检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2010年第8期42卷 1-5页

作者：王权闫叶娜黄克和南京农业大学动物医学院江苏南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

用大田软海绵酸(okadaic acid,OA)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物OA-BSA作为免疫原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备OA单克隆抗体,并以纯化的抗体为探针建立了检测OA的快速、灵敏、简便的间接竞争ELISA(ciELISA)。回归方程和相关系数分别为:y=... 详细信息

用大田软海绵酸(okadaic acid,OA)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物OA-BSA作为免疫原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备OA单克隆抗体,并以纯化的抗体为探针建立了检测OA的快速、灵敏、简便的间接竞争ELISA(ciELISA)。回归方程和相关系数分别为:y=-0.3949x+0.6312,R2=0.9806;线性范围为0.3125~20 ng/mL;对OA的最低检出质量浓度为0.175 ng/mL;批内和批间变异系数分别为2.09%和3.27%;扇贝肉样的添加回收率为74.2%~80.8%;与鳍藻毒素(DTX1)的交叉反应(CR%)为51.82%,与石房蛤毒素(STX)无交叉反应。结果表明,建立了OA间接竞争ELISA检测方法,可用于海产品中OA残留检测。

关键词：大田软海绵酸单克隆抗体间接竞争ELISA

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我国部分茶园蜱种类及其携带的二种新发病原的调查研究

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中国动物传染病学报 2023年

作者：石涵周勇志曹杰王亚楠张厚双夏宣保徐前明周金林安徽农业大学动物科技学院中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室安徽省金寨县农业技术推广服务中心

为了保障茶叶主产区茶农的生命健康，查清新发人兽共患重要蜱传病的本底，本研究对我国中东部的河南信阳、安徽六安、浙江金华三地区的茶园中蜱种类及其携带的蜱传田鼠巴贝斯虫和发热伴血小板减少综合征病毒开展了调查研究。在2022年至2... 详细信息

为了保障茶叶主产区茶农的生命健康，查清新发人兽共患重要蜱传病的本底，本研究对我国中东部的河南信阳、安徽六安、浙江金华三地区的茶园中蜱种类及其携带的蜱传田鼠巴贝斯虫和发热伴血小板减少综合征病毒开展了调查研究。在2022年至2023年间，共采集了963只蜱样本，发现有长角血蜱、微小扇头蜱、褐黄血蜱、龟形花蜱、微形血蜱等5种蜱，分别占总数的72.90%、16.72%、9.76%、0.42%、0.21%。应用荧光定量PCR和巢式PCR方法对三地蜱样本中的田鼠巴贝斯虫和发热伴血小板减少综合征病毒的进行检测结果显示，田鼠巴贝斯虫在河南信阳、安徽六安、浙江金华三地的蜱样本中阳性率分别为25.17%、13.98%、4.99%。长角血蜱的阳性率占比最高（83.33%），褐黄血蜱和龟形花蜱中没有检测出携带田鼠巴贝斯虫。发热伴血小板减少综合征病毒在河南信阳、安徽六安、浙江金华三地的阳性率分别为20.07%、5.77%、7.84%，5种蜱均检测到阳性，其中长角血蜱的阳性率占比最高（60.82%），微形血蜱阳性率占比最低（1.03%）。在长角血蜱和微形血蜱中发现有田鼠巴贝斯虫和发热伴血小板减少综合征病毒共感染情况，其中长角血蜱若蜱共感染最为显著。茶园是新发蜱传病病高风险场景，应加强相关防控研究。

关键词：蜱蜱传病田鼠巴贝斯虫发热伴血小板减少综合征病毒分子检测

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犬隐孢子虫病研究进展

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动物医学进展 2013年第8期34卷 97-101页

作者：石凯邓俊良陈兆国米荣升黄燕周鹏四川农业大学动物医学院四川雅安625014 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241

犬隐孢子虫(***)广泛寄生于犬体内,也可感染人,引起犬和人的隐孢子虫病(Cryptospo-ridiosis)。近年来,随着其生物学特性及流行病学研究的深入,犬隐孢子虫逐渐引起了人们的重视。论文从病原学、寄生部位与致病性、流行病学、诊断和防治... 详细信息

犬隐孢子虫(***)广泛寄生于犬体内,也可感染人,引起犬和人的隐孢子虫病(Cryptospo-ridiosis)。近年来,随着其生物学特性及流行病学研究的深入,犬隐孢子虫逐渐引起了人们的重视。论文从病原学、寄生部位与致病性、流行病学、诊断和防治等方面阐述了犬隐孢子虫病的研究现状,为有效防治该病提供参考。

关键词：犬隐孢子虫隐孢子虫病流行病学防治

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柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶真核表达质粒的构建与鉴定

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中国动物传染病学报 2014年第2期22卷 65-71页

作者：王艳歌董辉韩红玉赵其平朱顺海李榴佳吴有陵黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为构建柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella Lactate dehydrogenase,EtLDH)的真核表达质粒,分别以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子和鸡脾脏cDNA为模板,PCR扩增出EtLDH和鸡IFN-γ基因,PCR产物经酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表... 详细信息

为构建柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella Lactate dehydrogenase,EtLDH)的真核表达质粒,分别以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子和鸡脾脏cDNA为模板,PCR扩增出EtLDH和鸡IFN-γ基因,PCR产物经酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建了真核表达质粒pCAGGS-EtLDH和pCAGGS-EtLDH-IFN-γ。所构建的真核表达质粒经酶切和测序鉴定为正确后转染293T细胞进行表达,分别用Western blot和间接免疫荧光鉴定EtLDH基因的表达情况。Western blot结果可见大小约为37 kDa的目的蛋白条带,间接免疫荧光可以检测到特异性红色荧光。结果表明成功构建了EtLDH的真核重组表达质粒pCAGGS-EtLDH和pCAGGS-EtLDH-IFN-γ,并能在真核细胞中表达,为深入研究EtLDH的生物学功能和球虫DNA疫苗的研制奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶 IFN-γ基因 293T细胞真核表达

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蜱IgG结合蛋白的昆虫细胞表达及结合IgG特性分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第4期19卷 235-240页

作者：秦顺晴曹杰周勇志张厚双周金林中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

蜱吸食宿主大量血液，其中宿主血液中IgG分子能穿过蜱肠道，进入血淋巴，且能保持其活性。为逃避宿主免疫攻击，蜱唾液腺分泌一种免疫球蛋白结合蛋白（ImmunoglobulinGbindingprotein，IGBP），与蜱体内的宿主IgG结合，抑制宿主IgG对蜱... 详细信息

蜱吸食宿主大量血液，其中宿主血液中IgG分子能穿过蜱肠道，进入血淋巴，且能保持其活性。为逃避宿主免疫攻击，蜱唾液腺分泌一种免疫球蛋白结合蛋白（ImmunoglobulinGbindingprotein，IGBP），与蜱体内的宿主IgG结合，抑制宿主IgG对蜱的损害，是蜱唾液腺重要的功能分子，也是抗蜱疫苗候选分子。镰形扇头蜱是我国南方的优势蜱种，其唾液腺免疫球蛋白结合蛋白（***）被鉴定为抗蜱免疫保护性抗原，为进一步了解其生物学功能，本研究应用杆状病毒表达系统，构建出重组杆粒***，并在昆虫细胞中表达出真核重组蛋白RH-IGBP，经免疫荧光实验鉴定和Westernblot分析，重组蛋白大小为23kDa，与预期一致。重组蛋白经纯化，利用ELISA方法，研究重组蛋白与不同哺乳动物宿主（兔、猪、牛羊、鼠、犬）和人的IgG结合能力，发现RH·IGBP与不同宿主IgG结合能力不同，与兔、猪的IgG有明显结合能力。对来自兔源IgG不同酶切片段F（ab’）2和Fc与***结合特性分析表明，蜱IgG结合蛋白主要识别部位是IgG的F（ab’）2片段。这些结果初步揭示了蜱IgG结合蛋白的作用机制和特点。

关键词：免疫球蛋白结合蛋白昆虫细胞表达镰形扇头蜱

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柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3在293T细胞中的表达研究

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中国动物传染病学报 2013年第6期21卷 33-38页

作者：王晔韩红玉董辉姜连连赵其平朱顺海薛璞舒凡帆黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为构建柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenella calcium-dependent protein kinases 3,EtCDPK3)基因的重组质粒pCAGGS-EtCDPK3,并转染293T细胞进行表达,以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增其含完整开放阅读框的序... 详细信息

为构建柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenella calcium-dependent protein kinases 3,EtCDPK3)基因的重组质粒pCAGGS-EtCDPK3,并转染293T细胞进行表达,以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增其含完整开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-T easy载体,构建pGEM-Teasy-EtCDPK3重组质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtCDPK3。该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞进行表达,分别用免疫印迹和间接免疫荧光鉴定EtCDPK3基因的表达情况。结果显示所构建的真核重组表达质粒pCAGGSEtCDPK3经过双酶切鉴定,可见1条大小约为1302 bp的目的条带,测序结果与实验室已获得的EtCDPK3序列完全一致;Western blot结果可见大小约为49 kDa的目的蛋白条带,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光。这些研究结果表明已成功构建了EtCDPK3的真核重组表达质粒pCAGGS-EtCDPK3,并在真核细胞中获得表达,为深入研究EtCDPK3的功能和制备DNA疫苗奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3基因 293T细胞真核表达

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寄生虫乳酸脱氢酶研究进展

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中国动物传染病学报 2014年第1期22卷 80-86页

作者：王艳歌董辉黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

大多数体内寄生虫的生存必须依赖糖酵解途径将葡萄糖代谢为乳酸以提供能量。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸还原为乳酸及乳酸氧化为丙酮酸的可逆反应,与寄生虫生存密切相关。研究表明,各种寄生... 详细信息

大多数体内寄生虫的生存必须依赖糖酵解途径将葡萄糖代谢为乳酸以提供能量。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸还原为乳酸及乳酸氧化为丙酮酸的可逆反应,与寄生虫生存密切相关。研究表明,各种寄生虫LDH在理化性质和分子结构方面均有独特的特性,是良好的诊断分子和潜在的药物作用靶标。对寄生虫LDH功能的研究,对于促进寄生虫病诊断、疫苗研究以及新抗虫药物的研发具有重要意义。本文对国内外寄生虫LDH的研究现状进行了综述。

关键词：乳酸脱氢酶寄生虫诊断药物靶标疫苗

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日本血吸虫SjZFP1 181-786bp基因序列编码蛋白的免疫保护效果评估

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中国动物传染病学报 2013年第4期21卷 51-56页

作者：刘欣郭艳红艾德宙石耀军李浩金亚美刘金明中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

根据日本血吸虫锌指蛋白SjZFP1的抗原位点预测结果,选取编码基因中抗原表位富集的181~786 bp核苷酸序列(SjZFP1-1)表达制备重组蛋白抗原rSjZFP1-1/His,构建重组真核表达质粒pcDNA-SjZFP1-1,并开展动物免疫实验,评估免疫保护效果。在两... 详细信息

根据日本血吸虫锌指蛋白SjZFP1的抗原位点预测结果,选取编码基因中抗原表位富集的181~786 bp核苷酸序列(SjZFP1-1)表达制备重组蛋白抗原rSjZFP1-1/His,构建重组真核表达质粒pcDNA-SjZFP1-1,并开展动物免疫实验,评估免疫保护效果。在两次独立的免疫实验中,与相应对照组相比,rSjZFP1-1/His单独免疫组以及pcDNA-SjZFP1-1与rSjZFP1-1/His联合免疫组均产生较高水平的特异性抗体,但平均虫负荷、肝脏虫卵数无显著性减少。研究结果显示rSjZFP1-1/His不能诱导有效的抗感染免疫,今后可进一步开展SjZFP1蛋白N-端肽段编码序列的表达和效果评估。

关键词：日本血吸虫 SjZFP1 免疫保护评估

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微小隐孢子虫类钙调蛋白基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达

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中国兽医科学 2014年第5期44卷 485-491页

作者：杨晓娇周鹏米荣升黄燕石凯王晓娟王向佩刘宇轩雷晓思陈兆国中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241 四川农业大学动物医学院四川雅安625014 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

为了构建微小隐孢子虫类钙调蛋白(calmodulin-like protein,CML)基因的真核表达质粒,并在Hela细胞中实现表达,以微小隐孢子虫卵囊cDNA为模板,通过PCR扩增CML基因,插入到克隆载体pMD18-T中。对经鉴定的pMD-CML重组质粒进行双酶切,将目的... 详细信息

为了构建微小隐孢子虫类钙调蛋白(calmodulin-like protein,CML)基因的真核表达质粒,并在Hela细胞中实现表达,以微小隐孢子虫卵囊cDNA为模板,通过PCR扩增CML基因,插入到克隆载体pMD18-T中。对经鉴定的pMD-CML重组质粒进行双酶切,将目的基因连接到经同样内切酶双酶切的真核表达载体pVAX1上。重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后,用FuGENE HD转染试剂介导的方法,将重组表达质粒转染Hela细胞,用Western-blot技术和间接免疫荧光法检测外源基因的表达。结果显示,成功构建了微小隐孢子虫CML基因的真核表达质粒pVAX-CML,重组质粒在Hela细胞中实现了表达,表达产物具有良好的反应原性,为研究CML的特性和功能、寻找新的防控技术奠定了基础。

关键词：微小隐孢子虫类钙调蛋白基因真核表达质粒

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日本血吸虫GSK3蛋白编码cDNA的克隆、表达及其重组蛋白的免疫保护研究

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中国动物传染病学报 2012年第4期20卷 52-57页

作者：周春景罗荣石耀军赵江平程国锋 r中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

本研究利用生物信息学分析了日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)Glycogen synthase kinase 3(GSK3)蛋白,并对其中一个GSK3蛋白的编码cDNA进行了克隆和原核表达,制备了特异性的多克隆抗体。同时,还初步评估了重组蛋白的免疫保护效果... 详细信息

本研究利用生物信息学分析了日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)Glycogen synthase kinase 3(GSK3)蛋白,并对其中一个GSK3蛋白的编码cDNA进行了克隆和原核表达,制备了特异性的多克隆抗体。同时,还初步评估了重组蛋白的免疫保护效果。生物信息学分析表明在日本血吸虫数据库存在两种GSK3蛋白,且其中一个SjGSK3在日本血吸虫不同发育时期均有转录。Western blot结果表明本研究制备的抗体能特异性识别日本血吸虫SjGSK3重组蛋白,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。动物实验表明免疫SjGSK3重组蛋白的动物与佐剂对照组比较分别获得了平均10.6%减虫率和40.5%肝脏减卵率。

关键词：日本血吸虫蛋白激酶免疫保护

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