检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药生物技术 2014年第4期9卷 300-302,293页

作者：李良邵荣光中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室北京100050

近年来抗肿瘤抗体药物在基础研发、临床应用等方面都得到了快速发展。但现有抗体药物单独使用抗肿瘤疗效有限，临床上多与化疗药物联合应用，且多数初始接受抗体治疗有效的患者易产生耐药。抗体药物偶联物（antibody drug conjugates，A... 详细信息

近年来抗肿瘤抗体药物在基础研发、临床应用等方面都得到了快速发展。但现有抗体药物单独使用抗肿瘤疗效有限，临床上多与化疗药物联合应用，且多数初始接受抗体治疗有效的患者易产生耐药。抗体药物偶联物（antibody drug conjugates，ADCs）在提高抗体药物的治疗效果、克服耐药和充分利用抗体靶向性方面具有独特优势。目前，ADCs 俨然已成为新型抗肿瘤抗体药物研发的重点。本文拟对现有ADCs 研究现状作一简要概述。

关键词：抗体药物药物偶联物抗肿瘤抗体临床应用治疗效果肿瘤疗效联合应用化疗药物

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抗CD30抗体药物研究进展

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中国医药生物技术 2014年第4期9卷 306-309,315页

作者：王蓉苗庆芳中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室北京100050

CD30是肿瘤坏死因子受体超家族（tumor necrosis factor receptor superfamily，TNFRSF）成员之一，属于 I 型跨膜糖蛋白，过表达于霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma， HL）和间变性大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphomas， ALCL），低表达于非病理状态下活化的 T 细胞、B 细胞表面，而正常细胞不表达[1]。早期研究表明，CD30参与细胞活化和分化，NF-κB 等信号的传导以及 T 细胞免疫激活等[2]。目前的研究证实 CD30与细胞的增殖和死亡密切相关[3]，其胞内部分可与 TNFR 相关因子（TNFR associated factor，TRAF）家族多个成员相互作用，既能通过 JNK 和p38途径介导细胞的凋亡，又能通过 NF-κB 途径介导细胞的活化[4-5]。CD30激活后其胞外部分很快被蛋白酶降解，形成可溶性的 sCD30。正常情况下人体血清中的 sCD30含量很低，但在许多病理状态下，sCD30水平会明显升高，可作为疾病诊断的指标。由于 sCD30在 HL 和 ALCL 患者血清中的含量升高，因此可作为肿瘤标志物[6]。

关键词： sCD30 间变性大细胞淋巴瘤抗体药物 receptor lymphoma 受体超家族跨膜糖蛋白 NF-κB

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以胰岛新生相关蛋白启动子为靶点的基因表达上调剂筛选模型的建立与初步应用

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中国医药生物技术 2014年第5期9卷 335-340页

作者：张许萌王林林任浩何琪杨陈汝贤解云英中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学室北京100050

目的建立以胰岛新生相关蛋白启动子为靶点的高通量筛选模型,用于胰岛新生相关蛋白基因表达上调剂的筛选。方法以叙利亚金黄地鼠基因组DNA为模板扩增胰岛新生相关蛋白核心启动子序列,克隆至pGL4.17质粒载体构建重组质粒。采用脂质体介导... 详细信息

目的建立以胰岛新生相关蛋白启动子为靶点的高通量筛选模型,用于胰岛新生相关蛋白基因表达上调剂的筛选。方法以叙利亚金黄地鼠基因组DNA为模板扩增胰岛新生相关蛋白核心启动子序列,克隆至pGL4.17质粒载体构建重组质粒。采用脂质体介导的方法将重组质粒和内参质粒pRL-TK共转染金黄地鼠胰岛β细胞HIT-T15,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶的表达活性。对瞬时转染条件进行优化,以豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯作为阳性对照来评价模型的有效性,并利用该细胞模型对本研究所的化合物库进行筛选。结果构建了重组荧光素酶报告基因质粒pGL4.17-INGAP,并成功转染HIT-T15细胞株。对模型进行优化后,应用阳性对照对其进行评价,Z'因子为0.57,适用于进行高通量筛选。用该模型筛选了本所化合物库,其中白藜芦醇显示出较好的上调作用,EC50为1.6μg/ml。结论成功建立了以胰岛新生相关蛋白启动子为靶点的基因表达上调剂筛选模型。

关键词：转录启动子药物评价,临床前胰岛新生相关蛋白

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以丙氨酸消旋酶为靶点的高通量抗结核药物筛选模型的建立及应用

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中国医药生物技术 2014年第2期9卷 116-123页

作者：周爽蒙建洲关艳胡辛欣司书毅肖春玲中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所国家新药(微生物)筛选实验室北京100050

目的建立以结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶为靶点的新型高通量抗结核药物筛选模型，筛选丙氨酸消旋酶的抑制剂，获得以丙氨酸消旋酶为靶点的新型抗结核药物先导物。方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组为模板，pET28a表达质粒为载体，将 alr ... 详细信息

目的建立以结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶为靶点的新型高通量抗结核药物筛选模型，筛选丙氨酸消旋酶的抑制剂，获得以丙氨酸消旋酶为靶点的新型抗结核药物先导物。方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组为模板，pET28a表达质粒为载体，将 alr 基因克隆至 pET28a ，构建pET28a：alr 重组表达质粒，表达并纯化得到重组结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶；通过测定反应产物 NADH 在340 nm处光密度变化速率，检测酶反应活性，构建并优化该酶抑制剂的高通量筛选模型；应用该模型对化合物库进行筛选；测定活性化合物 IC50以及对结核分枝杆菌的 MIC。结果成功构建了结核分枝杆菌 alr 基因的表达载体；得到了纯度较高的重组丙氨酸消旋酶，测得该酶的比活力为13.53 kU/mg；所建立的丙氨酸消旋酶高通量筛选模型稳定性高，符合高通量筛选的要求；通过对70000个化合物进行筛选，得到了5个活性较高的化合物，其中，IMB-XZ5对结核分枝杆菌的 MIC 为4-8μg/ml，且对结核分枝杆菌的作用具有较高的特异性。结论建立了稳定性好、灵敏度较高的结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶抑制剂高通量筛选模型，应用该模型筛选得到了具有较好抗结核活性的丙氨酸消旋酶抑制剂。

关键词：丙氨酸消旋酶抗结核药酶抑制剂高通量筛选

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磷酸化蛋白EBP50通过降低ERK1/2活性抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖能力

磷酸化蛋白EBP50通过降低ERK1/2活性抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖能力

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第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：刘虹马艳邵荣光中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室

＜正＞目的探讨磷酸化蛋白EBP50对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响及其潜在机制研究。方法使用pGPU6/Neo载体构建稳定敲除EBP50表达的MCF-7细胞株,使用western blot检测乳腺癌细胞中EBP50、c-myc、p-ERK1/2以及ERK1/2的表达,使用磺酰罗丹... 详细信息

＜正＞目的探讨磷酸化蛋白EBP50对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响及其潜在机制研究。方法使用pGPU6/Neo载体构建稳定敲除EBP50表达的MCF-7细胞株,使用western blot检测乳腺癌细胞中EBP50、c-myc、p-ERK1/2以及ERK1/2的表达,使用磺酰罗丹明B染色方法检测乳腺癌细胞增殖。结果使用pGPU6/Neo载体可以稳定地降低MCF-7细胞中EBP50的表达,敲除EBP50可以促进MCF-7增殖,同时促进c-myc的表达,上调ERK1/2的磷酸化水平,但不影响ERK1/2的表达。结论 EBP50可以通过抑制ERK1/2活性,抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖能力,上述结果为研究乳腺癌发生机制提供了一定的参考意义。

关键词：乳腺癌磷酸化蛋白EBP50 细胞增殖信号调节激酶

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G3BP1参与乳腺癌β-catenin信号通路的调控

G3BP1参与乳腺癌β-catenin信号通路的调控

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第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：马艳刘虹张浩邵荣光中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室

目的探讨G3BP1对人乳腺癌细胞MCF-7细胞β-catenin信号通路的调控作用。方法在MCF-7细胞中,使用pcDNA3.1-G3BP1质粒上调或siRNA-G3BP1下调G3BP1,使用Western blot检测人乳腺癌细胞中β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β的表达情况。结果使用... 详细信息

关键词：乳腺癌细胞 siRNA 信号通路 catenin G3BP1

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人载脂蛋白A-I表达上调剂的发现与活性研究

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中国医药生物技术 2014年第2期9卷 95-102页

作者：杜郁贾晓健王丽王丽非姜华军杨帆司书毅杨媛洪斌中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050 中国医学科学院国家新药(微生物)筛选实验室北京100050

目的筛选上调人载脂蛋白A-I(ApoA-I)基因表达的新型活性化合物,并在表达和功能水平对其作用进行研究。方法利用人ApoA-I基因表达上调剂筛选模型对化合物库进行筛选;对发现的活性化合物在ApoA-I启动子水平进行量效关系研究;利用实时荧光... 详细信息

目的筛选上调人载脂蛋白A-I(ApoA-I)基因表达的新型活性化合物,并在表达和功能水平对其作用进行研究。方法利用人ApoA-I基因表达上调剂筛选模型对化合物库进行筛选;对发现的活性化合物在ApoA-I启动子水平进行量效关系研究;利用实时荧光定量RT-PCR检测ApoA-I mRNA的表达水平;利用Western blot、ELISA和流式细胞技术检测ApoA-I的蛋白表达;利用胆固醇流出试验检测ApoA-I介导的巨噬细胞胆固醇外流的情况。结果从20 000样次化合物筛选中得到活性化合物5238B-69,在一定浓度范围内存在转录调控活性的量-效关系,当化合物浓度为0.30μg/ml时,上调ApoA-I表达活性达到最高值(408%),EC50为0.01μg/ml。5238B-69能显著上调HepG2细胞中ApoA-I mRNA的水平;同时,Western blot结果显示5238B-69能增加HepG2细胞ApoA-I蛋白的表达。ELISA结果显示,与对照相比,5238B-69作用48 h时,胞外ApoA-I水平增加了48%,流式细胞检测表明,5238B-69作用24 h后,胞内ApoA-I蛋白水平增加了21.4%。功能分析试验显示,5238B-69作用HepG2细胞上调生成的ApoA-I,能促进巨噬细胞RAW264.7内[3H]标记的胆固醇的流出。结论得到一个具有上调ApoA-I表达的活性化合物,在提高ApoA-I表达水平和生物学功能方面均有明显的效果。

关键词：载脂蛋白A-I 基因表达调控动脉粥样硬化转录水平

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鲑鱼降钙素新型注射用温度敏感原位凝胶系统的构建及评价

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中国医药生物技术 2014年第3期9卷 196-201页

作者：丁维明李艳芳李桂玲中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所制剂室北京100050 北京大学第三医院中心实验室 100191

目的构建鲑鱼降钙素新型注射用温度敏感原位凝胶系统并对其胶凝特性和降血钙效应进行评价。方法以泊洛沙姆F127为主要基质材料,复合使用泊洛沙姆F68,制备鲑鱼降钙素注射用温度敏感原位凝胶给药系统,以胶凝温度、胶凝时间、流变学、质构... 详细信息

目的构建鲑鱼降钙素新型注射用温度敏感原位凝胶系统并对其胶凝特性和降血钙效应进行评价。方法以泊洛沙姆F127为主要基质材料,复合使用泊洛沙姆F68,制备鲑鱼降钙素注射用温度敏感原位凝胶给药系统,以胶凝温度、胶凝时间、流变学、质构特性为考察指标,对该凝胶系统性质进行评价;采用大鼠眼眶取血,钙显色法监测体内血清钙离子浓度,对该凝胶系统降血钙效应进行研究。结果所制备的鲑鱼降钙素注射用温度敏感原位凝胶的胶凝温度为(35.3±1.3)℃,胶凝时间为(108.3±5.5)s,在25℃条件下为流动的液体,原位凝胶的黏度和黏滞力极低,方便注射给药,当温度增至37℃时能够迅速发生相转变,黏度和黏滞力等质构特性数据显著增加,成为具有一定胶凝强度的半固体;大鼠降血钙效应结果显示,该给药系统具有明显的缓释作用,其24 h时血钙浓度明显低于普通注射剂组,相对于普通注射剂的药理活性为138.6%。结论温度敏感原位凝胶用于鲑鱼降钙素的注射给药,是一种很有潜力的递送系统。

关键词：降钙素泊洛沙姆温度敏感原位凝胶

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西多福韦对人宫颈癌细胞CaSki内人乳头瘤病毒16抑制作用研究

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中国医药生物技术 2014年第5期9卷 347-352页

作者：韩芳陆巧妮徐力昆窦媛媛李玉环中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所生化室北京100050 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的从抗病毒角度探讨西多福韦对宫颈癌细胞CaSki内人乳头瘤病毒16(HPV16)的抑制作用及对细胞周期的影响。方法用MTT法检测西多福韦对细胞的毒性;用实时定量PCR法检测其对病毒E6、E7 mRNA水平的影响;用Western blot方法检测其对病毒蛋... 详细信息

目的从抗病毒角度探讨西多福韦对宫颈癌细胞CaSki内人乳头瘤病毒16(HPV16)的抑制作用及对细胞周期的影响。方法用MTT法检测西多福韦对细胞的毒性;用实时定量PCR法检测其对病毒E6、E7 mRNA水平的影响;用Western blot方法检测其对病毒蛋白E6、E7和细胞抑癌蛋白p53、pRb表达水平的影响;用流式细胞法检测其对宫颈癌细胞周期的影响。结果西多福韦对宫颈癌细胞毒性较正常细胞大。可使HPV16阳性宫颈癌细胞CaSki内E6、E7 mRNA和蛋白水平降低,最大抑制率分别为(33.38±8.00)%、(28.32±2.73)%和98.92%、97.46%;可以使p53、pRb蛋白水平升高,最大浓度时可以上调12.06和3.53倍;对HPV16阴性宫颈癌细胞C-33A p53蛋白表达无影响,但可提高pRb蛋白水平;可导致CaSki和C-33A细胞发生S期阻滞,最高浓度组细胞相对对照组S期分别增加22.83%和67.64%。结论西多福韦可以在对细胞无毒的浓度下,抑制宫颈癌细胞内的HPV16,诱导宫颈癌细胞发生S期阻滞。

关键词：抗病毒药人乳头瘤病毒 16 宫颈肿瘤西多福韦

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过表达Tribbles同源蛋白3促进成纤维细胞分泌I型胶原的研究

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中国医药生物技术 2014年第1期9卷 37-42页

作者：刘虹谢琼李勇枝薛春美王静王佳平中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室北京100050 中国航天员科研训练中心航天医学基础与应用国家重点实验室北京100094

目的探讨过表达Tribbles同源蛋白3对小鼠成纤维细胞3T3-NIH分泌胶原的影响。方法使用腺病毒载体过量表达Tribbles同源蛋白3,使用PCR以及Western blot方法检测Tribbles同源蛋白3的过量表达情况,使用天狼猩红染色试剂盒以及Western blot... 详细信息

目的探讨过表达Tribbles同源蛋白3对小鼠成纤维细胞3T3-NIH分泌胶原的影响。方法使用腺病毒载体过量表达Tribbles同源蛋白3,使用PCR以及Western blot方法检测Tribbles同源蛋白3的过量表达情况,使用天狼猩红染色试剂盒以及Western blot检测胶原的表达。结果使用过量表达Tribbles同源蛋白3的腺病毒载体可以增加成纤维细胞3T3-NIH中Tribbles同源蛋白3的转录水平以及蛋白水平的表达,并增加3T3-NIH细胞中I型胶原的蛋白表达水平,降低III型胶原的蛋白表达水平。结论过量表达Tribbles同源蛋白3可以促进小鼠成纤维细胞I型胶原的表达与分泌。

关键词：辅助病毒胶原I型 Tribbles同源蛋白3

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