检索结果-内蒙古大学图书馆

鸡白痢沙门氏菌与其它致病性沙门氏菌的血清型特异性PCR鉴别检测方法的建立

中国预防兽医学报 2017年第3期39卷 215-219页

作者：张童利王曼宇曹俊王忠星刘思国于申业东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150069 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

为建立鸡白痢沙门氏菌与其他常见致病性沙门氏菌的血清型特异性快速PCR检测方法,本研究通过对Gen Bank中鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌全基因组进行生物信息学分析,确定SEEP17495基因为鸡白痢沙门氏菌的检测靶基因,设... 详细信息

为建立鸡白痢沙门氏菌与其他常见致病性沙门氏菌的血清型特异性快速PCR检测方法,本研究通过对Gen Bank中鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌全基因组进行生物信息学分析,确定SEEP17495基因为鸡白痢沙门氏菌的检测靶基因,设计特异性引物,建立了一种能够直接从粪便样品中检测鸡白痢沙门氏菌的PCR检测方法。结果显示:该方法对于两株鸡白痢沙门氏菌均可以特异性地扩增出356 bp的目的片段,但对于7株常见非沙门氏菌致病菌和29株其他常见致病性沙门氏菌血清型的扩增结果均为阴性。该方法无论检测鸡白痢沙门氏菌纯培养菌,还是检测模拟鸡粪样品中的鸡白痢沙门氏菌,检测的灵敏度均为103cfu/m L。本研究建立的PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,并且能够快速检测出粪便样品中的鸡白痢沙门氏菌,为鸡白痢沙门氏菌的检测提供了一种快速、有效的方法。

关键词：鸡白痢沙门氏菌 PCR 快速检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪源肠球菌林克酰胺、截短侧耳素及链阳菌素A类耐药基因lsa(E)的检测及传播方式

引用

中国预防兽医学报 2014年第10期36卷 766-770页

作者：初胜波王秀梅张万江刘琪牟迪刘思国吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为研究lsa(E)在猪源肠球菌中的流行情况及传播方式,本研究从广西某猪场分离的56株肠球菌中检测到15株携带多重耐药外排泵基因lsa(E)的肠球菌,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对lsa(E)基因阳性的肠球菌进行亲缘关系分析,并对不同克隆型的菌株... 详细信息

为研究lsa(E)在猪源肠球菌中的流行情况及传播方式,本研究从广西某猪场分离的56株肠球菌中检测到15株携带多重耐药外排泵基因lsa(E)的肠球菌,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对lsa(E)基因阳性的肠球菌进行亲缘关系分析,并对不同克隆型的菌株进行耐药表型和相关耐药基因型检测,通过Southern杂交定位lsa(E)基因在不同菌株中的位置。PFGE结果显示15株lsa(E)基因阳性的肠球菌共有7种不同的PFGE谱型,表明携带lsa(E)基因的肠球菌在同一猪场存在垂直传播的现象。药物敏感性试验结果显示,7株分离株除对红霉素、四环素、庆大霉素和环丙沙星100%耐药外,对利奈唑胺、氟苯尼考、利福平和左氧氟沙星也具有较高的耐药率,分别为57.1%、85.7%、71.4%和85.7%。耐药基因erm(B),aac(6')-Ie-aph(2'')-Ia和aph(3'')-IIIa的检出率分别为:100%、85.7%和72.4%;Southern杂交结果显示,lsa(E)基因在6株菌中定位于质粒22 kb^54 kb,而在1株菌中定位于染色体。本研究为临床制定合理措施控制lsa(E)快速传播提供依据。

关键词：肠球菌截短侧耳素耐药表型耐药基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

东北地区奶牛源葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究

引用

中国预防兽医学报 2014年第9期36卷 692-695页

作者：刘琪张万江牟迪初胜波王秀梅刘思国吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为调查东北三省地区奶牛源葡萄球菌耐药现状、耐药产生的分子机制和菌株流行情况,本研究对东北三省4个不同奶牛厂分离的107株不同种属葡萄球菌进行耐药表型测定,并采用PCR方法检测分离株中携带的相关耐药基因;通过脉冲凝胶电泳(PFGE)对... 详细信息

为调查东北三省地区奶牛源葡萄球菌耐药现状、耐药产生的分子机制和菌株流行情况,本研究对东北三省4个不同奶牛厂分离的107株不同种属葡萄球菌进行耐药表型测定,并采用PCR方法检测分离株中携带的相关耐药基因;通过脉冲凝胶电泳(PFGE)对分离株的亲缘关系进行分析,同时对金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST)。研究结果表明,同一奶牛场葡萄球菌克隆传播现象严重,PFGE分析后仅获得8株不同克隆的葡萄球菌。8株分离菌株对氨苄西林、克林霉素、红霉素、卡那霉素、和环丙沙星的耐药率分别为87.5%、87.5%、62.5%、50%和25%,对其余受试的6种药物(苯唑西林、四环素、氟苯尼考、利福平、万古霉素和利奈唑胺)均敏感。耐药基因检测结果显示,耐药基因blaZ/femB,lnuA/lnuB,erm(B),accA-aphD和gyrA基因Ser84(TCA)-I1e(TTA)的突变及grlA基因Ser80(CTC)-Phe(CTT)的突变是造成葡萄球菌对氨苄西林、克林霉素、红霉素、卡那霉素和环丙沙星耐药的主要原因。

关键词：葡萄球菌奶牛源脉冲凝胶电泳耐药基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛支原体表面一种新的膜蛋白(P33)的鉴定及特性研究

引用

中国预防兽医学报 2014年第9期36卷 679-683页

作者：吴金迪李媛白帆汪洋刘素丽周玉梅张秀英辛九庆东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

牛支原体(***)在感染和致病过程中其粘附蛋白起到关键的作用。为鉴定***膜表面粘附蛋白,本研究利用生物学软件对***全基因序列进行分析,预测其中一个891 bp的开放阅读框架编码一个约33 ku的具有粘附特征的假定蛋白,并将其命名为P33蛋白... 详细信息

牛支原体(***)在感染和致病过程中其粘附蛋白起到关键的作用。为鉴定***膜表面粘附蛋白,本研究利用生物学软件对***全基因序列进行分析,预测其中一个891 bp的开放阅读框架编码一个约33 ku的具有粘附特征的假定蛋白,并将其命名为P33蛋白。我们通过PCR扩增该基因并进行原核表达,获得了重组目的蛋白(rP33)。Western blot鉴定结果显示,P33蛋白定位于***菌体表面;激光共聚焦检测表明,rP33具有吸附胎牛肺细胞(EBL)的能力,其吸附作用可以被抗rP33血清特异性抑制。而且,以rP33为包被抗原的ELISA对EBL细胞膜成份的检测能够被抗rP33血清抑制,并呈抗体浓度依赖关系。本研究结果表明P33是一个新发现的具有粘附作用的***膜表面相关蛋白。

关键词：牛支原体原核表达粘附

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

氨基酸饥饿状态下(p)ppGpp调节猪传染性胸膜肺炎放线杆生物学特性研究

氨基酸饥饿状态下(p)ppGpp调节猪传染性胸膜肺炎放线杆生物学特性...

引用

2017年中国微生物学会学术年会

作者：李刚谢芳王春来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点试验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核分枝杆菌酯酶Rv1400c原核表达及表达产物的酶活性分析

引用

吉林农业大学学报 2014年第6期36卷 701-706页

作者：陶荣珊李金伟刘思国王全凯吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林省中韩动物科学研究院长春130600 吉林东丰药业股份有限公司东丰136300 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室哈尔滨150001

为探究结核分枝杆菌酯酶Rv1400c活性，以进一步研究Rv1400c的结构和功能。以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，对 Rv1400c 基因进行扩增，并将其克隆到 pET28b （＋）原核表达载体上，构建pET28b－Rv1400c重组质粒，然后将构建的重组... 详细信息

为探究结核分枝杆菌酯酶Rv1400c活性，以进一步研究Rv1400c的结构和功能。以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，对 Rv1400c 基因进行扩增，并将其克隆到 pET28b （＋）原核表达载体上，构建pET28b－Rv1400c重组质粒，然后将构建的重组质粒转化到BL21（ DE3）表达菌株中，增菌后用IPTG进行诱导表达再用亲和层吸树脂法进行纯化，利用不同底物、不同pH、不同温度对纯化后的Rv1400c酯酶进行活性分析。结果表明：成功构建出pET28b－Rv1400c重组质粒；SDS－PAGE和Western blot显示，Rv1400c以包涵体形式表达，蛋白分子质量为39 ku；在对8种底物的筛选中发现Rv1400c在C2～C14中具有活性，其中以在C2中活性最好；在以C12为底物、pH 8？0、37℃条件下酯酶活性最高。

关键词：结核分枝杆菌酯酶Rv1400c pET28b-Rv1400c重组质粒包涵体酯酶活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

副猪嗜血杆菌间接ELISA检测方法的建立

引用

中国预防兽医学报 2016年第7期38卷 576-579页

作者：刘双红李大鹏徐胜奎谢芳李刚李婷孙斌王春来黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原... 详细信息

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原阳性血清,除了HPS阳性血清呈阳性外,其余均为阴性,表明该方法特异性良好。批内重复和批间重复的最大变异系数分别小于7%和8%。此外,将Cdt B-ELISA方法与商品化试剂盒Bio Chek HPS-Opp A间接ELISA抗体检测方法对背景明确的116份HPS阳性血清和112份HPS阴性血清进行检测,商品化试剂盒阳性符合率为25%,阴性血清符合率为100%,总符合率为62%,其中Cdt B-ELISA方法对阳性血清的检出率高于商品化试剂盒。应用Cdt B-ELISA方法检测330份临床猪血清样品,结果显示,HPS抗体阳性检出率为11.8%。该方法可以用于HPS的临床检测,为HPS流行病学调查和防控提供了一种快速有效的检测方法。

关键词：副猪嗜血杆菌 rCdtB 间接ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国西部和北部边境4省区牛支原体血清流行病学调查及分析

引用

中国预防兽医学报 2021年第7期43卷 717-721页

作者：李媛闫磊刘桐辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室/国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150069 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130018

为了解我国边境地区牛支原体的流行情况,本研究利用间接ELISA对2017年~2018年间收集自我国西部和北部4个省区的8 832份临床健康牛血清样品进行了牛支原体血清抗体的检测,并从地区、年份、季节、牛的品种及不同生长阶段牛对结果做了统计... 详细信息

为了解我国边境地区牛支原体的流行情况,本研究利用间接ELISA对2017年~2018年间收集自我国西部和北部4个省区的8 832份临床健康牛血清样品进行了牛支原体血清抗体的检测,并从地区、年份、季节、牛的品种及不同生长阶段牛对结果做了统计分析。结果显示,两年各地牛支原体血清抗体阳性率平均为8.37%(396/4 416,2017)、15.67%(760/4 416,2018),其中两年阳性率最高的省份均为云南(15.76%2017,36.32%2018),其次依次是内蒙古(9.15%2017,18.3%2018)、新疆(8.96%2017,12.22%2018)、西藏(1.99%2017,1.99%2018)。对检测数据按季节分析结果显示,春季牛支原体抗体阳性率最高,达18.31%(809/4 416),高于夏季的7.86%(347/4 416)。对检测数据从牛的品种因素分析显示,黄牛和奶牛血清抗体阳性率较高,分别为13.3%(183/1 375)和15.6%(159/1 021),显著高于水牛的3.85%(20/520)和牦牛的1.99%(22/1 104)(p<0.01)。从不同生长阶段牛的分析显示,与青年牛和成年牛相比较,犊牛牛支原体抗体的阳性率更高为19.90%(195/980)(p<0.01),犊牛对牛支原体更易感。本研究结果表明这几个地区均存在牛支原体抗体阳性牛,且2018年比2017年牛血清抗体阳性率大幅度增加(p<0.01)。本研究首次检测并分析了我国北部和西部边境地区牛支原体的血清流行病学状况,为明确牛支原体在我国的流行状况及制定有效防治措施提供了参考依据。

关键词：牛支原体抗体水平调查与分析 ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪传染性胸膜肺炎的诊断技术

引用

兽医导刊 2010年第9期 38-40页

作者：谢芳张艳禾司微刘思国王春来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪传染性胸膜肺炎（PCP）,是一种高度传染性、致死性的呼吸系统传染病。该病的主要特征是急性与亚急性病例呈现纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例呈现纤维素性坏死性胸膜肺炎。1957年,英国人Pattison等首次发现该病,目前已在世界各国广... 详细信息

猪传染性胸膜肺炎（PCP）,是一种高度传染性、致死性的呼吸系统传染病。该病的主要特征是急性与亚急性病例呈现纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例呈现纤维素性坏死性胸膜肺炎。1957年,英国人Pattison等首次发现该病,目前已在世界各国广泛流行,造成巨大的经济损失,严重阻碍了世界养猪业的健康发展,

关键词：猪传染性胸膜肺炎诊断技术呼吸系统传染病纤维素性经济损失亚急性致死性出血性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

副猪嗜血杆菌“菌影”的制备

副猪嗜血杆菌“菌影”的制备

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：胡明明常月红张艳禾司薇谢芳于申业刘慧芳刘思国王春来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点试验室/动物细菌病研究室东北农业大学

本试验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有λP/P-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λP/P-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E。再将含有E基因的裂解盒插入到pMD18-T... 详细信息

本试验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有λP/P-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λP/P-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E。再将含有E基因的裂解盒插入到pMD18-T载体中,构建副猪嗜血杆菌打孔质粒。采用电击穿孔法将其转入***β2155中,然后利用接合的方式将打孔质粒转入副猪嗜血杆菌5型菌株。含有打孔质粒的副猪嗜血杆菌在28℃条件下生长到对数生长期,然后升温到42℃诱导E基因的表达,制备了副猪嗜血杆菌菌影。电镜观察菌影形态完整,内容物全部被释放到胞外。本试验为进一步研究菌影这一新型菌苗及佐剂形式奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌菌影裂解基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：