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阿尔采末病淀粉样前体蛋白(APP)和早老素-1(PS-1)双重基因稳定转染细胞系的建立

中国药理学通报 2004年第5期20卷 508-511页

作者：梁平潘扬杏赵雪梅杜洪震张冀民中国医学科学院基础医学研究所病理室中国协和医科大学基础医学院北京100005 美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心

目的　构建APP751和PS 1(M14 6L)双重基因稳定转染的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ,以用于 β 分泌酶或γ 分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选。方法　从人胎盘基因文库中用多聚酶链反应 (PCR)方法扩增野生型和突变型PS 1(M14 6L)基因 ,... 详细信息

目的　构建APP751和PS 1(M14 6L)双重基因稳定转染的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ,以用于 β 分泌酶或γ 分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选。方法　从人胎盘基因文库中用多聚酶链反应 (PCR)方法扩增野生型和突变型PS 1(M14 6L)基因 ,并重组克隆到PCI neo质粒 ,用脂质体 (Lipo fectAmine)法将野生型和突变型 (M14 6L)PS 1转染至含APP751表达基因的CHO细胞 ,选择培养液筛选能稳定表达目的基因的CHO细胞株。用免疫沉淀和ELISA测定分析细胞表达产物。结果　建立了数株能表达Aβ和PS 1的CHO细胞。在转染细胞株中高表达的SP 1为全长 4 5kd的PS 1蛋白 ;野生型PS 1和突变型PS 1(M14 6L)以及单纯APP751转染的CHO细胞株均可分泌Aβ多肽 ,且突变型PS 1(M14 6L)转染的细胞株分泌到条件培养液中的Aβ1～ 42 比其它细胞株增加了近两倍。结论　突变型PS 1(M14 6L)的高表达可促使Aβ1～ 42 的分泌增加。我们建立的PS 1和APP双重基因稳定转染的CHO细胞株模型 ,可用于 β 分泌酶或γ

关键词： β-淀粉样变多肽早老素-1 β-或γ-分泌酶基因转染

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羟苯氨酮激活家兔血管平滑肌细胞钙敏感钾通道

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药学学报 2004年第2期39卷 101-104页

作者：李安龙刘忠武朱丽霞张德昌叶益新中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005 中国中医研究院针灸所北京100700

目的　研究羟苯氨酮 (oxyphenamone ,Oxy)扩张血管作用机理。方法　用全细胞膜片钳技术 ,监测家兔肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流变化以及Oxy对其的影响。结果　 0 1μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,冲洗后恢... 详细信息

目的　研究羟苯氨酮 (oxyphenamone ,Oxy)扩张血管作用机理。方法　用全细胞膜片钳技术 ,监测家兔肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流变化以及Oxy对其的影响。结果　 0 1μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,冲洗后恢复至给药前水平 ;0 0 1～ 10 μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,且呈现浓度依赖性。

关键词：血管平滑肌羟苯氨酮全细胞膜片钳技术心力衰竭钙敏感钾通道

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人IgAFc受体的研究进展

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中国免疫学杂志 2004年第4期20卷 286-289页

作者：郭丽华张伟中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005

人IgA Fc受体,即FcαRI(CD89),属于免疫球蛋白超家族,表达于单核巨噬细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等.FcαRI能特异性结合血清型和分泌型IgA1和IgA2,引起一系列生物学效应,因此它在机体免疫防御中起着非常重要的作用.

关键词：人 IgA Fc受体结构特点信号转导生物学功能免疫球蛋白

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金龙胶囊(JLC)对肿瘤细胞诱导分化作用的研究

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中国肿瘤临床 2004年第7期31卷 380-383页

作者：刘玉琴高进顾蓓李建生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室北京市100005 北京鲜动物药研制中心

目的:观察鲜动物药金龙胶囊(JLC)对肿瘤细胞的诱导分化作用。方法:利用体外细胞培养、MTT、NBT染色及吞噬功能测定等方法,观察在不同浓度金龙胶囊作用下人早幼粒白血病细胞系(HL-60)的细胞形态和功能的变化。以维甲酸(RA)作阳性对照。结... 详细信息

目的:观察鲜动物药金龙胶囊(JLC)对肿瘤细胞的诱导分化作用。方法:利用体外细胞培养、MTT、NBT染色及吞噬功能测定等方法,观察在不同浓度金龙胶囊作用下人早幼粒白血病细胞系(HL-60)的细胞形态和功能的变化。以维甲酸(RA)作阳性对照。结果:在1×10-6mg/ml浓度以下金龙胶囊在细胞培养中对细胞的存活没有影响。HL-60细胞在1×10-6和10-9mg/ml作用3或5天后,早幼粒细胞比例减少,中、晚幼粒细胞比例显著增高,与维甲酸的作用相似。金龙胶囊作用后HL-60细胞的NBT还原能力和吞噬功能也有明显升高,与维甲酸作用相似。结论:金龙胶囊可明显促进HL-60细胞形态和功能上分化、成熟,说明金龙胶囊对HL-60细胞具有明显诱导分化作用。

关键词：实验肿瘤金龙胶囊肿瘤细胞分化诱导

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中药复方CHPⅡ对PDAPP^(V717I)转基因小鼠脑组织病变的影响

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解剖学报 2004年第6期35卷 622-625页

作者：张建民胡愉王红孔庆利刘庆丰何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005 济南大学校医院济南250002

目的　研究中药复方 (CHPII)对PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内病理改变的影响。　方法　通过免疫组织化学染色检测CHPⅡ对PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内淀粉样蛋白沉淀和反应性星形胶质细胞活化程度的影响。　结果　CHPⅡ治疗组PDAPPV7... 详细信息

目的　研究中药复方 (CHPII)对PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内病理改变的影响。　方法　通过免疫组织化学染色检测CHPⅡ对PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内淀粉样蛋白沉淀和反应性星形胶质细胞活化程度的影响。　结果　CHPⅡ治疗组PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内淀粉样蛋白沉淀的水平明显低于对照组和脑复康组 ,反应性星形胶质细胞的活化程度也明显降低。　结论　CHPⅡ能够明显降低PDAPPV71 7I转基因小鼠脑组织内淀粉样蛋白沉淀 ,降低脑组织内的神经炎症反应。

关键词：阿尔茨海默病 PDAP^V717I转基因小鼠中药淀粉样蛋白神经炎症

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美国大都市医疗反应系统及其对我国公共卫生体系建设的启示

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中华预防医学杂志 2004年第4期38卷 276-278页

作者：张慧黄建始胡志民中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病教研室北京100050 中国协和医科大学

20世纪90年代以来,美国从国家安全的高度防备潜在的生物、化学和放射性物质的恐怖袭击,投入了大量的资金建设和完善突发公共卫生事件应对体系[1].大都市医疗反应系统(metropolitan medical response system, MMRS)就是其中的一个重要组... 详细信息

20世纪90年代以来,美国从国家安全的高度防备潜在的生物、化学和放射性物质的恐怖袭击,投入了大量的资金建设和完善突发公共卫生事件应对体系[1].大都市医疗反应系统(metropolitan medical response system, MMRS)就是其中的一个重要组成部分,涉及公共卫生、突发事件的管理、执法监督、医疗服务、科研机构和第一现场应急人员(如消防员、救护人员等),是一个多学科全方位的综合反应系统[2]。

关键词：美国都市医疗反应系统公共卫生体系建设中国

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DIFF33H参与TRAIL诱导的人Jurkat T淋巴细胞白血病细胞凋亡调控

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中国免疫学杂志 2004年第12期20卷 809-812页

作者：邹耀中刘彦信(指导) 郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的 :研究DIFF33H在人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡中的表达规律及其生物学功能。方法 :采用PCR扩增DIFF33HcDNA ,Northernblot分析DIFF33H的mRNA表达 ,MTT法测定细胞凋亡。结果 :在重组可溶性TRAIL诱导的人T淋巴细胞白血病细胞Jurka... 详细信息

目的 :研究DIFF33H在人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡中的表达规律及其生物学功能。方法 :采用PCR扩增DIFF33HcDNA ,Northernblot分析DIFF33H的mRNA表达 ,MTT法测定细胞凋亡。结果 :在重组可溶性TRAIL诱导的人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡过程中 ,DIFF33HmRNA的表达水平随着Jurkat细胞的凋亡而下降 ,并对重组可溶性TRAIL的作用具有浓度和时间的依赖性。在抗肿瘤药物 5 FU诱导肿瘤细胞凋亡过程中 ,DIFF33H的mRNA表达水平也显著下降。结论 :DIFF33H参与人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡的调控。

关键词： DIFF33H TRAIL 5-FU T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat细胞凋亡

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人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗

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解剖学报 2004年第3期35卷 282-286页

作者：孟雁苏牧中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　探讨人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗效果。　方法　将构建的 7.1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入人Wilson病动物模型LEC(long EvansCinnamon)大鼠受精卵 ,建立转基因功能... 详细信息

目的　探讨人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗效果。　方法　将构建的 7.1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入人Wilson病动物模型LEC(long EvansCinnamon)大鼠受精卵 ,建立转基因功能恢复大鼠模型。以Westernbolt检测人ATP7B在转基因大鼠肝内的表达 ,用同窝无转基因大鼠及正常野生型LEA大鼠作对照 ,对 6～ 16周龄的转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平进行连续测定 ,同时取 13周龄转基因大鼠的肝组织进行病理学和组织化学分析。　结果　人ATP7B基因在转基因大鼠的肝组织中获得正确和完整的表达 :12周龄前后 ,与同窝无转基因大鼠相比 ,转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平明显降低 ,肝组织的炎性病变显著减轻 ,肝细胞内铜的蓄积减少 ;至 16周龄 ,转基因大鼠的临床表型未见异常 ,存活率达 10 0 %。说明人ATP7B的导入 ,成功地抑制了Wilson病动物模型LEC大鼠的暴发性肝炎的发生。结论　Wilson病肝炎的发生与ATP7B基因功能缺陷引起的铜蓄积有直接关系。基因转移有可能是一种有效的治疗Wilson病的方法。

关键词：人ATP7B基因基因治疗暴发性肝炎 LEC大鼠

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阿尔采末病Aβ多肽基因的高效表达及纯化研究

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中国药理学通报 2004年第6期20卷 644-647页

作者：杜洪震赵雪梅潘杨杏张冀民梁平中国医学科学院.协和医科大学基础医学研究所病理室北京100005 美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心

目的　通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法　采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经C... 详细信息

目的　通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法　采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经ChitinBeads亲和层析柱分离纯化 ;SDS PAGE电泳 ,毛细管区带电泳及免疫印迹法等鉴定。结果　重组的Intein Aβ基因在BL2 1中获得高效表达 ,筛选出稳定高效表达的BL2 1(DE3)细胞株 ;融合蛋白表达量可达全菌蛋白的 6 0 % ;表达产物经ChitinBeads亲和层析纯化后 ,其纯度可达 98%以上 ,并具有与Aβ多肽相同的分子量及免疫学活性。结论　Aβ多肽基因在IMPACT TWIN系统中可获得高效表达 ,利用ChitinBeads亲和层析方法可将表达的Aβ多肽进行快速、简便、无酶化的高效分离纯化。

关键词：阿尔采末病 Aβ多肽基因表达亲和层析

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出生重量指数对中年罹患代谢综合征的预测作用

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中华预防医学杂志 2004年第4期38卷 221-225页

作者：米杰程红赵小元张志坤丁秀原侯冬青张孔来首都儿科研究所流行病学研究室北京100020 华北煤炭医学院流行病学教研室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室

目的　探讨出生重量指数与中年期罹患代谢综合征 (MS)的联系。方法　对 975名“宫内发育与成人疾病”队列研究人群 (男 4 94人、女 4 81人 ,年龄 4 1～ 5 2岁 )的身高、体重、血压和血脂进行了测定 ,并用稳态模式评估法计算胰岛素抵抗... 详细信息

目的　探讨出生重量指数与中年期罹患代谢综合征 (MS)的联系。方法　对 975名“宫内发育与成人疾病”队列研究人群 (男 4 94人、女 4 81人 ,年龄 4 1～ 5 2岁 )的身高、体重、血压和血脂进行了测定 ,并用稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数。根据 1999年WHO定义进行MS诊断。采用多因素logistic回归方法分析出生重量指数对中年期MS患病风险的预测作用 ,及其与成年体重指数的交互作用。结果　人群MS检出率为 180例 (18 7% ) ,出生重量指数

关键词：出生重量指数中年人代谢综合征预测作用

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