检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2003年第4期11卷 434-436页

作者：吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

细胞因子、转录因子的“功能丰余性”(“functionalredundancy”)一词在国外文献中已作为关键词出现 ,国内文献则尚少见 ,更无统一和规范的译名。笔者认为细胞因子和转录因子的“功能丰余性”和“遗传丰余性”(geneticredundancy)是生... 详细信息

细胞因子、转录因子的“功能丰余性”(“functionalredundancy”)一词在国外文献中已作为关键词出现 ,国内文献则尚少见 ,更无统一和规范的译名。笔者认为细胞因子和转录因子的“功能丰余性”和“遗传丰余性”(geneticredundancy)是生物进化、生物复杂性和多样性的基础 ,有重要的理论意义和实际意义 ,应该深入研究。笔者在此就细胞因子及其受体以及转录因子功能丰余性与读者探讨。

关键词：细胞因子转录因子功能丰余性生物复杂性

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抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的制备

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免疫学杂志 2003年第3期19卷 193-197页

作者：李容熊冬生邵晓枫李长辉许元富刘嘉杨纯正中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院/中国协和医科大学药物研究所北京100050

目的　制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ (Kinaseinsertdomaintontainingreceptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法　在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E tag柱分离纯化后... 详细信息

目的　制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ (Kinaseinsertdomaintontainingreceptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法　在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E tag柱分离纯化后免疫Balb/c小鼠 ,采用传统杂交瘤技术制备抗KDR胞外Ⅲ区McAb ,采用ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性 ,并测定单克隆抗体对VEGF1 65刺激脐静脉内皮细胞株ECV30 4增殖的中和活性。结果　成功筛选出一株能稳定分泌抗KDR胞外Ⅲ区单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1D3) ,其分泌抗体亚类为IgG1。该McAb可明显阻断VEGF1 65对脐静脉内皮细胞株ECV30 4的刺激增生作用。结论　抗人血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外Ⅲ区McAb可通过封闭KDR而抑制VEGF活性 ,McAb

关键词：单克隆抗体制备血管内皮细胞生长因子受体杂交瘤

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Smad3基因剔除对小鼠造血功能的影响

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生物工程学报 2003年第4期19卷 428-432页

作者：张玲孙昭沈爱玲马丽姜学英马冠杰杨晓赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 军事医学科学院生物工程研究所发育和疾病遗传学研究室北京100071

研究Smad3基因剔除对小鼠造血功能的影响。实验小鼠分为 5组 ,每组有Smad3基因剔除小鼠(Smad3 - - )和其同窝孪生的野生型小鼠 (Smad3 + + )各 1只。小鼠的造血功能用 14天形成的脾结节 (CFU S1 4 )、多系祖细胞 (CFU GEMM)、粒单... 详细信息

研究Smad3基因剔除对小鼠造血功能的影响。实验小鼠分为 5组 ,每组有Smad3基因剔除小鼠(Smad3 - - )和其同窝孪生的野生型小鼠 (Smad3 + + )各 1只。小鼠的造血功能用 14天形成的脾结节 (CFU S1 4 )、多系祖细胞 (CFU GEMM)、粒单系祖细胞 (CFU GM)、红系祖细胞 (BFU E)测定及外周血象、骨髓象等实验血液学指标来确定。每组小鼠取尾血作白细胞、红细胞和血小板计数 ,涂片作白细胞分类计数。将一侧股骨的骨髓冲出 ,制成单细胞悬液 ,计数其中有核细胞数 ,测定CFU GM、BFU E、CFU GEMM值。将每只小鼠的 4× 10 4个骨髓有核细胞 ,经尾静脉注入 3只 8～ 10周经致死量射线照射的同系雌性小鼠体内 ,测定 14天的CFU S。取一部分胸骨、肝脏、脾脏固定做病理切片 ,其余胸骨冲出骨髓 ,涂片作分类计数。结果Smad3 - - 小鼠外周血白细胞和血小板计数明显高于Smad3 + + 小鼠 ,红细胞数无显著差异。外周血白细胞分类结果也表明粒细胞显著增高。骨髓有核细胞数无显著差异 ,CFU GM显著增高 ,BFU E无显著差异 ,CFU GEMM明显减少 ,CFU S显著减少。病理形态学观察发现骨髓增生极度活跃 ,以粒系为主 ,肝脾无显著差别。骨髓涂片分类表明粒系增多 ,粒系 :红系比例增高。因此得出结论Smad3基因剔除使小鼠造血干祖细胞数目?

关键词： Smad3 基因剔除小鼠造血功能介导转化生长因子信号转导

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抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究

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高技术通讯 2003年第8期13卷 33-38页

作者：许元富熊冬生杨纯正邵晓枫彭晖范冬梅刘汉芝赖增祖高赢岱朱祯平中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi... 详细信息

为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi细胞 (CD2 0 + )的结合的亲和常数Ka分别为 3.2× 10 8M- 1和 8.9× 10 8M- 1。在体外该抗体能激活并介导T细胞杀伤Daudi细胞。裸鼠体内分布实验结果表明 :该型抗体可在移植瘤部位富集 ;在人B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型中 ,联合人的PBMC和IL 2 ,该抗体可以杀灭人B淋巴瘤细胞 ,明显延长荷瘤裸鼠的生存时间。

关键词：抗CD3/抗B细胞肿瘤双功能小抗体抗肿瘤活性玫瑰花环亲和常数 Jurkat细胞 Daudi细胞 B淋巴瘤

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单价抗CD20抗体诱导人B细胞淋巴瘤Raji细胞的凋亡

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癌症 2003年第12期22卷 1249-1253页

作者：刘银星范冬梅熊冬生许元富邵晓枫许元生彭晖杨铭秦岚朱祯平杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院核医学室天津300192

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建... 详细信息

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建。本研究目的是观察HI47(鼠抗-CD20抗体)和其嵌合抗CD20抗体片段抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:用免疫荧光法测定抗CD20抗体与CD20+人B细胞淋巴瘤Raji细胞的结合能力;MTT法测定抗CD20抗体片段对Raji细胞生长的影响;用膜联蛋白Ⅴ染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测和验证抗CD20抗体片段诱导Raji细胞凋亡。结果:HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段均可与CD20+Raji细胞结合,结合率可达90%以上;HI47不能与美罗华竞争结合Raji细胞;HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段浓度为100μg/ml对Raji细胞的抑制率分别为:(57.0±1.5)%、(65.2±2.5)%、(77.2±3.2)%;单价的抗CD20抗体片段Fab(20μg/ml)能够诱导Raji细胞的凋亡,早期凋亡率为17%。结论:HI47的嵌合抗体片段对Raji细胞有抑制作用,能诱导Raji细胞的凋亡。

关键词：单价抗CD20抗体诱导 B细胞淋巴瘤 Raji细胞细胞凋亡

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重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化

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高技术通讯 2003年第11期13卷 27-30页

作者：李董袁文肃马小彤蔡辉国明宇李静赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融... 详细信息

克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式。表达蛋白占菌体总蛋白的30％左右。菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70％,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95％以上。IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105 U/mg。重组人IL-6,/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达。

关键词：白细胞介素纯度离子交换层析凝胶过滤层析大肠杆菌

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骨髓间质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响

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中华神经外科杂志 2003年第1期19卷 58-62页

作者：赵宗茂张庆俊韩忠朝刘海英李洪钧孙国柱杨仁池邱录贵蔡英林朱慧芳卢士红河北医科大学第二医院神经外科 050000 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的　观察成人骨髓间质干细胞 (hBMSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法　Wistar大鼠 90只 ,随机分为脊髓半切 +hBMSCs组、脊髓半切 +PBS组、单纯脊髓半切组和假手术组。脊髓半切 +hBMSCs组和PBS组又分别分为头侧注射、尾... 详细信息

目的　观察成人骨髓间质干细胞 (hBMSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法　Wistar大鼠 90只 ,随机分为脊髓半切 +hBMSCs组、脊髓半切 +PBS组、单纯脊髓半切组和假手术组。脊髓半切 +hBMSCs组和PBS组又分别分为头侧注射、尾侧注射和头尾两侧注射三个亚组。移植后 1、 7、 1 4、 2 1、 2 8d观察大鼠神经功能恢复情况 ,应用免疫组化和免疫荧光技术检测BrdU标记hBMSCs的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和神经元特异性核蛋白 (NeuN)表达情况。结果　大鼠脊髓半切损害后 ,hBMSCs组动物较PBS组死亡率下降并有明显的神经功能恢复。移植的hBMSCs在宿主脊髓中存活 ,从第 7天开始即有NeuN和GFAP表达并向损伤部位及对侧迁移 ,第 2 8天hBMSCs来源GFAP阳性细胞可见明显的树突生长。结论　　hBMSCs可在宿主损伤脊髓中存活、向损伤部位迁移并向神经元和星形胶质细胞分化 ,并促进神经功能恢复 ,降低死亡率 ;

关键词：脊髓损伤骨髓间质干细胞移植大鼠神经功能恢复

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嵌合抗CD_(20)抗体分子在CHO细胞中的表达

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高技术通讯 2003年第3期13卷 21-24页

作者：刘银星熊冬生邵晓枫许元富范冬梅徐晨彭晖杨铭朱祯平杨纯正中国医学科学院和中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

利用PCR方法从抗CD2 0 抗体Fab′片段的表达载体上扩增抗CD2 0 抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体恒定区的表达载体中 ,构建抗CD2 0抗体IgG的轻链和重链表达载体PK10 0VL和PGL0 5VH ,并用质脂体法共转染CHO细... 详细信息

利用PCR方法从抗CD2 0 抗体Fab′片段的表达载体上扩增抗CD2 0 抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体恒定区的表达载体中 ,构建抗CD2 0抗体IgG的轻链和重链表达载体PK10 0VL和PGL0 5VH ,并用质脂体法共转染CHO细胞 ,RT PCR和ELISA检测结果证实了抗CD2 0 抗体IgG全分子在CHO细胞中的分泌表达。免疫结合结果表明CHO细胞分泌表达的抗CD2 0 抗体IgG全分子可与CD2 0 阳性的B淋巴瘤Raji细胞结合。

关键词：嵌合抗CD20抗体分子基因表达 CHO细胞基因工程 B淋巴肿瘤治疗 B淋巴细胞

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成体骨髓间充质干细胞的生物学特性

成体骨髓间充质干细胞的生物学特性

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第九届全国实验血液学会议

背景与目的造血干细胞移植(HST)是治疗血液病、实体瘤、免疫缺陷病及遗传疾病的最有效方

关键词：骨髓间充质干细胞生物学特性 MSC

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嵌合抗CD20Fab′抗体片段诱导Raji细胞的凋亡机制

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中国肿瘤生物治疗杂志 2003年第3期10卷 166-169页

作者：范冬梅刘银星熊冬生赖增祖许元富邵晓枫杨铭杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的 :探讨嵌合抗CD2 0抗体Fab′片段的抗肿瘤机制。方法 :应用MTT法检测Fab′片段对Raji细胞生长的抑制作用 ,用AnnexinV FITC和PI测定Fab′片段对Raji细胞凋亡的诱导作用 ,用RT PCR和Westernblot检测Raji细胞中bcl 2表达的变化。结果 ... 详细信息

目的 :探讨嵌合抗CD2 0抗体Fab′片段的抗肿瘤机制。方法 :应用MTT法检测Fab′片段对Raji细胞生长的抑制作用 ,用AnnexinV FITC和PI测定Fab′片段对Raji细胞凋亡的诱导作用 ,用RT PCR和Westernblot检测Raji细胞中bcl 2表达的变化。结果 :嵌合抗CD2 0Fab′片段对Raji细胞具有明显的抑制作用IC5 0值为 2 4 .2 μg/ml,并呈剂量依赖性 ;嵌合抗CD2 0Fab′片段能诱导Raji细胞的凋亡 ,并降低Raji细胞中bcl 2基因及其蛋白的表达水平。结论 :嵌合抗CD2 0抗体片段Fab′能抑制Raji细胞生长和诱导细胞凋亡 ,其作用机制与bcl 2蛋白表达的下降有关。

关键词：抗CD20抗体 B淋巴瘤 bcl-2

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