检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与比较医学 2019年第3期39卷 178-186页

作者：王文广匡德宣李娜陆彩霞罕园园仝品芬孙晓梅代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队

目的对树鼩主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a)基因进行克隆、测序和生物信息学分析,并定量检测其组织表达量。方法从树鼩脑和脊髓中提取总RNA,RT-PCR扩增Mfsd2a基因片段,测序后利用生物信息学软件对其序列特征、系统进化、编码蛋白的结... 详细信息

目的对树鼩主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a)基因进行克隆、测序和生物信息学分析,并定量检测其组织表达量。方法从树鼩脑和脊髓中提取总RNA,RT-PCR扩增Mfsd2a基因片段,测序后利用生物信息学软件对其序列特征、系统进化、编码蛋白的结构和理化性质进行分析;以树鼩β-actin为内参,qPCR检测树鼩Mfsd2a基因在不同组织中的表达情况。结果克隆获得Mfsd2a基因片段全长1 796 bp,与NCBI上公布的树鼩Mfsd2a基因预测序列高度一致,比对显示其与MFS转运蛋白超家族同源。其编码区全长1 464 bp,编码488个氨基酸。预测结果显示树鼩Mfsd2a蛋白具有明显的疏水性区域,无信号肽,二级结构元件由α螺旋、β折叠、无规卷曲和延伸链组成。OCTOPUS分析发现Mfsd2a存在12个跨膜结构,修饰结构预测发现Mfsd2a蛋白存在两处N糖基化位点,亚细胞定位发现其可能主要分布于细胞膜和内质网。qPCR检测树鼩不同组织的Mfsd2a表达,结果显示各组织均有表达,在大脑、脊髓中的表达水平相对较高。结论成功克隆了树鼩Mfsd2a基因,建立了该基因表达定量检测方法,为今后利用树鼩神经系统疾病模型深入开展Mfsd2a基因功能研究提供了理论和技术支持。

关键词：树鼩主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a) 克隆分析表达

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恶性疟原虫动物模型及基因编辑研究进展

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实验动物与比较医学 2019年第1期39卷 65-71页

作者：匡德宣王文广孙晓梅代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队

恶性疟原虫是人体疟疾的病原体,恶性疟原虫动物模型是研究人疟原虫感染、慢性致病机制、药物评价和人疟原虫疫苗研制的重要实验材料。迄今为至,恶性疟原虫动物模型研究主要涉及非人灵长类、免疫缺陷小鼠、转基因技术以及CRISPR/Cas9系... 详细信息

恶性疟原虫是人体疟疾的病原体,恶性疟原虫动物模型是研究人疟原虫感染、慢性致病机制、药物评价和人疟原虫疫苗研制的重要实验材料。迄今为至,恶性疟原虫动物模型研究主要涉及非人灵长类、免疫缺陷小鼠、转基因技术以及CRISPR/Cas9系统等领域。本文对恶性疟原虫体内外感染动物模型及基因编辑研究做总结分析,为今后恶性疟原虫动物模型建立及基因编辑研究提供参考。

关键词：恶性疟原虫体外感染体内感染基因编辑

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新型冠状病毒动物实验存在暴露风险时的实验室生物安全要求

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医疗卫生装备 2020年第5期41卷 70-74页

作者：陆兵王荣吴东来赵四清胡云章翟培军周永运王中一靳晓军李京京程洪亮祁建城吕京军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071 中国合格评定国家认可中心北京100062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 军事科学院军事医学研究院生物安全处北京100850 中国医学科学院(北京协和医学院)医学生物学研究所昆明650118 军事科学院系统工程研究院卫勤保障技术研究所国家生物防护装备工程技术研究中心天津300161

解读了GB 19489-2008《实验室生物安全通用要求》标准中关于生物安全实验室的分级和分类,阐明了缓冲间和气锁的定义,重点分析了4.4.3类型实验室关于准入和退出,气压、压差和气密性及送排风高效空气过滤器等技术性条款。指出了4.4.3类型... 详细信息

解读了GB 19489-2008《实验室生物安全通用要求》标准中关于生物安全实验室的分级和分类,阐明了缓冲间和气锁的定义,重点分析了4.4.3类型实验室关于准入和退出,气压、压差和气密性及送排风高效空气过滤器等技术性条款。指出了4.4.3类型实验室开展不传染人的非洲猪瘟病毒实验活动和可传染人的新型冠状病毒实验活动时关于个体防护用品选择及其处置中存在的问题,以及风险评估应重点考虑的要素,建议组织国家病原微生物实验室生物安全专家委员会对新型冠状病毒进行论证,明确新型冠状病毒动物实验存在暴露风险时的实验室生物安全要求。

关键词：实验室生物安全新型冠状病毒动物实验风险评估新型冠状病毒肺炎

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树鼩实验动物标准化质量控制标准的研究编制

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中国比较医学杂志 2019年第3期29卷 67-71页

作者：匡德宣王文广孙晓梅陆彩霞罕园园仝品芬李娜代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南省实验树鼩标准化与应用研究创新团队昆明650118

树鼩在新陈代谢、生理机能、大体解剖和基因组等方面与人类具有相似性,已被广泛应用于医学和生物学研究领域。作为一种极具价值和科学研究需求的实验动物新资源,标准化质量控制已经成为树鼩使用中亟待解决的技术瓶颈和研究发展的必然趋... 详细信息

树鼩在新陈代谢、生理机能、大体解剖和基因组等方面与人类具有相似性,已被广泛应用于医学和生物学研究领域。作为一种极具价值和科学研究需求的实验动物新资源,标准化质量控制已经成为树鼩使用中亟待解决的技术瓶颈和研究发展的必然趋势。本文对树鼩质量控制团体标准进行归纳总结和分析说明,加强标准的宣传推广和贯彻实施,为树鼩实验动物标准化质量控制及国家标准的制订提供参考依据,最终促进树鼩推广应用和产业化发展。

关键词：树鼩实验动物质量控制标准

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肠道病毒71型灭活疫苗上市后预防接种不良反应主动监测研究

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中国疫苗和免疫 2019年第5期25卷 557-561页

作者：赵志梅王雷邓燕王四全蒋蕊鞠沈灵智车艳春中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 湖北省疾病预防控制中心湖北武汉430079 浙江省疾病预防控制中心浙江杭州310051

目的评价肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞)上市后大规模接种的不良反应。方法选择湖北、浙江省6-71月龄儿童接种EV71疫苗,采用主动监测方式收集每剂疫苗接种后0-30d的不良反应,计算不良反应发生率。结果接种第... 详细信息

目的评价肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞)上市后大规模接种的不良反应。方法选择湖北、浙江省6-71月龄儿童接种EV71疫苗,采用主动监测方式收集每剂疫苗接种后0-30d的不良反应,计算不良反应发生率。结果接种第1剂、第2剂疫苗分别纳入有效研究对象60115例、47313例,共收集到不良反应/事件2733例,总发生率为25.44‰;其中局部、全身反应发生率分别为2.93‰、15.20‰,≥3级局部、全身反应发生率分别为0.11‰、1.14‰。最常见的局部、全身反应分别为注射部位红(1.59‰)、发热(10.94‰)。结论本研究6-71月龄儿童接种EV71疫苗后30d内不良反应发生率低,未观察到新的罕见不良反应。

关键词：肠道病毒71型灭活疫苗不良反应主动监测

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小鼠遗传背景对伯氏螺旋体感染的影响

小鼠遗传背景对伯氏螺旋体感染的影响

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第十五届中国实验动物科学年会

作者：陆巍陶玉芬程美慧刘红旗中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所昆明医科大学

目的确定宿主的遗传背景对回归热伯氏螺旋体感染的影响。方法本研究选用了3种常用的不同遗传背景小鼠(C57BL/6,Balb/c和ICR),经腹腔注射感染回归热伯氏螺旋体,每天计数细菌和记录神经症状,并通过ELISA法分析血液中螺旋体特异性的IgG及Ig... 详细信息

目的确定宿主的遗传背景对回归热伯氏螺旋体感染的影响。方法本研究选用了3种常用的不同遗传背景小鼠(C57BL/6,Balb/c和ICR),经腹腔注射感染回归热伯氏螺旋体,每天计数细菌和记录神经症状,并通过ELISA法分析血液中螺旋体特异性的IgG及IgM抗体水平。结果在整个21d实验观察期内,回归热螺旋体在三种不同遗传背景小鼠体内均能高效的复制,且菌血症呈周期性地发生。螺旋体特异性IgG抗体,随着感染时间推移而逐渐升高,并一直维持在较高的水平。螺旋体特异性IgM抗体呈现周期性地下降和回升。C57BL/6和ICR小鼠从感染后第9 d开始出现神经症状,并于第15d达到高峰,然而ICR小鼠症状没有C57BL/6小鼠的严重。Balb/c小鼠在整个实验过程中没有出现明显的神经症状。结论综上所述,我们的研究表明宿主的遗传背景影响回归热螺旋体感染引起中枢神经性疾病的致病性,并且进一步确认了C57BL/6小鼠是所研究的3种小鼠中最为合适的回归热螺旋体感染引起中枢神经系统疾病模型。

关键词：回归热伯氏螺旋体菌血症神经症状遗传背景

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回归热螺旋体实验性感染树鼩

回归热螺旋体实验性感染树鼩

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第十五届中国实验动物科学年会

作者：张静苏春燕程美慧刘红旗中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所昆明医科大学

目的探讨回归热螺旋体实验性感染树鼩后的复制情况,以及螺旋体对树鼩的致病性。方法回归热螺旋体经腹腔注射感染树鼩后,每日通过尾静脉采集抗凝血计数细菌数量,并观察树鼩临床症状和测量体温。实验后期对树鼩进行解剖,称肝脏和脾脏的重... 详细信息

目的探讨回归热螺旋体实验性感染树鼩后的复制情况,以及螺旋体对树鼩的致病性。方法回归热螺旋体经腹腔注射感染树鼩后,每日通过尾静脉采集抗凝血计数细菌数量,并观察树鼩临床症状和测量体温。实验后期对树鼩进行解剖,称肝脏和脾脏的重量。结果回归热螺旋体经腹腔感染树鼩后,能在树鼩体内进行有效地增殖,在感染后第7天左右会出现第一个菌血症的高峰,然后开始下降,第12-14天左右又形成一个小峰,形成一个"回归"状增殖曲线。体温监测表明,树鼩在整个螺旋体感染过程中,其体温没有明显的变化,与未感染树鼩一样,一般维持在40℃-42℃之间。螺旋体感染导致树鼩的死亡率约为89%,树鼩在死亡之前出现体温骤降2℃-10℃。临床症状观察发现,36%的树鼩在感染后期会出现双后肢无力,尾无力并拖地行走,以及身体左右摇晃不平衡的神经症状,且无法正常行走,呼吸急促,性情狂躁。树鼩解剖结果表明,螺旋体感染引起树鼩肝脏和脾脏明显肿大,约为正常树鼩的1-2倍。结论回归热螺旋体能有效地感染树鼩,形成的菌血症呈一个回归状的曲线,并且引起树鼩明显的临床症状。这些结果提示树鼩可能作为研究回归热螺旋体感染和致病机制的动物模型。

关键词：树鼩回归热螺旋体菌血症神经症状

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云南4种罕见异常血红蛋白突变型分析

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国际检验医学杂志 2019年第8期40卷 932-934,938页

作者：何建萍郭薇霞唐健罗胜军吕梦欣党峰博林克勤杨昭庆昆明市妇幼保健院遗传室云南昆明650031 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所遗传室云南昆明650118

目的明确7例血红蛋白电泳检出的异常条带产生的基因分子基础,探讨基因型与血液学表型的关系。方法用血常规指标和血红蛋白电泳进行表型分析,采用PCR-反向点杂交法检测α地贫和β地贫,应用PCR产物测序技术对α、β基因全长进行测序,检测... 详细信息

目的明确7例血红蛋白电泳检出的异常条带产生的基因分子基础,探讨基因型与血液学表型的关系。方法用血常规指标和血红蛋白电泳进行表型分析,采用PCR-反向点杂交法检测α地贫和β地贫,应用PCR产物测序技术对α、β基因全长进行测序,检测基因突变类型。结果 7例样本中检出4种异常血红蛋白突变型:1例中国首次发现的Hb San Bruno(HBB:c.120G>C)、2例Hb New York(HBB:c.341T>A)、2例Hb J-Bangkok(HBB:c.170G>A)、2例Hb G-Coushatta(HBB:c.68A>C),血常规参数均无明显异常。结论云南存在多种异常血红蛋白突变型,多数单纯异常血红蛋白罕见突变都不产生临床表型,但是云南作为地中海贫血的高发地区,异常血红蛋白病合并地中海贫血的临床意义和危害性有待于进一步研究。

关键词：异常血红蛋白血红蛋白电泳基因型血液学表型

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1例α_2珠蛋白新突变型分析

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国际检验医学杂志 2019年第9期40卷 1148-1150页

作者：郭薇霞唐健何建萍罗胜军黄铠林克勤褚嘉祐杨昭庆中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所遗传室云南昆明650118 昆明市妇幼保健院遗传室云南昆明650031

异常血红蛋白是由于珠蛋白基因突变导致珠蛋白分子结构和功能异常的一类血红蛋白,当产生临床表现时称为异常血红蛋白病[1]。异常血红蛋白的种类和分布频率存在地域和人种差异[2],根据人类血红蛋白变异体数据库HbVar(http://***/hbvar/*... 详细信息

异常血红蛋白是由于珠蛋白基因突变导致珠蛋白分子结构和功能异常的一类血红蛋白,当产生临床表现时称为异常血红蛋白病[1]。异常血红蛋白的种类和分布频率存在地域和人种差异[2],根据人类血红蛋白变异体数据库HbVar(http://***/hbvar/***)结果显示,目前全世界报道的发生在α珠蛋白肽链上的异常血红蛋白超过490种,我国报道的有38种。大多数异常血红蛋白是由于珠蛋白链上单个碱基替换引起的,不产生临床症状,因此需要借助血红蛋白电泳和基因检测才能确诊[3]。本研究通过对血红蛋白电泳结果异常的1例样本进行了基因诊断,检出了1例α珠蛋白基因新突变型,现报道如下。

关键词：异常血红蛋白 α2珠蛋白基因新突变血红蛋白电泳

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树鼩脊髓星形胶质细胞的分离鉴定

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实验动物与比较医学 2019年第1期39卷 15-20页

作者：王璇王文广李娜袁园张志成孙晓梅中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队云南省眼科疾病防治研究重点实验室

目的建立树鼩脊髓来源的星形胶质细胞的体外分离、鉴定方法以及原代培养技术。为体外利用树鼩星形胶质细胞开展相关研究提供实验材料。方法给新生树鼩实施安死术后采集脊髓组织,于解剖显微镜下去除脊髓膜和血管,减少成纤维细胞、血管内... 详细信息

目的建立树鼩脊髓来源的星形胶质细胞的体外分离、鉴定方法以及原代培养技术。为体外利用树鼩星形胶质细胞开展相关研究提供实验材料。方法给新生树鼩实施安死术后采集脊髓组织,于解剖显微镜下去除脊髓膜和血管,减少成纤维细胞、血管内皮细胞和红细胞的影响,然后使用胰蛋白酶和DNaseⅠ联合消化眷髓组织,分离培养。根据星形胶质细胞和成纤维细胞、小胶质细胞的贴壁时间差异,使用差速贴壁法去除成纤维细胞;然后在细胞铺满后,使用恒温摇床振荡的方式去除少突胶质细胞;通过连续3次纯化,去除神经元。对所培养的细胞进行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)细胞免疫荧光染色鉴定。结果采用胰蛋白酶和DNaseⅠ联合消化后差速贴壁培养,能够分离获得星形胶质细胞。细胞具有典型的原浆型和纤维型特征,原浆型呈多角状,突起少而粗壮;纤维型突起丰富且向外铺展开;细胞免疫荧光结果显示GFAP表达阳性,且纯度可达到95%。结论成功建立了树鼩的脊髓星形胶质细胞的体外分离纯化培养方法。

关键词：星形胶质细胞脊髓分离鉴定树鼩

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