检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2018年第5期35卷 72-74页

作者：刘洋林晓晨李鸿钧昆明医科大学昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

轮状病毒(RV)是世界范围内导致婴幼儿胃肠道疾病的主要病原体,RV基因组由11个分节段的双链RNA组成,分别编码6个结构蛋白(VP1、VP2、VP3、VP4、VP6和VP7)和6个非结构蛋白(NSP1、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5和NSP6),其中第11基因片段编码非结... 详细信息

轮状病毒(RV)是世界范围内导致婴幼儿胃肠道疾病的主要病原体,RV基因组由11个分节段的双链RNA组成,分别编码6个结构蛋白(VP1、VP2、VP3、VP4、VP6和VP7)和6个非结构蛋白(NSP1、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5和NSP6),其中第11基因片段编码非结构蛋白NSP5。NSP5蛋白较大,NSP5在病毒感染细胞中以二聚体形式存在,是一个高度磷酸化的蛋白,可与轮状病毒其他非结构蛋白或结构蛋白相互作用,具有RNA结合活性,在病毒复制过程中主要通过与NSP2的一系列相互作用发挥功能。对轮状病毒的相关结构与功能的研究十分必要,近年来,对轮状病毒的非结构蛋白进行了大量研究,主要集中在其结构、表达、功能及免疫学性质方面,现就目前国内外对轮状病毒NSP5结构与功能的研究进展进行综述。

关键词：轮状病毒结构蛋白非结构蛋白 NSP5

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基于16S rRNA测序对树鼩肠道菌群特征与高级别肉瘤的相关性分析

基于16S rRNA测序对树鼩肠道菌群特征与高级别肉瘤的相关性分析

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第十五届中国实验动物科学年会

作者：黄鑫古文鹏黎晓慧李娜贾杰李明学代解杰昆明医科大学中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队

目的检测高级别肉瘤的树鼩肠道微生物菌群结构,为探讨肠道微生物菌群结构的改变与肿瘤发生的相关性提供科学依据。方法选取3例患有恶性高级别肉瘤树鼩粪便为CA组,6例健康树鼩粪便为对照NO组。通过16SV3+4区引物进行细菌多样性的鉴定,通... 详细信息

目的检测高级别肉瘤的树鼩肠道微生物菌群结构,为探讨肠道微生物菌群结构的改变与肿瘤发生的相关性提供科学依据。方法选取3例患有恶性高级别肉瘤树鼩粪便为CA组,6例健康树鼩粪便为对照NO组。通过16SV3+4区引物进行细菌多样性的鉴定,通过对Reads剪切过滤,OTUs聚类,并进行物种注释及丰度分析,得出两组树鼩肠道微生物结构、丰度以及多样性。结果比较CA组和NO组树鼩肠道微生物结构,多样性指数Chao1指数值、ACE指数值、Shannon指数值差异无统计学意义(P>0.05)。NO组的树鼩肠道菌群OTUs为640种,而CA组为494种,健康树鼩肠道菌群结构呈多样性。在门水平上比较,其中CA组中螺旋体门(Spirochaetes)丰度为0.03%,低于NO组(丰度为0.12%),且差异有统计学意义(P<0.05);CA组厚壁菌门(Firmicutes)丰度为77.79%高于NO组(47.65%),但差异无统计学意义;CA组的拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度为0.75%低于NO组(8.31%),但差异无统计学意义。CA组中的乳杆菌属(lactobacillus)是具有统计学意义的生物标识。结论患有高级别肉瘤树鼩的肠道菌群结构丰度和多样性低于健康树鼩,肠道菌群的结构改变及厚壁菌门含量增加可能增加恶性肿瘤的发生。

关键词：肠道菌群高级别肉瘤 16srRNA测序树鼩

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HPV 16 L1天然变异体在毕赤酵母中的可溶性表达及病毒样颗粒装配

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中国生物制品学杂志 2018年第5期31卷 462-466页

作者：杨旭黄惟巍姚宇峰刘存宝孙文佳白红妹马雁冰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心云南昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发国家地方联合工程研究中心云南昆明650118

目的在毕赤酵母中表达两个临床人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型毒株主要衣壳蛋白L1(HPV 16 L1),并分析表达产物的可溶性及病毒样颗粒(virus-like parcticle,VLP)装配差异。方法将编码两个不同HPV 16毒株L1蛋白的全长基因序... 详细信息

目的在毕赤酵母中表达两个临床人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型毒株主要衣壳蛋白L1(HPV 16 L1),并分析表达产物的可溶性及病毒样颗粒(virus-like parcticle,VLP)装配差异。方法将编码两个不同HPV 16毒株L1蛋白的全长基因序列M16和Y16分别重组于毕赤酵母表达载体p Pink LC,构建重组表达质粒Y16LC和M16LC,转化表达菌株p Pink strain 1。重组菌经甲醇诱导后,Western blot分析L1蛋白的表达水平及可溶性。经密度梯度离心结合透射电镜观察,分析VLP装配情况。通过软件pubmed在线Alignment分析两个序列的氨基酸排列。结果两个重组表达质粒经酶切鉴定及测序分析证明构建正确。两个序列获得了相似的蛋白表达水平,但Y16的可溶性较差,几乎且无VLP形成;而M16呈现较好的蛋白可溶性及VLP装配能力。Y16与M16有5个氨基酸的差异(H202D、T266A、Δ424S、D441Δ、K452Q)。结论 HPV 16 L1氨基酸的微小改变尽管未对重组蛋白的表达水平产生影响,但显著影响有功能的预期产物的获得。提示在基因重组病毒疫苗研发中,制备VLP时需考虑毒株的选择,甚至主动进行抗原的特定氨基酸的改造。

关键词：人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白L1 毕赤酵母病毒样颗粒

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树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

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中国比较医学杂志 2018年第3期28卷 72-77页

作者：宋庆凯李晓飞苗雨润张志成王璇袁圆代解杰孙晓梅中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队昆明650118

目的通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。方法根据TAV全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV ... 详细信息

目的通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。方法根据TAV全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的TAV实时荧光定量PCR检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好。结论成功建立了TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV感染的早期快速检测。

关键词：树鼩腺病毒 3’保守区域 TaqMan 实时荧光定量PCR

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甲型肝炎疫苗免疫效果影响因素的分析

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中国生物制品学杂志 2018年第11期31卷 1283-1285,1289页

作者：罗佳孙强明昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

甲型肝炎疫苗以其卓越的免疫原性、安全性及免疫持久性,被公认为预防甲型肝炎流行的重要措施。绝大多数人接种甲型肝炎疫苗后均能产生很好的保护效果,但不同人群的反应并不均一,呈多样性。出现上述情况的原因复杂,影响因素众多。掌握有... 详细信息

甲型肝炎疫苗以其卓越的免疫原性、安全性及免疫持久性,被公认为预防甲型肝炎流行的重要措施。绝大多数人接种甲型肝炎疫苗后均能产生很好的保护效果,但不同人群的反应并不均一,呈多样性。出现上述情况的原因复杂,影响因素众多。掌握有关影响因素对实现接种的群体化或个体化,使不同群体获得成功免疫具有重大意义。基于此,本文从甲型肝炎疫苗类型、佐剂、免疫接种对象个体差异、疾病因素、免疫策略等方面,对甲型肝炎疫苗免疫效果的影响因素作一综述。

关键词：甲型肝炎疫苗免疫效果佐剂影响因素

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帕金森疾病动物模型的研究进展

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中国比较医学杂志 2018年第5期28卷 21-27页

作者：张志成袁圆王璇宋庆凯代解杰昆明医科大学昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,现多认为是遗传和环境因素相互作用的结果。典型特征是黑质纹状体中多巴胺神经元丧失以及多巴胺缺乏相关的典型帕金森运动特征。动物模型在阐明PD的发病机制、测试新的治疗方... 详细信息

帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,现多认为是遗传和环境因素相互作用的结果。典型特征是黑质纹状体中多巴胺神经元丧失以及多巴胺缺乏相关的典型帕金森运动特征。动物模型在阐明PD的发病机制、测试新的治疗方案及药物的研究中,具有十分重要的作用。啮齿类动物、树鼩和灵长类动物等采用不同造模方法所建立的PD动物模型都拥有自己的优势和局限性,所表现出的临床特征和病理机制与人类有所不同。因此,在科学研究中选择所需使用的模型时必须仔细考虑。本文就主要神经毒素及转基因PD动物模型的相关研究进展进行综述。

关键词：帕金森疾病 6-羟基多巴胺 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶神经毒素转基因动物模型

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新生树鼩多巴胺神经元的体外培养

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中国比较医学杂志 2018年第7期28卷 82-86页

作者：李娟曾晓锋杨根梦仝品芬代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医科大学法医学院昆明650500

目的分离培养鉴定树鼩多巴胺神经元,为进一步建立多巴胺神经元功能异常疾病研究的细胞模型打下基础。方法应用神经元专用培养基添加B27和Glutamax的培养液对新生树鼩多巴胺神经元进行体外培养。采用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。结果... 详细信息

目的分离培养鉴定树鼩多巴胺神经元,为进一步建立多巴胺神经元功能异常疾病研究的细胞模型打下基础。方法应用神经元专用培养基添加B27和Glutamax的培养液对新生树鼩多巴胺神经元进行体外培养。采用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。结果成功培养出树鼩原代多巴胺神经元,免疫荧光法检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫阳性神经元达到(88.49±2.4)%。结论使用本方法可以培养出高纯度的树鼩多巴胺神经元。

关键词：多巴胺神经元原代培养树鼩

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2017年两株肠道病毒71型襄阳分离株的全基因组分析

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中国生物制品学杂志 2018年第8期31卷 824-829页

作者：于亮赵义林张海浩张捷李倩杨昭庆闵国平马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 襄阳市疾病预防控制中心湖北襄阳420607

目的分析2017年两株肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)分离株的全基因组及其遗传特性。方法收集手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)粪便样品,采用RD细胞进行病毒分离;提取病毒RNA,采用RTPCR法分段扩增EV71全长基因组,经测序... 详细信息

目的分析2017年两株肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)分离株的全基因组及其遗传特性。方法收集手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)粪便样品,采用RD细胞进行病毒分离;提取病毒RNA,采用RTPCR法分段扩增EV71全长基因组,经测序和拼接后,利用Mega 6.06和SimPlot 3.5.1等软件进行分析。结果两株EV71分离株4-23/XY/CHN/2017和6-4/XY/CHN/2017基因组全长均为7 406 bp,编码含2 193个氨基酸残基的多聚蛋白。通过Mega 6.06软件分析显示,与EV71/SZ50/CHN/2014株全基因的核苷酸同源性最高(97.6%),其VP1核苷酸同源性与EV71/FJFZ422/CHN/2015株最高(99%)。在全基因组上,与原型株Br Cr的核苷酸同源性分别80.6%和80.7%,氨基酸同源性均为99.3%;在VP1序列上,与C4a基因型其他毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别94.5%~99.3%和97.3%~98.5%。进化分析显示,这两分离株属于C4a基因型。重组分析未发现重组事件发生。结论 2017年襄阳分离株4-23/XY/CHN/2017和6-4/XY/CHN/2017属于C4a基因型,且未发生重组。

关键词：手足口病肠道病毒71型全基因组序列分析

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GC-MS结合演进特征投影法解析肉桂挥发油成分

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中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生 2019年第2期 00075-00075,78页

作者：杨丽芳李慧林航羽云南白药集团医药电子商务有限公司云南昆明 650500 中国医学科学院&北京协和医学院、医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明 650118 昆明医科大学第一附属医院药剂科云南昆明 650000

定性和定量分析肉桂中所含挥发油成分,为深入研究肉桂挥发油药理活性提供物质基础和研究依据。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)联合演进特征投影(HELP)法,对肉桂中所含挥发油成分进行准确定性,总体积积分法进行定量分析。结果:... 详细信息

定性和定量分析肉桂中所含挥发油成分,为深入研究肉桂挥发油药理活性提供物质基础和研究依据。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)联合演进特征投影(HELP)法,对肉桂中所含挥发油成分进行准确定性,总体积积分法进行定量分析。结果:肉桂挥发油中共定性了86种化合物,占其所含挥发油总量的95.82%。其中,含量高于1%的成分有15个。结论:肉桂挥发油中主要化学成分为桉油醇、肉桂醇、桂皮醛α-蒎烯等小分子醇类和烯萜类化合物。

关键词：肉桂挥发油气相色谱-质谱联用技术演进特征投影法

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肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)研究进展

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中国病毒病杂志 2018年第6期8卷 521-527页

作者：王晶晶张莹中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

手足口病是近年来严重威胁亚太地区儿童群体的一种主要急性传染病,该病的主要病原之一是肠道病毒71型.中国医学科学院医学生物学研究所经过八年艰辛的研究,终于在2015年12月率先成功研制出具有自主知识产权的针对肠道病毒71型的预防性疫... 详细信息

手足口病是近年来严重威胁亚太地区儿童群体的一种主要急性传染病,该病的主要病原之一是肠道病毒71型.中国医学科学院医学生物学研究所经过八年艰辛的研究,终于在2015年12月率先成功研制出具有自主知识产权的针对肠道病毒71型的预防性疫苗.本文针对全球首个手足口病疫苗、国家Ⅰ类新药---肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)的整个研发过程展开综述,详细叙述了该疫苗毒种筛选、动物模型建立、生产工艺建立、质控和标准建立、临床研究及上市后研究进展等.

关键词：手足口病肠道病毒71型灭活疫苗人二倍体细胞

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