检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 139-143页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院骨关节外科

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfac... 详细信息

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)、地塞米松、维生素C的培养基进行成软骨诱导,诱导第7、14天分别检测软骨细胞特异的生物学特性。将诱导7d的MSCs与FS复合,接种于裸鼠背部皮下作为实验组,同时设单纯只注射FS或MSCs的支架对照组和细胞对照组。分别于接种后6、12周取材进行大体观察,行HE、阿尔新蓝染色和型胶原免疫组织化学染色评价其成软骨能力。结果MSCs以特定的培养基诱导后由纺锤形变为多角形,并表达软骨细胞分泌的基质。复合物接种6和12周后,实验组均可形成软骨样组织块,6周时形成的组织块较小而质地柔韧,陷窝清楚,可检测到阳性阿尔新蓝及型胶原表达;12周形成的组织块较大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新蓝及型胶原免疫组化阳性染色较6周增强。两个对照组均无软骨样组织块形成。结论MSCs复合FS可以作为一种较优良的可注射性组织工程软骨的构建方法。

关键词：组织工程软骨骨髓间充质干细胞可注射性纤维蛋白封闭剂

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儿童血友病429例临床回顾分析

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中国实用儿科杂志 2006年第4期21卷 292-295页

作者：郭晔张磊竺晓凡杨仁池中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院国家实验血液学重点实验室天津300020

目的探讨血友病患儿确诊时间、症状及其关节畸形等情况。方法天津血液学研究所血液病医院于1986年7月至2004年8月,对就诊的429例血友病患儿临床症状出现时间、诊断时间及关节畸形出现的时间进行分析。结果429例血友病患儿,均为男性,血友... 详细信息

目的探讨血友病患儿确诊时间、症状及其关节畸形等情况。方法天津血液学研究所血液病医院于1986年7月至2004年8月,对就诊的429例血友病患儿临床症状出现时间、诊断时间及关节畸形出现的时间进行分析。结果429例血友病患儿,均为男性,血友病A共390例,占90.9%,其中亚临床型5例(1.3%),轻型43例(11.0%),中型181例(46.4%),重型161例(41.3%);血友病B共39例,占9.1%,其中亚临床型2例(5.1%),轻型6例(15.4%),中型26例(66.7%),重型5例(12.8%)。患儿初次出现出血症状的中位年龄为1.6岁(0～12岁);但初次诊断年龄0.3～12.0岁,中位年龄为5.2岁(0.3～12.0岁),两者之间差异具有显著性意义(P<0.01)。结论目前血友病患儿的诊断存在延迟,替代治疗疗程和因子剂量的不足是关节畸形高发生率的原因。

关键词：血友病关节畸形诊断治疗

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血友病骨关节病101例X线表现及临床分析

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中国综合临床 2006年第4期22卷 326-328页

作者：孙淑娟张磊杨仁池孙洪砚韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液科天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院放射科天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的通过单中心较大样本的X线检查及临床分析，了解我国血友病骨关节病的治疗现状。方法回顾性分析101例血友病患者的临床资料和骨关节的放射学积分。结果 ①患者首次发生异常出血和首次就诊的中位年龄分别为1岁和15岁，诊断时间延迟... 详细信息

目的通过单中心较大样本的X线检查及临床分析，了解我国血友病骨关节病的治疗现状。方法回顾性分析101例血友病患者的临床资料和骨关节的放射学积分。结果 ①患者首次发生异常出血和首次就诊的中位年龄分别为1岁和15岁，诊断时间延迟。②骨关节病在重型、中型、轻型血友病的发生率分别为77．8％、53．6％、20．0％，中型、轻型患者也有较高的罹患率。易受累的关节依次为膝、肘、踝；③在0～9岁、10～19岁、20～29岁、30～39岁、40～49岁、≥50岁等各年龄段，骨关节病的发病率分别为37．5％、59．4％、78．3％、83．3％、76．9％、100％。④治疗组和非治疗组骨关节病的发病率分别为69．4％和62．1％。差异无显著性；⑤骨关节畸形的发生率在具有靶关节组和无靶关节组分别为71．2％和20．0％，差异有显著性。结论我国血友病患者骨关节病发病率高，成为影响患者健康相关生活质量的主要因素之一。靶关节可以作为判断发生病变骨关节预后的较好指标。

关键词：血友病慢性骨关节病变放射学积分靶关节

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基质金属蛋白酶9在粒细胞集落刺激因子诱导的造血干/祖细胞动员中的作用

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中华医学杂志 2006年第42期86卷 2966-2970页

作者：靳风艳邱录贵李桥川孟恒星王亚非于珍李茜韩俊领中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 现在吉林省肿瘤医院肿瘤内科天津市脐带血造血干细胞库

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI)ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响。结果G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍(P<0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多。动员后骨髓单个核细胞MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.05)。rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解。HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P<0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P<0.05),该效应可被MPI阻断(P<0.05)。与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69U/2×105MNC±3U/2×105MNC)数量显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用。

关键词：基质金属蛋白酶粒细胞集落刺激因子造血干细胞动员

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多发性骨髓瘤患者骨髓Flk1^+间充质干细胞的成骨能力降低

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基础医学与临床 2006年第6期26卷 586-592页

作者：李炳宗李静史明霞陈磊高伟波赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液病研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-K... 详细信息

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-Kossa染色法测定钙盐沉积;同时测定F lk1+MSCs中转录共刺激因子(TAZ)的表达。结果MM患者骨髓F lk1+MSCs在体外经成骨诱导后,其成骨指标的表达较正常人明显降低,Von-Kossa染色也可见矿化基质沉积相应减低。同时F lk1+MSCs中TAZ的表达在MM中较正常人明显下调(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤患者的骨髓F lk1+MSCs成骨能力较正常人减低,此因素可能参与了MM患者骨病的发病环节,而TAZ表达的减弱可能在此过程中发挥一定作用。

关键词：多发性骨髓瘤间充质干细胞成骨转录共刺激因子

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基质细胞衍生因子-1和血小板第4因子对体外扩增后脐血CD34^+细胞黏附特性和趋化功能的影响

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中国实验血液学杂志 2006年第1期14卷 83-88页

作者：李桥川李云涛孟恒星王亚非万长春李新葛薇李茜韩俊领邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津脐带血造血干细胞库天津300384

为了研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板第4因子(PF4)对扩增后脐血CD34+细胞归巢相关功能的影响,将纯化的脐血CD34+细胞接种入无血清培养液中,加入不同组合的细胞因子FST(FL+SCF+TPO)、FST+SDF-1、FST+PF4或FST+SDF-1+PF4,分别于培... 详细信息

为了研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板第4因子(PF4)对扩增后脐血CD34+细胞归巢相关功能的影响,将纯化的脐血CD34+细胞接种入无血清培养液中,加入不同组合的细胞因子FST(FL+SCF+TPO)、FST+SDF-1、FST+PF4或FST+SDF-1+PF4,分别于培养第7、10、14天检测CD34+细胞扩增倍数、集落形成能力、细胞的黏附分子表达、总黏附性、趋化功能。结果表明:①加入SDF-1的实验组CD34+细胞及造血祖细胞集落扩增倍数高于对照组;②加入SDF-1明显上调扩增的CD34+细胞CD49e的表达,加入PF4明显上调扩增的CD34+细胞CD49e、CD54的表达,在扩增体系中加入SDF-1或PF4均能够明显提高扩增的CD34+细胞的总黏附性;③在扩增体系中加入SDF-1能够明显提高扩增的CD34+细胞的自发迁移率,但导致CXCR-4的表达和SDF-1诱导迁移率降低;而PF4能够明显提高扩增的CD34+细胞的CXCR-4的表达和SDF-1诱导迁移率;在扩增体系中同时加入SDF-1和PF4能够明显提高扩增的CD34+细胞自发迁移率和SDF-1诱导迁移率。结论:体外扩增体系中加入SDF-1和PF4能够上调部分归巢相关黏附分子的表达,保持扩增的CD34+细胞的黏附和迁移能力,有利于降低体外扩增对造血干/祖细胞(HSPC)归巢相关功能的不利影响,维持扩增的HSPC的归巢潜能。

关键词： CD34^+细胞脐带血基质细胞衍生因子-1 血小板第4因子体外扩增黏附特性趋化功能

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伴有t(3;5)(q25;q34)的骨髓增生异常综合征急性髓系白血病变患者的分子特征

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中华血液学杂志 2006年第12期27卷 833-837页

作者：张悦邵英起薛永权王一张美荣刘旭平郑以州肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 苏州大学第一附属医院江苏省血液研究所中山大学肿瘤防治中心

目的研究t(3;5)(q25;q34)的分子特征。方法R显带染色体核型分析和染色体涂染分析确定t(3;5)(q25;q34)存在。RT-PCR法检测患者NPM-MLF1融合基因、MLF1基因表达。PCR联合序列分析检测NPM基因突变。实时定量RT-PCR(Real-time PCR)检测Evi-1... 详细信息

目的研究t(3;5)(q25;q34)的分子特征。方法R显带染色体核型分析和染色体涂染分析确定t(3;5)(q25;q34)存在。RT-PCR法检测患者NPM-MLF1融合基因、MLF1基因表达。PCR联合序列分析检测NPM基因突变。实时定量RT-PCR(Real-time PCR)检测Evi-1,MDS1／Evi-1表达。免疫组化染色确定MLF1和NPM-MLF1蛋白细胞定位分布。Western blot法检测bcl-2蛋白表达。结果染色体核型分析和涂染分析均证实存在染色体t(3;5)(q25;q34),NPM-MLF1融合基因阳性,经诱导治疗获得完全缓解后转为阴性。患者白血病细胞仅表达MLF1基因非编码蛋白剪接体,不表达Evi-1基因,弱表达MDS1／Evi-1。无NPM基因突变,未检出bcl-2蛋白表达。MLF1蛋白定位于细胞质,而NPM-MLF1则主要定位于胞核。结论t(3;5)(q25;q34)是髓系肿瘤的一种少见的染色体易位,该染色体易位导致形成NPM-MLF1融合基因是其发病的分子学基础。

关键词：染色体畸变融合蛋白类 NPM-MLF1 白血病髓系急性骨髓增生异常综合征

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抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在小鼠体内性质的研究

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天津医药 2006年第9期34卷 625-627页

作者：秦岚赵艳津高瀛岱杨铭苏晔吕晶丽邵梦麟熊冬生杨纯正天津市第一中心医院 300192 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:研究抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的体内作用。方法:125I标记抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体采用氯胺T法,并采用昆明鼠和人K562耐药裸鼠移植瘤模型分别测定该微型双功能抗体在小鼠体内的药代动力学和体内组织分布;采用人K562耐药及敏感... 详细信息

目的:研究抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的体内作用。方法:125I标记抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体采用氯胺T法,并采用昆明鼠和人K562耐药裸鼠移植瘤模型分别测定该微型双功能抗体在小鼠体内的药代动力学和体内组织分布;采用人K562耐药及敏感裸鼠移植瘤模型测定该微型双功能抗体介导的体内靶向杀伤活性及其不良反应。结果:抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在昆明鼠体内的半衰期为2h;尾静脉注射抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体6h后,其在肿瘤部位的分布高于其他组织,在12h和24h时,其在肿瘤与血液分布的比率分别为2.69和8.09;抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能介导人T细胞有效杀伤表达Pgp抗原的K562耐药细胞。结论:抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能在裸鼠皮下人白血病细胞移植瘤部位富集,并能有效地抑制耐药白血病移植瘤的生长,无明显的不良反应。

关键词： P糖蛋白抗原,CD3抗体小鼠

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纤维蛋白封闭剂复合人胚关节软骨细胞体内构建可注射性软骨

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中国生物工程杂志 2006年第8期26卷 77-83页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所天津300020 天津市第一中心医院骨关节外科天津310000

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×1... 详细信息

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×10^7第4代软骨细胞与FS混合接种于裸鼠皮下，并于第10周取材判断体内形成软骨的能力。结果：3～4代软骨细胞保持了很高的增殖和分泌基质的能力。软骨细胞与FS的复合物体内接种后各组均可形成软骨样组织块，其湿重、GAG含量随着接种细胞数量的增多而增高，各组之间差异具有显著性（P〈0．05）。3×10^7细胞组GAG含量与正常人胚关节软骨没有差异（P〉0．05）。组织切片显示软骨细胞位于类似正常软骨组织的陷窝中，阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原表达阳性，细胞内富含高尔基体、粗面内质网及大量分泌泡。结论：FS和人胚关节软骨细胞可以作为理想的支架材料和种子细胞应用于可注射软骨组织的构建。

关键词：纤维蛋白封闭剂软骨细胞组织工程可注射软骨

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造血干细胞联合骨髓间充质干细胞移植实验效果观察

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郑州大学学报（医学版） 2006年第5期41卷 873-875页

作者：汪萍呼莹姜学英马冠杰宋永平赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中美合作实验室河南省血液病研究所郑州450008 河南省肿瘤医院

目的：对骨髓问充质干细胞（MSC）在造血干细胞移植后造血重建中的作用进行探讨。方法：分离培养水囊引产4～5个月龄胎儿来源的骨髓MSC和脐血CD34^＋造血干／祖细胞（HSC），作为供体细胞。23只重症联合免疫缺陷（scm）小鼠作为受体，... 详细信息

目的：对骨髓问充质干细胞（MSC）在造血干细胞移植后造血重建中的作用进行探讨。方法：分离培养水囊引产4～5个月龄胎儿来源的骨髓MSC和脐血CD34^＋造血干／祖细胞（HSC），作为供体细胞。23只重症联合免疫缺陷（scm）小鼠作为受体，随机分成4组，^137Cs全身照射350cGy后，在4h内从尾静脉输入供体细胞。①阴性对照组：5只，不输入任何细胞。②阳性对照组：6只，单纯输入HSC5×10^6ml^-1。③实验Ⅰ组：6只，输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1。④实验Ⅱ组：6只，输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1输注后观察各组小鼠的存活情况；每周计数外周血单个核细胞（MNC）总数；移植后第7周，PCR检测外周血人体细胞DNA，并用流式细胞仪测定供体骨髓人源细胞嵌合比例。结果：阴性和阳性对照组小鼠均于10d内死亡，骨髓病理切片提示小鼠死于骨髓衰竭。实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠均保持良好的生存状态，皮肤黏膜无溃烂、出血，毛发无缺损。实验Ⅰ、Ⅱ组外周血象逐渐回升，第3周，实验Ⅱ组外周血MNC数量（2．63±0．32）×10^9L^-1，高于实验Ⅰ组的（1．33±0．21）×10^9L^-1（P〈0．01），第5周即恢复正常水平。第7周，实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠外周血均检测出供体细胞；实验Ⅱ组人源细胞嵌合比例为（7．41±0．79）％，高于实验Ⅰ组（5．11±0．07）％（P〈0．05）。结论：SCID小鼠致死剂量照射后．联合输入HSC和MSC可明显促进造血干细胞移植后造血重建，且不增加移植物抗宿主病的发生率。

关键词：骨髓间充质干细胞小鼠重症联合免疫缺陷造血重建嵌合

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