检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2024年第5期56卷 64-72页

作者：于泳鑫吴钰楠齐富磊温晨张毅豪左佳坤韩先干苗晋锋贾逸敏南京农业大学动物医学院江苏南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 农业农村部生理生化重点实验室江苏南京210095

旨在通过比较苏北地区健康奶牛和乳房炎奶牛乳汁中的微生物菌群结构和多样性,分析不同养殖场奶牛乳腺中的主要常驻菌,为防控奶牛乳房炎的发生提供基础数据和科学依据。针对苏北地区3个规模化奶牛养殖场随机采集137份乳样,采用加州乳房... 详细信息

旨在通过比较苏北地区健康奶牛和乳房炎奶牛乳汁中的微生物菌群结构和多样性,分析不同养殖场奶牛乳腺中的主要常驻菌,为防控奶牛乳房炎的发生提供基础数据和科学依据。针对苏北地区3个规模化奶牛养殖场随机采集137份乳样,采用加州乳房炎检测法筛选健康奶牛和乳房炎奶牛,通过对奶样中细菌的16S rRNA测序分析,揭示该地区奶牛乳房炎的流行趋势。结果表明:该地区3个规模化奶牛养殖场乳房炎的平均阳性率为420%,其中,养殖场A的主要乳房炎致病菌是木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)、松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)、大肠杆菌(Escherichia coli)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae),养殖场B的致病菌主要是肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和木糖葡萄球菌,而养殖场C奶牛乳房炎阳性比例少,仅有少量的木糖葡萄球菌。此外,伯克霍尔德菌(Burkholderia)、克雷伯菌(Klebsiella)、链球菌(Streptococcus)和草螺菌(Herbaspirillum)是奶牛乳腺中优势常驻菌。研究表明,16S rRNA测序分析技术能够很好地筛选出乳样中的主要菌属,进而分析优势常驻菌,为防控奶牛乳房炎提供参考。

关键词：奶牛乳房炎菌群结构 16S rRNA测序

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OPU卵母细胞体外成熟体系的优化研究进展

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畜牧兽医学报 2023年第4期54卷 1359-1369页

作者：张培培郝海生杜卫华朱化彬李树静余文莉赵学明中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 石家庄天泉良种奶牛有限公司石家庄050200

近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产... 详细信息

近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产和发育机理研究及人类辅助生育技术临床实践中有着广阔的应用前景。可以提高种母畜和珍贵野生动物的资源保护效率,提高优良母畜的遗传潜力,为奶牛生物技术发展提供必要的支撑技术。卵母细胞的质量是IVP系统取得成功的关键,卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)是成功受精和胚胎发育必不可少的步骤。卵母细胞IVM完成了卵母细胞的细胞质和核成熟,准备了发育至胚胎基因组激活所必需的所有必要成分。但体外成熟的卵母细胞发育能力低于体内成熟卵母细胞,卵母细胞减数分裂和细胞核质成熟不同步,氧化应激损伤等对卵母细胞成功受精和胚胎发育非常重要,因此,需要进一步提高卵母细胞体外成熟能力,以改善牛体外胚胎生产系统。本文从卵母细胞体外成熟面临的核质成熟不同步,氧化应激等问题进行概述,同时,叙述C型钠肽、褪黑素、FLI等物质对卵母细胞IVM的改善作用,以期为OPU卵母细胞体外成熟体系的优化提供一定的参考。

关键词： OPU 卵母细胞体外成熟牛

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口蹄疫病毒样颗粒诱导表达型载体的构建及其BHK-21细胞池的筛获

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生物工程学报 2023年第12期39卷 4849-4860页

作者：谭书桢董虎孙世琪郭慧琛中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 云南省畜牧兽医科学院云南热带亚热带动物病毒重点病实验室云南昆明650224

瞬时表达是目前利用哺乳动物细胞表达口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)衣壳蛋白的主流方法。为实现染色体稳定表达FMDV衣壳蛋白并高效组装出病毒样颗粒(virus like particles,VLPs),本研究构建了piggy Bac(PB)转座-组成... 详细信息

瞬时表达是目前利用哺乳动物细胞表达口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)衣壳蛋白的主流方法。为实现染色体稳定表达FMDV衣壳蛋白并高效组装出病毒样颗粒(virus like particles,VLPs),本研究构建了piggy Bac(PB)转座-组成型表达、PB转座-四环素(tetracycline,Tet)诱导型表达两套质粒。利用荧光蛋白标记技术,验证了质粒的功能。通过抗生素筛选得到了组成型表达P12A3C(WT/L127P)基因的BHK-21细胞池(C-WT、C-L127P)和诱导型表达P12A3C(WT/L127P)基因的BHK-21细胞池(I-WT、I-L127P)。荧光观察和PCR检测证明了绿色荧光蛋白、3C蛋白酶、反向四环素转录激活因子等基因的稳定整合。Western blotting、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验证明了细胞池I-L127P具有更强的衣壳蛋白和VLPs生产能力。本研究首次实现了哺乳动物细胞染色体诱导表达FMDV衣壳蛋白,有助于推动哺乳动物生产FMDV VLPs疫苗的技术工艺,也为构建其他蛋白的哺乳动物细胞诱导型表达系统提供了参考。

关键词：口蹄疫病毒病毒样颗粒质粒构建细胞池诱导表达

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GS15株NSP2蛋白多位点缺失病毒的拯救与体外生长特性分析

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微生物学报 2024年第7期64卷 2307-2322页

作者：张兴民张婧孙普李娇阳崔占鼎李国秀王健李平花袁红李坤曹轶梅付元芳李冬赵志荀曾巧英卢曾军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建... 详细信息

【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建拯救获得NSP2三个位点缺失的工程病毒。【方法】在前期双缺失病毒感染性克隆的基础上,利用融合PCR方法分别构建缺失NSP2第323-364位和第372-433位优势抗原表位的两个3个位点缺失的重组质粒。经脂质体介导,转染Marc-145细胞拯救病毒,通过电子显微镜观察、免疫荧光实验、测定病毒滴度、绘制生长曲线等方法对缺失病毒的生长特性进行分析。【结果】成功获得拯救病毒r GS15-?3-1和r GS15-?3-2。电子显微镜下可以观察到直径大小为50-80 nm的病毒粒子;免疫荧光实验检测表明,拯救病毒与亲本病毒GS15一致,都能检测到PRRSV N蛋白表达;缺失区域RT-PCR扩增鉴定,拯救病毒传至40代缺失标记稳定存在;r GS15-△3-1与r GS15-△3-2病毒滴度分别为2.00×10^(6.0)TCID_(50)/m L和2.25×10^(5.8)TCID50/m L,与亲本病毒相比病毒滴度差异显著(P<0.05);生长曲线分析表明拯救病毒复制水平低于亲本病毒达到最高滴度的培养时间比亲本病毒延迟24 h。【结论】本研究通过对PRRSV基因2型非结构蛋白NSP2多位点缺失病毒的体外生长特性分析,为研制新型PRRSV标记疫苗奠定了基础,也为猪繁殖与呼吸综合征的防控提供新的策略。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆非结构蛋白2(NSP2) 缺失标记生长特性

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商品蛋鸡精准饲养技术研究进展

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畜牧兽医学报 2023年第5期54卷 1815-1823页

作者：常心雨王继光王晶张海军齐广海邱凯武书庚中国农业科学院饲料研究所、农业农村部动物产品质量安全饲料源性因子风险评估实验室、农业部饲料生物技术重点实验室、生物饲料开发国家工程研究中心北京100081

当前,我国集约化和规模化蛋鸡养殖场普遍存在饲养密度过大、饲料浪费、生产效率低和环境污染等问题。商品蛋鸡精准饲养技术可以系统性监测不同阶段蛋鸡机体状况,依据蛋鸡营养需求和采食量变化等特征,制定个性化饲养方案,可改善饲料转化... 详细信息

当前,我国集约化和规模化蛋鸡养殖场普遍存在饲养密度过大、饲料浪费、生产效率低和环境污染等问题。商品蛋鸡精准饲养技术可以系统性监测不同阶段蛋鸡机体状况,依据蛋鸡营养需求和采食量变化等特征,制定个性化饲养方案,可改善饲料转化率和生产成绩,提高经济效益,减少氮磷排放等环境问题,促进蛋鸡养殖业的可持续发展。本文从蛋鸡不同阶段的营养调控措施、饲养管理与环境控制以及免疫与卫生三个方面出发,综述了蛋鸡精准饲养技术的应用要点与发展趋势,旨在提高商品蛋鸡饲养水平,改善养殖效益。

关键词：蛋鸡营养调控精准饲养环境控制

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SOX12基因在Vero细胞感染猪流行性腹泻病毒过程中的功能研究

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中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 289-297页

作者：向娇娇元娜李慧慧邵明珠赵福平张龙超王立贤石丽君陈斌湖南农业大学动物科技学院长沙410128 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 北京大伟嘉生物技术股份有限公司北京100193

[目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴... 详细信息

[目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),转染48 h后收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测干扰效率。将有效的干扰片段和siNC分别转染至Vero细胞24 h后,用感染复数为0.05的PEDV感染细胞,分为4组:感染PEDV 12 h试验组(12 hpi-siRNA)、感染PEDV 12 h对照组(12 hpi-siNC)、感染PEDV 24 h试验组(24 hpi-siRNA)及感染PEDV 24 h对照组(24 hpi-siNC),利用实时荧光定量PCR检测PEDV N及SOX12基因的表达水平,通过Western blotting检测各组细胞PEDV N蛋白表达水平,利用组织半数感染量(50%tissue culture infective dose, TCID_(50))检测PEDV的病毒滴度,并利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)法检测各组细胞中PEDV复制情况。通过GeneMANIA网站预测SOX12基因的互作基因,利用实时荧光定量PCR检测抑制SOX12基因表达后其互作基因的表达变化。[结果]SOX12基因3条干扰片段的干扰效率为30%~60%,其中siRNA3干扰效率最高,可达60%。与12 hpi-siNC和24 hpi-siNC组相比,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组PEDV N基因的转录和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。病毒滴度表型测定结果表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV病毒滴度显著低于各自对照组(P<0.05);IFA结果也表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV复制明显少于对照组。基因互作预测及实时荧光定量PCR检测结果显示,与siNC组相比,干扰SOX12基因的表达后,其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达水平均显著降低(P<0.05)。[结论]本研究揭示了SOX12基因在PEDV感染Vero细胞过程中的调控作用,发现SOX12基因的下调表达能显著抑制PEDV复制和其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达。

关键词：猪流行性腹泻病毒(PEDV) SOX12基因 Vero细胞基因干扰

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5'UTR缺失重组塞内卡病毒的构建与生物学特性分析

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农业生物技术学报 2025年

作者：张岩杨帆曹伟军杜晓莉郑海学包世俊甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院/动物疫病防控全国重点实验室/国家口蹄疫参考实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心西北民族大学生命科学与工程学院

塞内卡病毒A (Senecavirus A,SVA)是属于塞内卡病毒属的小RNA病毒。感染该病毒后可引发原发性猪(Sus scrofa)的水疱病，在临床上很难与口蹄疫、猪水泡病和水疱性口炎区分。本研究成功从临床中分离鉴定了1株SVA变异毒株，发现其5'UT... 详细信息

塞内卡病毒A (Senecavirus A,SVA)是属于塞内卡病毒属的小RNA病毒。感染该病毒后可引发原发性猪(Sus scrofa)的水疱病，在临床上很难与口蹄疫、猪水泡病和水疱性口炎区分。本研究成功从临床中分离鉴定了1株SVA变异毒株，发现其5'UTR存在13个核苷酸(nucleotide,nt)缺失。为了研究该缺失对SVA生物学特性的影响，本研究利用反向遗传技术，以SVA CH/FJ/2017毒株的全长cDNA感染性克隆为基础，对其基因组5'UTR序列进行定向缺失，将重组质粒转染BHK-21细胞，拯救出1株5'UTR基因缺失的塞内卡病毒rSVA-5UTRM，利用间接免疫荧光试验和Western blot对重组毒株进行鉴定；并将重组病毒在BHK-21细胞上连续传代，进行遗传稳定性分析；然后通过蚀斑试验和病毒生长曲线比较重组病毒与亲本毒株在BHK-21细胞上的增殖特性。结果显示，重组病毒能够与SVA抗体及SVA VP2抗体发生特异性反应，表明重组毒株拯救成功；遗传稳定性分析结果显示，5'UTR基因缺失的重组病毒传代至20代，缺失基因仍稳定存在，表明重组毒株具有良好的遗传稳定性；生物学特性分析结果表明，重组毒株与亲本毒株SVA CH/FJ/2017在BHK-21细胞上的复制特性相近，且具有较高的病毒滴度，说明5'UTR中13 nt的核苷酸缺失并不影响病毒在BHK-21细胞上的复制。本研究成功拯救出5'UTR缺失的重组SVA毒株，研究了缺失区段的功能，为阐明SVA非编码功能提供了新的科学数据。

关键词：塞内卡病毒 5'UTR 缺失重组病毒生物学特性

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布鲁氏菌病及其在我国的防控现状与建议

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中国兽医科学 2022年第12期52卷 1578-1585页

作者：汪洁英宁博景伟高建平曹莹王雪梅刘帅马永红景志忠西安医学院陕西西安710021 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

布鲁氏菌病(简称布病)已成为世界上最流行的细菌性人兽共患病,在牲畜健康、生产和公共卫生方面造成了巨大的损失,极大地限制了流行国家特别是我国的经济发展、人类健康和社会进步。本文简要介绍了布病的病原学、流行病学、临床表现及诊... 详细信息

布鲁氏菌病(简称布病)已成为世界上最流行的细菌性人兽共患病,在牲畜健康、生产和公共卫生方面造成了巨大的损失,极大地限制了流行国家特别是我国的经济发展、人类健康和社会进步。本文简要介绍了布病的病原学、流行病学、临床表现及诊断治疗技术和疫苗的研究现状,重点聚焦动物和人间布病综合防控措施的介绍,以期通过“One Health”理念应用于布病防控,构建医学、兽医学协调一致的布病疫苗免疫接种、检疫与净化和科普宣传教育为主的综合性防控机制,从动物无疫、环境生物安全和人类健康角度出发,积极推动多领域,多部门和多学科的合作,为从动物源头防控、阻断和消除布病传播提供新思路。

关键词：布鲁氏菌人兽共患病综合防控

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乳及乳制品中嗜冷菌的多样性及其腐败危害研究进展

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食品安全质量检测学报 2023年第7期14卷 15-21页

作者：许文君孟璐郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室北京100193 青岛农业大学食品科学与工程学院青岛266109

乳是一种营养丰富的物质,同时也是微生物生长繁殖的理想培养基。生乳的质量是影响乳制品产业链的关键因素,随着低温储存和冷链运输技术的发展,生乳中大部分细菌的生长受到抑制,但嗜冷菌的生长并未受到抑制,并逐步成为生乳中的优势菌。... 详细信息

乳是一种营养丰富的物质,同时也是微生物生长繁殖的理想培养基。生乳的质量是影响乳制品产业链的关键因素,随着低温储存和冷链运输技术的发展,生乳中大部分细菌的生长受到抑制,但嗜冷菌的生长并未受到抑制,并逐步成为生乳中的优势菌。生乳在冷藏运输或储存期间,嗜冷菌依旧可以生长繁殖,其分泌的蛋白酶和脂肪酶可耐高温,经过巴氏杀菌或超高温灭菌处理后依旧保持活性,因此,了解嗜冷菌的多样性及其产生的酶对提高乳及乳制品质量、减少腐败和浪费具有重要作用。本文通过介绍乳及乳制品中嗜冷菌污染现状及腐败危害研究,旨在为乳及乳制品行业的风险评估提供背景信息,从源头控制嗜冷菌对生乳的浪费,保证乳及乳制品的品质。

关键词：生乳嗜冷菌污染蛋白酶脂肪酶

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高、低精子活力黑羽番鸭精液品质、血清生化指标及繁殖性能差异分析

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中国畜牧杂志 2025年

作者：于凯强郭顺孙寒雪陈黎许文武曾涛卢永胜卢立志李海英新疆农业大学动物科学学院浙江省农业科学院畜牧兽医研究所全省畜禽生物育种重点实验室湘湖实验室江西和盈育种科技有限公司

本研究旨在分析高、低精子活力黑羽番鸭精液品质、血清激素及生化指标、繁殖性能和睾丸发育的差异，为黑羽番鸭配套系选育提供参考。选择26周龄黑羽番鸭育种群125羽，从中挑选高低精子活力组共48羽，高精子活力组（GHL组）和低精子活力... 详细信息

本研究旨在分析高、低精子活力黑羽番鸭精液品质、血清激素及生化指标、繁殖性能和睾丸发育的差异，为黑羽番鸭配套系选育提供参考。选择26周龄黑羽番鸭育种群125羽，从中挑选高低精子活力组共48羽，高精子活力组（GHL组）和低精子活力组（DHL组）各24羽，其中每组随机挑选6羽进行繁殖性能测定；每组再随机挑选6羽进行屠宰并取睾丸组织，进行切片制作并观察。结果显示：①GHL组黑羽番鸭精子活力和活率均极显著高于DHL组；②GHL组黑羽番鸭公鸭血清中的促性腺激素释放激素（GnRH）和睾酮（TESTO）含量极显著高于DHL组；③GHL组黑羽番鸭的受精率和种蛋孵化率均极显著高于DHL组；④黑羽番鸭血清中的促卵泡素（FSH）与精子畸形率呈极显著负相关，血清中的TESTO与精子活力、精子活率呈极显著正相关；⑤黑羽番鸭的精子活力和精子活率均与受精率、入孵蛋孵化率呈极显著正相关；⑥GHL组黑羽番鸭生精小管内各级生精细胞排布紧密、整齐有序，可见大量变形中或已成熟精子；DHL组各级生精细胞的排布杂乱，变形中或已成熟的精子少见。由以上可知，高、低精子活力组黑羽番鸭的精液品质、血清激素及生化指标和睾丸发育存在差异，且黑羽番鸭精液品质与繁殖性能强正相关，可以作为育种公鸭选留的理论参考。

关键词：黑羽番鸭精子活力繁殖性能睾丸发育血清生化指标

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