检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2018年第3期43卷 249-253,304页

作者：杨晓蕾周紫云王小娜刘舒媛张新文胡术然黄翟李娜李翼君李传印中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的:探讨低相对分子量蛋白酶体7基因(LMP 7)及抗原处理相关转运体2基因(TAP 2)中的单核苷酸多态性(SNP)与云南汉族人群非小细胞肺癌的相关性。方法:选取云南汉族非小细胞肺癌患者467例作为病例组、同期健康正常人群488例作为对照组,采... 详细信息

目的:探讨低相对分子量蛋白酶体7基因(LMP 7)及抗原处理相关转运体2基因(TAP 2)中的单核苷酸多态性(SNP)与云南汉族人群非小细胞肺癌的相关性。方法:选取云南汉族非小细胞肺癌患者467例作为病例组、同期健康正常人群488例作为对照组,采用Taq Man探针基因分型方法对TAP2基因的SNP位点rs241447及LMP7基因的SNP位点rs2071543进行基因分型,分析rs241447和rs2071543等位基因和基因型在病例组和对照组间的分布差异,分析这两个SNP位点在肺癌不同临床分期的中分布差异。结果:rs241447在对照组和病例组中基因型的分布频率比较,差异有统计学意义(P=0.015);在超显性遗传模式下,rs241447基因型C/C-T/T可能是云南汉族人群非小细胞肺癌的风险因素(OR=1.38,95%CI为1.07~1.78,P=0.014),rs2071543的等位基因和基因型在对照组和病例组中的分布频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TAP2基因中的SNP位点rs241447可能与云南汉族人群非小细胞肺癌的易感性相关。

关键词：低相对分子量蛋白酶体7基因抗原处理相关转运体2基因多态性,单核苷酸肺肿瘤云南,汉族

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血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测结果的影响

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医学研究杂志 2018年第5期47卷 43-46页

作者：张名伍胤杰沈武玲周健寸怡娜平玲彭佳孙明波中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中... 详细信息

目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,并使用处理血清组进行促细胞生长试验。最后分析不同血清对感染性滴度的影响。结果6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异有统计学意义(P<0.01),6种处理血清组病毒感染性滴度差异无统计学意义(P>0.05)。未处理组2号血清的中和抗体滴度为1∶4,6号血清的中和抗体滴度为1∶8,其余各组血清的中和抗体滴度均<1∶4。6种处理血清组的中和抗体滴度均为1∶2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。

关键词：脊髓灰质炎病毒滴度中和抗体血清

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细胞自噬与病毒感染研究进展

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国际免疫学杂志 2018年第6期41卷 654-658页

作者：蒋曦宋杰朱文兵董少忠中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

自噬作为真核细胞的一种防御和调控机制,在维持细胞存活、物质再利用和内环境稳态中起到重要作用,同时也是清除细胞内病原体的一种重要手段,在抗病毒免疫中发挥重要作用。自噬在病毒感染中具有双重作用,一方面,自噬可以通过异源自噬直... 详细信息

自噬作为真核细胞的一种防御和调控机制,在维持细胞存活、物质再利用和内环境稳态中起到重要作用,同时也是清除细胞内病原体的一种重要手段,在抗病毒免疫中发挥重要作用。自噬在病毒感染中具有双重作用,一方面,自噬可以通过异源自噬直接降解病毒,也可以协助免疫系统清除病毒;另一方面,一些病毒进化出相应的机制对抗自噬,以利于自身存活。通过全面了解细胞自噬与抗病毒天然免疫反应、适应性免疫反应以及病毒复制之间的关系,为抗病毒研究提供一定的参考。

关键词：细胞自噬病毒感染天然免疫反应适应性免疫反应

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单纯疱疹病毒疫苗的研究进展

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医学研究杂志 2018年第10期47卷 1-3页

作者：和占龙李琦涵中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)属致病性人类α疱疹病毒,能引起龈口炎、角膜结膜、脑炎以及生殖系统感染和新生儿的感染等多种疾病。HSV包括2个血清型:Ⅰ型(HSV-1)和Ⅱ型(HSV-2),可以在三叉及骶尾神经节等组织内建立终身潜伏状... 详细信息

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)属致病性人类α疱疹病毒,能引起龈口炎、角膜结膜、脑炎以及生殖系统感染和新生儿的感染等多种疾病。HSV包括2个血清型:Ⅰ型(HSV-1)和Ⅱ型(HSV-2),可以在三叉及骶尾神经节等组织内建立终身潜伏状态,并且周期性复活而引起疾病复发[1]。感染HSV-1主要引起口唇及颜面、腰部以上的部位感染;感染HSV-2者80%以上引起生殖系统感染,主要通过性传播。

关键词：单纯疱疹病毒疫苗生殖系统感染 HSV-1 疾病复发角膜结膜潜伏状态致病性新生儿

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circRNA研究进展

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实验动物科学 2018年第5期35卷 83-87页

作者：陆彩霞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

环形RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类通过反向剪接所形成的闭合环状RNA分子,广泛存在于各种生物细胞中,并且具有结构稳定、表达量丰富以及在不同组织及其不同发育阶段具有表达特异性等特征。circRNAs可以作为miRNA海绵调控miRNA的表... 详细信息

环形RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类通过反向剪接所形成的闭合环状RNA分子,广泛存在于各种生物细胞中,并且具有结构稳定、表达量丰富以及在不同组织及其不同发育阶段具有表达特异性等特征。circRNAs可以作为miRNA海绵调控miRNA的表达,通过cis或trans调控其母基因的表达,并参与蛋白的翻译。此外,circRNA在神经发育及相关疾病的发生和发展过程中起着重要的调控作用,有望成为疾病诊断的分子标志物。本文就circRNA的分子特征、形成机制、功能、常用的数据库及其与神经系统疾病的关系做一综述。

关键词：环状RNA microRNA海绵 circRNA数据库神经系统

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细胞自噬对甲型流感病毒H1 N1感染A549细胞过程中病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第2期37卷 85-90页

作者：李嘉祺胡雅洁宋杰李洪哲王晶晶郭磊郑惠文宁若彤范海涛杨泽宁刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对... 详细信息

目的通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对细胞凋亡的影响,激光共聚焦显微镜观察H1N1感染A549细胞后的自噬现象,利用real-time PCR检测自噬被抑制前后病毒拷贝数的变化以及Ⅰ型干扰素（typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ）产生通路各基因mRNA表达量的变化.分析细胞自噬对病毒复制及干扰素表达的影响.结果当H1N1感染A549细胞后可诱导细胞产生不完全自噬,导致自噬体积累.当自噬被3-MA抑制后,TLR3-TLR7-MyD88-IRF7-IFN-α/β信号通路各基因mRNA表达量上调,与此同时病毒拷贝数及血凝滴度下调.结论 H1N1可能通过诱导不完全自噬逃逸了机体的抗病毒固有免疫应答,促进了自身复制和存活.

关键词：细胞自噬甲型流感病毒 A549细胞 Ⅰ型干扰素

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云南汉族人群CD6基因多态性与非小细胞肺癌的相关性

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贵州医科大学学报 2018年第3期43卷 254-258页

作者：洪超周紫云张新文刘舒媛陈珺李传印熊增平吴克川李玙梁燕中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的:探究云南地区汉族人群中细胞表面糖蛋白CD6基因多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性。方法:选取云南汉族NSCLC患者467例作为病例组,选取同期健康正常人群490例作为对照组,采用TaqMan探针基因分型方法对CD6基因的SNP位点(rs1236086... 详细信息

目的:探究云南地区汉族人群中细胞表面糖蛋白CD6基因多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性。方法:选取云南汉族NSCLC患者467例作为病例组,选取同期健康正常人群490例作为对照组,采用TaqMan探针基因分型方法对CD6基因的SNP位点(rs12360861、rs11230563及rs17824933)进行基因分型,分析3个SNP位点等位基因和基因型在病例组和对照组间的分布差异,分析3个SNP位点在肺癌不同临床分期的中分布。结果:CD6基因的SNP位点(rs12360861、rs11230563及rs17824933)的等位基因、基因型和构建的单倍型在病例组与对照组中的分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05);CD6基因的3个SNP位点的等位基因、基因型在肺癌Ⅰ+Ⅱ期组和Ⅲ+Ⅳ期组间的分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CD6基因的rs12360861、rs11230563及rs17824933多态性位点可能与云南汉族人群NSCLC的发生发展无相关性。

关键词：肺肿瘤多态性,单核苷酸云南汉族细胞表面糖蛋白CD6基因

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树鼩IgE高亲和力受体α亚基单克隆抗体的制备及鉴定

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生物技术通讯 2018年第6期29卷 748-751页

作者：张晶晶肖红剑龙琼浦滔李智华寸韡中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的:制备抗树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεRIα)的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行检测。方法:采用大肠杆菌原核表达树鼩IgE FcεRIα蛋白,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合;通过ELISA法和有限稀释法筛选杂... 详细信息

目的:制备抗树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεRIα)的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行检测。方法:采用大肠杆菌原核表达树鼩IgE FcεRIα蛋白,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合;通过ELISA法和有限稀释法筛选杂交瘤细胞;利用Protein A纯化单克隆抗体,Western印迹检测其特异性,间接免疫荧光及免疫组化对单克隆抗体进行分析。结果:用纯化的树鼩IgE FCεRIα蛋白免疫小鼠,选取效价高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经过3轮亚克隆筛选,筛选出5株抗树鼩IgE FCεRIα单克隆抗体,分别命名为HC020、HC021、HC022、HC023和HC024,细胞间接免疫荧光表明5株单克隆抗体均能检测到293T细胞中表达的IgE FCεRIα,其中HC020、HC022、HC024能够通过免疫组化检测组织切片中的IgE FCεRIα。结论:制备了5株IgE FCεRIα单克隆抗体,为今后研究树鼩IgE FCεRIα奠定了基础。

关键词：树鼩 IgE高亲和力受体α亚基单克隆抗体

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狂犬病病毒糖蛋白表达及纯化及其记忆性B细胞结合能力的分析

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生物工程学报 2017年第11期33卷 1840-1849页

作者：严丽蔚巩蔚朱文兵张雪梅徐婧雯吴忠香卢孔杰孙明董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

表达纯化不同标签、不同大小3个狂犬病病毒糖蛋白,分析其结合功能后,得到具备高亲和力的、可特异性结合记忆性B细胞的狂犬病病毒糖蛋白。本实验通过基因工程的方法,采用不同的原核表达系统分别表达带有不同标签的、全长和膜外区的RVG,... 详细信息

表达纯化不同标签、不同大小3个狂犬病病毒糖蛋白,分析其结合功能后,得到具备高亲和力的、可特异性结合记忆性B细胞的狂犬病病毒糖蛋白。本实验通过基因工程的方法,采用不同的原核表达系统分别表达带有不同标签的、全长和膜外区的RVG,纯化蛋白并分析比较其结合功能,荧光标记候选蛋白,结合CD19及CD27的抗体,流式细胞术检测狂犬疫苗免疫后PBMCs中抗狂犬病病毒特异性记忆性B细胞的情况,确认候选蛋白与抗狂犬病毒特异性记忆性B细胞的结合功能。本实验成功构建了3个表达载体pGEX-5X-1-RVG、pET28a-RVG和pET30a-G,优化表达纯化条件成功获得了糖蛋白GST-RVG、His-RVG和His-G。纯化后的GST-RVG、His-RVG和His-G经Western blotting和ELISA鉴定均有抗原特异性;由竞争ELISA法测得3个纯化后糖蛋白与抗狂犬病病毒抗体的亲和力。通过流式细胞术可以检测到狂犬疫苗免疫后阳性志愿者PBMCs中的抗狂犬病病毒特异性记忆性B细胞,从而获得了高亲和力、可用于分选抗原特异性的记忆性B细胞的狂犬病病毒糖蛋白。

关键词：狂犬病病毒糖蛋白抗原特异性记忆性B细胞流式细胞术

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树鼩粪便中病毒三种浓缩方法的效果比较

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实验动物科学 2018年第2期35卷 38-41,46页

作者：陈玲霞尹博文苗雨润宋庆凯李晓飞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室树鼩种质资源中心昆明650118

目的比较树鼩粪便中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为病毒浓缩方法的最佳选择提供依据。方法将指示病毒(树鼩呼肠孤病毒,tree shrew’s reovirus,TRV)加入经离心过滤处理后的野生树鼩粪便上清中,采用PEG(聚乙二醇,polyehhyle... 详细信息

目的比较树鼩粪便中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为病毒浓缩方法的最佳选择提供依据。方法将指示病毒(树鼩呼肠孤病毒,tree shrew’s reovirus,TRV)加入经离心过滤处理后的野生树鼩粪便上清中,采用PEG(聚乙二醇,polyehhylene glycol)沉淀结合超声分离法、铁离子絮凝的化学方法和GBviroFast病毒浓缩试剂盒对树鼩粪便上清分别进行浓缩,经实时荧光定量PCR技术对指示病毒进行绝对定量,比较各方法的浓缩效果。结果 TRV病毒悬液的载量为1.34E+05;铁离子絮凝的化学方法浓缩的TRV载量为1.86E+04,浓缩效率为49.57%;GBviroFast病毒浓缩试剂盒浓缩的TRV载量为0.98E+04,浓缩效率为26.12%;PEG沉淀结合超声分离法浓缩的TRV载量为2.30E+03,浓缩效率为6.13%。结论三种方法均能浓缩粪便上清中低浓度的肠道病毒,铁离子絮凝方法最佳,GBviroFast病毒浓缩试剂盒其次,PEG结合超声分离效果最差。

关键词：实时荧光定量PCR 病毒浓缩粪便树鼩

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