检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 1998年第4期25卷 367-373页

作者：孔建朱宁宁尹斌沈岩吴冠芸中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在... 详细信息

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在人胎肝和骨骼肌文库中丰度较高，在肝、肾和骨髓文库中也有ＰＣＲ扩增．而Ｄ１２在所分析的８个ｃＤＮＡ文库中均未见ＰＣＲ扩增产物．从骨骼肌文库中克隆到一段包含Ａ９１的３１５ｂｐ的ｃＤＮＡ（ＡＭ４４７０）．多种组织ＲＮＡ印迹显示，ＡＭ４４７０与骨骼肌和心脏ｍＲＮＡ杂交，转录本长度均为２８ｋｂ．

关键词：外显子捕获表达序列 FRAXA位点

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非编码的mRNA

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生物化学与生物物理进展 1998年第5期25卷 387-389页

作者：罗文琴袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

非编码的ｍＲＮＡ是近年发现的一类不含典型ＯＲＦ的ｍＲＮＡ．目前已发现或克隆的这类基因主要有：Ｈ１９基因，ＸＩＳＴ基因，ＸＬＳＩＲＴ基因，Ｈｉｓ１基因，ｂｉｃ基因，ｒｏｘ１和ｒｏｘ２基因等．它们与胚胎发育，肿瘤发生及... 详细信息

非编码的ｍＲＮＡ是近年发现的一类不含典型ＯＲＦ的ｍＲＮＡ．目前已发现或克隆的这类基因主要有：Ｈ１９基因，ＸＩＳＴ基因，ＸＬＳＩＲＴ基因，Ｈｉｓ１基因，ｂｉｃ基因，ｒｏｘ１和ｒｏｘ２基因等．它们与胚胎发育，肿瘤发生及Ｘ染色体失活密切相关．

关键词：非编码 mRNA H19基因 XIST基因 His-1基因

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人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中瞬时及稳定表达

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 138-143页

作者：孙明增琦祖和潘燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamin... 详细信息

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamine转染NIH/3T3细胞。结果瞬时表达结果表明,重组pME_7质粒能够在NIH/3T3细胞中表达。稳定表达的结果则表明,人apoE_7基因的表达水平与其整合到宿主细胞基因组的拷贝数密切相关。ELISA测定结果显示,人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中可以进行正确的转录剪切和翻译加工,合成有生物活性的人apoE_7蛋白;研究结果还表明:重金属可以诱导增强人apoE_7基因的高效表达,诱导后表达水平提高45%～60%。结论人apoE_7基因的表达不仅局限于人类的组织细胞,也可以在鼠类组织细胞中表达;而且MT-I启动子能够诱导表达人apoE_7基因,为人apoE_7转基因小鼠模型的建立奠定了基础。

关键词：真核表达质粒 apoE7基因 MT-I启动子 NIH/3T3

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血管紧张素转换酶基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

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中华结核和呼吸杂志 1998年第8期21卷 489-491页

作者：肖毅黄席珍邱长春朱席琳刘怡文中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶... 详细信息

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增基因片段，对５０例ＯＳＡＳ患者和５０名正常人ＡＣＥ基因多态性的分布进行了观察，并结合临床特点和多导睡眠监测结果进行了分析。结果发现在中国汉族正常人群中，ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态Ｉ、ＩＤ、ＤＤ基因型频率分别为１６％，５２％，３２％，其Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为４２％和５８％。Ｉ／Ｄ多态分布符合Ｈａｒｄｙｗｅｉｎｂｅｒｇ定律，达到了遗传平衡，具有群体代表性。ＯＳＡＳ患者Ⅱ基因型显著高于正常人，ＤＤ基因型则明显低于正常人；Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为２８％和７２％，其差异也具有统计学意义。Ⅱ基因型的ＯＳＡＳ患者较ＩＤ基因型，最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和睡眠呼吸暂停低通气指数（ＡＨＩ）均较严重。另外，合并高血压的ＯＳＡＳ患者其最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和ＡＨＩ较无高血压的ＯＳＡＳ患者严重。结论中国汉族人ＯＳＡＳ发病与ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态性相关联，基因型ＩＩ和等位基因Ｉ可能是中国人?

关键词：睡眠呼吸暂停综合征 ACE 基因多态性

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人脑新EST的分离及其表达特异性分析

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科学通报 1998年第16期43卷 1738-1741页

作者：潘美辉袁建刚杜光伟周彦姚辉强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了解脑发育和分化的机制 ,利用差异显示技术从 1 3和 33周的胎儿脑中分离到 90个EST .比较GenBank以后发现其中的 74个EST代表新的基因 ,当中的一些与某些脑发育相关的基因同源 .将来自差异显示的 79个EST固定在膜上。

关键词：发育分化胎儿基因差异表达脑分离 EST

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带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达

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中华医学杂志 1998年第1期78卷 66-67页

作者：李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子... 详细信息

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子５′ＨＳ２的人β４１／４２珠蛋白基...

关键词：地中海贫血 β珠蛋白期转基因小鼠病理学

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载脂蛋白 E 与 Alzheimer 病的分子生物学研究新进展

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中华老年医学杂志 1998年第3期17卷 188-189页

作者：江天琦祖和中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部医学分子生物学国家重点实验室

载脂蛋白Ｅ与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的分子生物学研究新进展江天琦祖和载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）是血浆中最重要的载脂蛋白成分之一，编码ａｐｏＥ的基因位于第１９号染色体的长臂（１９ｑ１３．２）。ａｐｏＥ基因的３种常见等位基因分别... 详细信息

载脂蛋白Ｅ与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的分子生物学研究新进展江天琦祖和载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）是血浆中最重要的载脂蛋白成分之一，编码ａｐｏＥ的基因位于第１９号染色体的长臂（１９ｑ１３．２）。ａｐｏＥ基因的３种常见等位基因分别为ε２、ε３和ε４。３者的区别在于...

关键词：老年性痴呆载脂蛋白分子生物学

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毛细管无胶筛分电泳在苯丙氨酸羟化酶基因短串联重复序列分析及苯丙酮尿症基因诊断中的应用

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中国医学科学院学报 1998年第6期20卷 433-439页

作者：许琪宋昉韩富天林炳承沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 首都儿科研究所北京100020 中国科学院化学物理研究所

目的　应用毛细管无胶筛分电泳技术分析苯丙氨酸羟化酶基因内含子 3中四核苷酸 ( TCTA)重复序列的多态性。方法　通过毛细管无胶筛分电泳分离分析特异 PCR产物。结果　在 6 1个正常中国人和 6个苯丙酮尿症家系中共检测到从 2 2 4bp到... 详细信息

目的　应用毛细管无胶筛分电泳技术分析苯丙氨酸羟化酶基因内含子 3中四核苷酸 ( TCTA)重复序列的多态性。方法　通过毛细管无胶筛分电泳分离分析特异 PCR产物。结果　在 6 1个正常中国人和 6个苯丙酮尿症家系中共检测到从 2 2 4bp到 2 6 0 bp连续分布的 1 0种等位基因片段 ,多态信息量为 0 .738。其中 2 6 0 bp等位片段是第 1次在中国人群中被检测到。用这一检测方法对 6个苯丙酮尿症家系进行基因型分析 ,并完成了 1例产前基因诊断。结论　与聚丙烯酰胺变性凝胶电泳相比 ,毛细管电泳具有准确、快速、自动化和高分辨等优点。毛细管电泳技术与 PCR技术的结合在遗传病基因诊断方面具有广泛的应用前景。

关键词：毛细管电泳苯丙酮尿症基因诊断产前诊断

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阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓中正常及异常造血干/祖细胞含量分析

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中华血液学杂志 1998年第10期19卷 518-521页

作者：李强张之南刘尔坤沈悌武永吉许彩民中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血液科华西医科大学附属第二医院儿科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的：根据阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者骨髓造血干／祖细胞的含量，探讨异常细胞获得造血优势的可能原因。方法：骨髓有核细胞以ＣＤ３４ＦＩＴＣ及ＣＤ５９ＰＥ免疫荧光双标记，经流式细胞仪测定不同细胞群内ＣＤ３４... 详细信息

目的：根据阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者骨髓造血干／祖细胞的含量，探讨异常细胞获得造血优势的可能原因。方法：骨髓有核细胞以ＣＤ３４ＦＩＴＣ及ＣＤ５９ＰＥ免疫荧光双标记，经流式细胞仪测定不同细胞群内ＣＤ３４＋细胞含量。结果：①正常对照及ＰＮＨ患者骨髓中的ＣＤ３４＋细胞均分布在“淋巴细胞窗”（Ａ窗）及“原始细胞窗”（Ｄ窗）内。②正常对照Ａ窗及Ｄ窗内ＣＤ３４＋细胞数分别为（３７０１±８９６）／１０５个细胞、（１１３７３±１５７４）／１０５个细胞；ＰＮＨ患者Ａ窗及Ｄ窗内ＣＤ３４＋细胞分别为（１２１５±７４９）／１０５个细胞及（６４２０±２３３７）／１０５个细胞，均较正常对照显著减少（Ｐ＜０．０１）。③患者ＣＤ５９＋细胞群中ＣＤ３４＋细胞的减少比ＣＤ５９－细胞群更为显著，Ａ窗及Ｄ窗内ＣＤ５９－细胞群中ＣＤ３４＋细胞分别相当于ＣＤ５９＋细胞群的５．６２倍、１．８５倍。④正常对照Ａ窗及Ｄ窗内ＣＤ３４＋细胞几乎均为ＣＤ５９＋表型（分别为９９．２％±１．０％、９８．７％±０．８％），而ＰＮＨ患者Ａ窗及Ｄ窗内则都以ＣＤ３４＋ＣＤ５９－细胞占据数量优势（分别为７９．３％±１５．５％、８５．９％±７．８％）。结论：ＰＮ?

关键词：血红蛋白尿症 PNH 骨髓造血干细胞流式细胞术

来源：评论

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利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 610-616页

作者：顾继杰黄秉仁蔡良琬中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１... 详细信息

转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段ＬＩＡＲＥＳＴ－１和ＬＩＡＲＥＳＴ－２表达量在凋亡细胞中显著高于不发生凋亡的细胞中，ＧｅｎＢａｎｋ检索表明此二片段为新的ｃＤＮＡ序列并给予登录号Ｕ４７３１５和Ｕ４７３１６．另有一个ｃＤＮＡ片段ＬＩＡＲＣＤ－３在凋亡细胞中受到了明显的抑制，经检索为一已知的与前强啡肽原上游调控区结合的ＤＮＡ结合蛋白ｃＤＮＡ编码区的一部分。

关键词：神经生长因子低亲和力受体细胞凋亡差示PCR

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