检索结果-内蒙古大学图书馆

2017年两株肠道病毒71型襄阳分离株的全基因组分析

中国生物制品学杂志 2018年第8期31卷 824-829页

作者：于亮赵义林张海浩张捷李倩杨昭庆闵国平马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 襄阳市疾病预防控制中心湖北襄阳420607

目的分析2017年两株肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)分离株的全基因组及其遗传特性。方法收集手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)粪便样品,采用RD细胞进行病毒分离;提取病毒RNA,采用RTPCR法分段扩增EV71全长基因组,经测序... 详细信息

目的分析2017年两株肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)分离株的全基因组及其遗传特性。方法收集手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)粪便样品,采用RD细胞进行病毒分离;提取病毒RNA,采用RTPCR法分段扩增EV71全长基因组,经测序和拼接后,利用Mega 6.06和SimPlot 3.5.1等软件进行分析。结果两株EV71分离株4-23/XY/CHN/2017和6-4/XY/CHN/2017基因组全长均为7 406 bp,编码含2 193个氨基酸残基的多聚蛋白。通过Mega 6.06软件分析显示,与EV71/SZ50/CHN/2014株全基因的核苷酸同源性最高(97.6%),其VP1核苷酸同源性与EV71/FJFZ422/CHN/2015株最高(99%)。在全基因组上,与原型株Br Cr的核苷酸同源性分别80.6%和80.7%,氨基酸同源性均为99.3%;在VP1序列上,与C4a基因型其他毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别94.5%~99.3%和97.3%~98.5%。进化分析显示,这两分离株属于C4a基因型。重组分析未发现重组事件发生。结论 2017年襄阳分离株4-23/XY/CHN/2017和6-4/XY/CHN/2017属于C4a基因型,且未发生重组。

关键词：手足口病肠道病毒71型全基因组序列分析

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GC-MS结合演进特征投影法解析肉桂挥发油成分

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中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生 2019年第2期 00075-00075,78页

作者：杨丽芳李慧林航羽云南白药集团医药电子商务有限公司云南昆明 650500 中国医学科学院&北京协和医学院、医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明 650118 昆明医科大学第一附属医院药剂科云南昆明 650000

定性和定量分析肉桂中所含挥发油成分,为深入研究肉桂挥发油药理活性提供物质基础和研究依据。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)联合演进特征投影(HELP)法,对肉桂中所含挥发油成分进行准确定性,总体积积分法进行定量分析。结果:... 详细信息

定性和定量分析肉桂中所含挥发油成分,为深入研究肉桂挥发油药理活性提供物质基础和研究依据。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)联合演进特征投影(HELP)法,对肉桂中所含挥发油成分进行准确定性,总体积积分法进行定量分析。结果:肉桂挥发油中共定性了86种化合物,占其所含挥发油总量的95.82%。其中,含量高于1%的成分有15个。结论:肉桂挥发油中主要化学成分为桉油醇、肉桂醇、桂皮醛α-蒎烯等小分子醇类和烯萜类化合物。

关键词：肉桂挥发油气相色谱-质谱联用技术演进特征投影法

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肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)研究进展

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中国病毒病杂志 2018年第6期8卷 521-527页

作者：王晶晶张莹中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

手足口病是近年来严重威胁亚太地区儿童群体的一种主要急性传染病,该病的主要病原之一是肠道病毒71型.中国医学科学院医学生物学研究所经过八年艰辛的研究,终于在2015年12月率先成功研制出具有自主知识产权的针对肠道病毒71型的预防性疫... 详细信息

手足口病是近年来严重威胁亚太地区儿童群体的一种主要急性传染病,该病的主要病原之一是肠道病毒71型.中国医学科学院医学生物学研究所经过八年艰辛的研究,终于在2015年12月率先成功研制出具有自主知识产权的针对肠道病毒71型的预防性疫苗.本文针对全球首个手足口病疫苗、国家Ⅰ类新药---肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)的整个研发过程展开综述,详细叙述了该疫苗毒种筛选、动物模型建立、生产工艺建立、质控和标准建立、临床研究及上市后研究进展等.

关键词：手足口病肠道病毒71型灭活疫苗人二倍体细胞

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药对白术-陈皮及其单味药中挥发油的分析比较

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广州化工 2019年第12期47卷 107-110页

作者：杨丽芳李慧林航羽云南白药集团医药电子商务有限公司云南昆明650500 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院药剂科云南昆明650000

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)结合演进特征投影法(HELP)分析比较药对白术-陈皮及其单味药的挥发油成分。利用质谱库结合保留时间进行定性分析,总体积积分法进行定量分析。结果表明:白术与陈皮配伍后,新生成了19种化合物,约占药对... 详细信息

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)结合演进特征投影法(HELP)分析比较药对白术-陈皮及其单味药的挥发油成分。利用质谱库结合保留时间进行定性分析,总体积积分法进行定量分析。结果表明:白术与陈皮配伍后,新生成了19种化合物,约占药对挥发性化合物总数(81种)的23%。两种单味药配伍前后,所含挥发油成分存在明显差异,值得深入分析研究。

关键词：药对挥发油成分气相色谱-质谱联用技术演进特征投影法

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封闭群树鼩的微卫星遗传特性分析

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实验动物与比较医学 2018年第1期38卷 1-9页

作者：刘城秀李娜仝品芬王文广陆彩霞罕园园匡德宣孙晓梅代解杰中国医学科学院、北京协和医学院医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的比较分析远交繁殖的I^IV代次的滇西亚种树鼩群体的遗传差异和分化程度,为培育封闭群树鼩种群提供遗传学依据。方法提取I^IV四个代次共49只滇西亚种树鼩的全血基因组DNA,选取树鼩的18个微卫星位点,结合荧光标记(FAM)PCR扩增技术,通... 详细信息

目的比较分析远交繁殖的I^IV代次的滇西亚种树鼩群体的遗传差异和分化程度,为培育封闭群树鼩种群提供遗传学依据。方法提取I^IV四个代次共49只滇西亚种树鼩的全血基因组DNA,选取树鼩的18个微卫星位点,结合荧光标记(FAM)PCR扩增技术,通过毛细管电泳技术检测扩增产物,并利用POPGENE、FSTAT等软件比较各代次树鼩的遗传相关指标。结果四个代次的树鼩群体共检测到等位基因(Na)89个,平均有效等位基因数(Ne)为3.779,平均观察杂合度(Ho)为0.523,平均期望杂合度(He)为0.613,平均多态信息含量(PIC)为0.558,平均Shannon信息指数(I)为1.277,平均等位基因丰富度(AR)为2.938,遗传分化系数(Fst)平均值为0.046;其遗传距离及无偏遗传距离分别为0.049~0.159和0.022~0.109。结论培育的树鼩群体的遗传多样性较丰富,且不存在较大的遗传差异和分化程度。

关键词：滇西亚种树鼩封闭群微卫星位点遗传多样性遗传管理

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云南省两市区脊髓灰质炎灭活疫苗接种情况调查

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贵州医科大学学报 2019年第3期44卷 297-301页

作者：蒋曦朱文兵王静詹会莲李慧宋杰董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明市五华区疾病预防控制中心云南昆明650118 丽江市疾病预防控制中心云南丽江674100

目的:分析云南省昆明市五华区及丽江市脊髓灰质炎疫苗(PV)接种情况及脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)在每个剂次中所占的比率及普及情况。方法:从两地疾病预防控制中心儿童免疫规划信息管理系统中收集2016年5月～2017年7月儿童PV接种数据,应用... 详细信息

目的:分析云南省昆明市五华区及丽江市脊髓灰质炎疫苗(PV)接种情况及脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)在每个剂次中所占的比率及普及情况。方法:从两地疾病预防控制中心儿童免疫规划信息管理系统中收集2016年5月～2017年7月儿童PV接种数据,应用描述性流行病学方法进行分析。结果:2016年5月～2017年7月,五华区共接种PV 65 349剂,每一剂接种率均为99%以上,第1、2、3及4次剂IPV所占比率分别为86. 02%、33. 62%、26. 30%及20. 33%;丽江市共接种脊髓灰质炎疫苗21 962剂,每一剂次接种率均为99%以上,第1、2、3及4次剂IPV所占比率分别为39. 75%、7. 55%、8. 20%及0. 07%,使用IPV种类多为Sabin-IPV、Salk-IPV、DTa P-IPV/Hib,DTa P-IPV/Hib所占比率最高(62. 63%,χ~2=9 597. 6,P <0. 001);丽江市IPV相对单一,95%为免费Sabin-IPV,五华区IPV接种率明显高于丽江市(χ~2=22 614. 9,P <0. 001)。结论:昆明市五华区IPV接种率明显高于丽江市。

关键词：脊髓灰质炎疫苗脊髓灰质炎灭活疫苗接种云南

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朗格汉斯细胞与病毒感染

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微生物与感染 2018年第4期13卷 250-256页

作者：王建斌李琦涵中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

朗格汉斯细胞位于黏膜状组织和皮肤分层鳞状上皮,是高度专职的抗原呈递细胞家族成员,也是表皮中唯一的树突细胞。其作为一种皮肤免疫细胞,在摄取、加工处理和呈递抗原及诱导T细胞反应等方面发挥着巨大作用。机体皮肤或黏膜在遭遇不同病... 详细信息

朗格汉斯细胞位于黏膜状组织和皮肤分层鳞状上皮,是高度专职的抗原呈递细胞家族成员,也是表皮中唯一的树突细胞。其作为一种皮肤免疫细胞,在摄取、加工处理和呈递抗原及诱导T细胞反应等方面发挥着巨大作用。机体皮肤或黏膜在遭遇不同病原微生物入侵时,朗格汉斯细胞与病原体的相互作用及引起后续免疫反应的机制存在差异。本文就朗格汉斯细胞的生物学功能及其在一些病毒感染中的作用进行综述。

关键词：朗格汉斯细胞抗原呈递细胞免疫反应病毒感染

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树鼩IgE高亲和力受体α亚基的原核表达、抗体制备及鉴定

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生物技术通讯 2018年第5期29卷 641-646,722页

作者：张晶晶肖红剑李育中宫悦毕研伟寸韡中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的:原核表达树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεR1α)并制备抗体,为研究树鼩过敏反应动物模型奠定基础。方法:提取树鼩肝脏及脾脏组织RNA,用巢式PCR法扩增树鼩FcεR1α基因,连接至pMD-19T载体后进行DNA测序,将测序正确的目的片段与表达载... 详细信息

目的:原核表达树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεR1α)并制备抗体,为研究树鼩过敏反应动物模型奠定基础。方法:提取树鼩肝脏及脾脏组织RNA,用巢式PCR法扩增树鼩FcεR1α基因,连接至pMD-19T载体后进行DNA测序,将测序正确的目的片段与表达载体pET30a(+)连接,构建重组表达质粒,转入表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化;将纯化的蛋白作为免疫原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;Western印迹检测多克隆抗体的特异性,ELISA检测多克隆抗体的效价。结果:调取了树鼩FCεRIα基因,并将该序列去信号肽的胞外结构(第26～213氨基酸)构建到pET30a(+)载体上,通过IPTG诱导表达并纯化了FCεRIα蛋白,蛋白纯度在90%以上。ELISA效价检测结果表明免疫动物制备的多克隆抗体效价为100 000,且该抗体能够检测到真核细胞表达的树鼩IgE FCεRIα蛋白。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得树鼩FcεRIα,免疫动物制备了多克隆抗体。

关键词：树鼩 IgE高亲和力受体α亚基(FcεR1α) 原核表达过敏性反应

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肠道病毒-D68型流行株3C和3D蛋白结构域序列和结构特征比较分析

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国际病毒学杂志 2018年第1期25卷 29-34页

作者：杨泽宁郑惠文李嘉祺李洪哲郭磊王晶晶李恒宁若彤范海涛黄星储曼曼刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的利用生物信息学的方法,探究不同亚型肠道病毒-D68型（EV-D68）的3C和3D非结构蛋白序列及结构是否存在差异.方法通过将近年来世界各国EV-D68流行株（主要为中国株和美国株）的VP1核酸序列进行比对,利用邻接法（Neighbor-Joining）... 详细信息

目的利用生物信息学的方法,探究不同亚型肠道病毒-D68型（EV-D68）的3C和3D非结构蛋白序列及结构是否存在差异.方法通过将近年来世界各国EV-D68流行株（主要为中国株和美国株）的VP1核酸序列进行比对,利用邻接法（Neighbor-Joining）构建系统进化树进行分型,选取各型的代表株,利用其3C和3D蛋白的核酸序列构建进化树并同时利用其氨基酸序列进行同源建模,以进行蛋白质结构分析.结果通过分析发现,EV-D68 Clade A、CladeB亚型毒株3D蛋白的三级结构均相同;而在3C蛋白的三级结构中,Clade B1亚型的毒株与Clade A、Clade B2和CladeB3亚型毒株存在差异.结论 3C蛋白的三级结构上的差异可能导致EV-D68 Clade B1亚型毒株的毒力和致病性高于Clade A、Clade B2和Clade B3亚型毒株.

关键词：人肠道病毒D型衣壳蛋白质类病毒非结构蛋白质类基因

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树鼩尾静脉注射单人操作方法与经验

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中国比较医学杂志 2018年第3期28卷 91-94页

作者：何永旺李娟黄俭周一卿赵祥月杨根梦李桢李娜曾晓锋昆明医科大学法医学院昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南省实验树鼩标准化与应用研究创新团队昆明650118

目的介绍树鼩清醒状态下尾静脉注射的单人操作方法与经验,提高尾静脉注射给药成功率。方法采用帆布手套套取和文件夹夹紧手套的方法固定树鼩,左手固定树鼩尾巴,右手持1 m L一次性注射器注射药物。结果本方法操作简单、经济实用、固定效... 详细信息

目的介绍树鼩清醒状态下尾静脉注射的单人操作方法与经验,提高尾静脉注射给药成功率。方法采用帆布手套套取和文件夹夹紧手套的方法固定树鼩,左手固定树鼩尾巴,右手持1 m L一次性注射器注射药物。结果本方法操作简单、经济实用、固定效果好、动物依从性好、给药成功率高。结论本方法与其他的尾静脉注射方法比较,有明显的优势。可单人操作,简便快速,省时省力;实验成本低,使用效果好,物美价廉;显著提高了树鼩尾静脉注射给药的成功率。

关键词：树鼩尾静脉注射单人操作实验技能实验动物

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