检索结果-内蒙古大学图书馆

小儿腹腔镜经肛门直肠结肠拖出术操作指南(2024版)

临床小儿外科杂志 2024年第9期23卷 805-813页

作者：国家卫生健康委小儿内镜外科专家委员会中华医学会小儿外科学分会肛肠学组中国医师协会小儿外科医师分会徐伟立李索林李龙汤绍涛白玉作李爱武不详河北医科大学第二医院首都儿科研究所附属儿童医院华中科技大学同济医学院附属协和医院中国医科大学附属盛京医院山东大学齐鲁医院

随着微创技术的引入, 腹腔镜辅助经肛门直肠结肠拖出术治疗小儿先天性巨结肠症及其类缘病、多发结肠息肉病得以快速应用。为进一步规范小儿腹腔镜经肛门直肠结肠拖出术的术式选择以及操作, 由国家卫生健康委小儿内镜外科专家委员会、中... 详细信息

随着微创技术的引入, 腹腔镜辅助经肛门直肠结肠拖出术治疗小儿先天性巨结肠症及其类缘病、多发结肠息肉病得以快速应用。为进一步规范小儿腹腔镜经肛门直肠结肠拖出术的术式选择以及操作, 由国家卫生健康委小儿内镜外科专家委员会、中华医学会小儿外科学分会肛肠学组和中国医师协会小儿外科医师分会牵头, 组织全国30位小儿肛肠与腔镜外科专家, 围绕腹腔镜经肛门直肠结肠拖出术的适应证与禁忌证、手术设备与器械选择、手术基本原则及手术方式等, 制定《小儿腹腔镜经肛门直肠结肠拖出术操作指南(2024版)》。

关键词： Hirschsprung病巨结肠类源性疾病外科手术腹腔镜检查机器人手术诊疗指南儿童

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非洲马瘟病毒VP7蛋白的可溶性表达及抗体阻断ELISA方法的初步建立

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中国兽医科学 2024年第10期54卷 1318-1326页

作者：徐婧户鑫兵宋昱庆张鸿歌田占成关贵全罗建勋殷宏魏衍全独军政甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

为了实现非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白的可溶性表达,制备其特异性单克隆抗体,建立AHSV VP7阻断ELISA抗体检测方法,通过对编码AHSV VP7蛋白的基因序列进行突变设计与密码子优化,以大肠杆菌表达系统表达可溶性VP7蛋白并进行纯化,免疫BALB/c... 详细信息

为了实现非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白的可溶性表达,制备其特异性单克隆抗体,建立AHSV VP7阻断ELISA抗体检测方法,通过对编码AHSV VP7蛋白的基因序列进行突变设计与密码子优化,以大肠杆菌表达系统表达可溶性VP7蛋白并进行纯化,免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得VP7蛋白单克隆抗体。通过细胞免疫荧光和Western-blot鉴定单克隆抗体的特异性,并建立AHSV VP7阻断ELISA方法。结果显示,利用大肠杆菌表达系统成功表达了可溶性重组AHSV VP7蛋白,将纯化的VP7蛋白免疫小鼠筛选制备了2株稳定分泌VP7蛋白单克隆抗体的细胞株,分别为3F7和7H8。经鉴定证明这2株VP7单克隆抗体不仅能与大肠杆菌重组表达的VP7蛋白反应,而且也与BHK-21细胞表达的具有天然构象的重组VP7蛋白反应,具有良好的特异性和反应性。以重组VP7蛋白和单克隆抗体7H8分别为包被抗原和阻断抗体建立了AHSV VP7阻断ELISA方法,检测了277份马血清样本,结果与商品化进口AHSV抗体检测试剂盒测定结果一致。本研究在大肠杆菌表达系统中实现了AHSV VP7蛋白的可溶性表达,制备获得了VP7特异性单克隆抗体,并建立了AHSV VP7阻断ELISA方法,为我国有效防控非洲马瘟的传入提供了技术储备。

关键词：非洲马瘟病毒 VP7蛋白可溶性表达单克隆抗体阻断ELISA

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丝氨酸蛋白酶在细粒棘球绦虫中的表达及活性鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第2期39卷 233-239页

作者：田梦潇臧小燕郭刚齐文静郭宝平任远李军张文宝新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830017 中亚高发病成因与防治国家重点实验室临床医学研究院新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054

目的比较细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(EgSP)在原头节、生发层(包囊)和成虫中的表达水平差异及活性鉴定。方法采用TRIzol试剂分别提取细粒棘球绦虫原头节(经胃蛋白酶消化和未经胃蛋白酶消化)、生发层(包囊)和成虫总RNA,并进行PCR分别扩增E... 详细信息

目的比较细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(EgSP)在原头节、生发层(包囊)和成虫中的表达水平差异及活性鉴定。方法采用TRIzol试剂分别提取细粒棘球绦虫原头节(经胃蛋白酶消化和未经胃蛋白酶消化)、生发层(包囊)和成虫总RNA,并进行PCR分别扩增EgSP基因片段,PCR扩增产物测序后通过Clustal×2.0软件进行序列比对,采用邻接法构建系统进化树。选择具有SP活性基团的38 000亚基基因序列进行原核表达,将正确的目的片段克隆至表达载体pET-30a中,再转化至大肠埃希菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用His标签亲和层析纯化柱纯化重组蛋白EgSP(rEgSP)。将rEgSP(25μg)与等量的弗氏完全佐剂混合乳化,皮下多点注射免疫5只BALB/c小鼠,从第2次免疫开始,改为等量的弗氏不完全佐剂,第4次加强免疫采用腹腔注射,每次免疫间隔1周。免疫结束后,尾静脉采血,分离血清。ELISA检测血清中特异性抗体水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定不同阶段中EgSP mRNA的相对表达水平。蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测细粒棘球绦虫不同阶段中EgSP的表达情况,采用Image Lab 6.0软件分析蛋白质的表达丰度。免疫组化检测EgSP在细粒棘球绦虫原头节和生发层(包囊)中的表达情况。纯化的rEgSP和囊液蛋白用胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸酶底物(Z-Arg-AMC)、组织蛋白酶L底物(Z-Phe-Arg-AMC)测定其蛋白酶活性。采用Graphpad Prism 7统计学软件对多组数据进行单因素ANOVA方差分析。结果细粒棘球绦虫原头节、生发层(包囊)和成虫的cDNA中均扩增出目的片段,与预期大小(1 455 bp)相符。PCR产物测序结果显示,EgSP开放阅读框为1 455 bp,编码484个氨基酸,相对分子质量(Mr)为54 870,与多房棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(Em SP)核苷酸序列一致性为97.73%,氨基酸序列一致性为96.69%。系统进化树分析结果显示,与其他绦虫属氨基酸序列一致性为33.10%~87.19%,其中与亚洲带绦虫(GenBank登录号:VDK43949.1),带状泡尾绦虫(GenBank登录号:VDM30859.1)的氨基酸序列一致性分别为87.19%、52.89%。qRT-PCR结果显示,胃蛋白酶消化的原头节、生发层(包囊)、成虫中EgSP mRNA的相对转录水平分别为2.1±1.2、9.1±2.1、5.8±2.3,均高于未经胃蛋白酶消化的原头节(1.0±0)(P<0.01)。Western blotting分析结果显示,原头节、生发层(包囊)、成虫中EgSP蛋白相对表达水平分别为1.2±0.1, 3.6±0.2, 4.0±0.1,生发层(包囊)和成虫中的表达水平高于原头节(P<0.01)。免疫组化分析结果显示,EgSP多克隆抗体能够特异性在生发层(包囊)中表达,而在原头节中不表达。在3种不同pH缓冲液中,rEgSP和囊液蛋白均具有蛋白酶活性,且在pH7.2的缓冲液中,rEgSP和囊液蛋白丝氨酸蛋白酶活性最强(P<0.01)。结论EgSP在细粒棘球绦虫生发层(包囊)和成虫组织中高表达,原头节中表达较低。rEgSP和囊液蛋白均具有较强的丝氨酸蛋白酶活性。

关键词：细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶原头节生发层

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基于非洲猪瘟病毒D250R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医科学 2025年第5期55卷 599-607页

作者：朱文青徐丽华刘佳畦邬雨倩金子安吴旭琪袁秀芳周继勇郑肖娟浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

D250R是非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-D250R，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细... 详细信息

D250R是非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-D250R，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞表达的重组蛋白Flag-D250R均能被ASFV标准阳性血清识别，证明D250R蛋白是ELISA抗体检测方法的潜在靶标。在此基础上，以纯化的重组蛋白为免疫原制备小鼠源多克隆抗体，该抗体ELISA效价大于1∶409 600。Western-blot试验表明该抗体与Flag-D250R和His-D250R均具有良好的反应性，证明His-D250R蛋白具有良好的抗原性。进一步以His-D250R蛋白为包被抗原，通过对抗原包被、封闭、抗体孵育、底物反应等条件的优化，建立间接ELISA抗体检测方法。其阴阳性临界值为0.359，检测PRV、PRRSV、PCV2、CSFV等阳性血清结果均呈阴性，灵敏度达1∶3 200，批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%，与商品化试剂盒符合率达98.8%。上述结果表明，基于His-D250R蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性、重复性良好，具备一定临床应用价值，可以为非洲猪瘟诊断方法开发提供重要支持。

关键词：非洲猪瘟病毒 D250R蛋白原核表达多克隆抗体间接ELISA

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新型均相免疫分析技术——荧光淬体免疫探针分析

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中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2223-2228页

作者：赵广伟陈浩董金华山东第二医科大学生命科学与技术学院潍坊261053 山东大学基础医学院济南250012 西南大学生物学研究中心重庆400715 康复大学康复科学与工程学院青岛266113

生化分析在疾病诊断、环境污染源鉴定、食品安全等多个领域具有重要意义。基于抗原抗体反应的免疫检测技术具有高特异性与多样性等特点,其操作比基于大型设备的色谱法简单,检测对象选择性更好,广泛应用于样品检测。荧光淬体免疫探针(Q-b... 详细信息

生化分析在疾病诊断、环境污染源鉴定、食品安全等多个领域具有重要意义。基于抗原抗体反应的免疫检测技术具有高特异性与多样性等特点,其操作比基于大型设备的色谱法简单,检测对象选择性更好,广泛应用于样品检测。荧光淬体免疫探针(Q-body)是一种通过荧光染料标记抗体片段构建成的新型荧光免疫检测探针,抗体内部色氨酸导致荧光基团发生电子转移而淬灭,当与抗原特异性结合时,其荧光强度恢复并呈浓度依赖性。因此,可通过检测Q-body的荧光强度变化检测抗原浓度。Q-body免疫检测技术因操作简便及灵敏度高等特点,被广泛应用于环境污染物质及疾病标志物的快速检测,对环境检测及疾病诊断具有重要意义。本文从Q-body的原理、构建方法、检测技术的开发及国内外研究进展进行综合论述,并对该技术的未来应用做出展望。

关键词：抗体免疫检测荧光探针淬灭疾病标志物

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国内外电烧伤研究现状与热点的可视化分析

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第10期39卷 977-984页

作者：陈瀚熙黄颖雯刘汶佶刘冰陈桂冰张豆豆陈萍云赖文南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)护理部广州510080 广东药科大学护理学院广州510310 南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)烧伤与创面修复外科广州510080

目的分析国内外发表的电烧伤相关文献,探讨电烧伤研究的热点与前沿。方法采用文献计量学方法。分别检索中国知网、万方数据库、维普数据库及Web of Science数据库核心合集中2013年1月1日—2022年12月31日发表的与电烧伤相关的中英文文献... 详细信息

目的分析国内外发表的电烧伤相关文献,探讨电烧伤研究的热点与前沿。方法采用文献计量学方法。分别检索中国知网、万方数据库、维普数据库及Web of Science数据库核心合集中2013年1月1日—2022年12月31日发表的与电烧伤相关的中英文文献,采用CiteSpace6.2.R2软件进行分析。分别统计中英文文献的发文量、发文作者、国家与机构,对关键词进行共现分析并在此基础上进行突现情况分析和聚类分析,将关键词按时间排序得到聚类时间线图,探讨电烧伤领域研究现状和热点的演变过程。结果在Web of Science数据库核心合集中检索出398篇英文文献;在中国知网、万方数据库、维普数据库检索并查重后得到523篇中文文献。2013—2022年,电烧伤领域英文文献发文量呈稳步上升趋势,中文文献发文量呈下降并趋于平稳趋势。中文文献中共302位作者以第1作者发表电烧伤相关文章,发文量≥3篇的核心作者共有17位;英文文献中共320位作者以第1作者发表电烧伤相关文章。共有65个国家进行电烧伤相关研究,美国是与其他国家合作最多、发文量最多的国家。国内外共512家机构发表电烧伤相关文章,发表中文和英文文章数量最多的机构分别是上海电力医院(14篇)和韩国翰林大学(11篇)。共纳入1176个中文关键词、1068个英文关键词进行共现分析,排除与检索词相关的关键词后,中文文献中出现频次排前3的关键词为外科皮瓣、创面修复、护理,英文文献中出现频次排前3的关键词是management、epidemiology、children。中文文献关键词分析得到10个聚类,最大的聚类是创面愈合,其次是临床效果、外科皮瓣;英文文献关键词分析得到7个聚类,最大的聚类是reconstructive surgical procedures,其次是chronic pain、shock。中文文献中持续存在的聚类为创面愈合、临床效果等,近2年出现的突现节点为手术时机、四肢电烧伤、增生性瘢痕等;英文文献中持续存在的聚类为reconstructive surgical procedures、chronic pain等,近2年出现的突现节点为predictors、burn management等。中文文献中突现持续时间最长(2017—2021年)的关键词是腕部电烧伤,突现强度最高的关键词是皮瓣修复;英文文献中突现持续时间最长(2019—2022年)的关键词是voltage,突现强度最高的关键词是prevention。结论国内外电烧伤研究方向与热点存在相似性和差异性。外科皮瓣修复是国内外电烧伤领域的共同研究热点,目前国内研究侧重于创面愈合、腕部电烧伤等方面,国外研究则聚焦在治疗管理、流行病学、重建等方面。

关键词：烧伤,电文献计量学研究现状研究热点可视化分析

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多房棘球蚴感染对小鼠脾自然杀伤T细胞及其亚群的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第3期39卷 311-317页

作者：李玲慧王伟侯昕伶施阳李德伟李亮王慧李静张传山新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾自然杀伤T细胞(NKT)及其亚群的影响。方法24只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组6只。低、中、高感染组每鼠分别经肝门静脉注射50、500、2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量生理盐... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾自然杀伤T细胞(NKT)及其亚群的影响。方法24只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组6只。低、中、高感染组每鼠分别经肝门静脉注射50、500、2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量生理盐水。感染后2周,无菌条件下取各组小鼠肝脏,制备肝组织切片,常规Masson染色后观察多房棘球蚴病灶和肝纤维化情况;取脾组织制备淋巴细胞悬液,流式细胞术检测NKT细胞不同亚群及分泌细胞因子的水平。结果Masson染色结果显示,感染2周后,对照组小鼠肝无明显变化;低、中感染组小鼠肝组织仅可见少量肉芽肿,炎性反应较弱,向纤维化修复转变;高感染组肝病灶形成较小的生发层结构,周围炎性细胞分布密集,可见纤维结缔增生。中、高感染组脾NKT细胞绝对数分别为(6.32±0.53)×10^(5)、(7.37±1.72)×10^(5),高于对照组的(5.02±1.08)×10^(5)和低感染组的(4.90±1.27)×10^(5)(P<0.01)。中、高感染组分泌γ干扰素(IFN-γ)的脾NKT1型细胞比例分别为(13.93±1.61)%、(10.9±3.04)%,低于对照组的(17.3±3.18)%和低感染组的(19.42±2.82)%(P<0.01);低、中、高感染组分泌IL-4的脾NKT2型细胞比例分别为(5.62±0.58)%、(5.86±1.43)%和(5.92±0.94)%,高于对照组的(4.37±0.83)%(P<0.05);低、中感染组分泌IL-17A的脾NKT17型细胞比例分别为(7.02±1.19)%和(6.62±0.41)%,高于对照组的(4.68±0.73)%和高感染组的(3.73±1.04)%(P<0.01)。中、高感染组脾CD4^(+)NKT细胞绝对数分别为(1.75±0.36)×10^(5)、(1.82±0.24)×10^(5),高于对照组的(1.24±0.26)×10^(5)(P<0.05);高感染组脾DN NKT细胞绝对数为(2.15±0.78)×10^(5),分别高于对照组的(1.27±0.36)×10^(5)、低感染组的(1.20±0.49)×10^(5)和中感染组的(1.43±0.19)×10^(5)(P<0.01)。低、中、高感染组分泌IFN-γ的脾CD4^(+)NKT1型细胞比例分别为(19.42±2.82)%、(14.40±1.81)%、(12.5±2.96)%,低于对照组的(21.16±2.83)%(P<0.01);低、中、高感染组分泌IL-17A的脾CD4^(+)NKT17型细胞比例分别为(18.73±1.99)%、(16.06±1.42)%和(14.41±3.55)%,高于对照组的(10.27±1.79)%(P<0.01)。低、中、高感染组分泌IFN-γ的CD8^(+)NKT细胞比例分别为(10.04±0.92)%、(13.43±0.92)%和(9.24±1.37)%,低于对照组的(15.83±1.59)%(P<0.01);中、高感染组分泌IL-10的脾CD8^(+)NKT细胞比例分别为(4.07±0.48)%、(3.92±0.75)%,高于对照组的(2.85±0.64)%(P<0.05)。中、高感染组分泌IFN-γ的脾DN NKT细胞比例分别为(17.48±2.50)%和(14.06±3.95)%,低于对照组的(25.18±5.78)%(P<0.01)。结论小鼠感染多房棘球蚴后,脾NKT细胞及其亚群发生明显变化,其中低、中感染组小鼠以CD4^(+)NKT17型免疫应答优势对虫体起杀伤和清除作用,高感染组小鼠以CD4^(+)NKT17型、NKT2型和NKT10型细胞亚群的混合优势,且NKT细胞呈抑制性表型,使NKT1型免疫应答能力下降,利于棘球蚴寄生。

关键词：多房棘球蚴脾 NKT细胞 CD4^(+)NKT细胞亚群

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非洲猪瘟病毒毒力因子MGF360-4L靶向降解RIPK3促进病毒复制的研究

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中国兽医科学 2024年第8期54卷 995-1001页

作者：曹雪静范许许朱兆宇裴丹诗王一卓张继燕何路李熙忠任青峰郑海学万博李伟伟河南农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室

本研究首先利用CellTiter-Glo试剂盒测定MGF360-4L对细胞活力的影响；通过蛋白免疫印迹（Western-blot）检测MGF360-4L及其突变体对细胞坏死通路关键接头分子表达的影响；通过同源重组技术构建MGF360-4L缺失毒株（ASFV-ΔMGF360-4L）；... 详细信息

本研究首先利用CellTiter-Glo试剂盒测定MGF360-4L对细胞活力的影响；通过蛋白免疫印迹（Western-blot）检测MGF360-4L及其突变体对细胞坏死通路关键接头分子表达的影响；通过同源重组技术构建MGF360-4L缺失毒株（ASFV-ΔMGF360-4L）；利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析ASFV野生毒株（ASFV-WT）与其缺失毒株（ASFV-ΔMGF360-4L）复制水平的差异；通过Western-blot检测MGF360-4L缺失对ASFV诱导的细胞坏死的影响。结果表明，MGF360-4L包含1个RHIM，并通过溶酶体途径降解RIPK3，从而抑制细胞坏死通路的活化；MGF360-4L发挥上述功能依赖其RHIM结构域；ASFV-ΔMGF360-4L毒株复制水平低于野生毒株，且该缺失毒株能够诱导更高水平的细胞坏死。本研究证实ASFV毒力因子MGF360-4L依赖其RHIM结构域靶向降解RIPK3，并促进病毒自身复制，为ASFV致病机理的阐明提供了科学数据。

关键词：非洲猪瘟病毒细胞坏死 RHIM RIPK3 MGF360-4L

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基于CNKI数据平台探究急诊科中成药的合理用药现状

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中国新药杂志 2023年第4期32卷 357-363页

作者：马杭琨栗蕊李辰飞高洪阳高蕊李庆娜中国中医科学院西苑医院河南中医药大学第一附属医院中国中医科学院西苑医院临床药理研究所国家药品监督管理局中药临床研究与评价重点实验室国家中医心血管病临床医学研究中心

目的:评估急诊科中成药的合理用药现状。方法:以“合理用药”OR “处方分析”OR “处方点评”AND “中成药”OR “中药注射剂”OR “注射液”AND “急诊科”进行主题检索，检索中国知网(CNKI)数据库，从建库至2022年8月1日的所有文献，... 详细信息

目的:评估急诊科中成药的合理用药现状。方法:以“合理用药”OR “处方分析”OR “处方点评”AND “中成药”OR “中药注射剂”OR “注射液”AND “急诊科”进行主题检索，检索中国知网(CNKI)数据库，从建库至2022年8月1日的所有文献，按文献来源、发表年份、作者及机构所属区域、研究人群年龄分布、不合理用药情况等对文献进行分类，应用文献计量学方法评估急诊科中成药的合理用药情况。结果:通过专业检索及手动剔除误纳入的文献，最终纳入急诊科中成药相关的文献121篇，共刊登在65种期刊上。整体上，文献发表数量呈上升趋势，来自华东地区的研究者相对更加关注急诊科中成药的合理用药情况。纳入文献总体处方总数为1 160 273,不合理处方15 815个。其中不适宜处方占比57.53%,不规范处方和超常处方分别占比21.16%和10.79%。儿童(或婴幼儿)急诊科中成药处方总数为32 179,不合理处方数量为2 211个。其中不规范处方、不适宜处方和超常处方分别占比16.46%,30.48%和50.57%。急诊科儿童不合理用药以清热类和祛痰类中成药为主，不合理用药以超说明书用药为主。急诊科老年人以活血化瘀类中成药为主，不合理用药情况以重复给药和联合用药不适宜为主。中成药不良反应以皮肤和消化系统症状为主，相关的不合理用药情况包括联合用药不适宜、重复用药、注射剂溶媒不适宜(或给药途径或剂型不适宜)。结论:中成药在急诊科合理用药的研究数量有限、质量不高，未来亟须制定急诊科的中成药临床使用指导原则，优化评判标准，为切实推动中成药在急诊科的合理规范应用奠定基础。

关键词：中成药急诊科合理用药文献计量学

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油酸上调围脂滴蛋白2表达增强巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除作用

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中国防痨杂志 2025年第1期47卷 72-76页

作者：卢海林汪文斐陶文慧林培翀陈心春邓国防谢水祥赣南医科大学基础医学院赣州341000 深圳国家感染性疾病临床医学研究中心深圳518000 深圳大学医学部深圳518000 深圳市第三人民医院肺病二科深圳518000

目的:研究油酸对巨噬细胞清除结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的作用,并进一步探讨其作用机制。方法:使用人单核细胞白血病细胞(THP-1)细胞系诱导的巨噬细胞,加入或不加入油酸(oleic acid,OA)后感染MTB标准株H37Ra,用菌... 详细信息

目的:研究油酸对巨噬细胞清除结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的作用,并进一步探讨其作用机制。方法:使用人单核细胞白血病细胞(THP-1)细胞系诱导的巨噬细胞,加入或不加入油酸(oleic acid,OA)后感染MTB标准株H37Ra,用菌落形成单位(colony-forming unit,CFU)计数及免疫荧光方式检测油酸对巨噬细胞清除MTB的影响。通过RNA-seq筛选出关键靶基因,并采用基因富集分析筛选出相关通路,实时荧光定量PCR验证基因表达。结果:MTB标准株H37Ra感染未经油酸诱导(H37Ra组)巨噬细胞后72 h的菌落计数单位(CFU)中位数(四分位数)为[49×10^(4)(48×10^(4),59×10^(4))],明显高于经油酸诱导(OA+H37Ra组)的巨噬细胞的CFU[34×10^(4)(30×10^(4),42×10^(4))],差异有统计学意义(U=3.500,P=0.017)。RNA-Seq数据显示,围脂滴蛋白2(recombinant perilipin 2,PLIN2)的表达在OA+H37Ra组明显高于H37Ra组。在油酸诱导的巨噬细胞中,敲低PLIN2基因后的CFU结果显示,在H37Ra感染72 h后,敲低PLIN2组的CFU中位数(四分位数)为86×10^(4)(78×10^(4),96×10^(4)),明显高于对照空载体组[56×10^(4)(54×10^(4),62×10^(4))],差异有统计学意义(U=3.000,P=0.015)。OA+H37Ra组中,PLIN2的相对表达量为3.219±0.298,明显高于H37Ra组的0.555±0.028,差异有统计学意义(t=15.410,P<0.01);OA+H37Ra组中PPARγ的相对表达量为0.666±0.075,明显低于H37Ra组的2.217±0.153,差异有统计学意义(t=14.700,P<0.01);OA+H37Ra组中,ACOX1、HADHA基因的相对表达量分别为1.410±0.124和1.107±0.111,均明显低于H37Ra组的2.476±0.207和3.140±0.240,差异均有统计学意义(t=13.520,P<0.01;t=12.760,P<0.01)。结论:油酸通过脂滴表面蛋白PLIN2调控巨噬细胞的脂肪酸氧化促进巨噬细胞对MTB的清除。

关键词：分枝杆菌,结核巨噬细胞油酸围脂滴蛋白基因表达调控,细菌

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