茎和叶中共扩增出4 192条带,其中差异条带2 275条。通过对茎中特异表达基因的克隆和测序,获得了4条cDNA序列。经Blast-x比对分析表明,它们分别是类伸展蛋白、漆酶、过氧化物酶和细胞壁相关水解酶。进行RT-PCR分析发现,4个基因在茎中的表达水平明显高于叶和根。其中,以漆酶的基因片段为基础进行生物信息学分析和设计引物,用RT-PCR技术克隆到了1 413 bp包含开放阅读编码框的cDNA片段,其开放阅读编码框长度为1 020bp,编码339个氨基酸残基,与来自其他植物漆酶的氨基酸序列具有较高的同源性。

关键词：小黑杨 RT-PCR cDNA-AFLP 漆酶

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四倍体与二倍体白桦的光合特性比较

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东北林业大学学报 2011年第2期39卷 1-4页

作者：杜琳李永存穆怀志张添咏刘菲菲黄海娇刘桂丰林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以4年生四倍体白桦和二倍体白桦为试材,对其光合作用日变化、光响应曲线、CO2响应曲线和叶绿素荧光参数进行测定。结果表明:①四倍体和二倍体白桦均有光合作用"午休"现象,四倍体的全天最大净光合速率极显著高于二倍体(P0.05)... 详细信息

以4年生四倍体白桦和二倍体白桦为试材,对其光合作用日变化、光响应曲线、CO2响应曲线和叶绿素荧光参数进行测定。结果表明:①四倍体和二倍体白桦均有光合作用"午休"现象,四倍体的全天最大净光合速率极显著高于二倍体(P<0.01),较二倍体提高了24.81%。②光饱和点、光补偿点和羧化效率等指标在两者之间的差异也极显著(P<0.01),四倍体较二倍体分别提高了9.41%、20.00%和25.19%。③四倍体叶绿素荧光参数中的PSⅡ中心非环式电子传递量子产额显著高于二倍体(P<0.05),较二倍体提高了13.28%,其他参数在两者之间差异不明显(P>0.05)。上述结果表明四倍体白桦的光合作用强于二倍体。

关键词：白桦四倍体白桦二倍体白桦光合作用

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柽柳类锌指基因ThZFL酵母诱饵表达载体的构建及其表达验证

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东北林业大学学报 2011年第12期39卷 4-7,15页

作者：郑唐春王英臧丽娜王亚军曲冠证夏德安林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040 嘉荫县林业局

利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,经检验后提取质粒,用BamH I和EcoR I限制性内切酶双酶切pMD18-T-ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4 DNA连接酶... 详细信息

利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,经检验后提取质粒,用BamH I和EcoR I限制性内切酶双酶切pMD18-T-ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4 DNA连接酶连接过夜后转化大肠杆菌DH5α感受态获得目的基因转化子pGBKT7-ThZFL,对转化子进行质粒PCR检验、质粒酶切检验、DNA测序鉴定。将测序检验正确的pG-BKT7-ThZFL转化子,转化酵母Y2Hgold菌株,对转化后的酵母涂布SD/-Trp、SD/-Trp/X、DDO、TDO平板,验证目的基因的自激活作用,通过对酵母生长曲线的测量验证诱饵蛋白的毒性作用。试验结果表明:用于筛选与ThZ-FL表达蛋白相互作用的靶蛋白的酵母诱饵载体构建成功。

关键词：柽柳 ThZFL基因酵母诱饵表达载体自激活作用

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日本落叶松碳储量家系遗传变异及优良家系选择研究

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中南林业科技大学学报 2011年第10期31卷 53-62页

作者：张超张含国朱航勇邓继峰张磊东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

以黑龙江省林口县青山林场日本落叶松种子园21年生自由授粉子代测定林30个处理为材料,测定了树高、胸径、材积、木材密度、含碳量,估算了生物量与碳储量,分析了各性状的变异系数、相关系数、遗传力及遗传增益,筛选出生长与碳汇功能兼优... 详细信息

以黑龙江省林口县青山林场日本落叶松种子园21年生自由授粉子代测定林30个处理为材料,测定了树高、胸径、材积、木材密度、含碳量,估算了生物量与碳储量,分析了各性状的变异系数、相关系数、遗传力及遗传增益,筛选出生长与碳汇功能兼优的家系。结果表明,树高、胸径、材积、生物量和碳储量在家系间都存在较大的变异,其变异系数分别是16.4%、23.7%、51.9%、50.0%和32.0%,木材密度和含碳量在家系间变异相对较小,变异系数分别是8.2%和3.5%。树高、胸径、材积、木材密度、生物量及碳储量在家系间有极显著或显著差异,家系遗传力分别为0.708、0.538、0.524、0.382、0.567和0.526,含碳量在家系间差异不显著,树高、胸径、材积、生物量和碳储量受较高强度的遗传控制,基本密度遗传力稍低。含碳量与树高呈不显著负相关,与胸径、材积、木材密度为不显著正相关;碳储量与树高、胸径、材积、木材密度及生物量呈显著正相关,相关系数分别为0.628、0.959、0.978、0.214和0.996,与含碳量呈不显著正相关;生物量与树高、胸径、材积及木材密度呈显著正相关,与含碳量呈不显著正相关。生物量和碳储量较大的家系都为日73-8、日73-14、日73-19,在10%的入选率下,生物量和碳储量的遗传增益分别是38.4%和34.2%。家系日73-8、日73-14、日73-19作为优良家系,其材积、木材密度、生物量和碳储量的平均值分别高出对照130.8%,4.6%,138.3%和137.1%;分别高出所有家系均值49.2%,0.6%,45.8%和47.4%。用这3个优良家系营造林分的碳储量为1.30×105 ***-2,比家系均值高47.4%,比用白刀山、大海林、小北湖优良林分、种长混和母日混对照造林每公顷碳储量分别高252.4%、203.0%、142.0%、86.9%和66.7%。

关键词：日本落叶松自由授粉家系碳储量遗传变异性状相关家系选择

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毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建

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北京林业大学学报 2011年第4期33卷 55-62页

作者：刘军梅李昊崔东清叶梅霞张志毅安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室、林木花卉遗传育种教育部重点实验室、国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京市100083

利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。

关键词：毛白杨 labA—like 克隆表达

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甜杨低温响应microRNAs的克隆与分析

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基因组学与应用生物学 2011年第2期30卷 204-211页

作者：孙润泽侯琦章文乐钮俊张志毅林善枝北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

MicroRNAs(miRNAs)作为一类21碱基左右的非编码小RNAs,参与植物生长发育的调控,并在植物对生物与非生物胁迫的应答过程中发挥重要作用。本研究依据miRNA高度保守特点,利用已公布的毛果杨(Populus trichocarpa)基因组序列设计引物,从甜杨... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)作为一类21碱基左右的非编码小RNAs,参与植物生长发育的调控,并在植物对生物与非生物胁迫的应答过程中发挥重要作用。本研究依据miRNA高度保守特点,利用已公布的毛果杨(Populus trichocarpa)基因组序列设计引物,从甜杨(Populus suaveolens)基因组中克隆获得了12个miRNA基因座序列。序列比对结果表明,这些miRNA基因均为毛果杨低温响应miRNA基因的同源序列。同时,以低温(0℃)处理0～48h的甜杨幼苗为试材,通过半定量RT-PCR法对miRNA基因的成熟体序列在不同处理时间下的表达谱进行分析,结果显示,大多数miRNA成熟体序列在甜杨低温胁迫下的表达模式与其在毛果杨中的表达极为相似,由此可推测这些保守性miRNAs可能在甜杨和毛果杨两物种对低温胁迫的应答反应中发挥相似的功能,而miR168a、miR168b和miR475a在两物种间表达现象的差异,表明它们可能通过调控多种靶基因而发挥不同作用。本文结果将为进一步研究甜杨基因功能提供基础。

关键词：甜杨 microRNA 低温胁迫表达谱

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白杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂及花粉形态观察

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西北植物学报 2011年第12期31卷 2454-2458页

作者：许重阳王君叶粟康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

通过醋酸洋红压片等方法观察毛新杨×银腺杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂及花粉形态,以探讨杂种三倍体雄配子的育性及其细胞学机制。结果显示:(1)在小孢子母细胞减数分裂过程中可观察到部分染色体提前分向两极、落后染色体、微... 详细信息

通过醋酸洋红压片等方法观察毛新杨×银腺杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂及花粉形态,以探讨杂种三倍体雄配子的育性及其细胞学机制。结果显示:(1)在小孢子母细胞减数分裂过程中可观察到部分染色体提前分向两极、落后染色体、微核等一系列染色体异常行为,表明该三倍体存在染色体的高度不平衡性。(2)在减数第二次分裂过程中存在大量胞质分裂提前现象;减数分裂产物中发现有少量二分体、三分体的存在,同时毛新杨×银腺杨杂种三倍体花粉粒的直径变化范围为22.6～62.6μm,呈现双峰分布,由此推测有一定数量的具可育性的未减数花粉产生。

关键词：毛新杨×银腺杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂可育性花粉

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植物多胺代谢途径研究进展

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生物工程学报 2011年第2期27卷 147-155页

作者：刘颖王莹龙萃张志毅庞晓明北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 暨南大学生物工程学系广州510632

多胺是一类小分子生物活性物质,广泛存在于生物体内,与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系。目前,在植物中的多胺合成途径已经基本揭示,其生理作用在分子水平上逐步得到阐明。对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得... 详细信息

多胺是一类小分子生物活性物质,广泛存在于生物体内,与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系。目前,在植物中的多胺合成途径已经基本揭示,其生理作用在分子水平上逐步得到阐明。对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得人们更深入地了解了多胺以及其合成代谢相关酶在植物生长发育等生理过程中的重要作用。以下概述了植物多胺代谢途径,重点综述了代谢途径中各基因的功能及遗传操作的最新进展,并对将来的研究方向尤其是相关基因在植物抗逆境(包括生物和非生物逆境)基因工程方面的应用作了讨论。

关键词：多胺代谢途径生物合成途径抗病性亚精胺合成酶

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