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第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)

作者：刘舒媛褚嘉祐中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所

DNA聚合酶γ（DNA polymerase gamma,polγ）是在线粒体DNA的复制和修复中起重要作用的核酶,并被认为是线粒体中唯一起聚合酶作用的酶。polγ由POLG基因编码,该基因定位于15q24-15q26,人类POLG基因第1外显子中有一个串联重复序列:（CAG... 详细信息

DNA聚合酶γ（DNA polymerase gamma,polγ）是在线粒体DNA的复制和修复中起重要作用的核酶,并被认为是线粒体中唯一起聚合酶作用的酶。polγ由POLG基因编码,该基因定位于15q24-15q26,人类POLG基因第1外显子中有一个串联重复序列:（CAG）_nCAACAGCAG,编码polγ氨基末端的多聚谷氨酸。研究表明POLG基因CAG-三核苷酸重复长度的突变将增加线粒体基因组的突变频率,这种不稳定的三核苷酸重复与许多人类疾病相关联。在POLG基因与疾病的相关性研究中发现,不同种族群体中POLG基因CAG-三核苷酸多态性与疾病的相关性情况不同,并且不同种族群体健康人群的POLG CAG-等位基因频率有显著性差异。本研究采用荧光标记PCR和ABI 3130 GeneMapper Analyzer,对来自中国5个地区（广东、云南、甘肃、山东和湖北）的5个汉族群体（云南汉族、广东汉族、甘肃汉族、山东汉族和湖北汉族）的199份无关个体外周血样本进行POLG基因CAG-三核苷酸等位基因的检测,以统计得到中国人群POLG基因上CAG-等位基因的频率分布,为POLG基因多态性与中国人群mtDNA突变相关性的研究提供一个群体背景。研究发现中国汉族群体最普遍的POLG等位基因是10-CAG,其中山东汉族、甘肃汉族、广东汉族、湖北汉族和云南汉族该等位基因的频率分别为:97.56%、98.15%、95.95%、97.67%和96.81%,各汉族群体间POLG 10-CAG等位基因频率无显著性差异。POLG基因的突变杂合子（≠10/10）频率分别为:山东汉族4.8%、甘肃汉族3.58%、广东汉族8.11%、湖北汉族4.77%和云南汉族6.25%。在所研究的5个汉族群体中均未发现有POLG基因突变纯合子（≠10/≠10）。

关键词： POLG基因多态性汉族群体

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RNAi在医学实验动物研究中的应用

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中国比较医学杂志 2009年第7期19卷 60-63页

作者：鲁帅尧和占龙禹文海赵远谭德勇中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南大学昆明650091

RNAi的发现使基因功能的研究和人类疾病的治疗有了新的途径,特别是在抗病毒、抗肿瘤研究中具有较高的应用前景,同时在心血管疾病、神经系统疾病、内分泌系统疾病等研究中也将发挥重要作用。RNAi将会是医学实验动物模型建立与研究的有力... 详细信息

RNAi的发现使基因功能的研究和人类疾病的治疗有了新的途径,特别是在抗病毒、抗肿瘤研究中具有较高的应用前景,同时在心血管疾病、神经系统疾病、内分泌系统疾病等研究中也将发挥重要作用。RNAi将会是医学实验动物模型建立与研究的有力工具。

关键词： RNAi 基因工程动物疾病基因治疗

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丙型肝炎病毒抗体对核酸及丙型肝炎病毒抗原检测的影响

丙型肝炎病毒抗体对核酸及丙型肝炎病毒抗原检测的影响

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：龙润乡杨蓉白慧珠金晶廖芸谭振国杨丽仙谢忠平中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的：对90份丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)阳性样品检测其核心HCV-Ag及HCV-Ag，并用荧光定量PCR进行复核，观察3者的关联性及HCV-Ab对核酸及HCV-Ag检测的影响程度。方法：从临床采集的90份HCV-Ab抗体阳性样品，分别用HCV-Ag检测试剂盒... 详细信息

目的：对90份丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)阳性样品检测其核心HCV-Ag及HCV-Ag，并用荧光定量PCR进行复核，观察3者的关联性及HCV-Ab对核酸及HCV-Ag检测的影响程度。方法：从临床采集的90份HCV-Ab抗体阳性样品，分别用HCV-Ag检测试剂盒及核心HCV-Ag检测试剂盒检测HCV-Ag，并用深圳匹基公司的荧光定量PCR进行复核。结果：90份HCV-Ab抗体阳性样品，检出核心HCV-Ag阳性25份(27.8％)，本所制备的HCV-Ag检测试剂盒检出32份(35.6％)，荧光定量PCR检出67份阳性(74.4％)，检出率荧光定量(74.4％)>HCV-Ag(35.6％)>核心抗原(27.8％)。结论：丙肝的三种标志物之间存在一定的联系，但不同试剂的检测结果间存在明显差异。HCV抗体的存在对HCV抗原试剂盒检测效果有影响。

关键词：丙型肝炎病毒感染免疫学检验抗体测定

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非人灵长类动物临床症状与疾病初步诊断的探讨

非人灵长类动物临床症状与疾病初步诊断的探讨

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中国西部第八届实验动物管理与学术研讨会暨四川省第二届实验动物学术年会

作者：匡德宣唐东红李春花代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明 650118

临床症状是诊断疾病的基础资料，可以作为疾病诊断的出发点和重要根据。在兽医临床中，由于非人灵长类动物不能用语言表达自身感觉，需要根据客观的临床症状观察来发现。所以兽医给动物诊断疾病，必须熟练掌握其各种常见临床症状与疾病... 详细信息

临床症状是诊断疾病的基础资料，可以作为疾病诊断的出发点和重要根据。在兽医临床中，由于非人灵长类动物不能用语言表达自身感觉，需要根据客观的临床症状观察来发现。所以兽医给动物诊断疾病，必须熟练掌握其各种常见临床症状与疾病的关系，以便根据症状的提示对疾病做出初步诊断。本文根据多年从事非人灵长类动物兽医临床工作的实践经验，从循环、呼吸、消化、泌尿、生殖、神经、造血、肌肉、骨骼、皮肤、代谢及中毒等方面，总结了非人灵长类实验动物常见的临床症状和相应疾病初步诊断的联系。

关键词：临床症状疾病诊断兽医临床非人灵长类动物

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树鼩正常肠道细菌的培养分离鉴定及其药敏试验研究

树鼩正常肠道细菌的培养分离鉴定及其药敏试验研究

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中国西部第八届实验动物管理与学术研讨会暨四川省第二届实验动物学术年会

作者：高家红江勤芳罗志武孙晓梅代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的：了解人工饲养树鼩肠道菌群感染情况及其各种细菌对药物的敏感性。方法：对107例人工饲养树鼩肠道细菌的采样、培养、分离和菌落生长情况的观察，并经革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、生化编码鉴定管试验和9种药敏试验，初... 详细信息

目的：了解人工饲养树鼩肠道菌群感染情况及其各种细菌对药物的敏感性。方法：对107例人工饲养树鼩肠道细菌的采样、培养、分离和菌落生长情况的观察，并经革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、生化编码鉴定管试验和9种药敏试验，初步鉴定树鼩肠道感染细菌的种类和这些细菌对药物的敏感程度。结果：本次细菌培养共从树鼩肠道中培养分离出5株细菌，其中革兰氏阳性菌2株，革兰氏阴性菌3株，以大肠杆菌和葡萄球菌最为多见。同时确定了菌株的药敏情况为：1.大肠杆菌对头孢类药头孢哌酮最为敏感，对药物磺胺甲噁唑／甲氧苄定，氧氟沙星，左氧氟沙星，呋喃妥因，氨苄西林高敏;2.沙门氏菌对阿米卡星最为敏感，对药物青霉素G高敏;3.链球菌对试验药物显示都为中敏;4.葡萄球菌对头孢类药头孢哌酮、磺胺类磺胺甲噁唑／甲氧苄定、沙星类诺氟沙星、左氧氟沙星晟为敏感，对其它药物均为中敏：5.假单胞菌对药物左氧氟沙星最为敏感，对大多数药物都显示高敏。结论：大肠杆菌和葡萄球菌可能是树鼩肠道中正常寄生的主要菌群，同时其它菌群也有寄生。用药敏实验筛选出的药物可为临床用药和动物的生物净化提供指导依据。

关键词：动物模型肠道细菌药敏试验人工饲养临床用药

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人工饲养树鼩血液学及生化指标正常值测定及分析

人工饲养树鼩血液学及生化指标正常值测定及分析

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中国西部第八届实验动物管理与学术研讨会暨四川省第二届实验动物学术年会

作者：白继丽孙晓梅王欣代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的：建立人工饲养健康树鼩血液学和血液生化指标的正常值参考范围，并探讨与不同物种的血液学和血液生化值的差异及相互关系。方法：应用全自动血细胞仪和生化分析仪测定140只健康成年树鼩的血液学及血液生化指标。结果：雌... 详细信息

目的：建立人工饲养健康树鼩血液学和血液生化指标的正常值参考范围，并探讨与不同物种的血液学和血液生化值的差异及相互关系。方法：应用全自动血细胞仪和生化分析仪测定140只健康成年树鼩的血液学及血液生化指标。结果：雌性与雄性比较，LYM％、PLT、RDW％、GLU、CREA的差异具有显著性(P<0.05)，TP、CHOL、TG的差异具有极显著性(P<0.01)，其他指标的差异不具显著性，部分指标与恒河猴、大鼠及人的相应指标存在一定的差异。结论：本文建立了健康树鼩的血液学及生化指标的正常值参考范围，可为应用该动物进行科学研究时提供参考。

关键词：树鼩血液学值血液生化值人工饲养

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后脊髓灰质炎时代我国应用Sabin株IPV免疫的可行性探讨

后脊髓灰质炎时代我国应用Sabin株IPV免疫的可行性探讨

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第十次全国生物制品学术会议

作者：车艳春姜莉邵聪文何春艳张云昆杨净思中国医学科学院、北京协和医学院医学生物学研究所，昆明 650118

在世界卫生组织(WHO)全球六大地区的所有国家都被证实已完全阻断了本土脊髓灰质炎(脊灰)野毒株的传播之后，全球将停止使用口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)免疫，进入后脊灰时代。为此，WHO提出了届时全面停止OPV的使用并同步开始脊髓灰... 详细信息

在世界卫生组织(WHO)全球六大地区的所有国家都被证实已完全阻断了本土脊髓灰质炎(脊灰)野毒株的传播之后，全球将停止使用口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)免疫，进入后脊灰时代。为此，WHO提出了届时全面停止OPV的使用并同步开始脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)的免疫，发展中国家更应考虑应用廉价的Sahin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin-IPV)免疫，直至最终根除脊灰。然而目前全球尚未有开发成功的Sabin-IPV上市。本文详细介绍了WHO推荐的这一免疫策略，分析了全球Sabin-IPV的研发现状，从免疫策略、免疫程序、生产技术及疫苗供应等方面探讨了我国应用Sabin-IPV免疫的可行性。鉴于这些可行性，我国应尽快推进Sabin-IPV的研制进程，为脊灰免疫策略的调整、实施做好准备。

关键词：脊髓灰质炎 Sahin株脊灭活疫苗免疫策略生产技术

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HCV分片断抗体检测及优势抗原表位分析

HCV分片断抗体检测及优势抗原表位分析

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第十次全国生物制品学术会议

作者：谢忠平杨蓉龙润乡李华白惠株廖云蒋蕊鞠王燕洪超中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所，昆明 650118

目的：对HCV不同抗体片段进行检测分析，分析HCV优势抗原表位，为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供帮助。方法：收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样本90份，使用抗HCV分片段试剂进行检测，并用荧光定量PCR对抗体阴性样品进行复核，... 详细信息

目的：对HCV不同抗体片段进行检测分析，分析HCV优势抗原表位，为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供帮助。方法：收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样本90份，使用抗HCV分片段试剂进行检测，并用荧光定量PCR对抗体阴性样品进行复核，分析不同片段出现的阳性率，从而分析出HCV的优势抗原表位。结果：90份抗HCV阳性的样本用另一检测试剂进行检测，其中阳性78份(86.67％);90份抗HCV阳性的样本中，分片段试剂1个片断以上阳性样品59份(65.56％);在分片断检测阳性的样品中，C片断、NS3片断、NS4片断及NS5片断抗体阳性分别为56份(94.92％)、58份(98.31％)、43份(72.88％)及48份(81.36％)，NS3片断及C片断是HCV的优势抗体。结论：HCV-C抗原表位及NS3表位是HCV的优势抗抗原表位，诱导机体产生的抗体为优势抗体;HCV分片断抗体与总抗体检测试剂之间阳性检届率存在一定差异。

关键词：丙型肝炎病毒抗体检测抗原表位分析

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恒河猴SRV-1和STLV-1血清抗体流行病学研究

恒河猴SRV-1和STLV-1血清抗体流行病学研究

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第十次全国生物制品学术会议

作者：杨净思张丽旌李晓燕张云昆代解杰孙晓梅唐东红中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所，昆明 650118

目的：调查恒河猴SRV-1和STLV-1血清流行病学特征。方法：用免疫荧光法(IFA)对63只野生恒河猴和105只人工繁殖饲养猴作了SRV-1和STLV-1血清抗体检查，并对检测结果进行统计学分析。结果：168只恒河猴中SRV-1和STLV—1血清抗体... 详细信息

目的：调查恒河猴SRV-1和STLV-1血清流行病学特征。方法：用免疫荧光法(IFA)对63只野生恒河猴和105只人工繁殖饲养猴作了SRV-1和STLV-1血清抗体检查，并对检测结果进行统计学分析。结果：168只恒河猴中SRV-1和STLV—1血清抗体阳性率分别为5.36％和5.95％，野生猴SRV-1和STLV-1血清抗体阳性率(11.11％，11.11％)均高于饲养猴(1.91％，2.86％);云南普洱和丽江两地野生恒河猴SRV-1血清抗体阳性率无差异(11.63％，10％)，而STLV-1血清抗体阳性率丽江(25％)高于普洱(4.65％);2岁以下、2—4岁、4岁以上恒河猴的SRV-1血清抗体阳性率分别为0、5.88％、7.06％，STLV-1血清抗体阳性率分别为0、5.88％、8.24％，2岁以上恒河猴SRV-1和STLV-1血清抗体阳性率明显高于2岁以下恒河猴;野生雌猴SRV-1和STLV-1血清抗体阳性率分别为14.81％和18.52％，雄猴分别为8.33％和5.56％，雌、雄恒河猴之间SRV-1和STLV-1血清抗体阳性率无显著性差异。结论：野生和人工饲养的恒河猴群中均可检出SRV-1和STLV-1血清抗体阳性动物，抗体阳性率与猴群生活地区、生长环境和年龄有关。

关键词：血清抗体血清流行病学特征免疫荧光法阳性率

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重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体纯化条件的优化

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中国生物制品学杂志 2009年第4期22卷 395-398页

作者：孙静傅晶晶霍烛陈佩胡云章刘勇郝彦玲中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所疫苗研究室昆明650118 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病防治国家重点实验室北京100050

目的优化重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体的纯化条件。方法将表达Gp41的大肠杆菌菌体高压匀浆破碎、洗涤分离提取包涵体,以不同pH值的低浓度变性剂溶解包涵体,稀释复性并用离子交换层析纯化目的蛋白,纯化产物经West-ernblot进行鉴定。结果... 详细信息

目的优化重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体的纯化条件。方法将表达Gp41的大肠杆菌菌体高压匀浆破碎、洗涤分离提取包涵体,以不同pH值的低浓度变性剂溶解包涵体,稀释复性并用离子交换层析纯化目的蛋白,纯化产物经West-ernblot进行鉴定。结果以50mmol/LTris buffer、2mol/L,pH11.5尿素溶解的包涵体蛋白得到很好的溶解,目的蛋白复性得率大于40%。经纯化后,目的蛋白的纯度大于90%,且具有良好的反应原性。结论优化了重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体的纯化条件,为HIV-1Gp41抗原纯化工艺的放大提供了依据。

关键词： HIV-1 跨膜蛋白Gp41 包涵体纯化

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