检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2009年第8期42卷 533-536页

作者：王红吕桂霞张燕魏欣净胡素泉沈永年刘维达山东大学附属省立医院皮肤科济南250021 滨州医学院病理学教研室中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所

目的探讨两株具有不同最高生长温度的葡萄孢弗隆那霉临床分离株的致病力、基因型的差异。方法将在37℃生长良好的江苏株和在36℃不生长的河南株葡萄孢弗隆那霉造成实验性感染，观察动物的发病、死亡以及各脏器受累情况。提取两临床分离... 详细信息

目的探讨两株具有不同最高生长温度的葡萄孢弗隆那霉临床分离株的致病力、基因型的差异。方法将在37℃生长良好的江苏株和在36℃不生长的河南株葡萄孢弗隆那霉造成实验性感染，观察动物的发病、死亡以及各脏器受累情况。提取两临床分离株的DNA进行随机扩增多态DNA（RAPD）分析以及核糖体内转录间隔区（ITS区）扩增，并对产物测序。结果江苏株可造成免疫正常及免疫抑制小鼠的暗色丝孢霉病，前者死亡率为30％，后者死亡率65％，两组间差异有统计学意义。免疫抑制组小鼠的肺脏感染率为100％，明显高于其他脏器，差异具有统计学意义；肝脏直接镜检阳性率为64．7％，组织培养阳性率为70．5％；免疫正常组各脏器感染阳性率差异无统计学意义，肺脏阳性率为57．8％，肝脏为42．1％。免疫抑制组小鼠的肺脏感染率明显高于免疫正常组。河南株在免疫正常组和免疫抑制组均未见导致明确的感染。RAPD和ITS区测序结果显示，在ITS区的236位碱基处有一个碱基的差异（A—G）。结论两株菌具有不同的基因型；葡萄孢弗隆那霉江苏株可以导致免疫抑制和免疫正常小鼠的系统性暗色丝孢霉病，前者的致死率显著高于后者，致病力与其免疫状态有关；免疫抑制状态下，肺脏是其最常受累的器官。

关键词：葡萄孢弗隆那霉毒力模型,动物

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梅毒螺旋体对人脑微血管内皮细胞趋化因子配体6、8、10表达的影响

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中华皮肤科杂志 2018年第5期51卷 358-362页

作者：吴凡胡文龙许卜方王千秋中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所性病防治室南京210042 南京医科大学附属逸夫医院皮肤科 211100

目的探讨梅毒螺旋体对人脑微血管内皮细胞（HBMEC）趋化因子配体（CXCL）表达的影响。方法将培养的HBMEC分为4组，分别加入用细胞培养液稀释的有活性的梅毒螺旋体、灭活的梅毒螺旋体、脂多糖和细胞培养液（梅毒螺旋体组、灭活梅毒螺旋... 详细信息

目的探讨梅毒螺旋体对人脑微血管内皮细胞（HBMEC）趋化因子配体（CXCL）表达的影响。方法将培养的HBMEC分为4组，分别加入用细胞培养液稀释的有活性的梅毒螺旋体、灭活的梅毒螺旋体、脂多糖和细胞培养液（梅毒螺旋体组、灭活梅毒螺旋体组、脂多糖组和空白对照组）刺激6、12、24h，用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验分别检测细胞中CXCL6、CXCL8和CXCL10基因和蛋白表达水平。利用Transwell小室细胞迁移实验检测梅毒螺旋体刺激后HBMEC对人早幼粒细胞白血病细胞HL-60的趋化作用。结果在各时间点，梅毒螺旋体组HBMEC中CXCL6、CXCL8和CXCL10的mRNA表达水平均显著高于空白对照组和灭活梅毒螺旋体组（P〈0．05），而灭活梅毒螺旋体组与空白对照组之间差异无统计学意义（均P〉0．05）。和脂多糖组相比，梅毒螺旋体组的CXCL6和CXCL8mRNA表达降低（P〈0．05），CXCL10差异无统计学意义（P〉0．05）。在各时间点，梅毒螺旋体组HBMEC培养上清液中CXCL6和CXCL8含量均高于空白对照组和灭活梅毒螺旋体组（均P〈0．05），而后2组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。各时间点培养上清液中CXCL10含量在梅毒螺旋体组、灭活梅毒螺旋体组和空白对照组间差异无统计学意义（均P〉0．05）；梅毒螺旋体组Transwell小室下室中迁移的HL-60细胞数量（A570）均高于另2组（均P〈0．05）。结论有活性的梅毒螺旋体可上调HBMEC中CXCL6、CXCL8和CXCL10基因表达水平，增加CXCL6和CXCL8的分泌，增强HBMEC对HL．60细胞的趋化作用，这可能在神经梅毒的发病中起一定作用。

关键词：神经梅毒苍白密螺旋体趋化因子类细胞迁移分析白细胞人脑微血管内皮细胞 HL-60细胞

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慢病毒介导shRNA沉默Nicastrin基因的人永生化角质形成细胞模型构建

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中华皮肤科杂志 2017年第4期50卷 268-272页

作者：毛秋霞张婉璐何艳艳贾苇雪 Yang Brooks 李莉李黎明张晓峰徐浩翔陈旭王宝玺李诚让中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 河南省人民医院皮肤科 Cutaneous Biology Research Center Massachusetts General Hospital 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院皮肤科

目的构建Nicastrin（NCT）基因的RNA干扰慢病毒表达载体，并在人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）上鉴定其沉默效率，构建NCT基因稳定下调的人永生化角质形成细胞模型，为后续研究NCT基因下调对角质形成细胞的生物学行为影响奠定实验... 详细信息

目的构建Nicastrin（NCT）基因的RNA干扰慢病毒表达载体，并在人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）上鉴定其沉默效率，构建NCT基因稳定下调的人永生化角质形成细胞模型，为后续研究NCT基因下调对角质形成细胞的生物学行为影响奠定实验基础。方法设计3个靶向NCT基因特异性短发卡RNA（shRNA）表达序列并连接到慢病毒表达质粒pGLV3/H1/GFP ＋ Puro中，成功构建慢病毒重组表达质粒，并通过测序鉴定。将构建的重组表达质粒与包装质粒共转染293T细胞，产生慢病毒颗粒，并测其滴度。将HaCaT细胞分为空白组（未感染病毒）、阴性对照组（NC组，感染空载病毒LV3-shNC）和干扰组（感染NCT-shRNA1、2、3慢病毒）。流式细胞仪检测慢病毒转染效率，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、Western印迹检测靶基因的沉默效率，筛选出沉默效果最佳的干扰序列。结果测序表明，NCT-shRNA慢病毒重组表达质粒构建成功。重组表达质粒与包装质粒共转染293T细胞后产生的慢病毒颗粒滴度为109 TU/ml。慢病毒感染HaCaT细胞后，流式细胞仪检测，慢病毒转染效率大于95%。qRT-PCR结果，与NC组相比，干扰组NCT mRNA表达量明显下降，其中NCT-shRNA1组NCT基因沉默效果最佳，干扰效率达到75%。Western印迹结果，与NC组相比，shRNA1组NCT蛋白表达抑制率为71.7%。结论成功筛选出高效NCT-shRNA干扰序列，构建NCT-shRNA慢病毒重组表达载体，并构建NCT基因稳定下调的人永生化角质形成细胞模型。

关键词：化脓性汗腺炎 RNA干扰慢病毒属角蛋白细胞 NCT基因模型,细胞

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16例皮肤结核分离菌株药敏试验分析

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中华皮肤科杂志 2009年第6期42卷 371-373页

作者：张彩萍季江林麟杨毅琴崔盘根冯雨苗岳晓玉赵亮曾学思吴勤学王洪生中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 苏州大学附属第二医院皮肤科南京市胸科医院结核病研究室

目的探讨结核分枝杆菌皮肤感染的耐药情况，为该病的临床治疗提供参考依据。方法分离培养的16株分枝杆菌经生化和分子生物学方法鉴定为结核分枝杆菌；采用国内公认的绝对浓度间接法分别检测16株结核分枝杆菌对异烟肼、链霉素、利福平和... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌皮肤感染的耐药情况，为该病的临床治疗提供参考依据。方法分离培养的16株分枝杆菌经生化和分子生物学方法鉴定为结核分枝杆菌；采用国内公认的绝对浓度间接法分别检测16株结核分枝杆菌对异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇四种药物的耐药情况；对其中2株链霉素耐药临床株进行rpsL基因扩增和DNA测序。结果16株结核分枝杆菌中，2株对链霉素耐药，对异烟肼、利福平和乙胺丁醇敏感；其余14株对利福平、异烟肼、乙胺丁醇和链霉素均敏感。2株链霉素耐药临床株中，1株rpsL基因43位密码子突变为AAG→AGG；另一株rpsL基因54位密码子突变为CGC→CAC。结论近5年收治的结核分枝杆菌皮肤感染患者耐药率不高，以链霉素耐药为主。

关键词：分枝杆菌,结核抗药性链霉素抗药性基因,rpsL

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中波紫外线对体外培养HaCaT细胞MAPK信号通路的影响

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中华皮肤科杂志 2015年第6期48卷 391-394页

作者：徐倩倩陈旭李莉徐松丁兰张云鞠梅李新宇施辛苏州大学附属第二医院 215004 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应.方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK... 详细信息

目的探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应.方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平;50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞,蛋白免疫印迹法测定照射后2、4、8、12h4个时间点,细胞ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平.使用Quantity One软件计算目的条带吸光度,以相应蛋白条带的吸光度值与GAPDH蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量.结果 7.5、10、20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8h,ERK1/2、JNK磷酸化水平明显上调（P＜0.05）,20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后p38磷酸化水平上调显著（P＜0.05）,且都在50 mJ/cm2照射后效应最为显著（P＜0.05）.50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8h,ERK1/2磷酸化产物水平出现上调,在处理后的12h,与对照组（10.277±0.320）比较,差异有统计学意义（44.844±2.023,P＜ 0.05）,而p38和JNK磷酸化产物水平在照射后2h即开始上调（P＜0.05）,4、8、12h,p38和JNK与对照相比,UVB照射后虽存在着显著地磷酸化水平差异（P＜0.05）,但随时间推移JNK磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化（P＜0.05）.结论在50 mJ/cm2中波紫外线照射后的HaCaT细胞中,ERK1/2、p38、JNK这3种MAPK信号通路产生了活化效应,具有一定的时间效应差异.

关键词：紫外线细胞,培养的角蛋白细胞信号传导 MAP激酶激酶激酶类

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面部损容性色素性疾病人工智能诊断模型的建立与评价

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临床皮肤科杂志 2021年第9期50卷 536-539页

作者：郭丽芳丁徽杨寅葛一平林彤中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所激光科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

目的:构建面部损容性色素性疾病的人工智能诊断模型,实现面部损容性色素性疾病的人工智能辅助诊断。方法:利用雀斑、黄褐斑、颧部褐青色痣、日光性黑子、太田痣、咖啡斑、白癜风的单反相机图像和YOLO(You Only Look Once)v5算法建立诊... 详细信息

目的:构建面部损容性色素性疾病的人工智能诊断模型,实现面部损容性色素性疾病的人工智能辅助诊断。方法:利用雀斑、黄褐斑、颧部褐青色痣、日光性黑子、太田痣、咖啡斑、白癜风的单反相机图像和YOLO(You Only Look Once)v5算法建立诊断模型,比较模型与我院以及基层医院皮肤科医生的诊断结果,评价模型的性能。结果:对于350张单反相机图像的诊断结果显示,模型对七种面部损容性色素性疾病的平均诊断准确率为94.29%,高于基层医院皮肤科医生(81.43%),与我院皮肤科医生(97.48%)相当。结论:面部损容性色素性疾病人工智能诊断模型显示出较好的性能,提供了一种较为客观、便捷的面部损容性色素性疾病的辅助诊断方法。

关键词：色素性疾病损容性人工智能诊断模型

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肿瘤坏死因子α基因启动子多态性与泛发性脓疱性银屑病相关性研究

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中华皮肤科杂志 2017年第12期50卷 879-882页

作者：龙福泉刘业强钱伊弘蒙秉新赵丽诗王千秋上海市皮肤病医院性病科 200043 上海市皮肤病医院病理科 200043 海南省人民医院皮肤科中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所性病临床防治室

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF？α）基因启动子区域多态性与泛发性脓疱性银屑病的相关性。方法检测对象为91例汉族泛发性脓疱性银屑病患者及102例汉族健康体检者，应用PCR及直接测序法分析TNF？α基因启动子区域？238、？308、？857... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF？α）基因启动子区域多态性与泛发性脓疱性银屑病的相关性。方法检测对象为91例汉族泛发性脓疱性银屑病患者及102例汉族健康体检者，应用PCR及直接测序法分析TNF？α基因启动子区域？238、？308、？857位点多态性。结果泛发性脓疱性银屑病患者与健康对照组TNF？α？238位点G/A等位基因频率差异有统计学意义（P = 0.003；OR = 4.819，95% CI：1.581 ~ 14.694），基因型GG与GA/AA在两组间的分布差异也有统计学意义（P = 0.006；OR = 4.455，95% CI：1.410 ~ 14.077）；TNF？α？308位点G/A等位基因频率以及基因型GG与GA/AA的分布在两组间差异无统计学意义（P值分别为0.794、0.786）；TNF？α？857位点C/T等位基因频率以及基因型CC与CT/TT的分布在两组间差异无统计学意义（P值分别为0.474、0.453）。结论 TNF？α？238G 〉 A多态性可能与泛发性脓疱性银屑病发病相关。

关键词：银屑病肿瘤坏死因子α 多态性单核苷酸转录启动子泛发性脓疱性银屑病

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梅毒IgA快速检测试剂诊断早期现症梅毒的应用性评估

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中华皮肤科杂志 2018年第5期51卷 372-375页

作者：韩燕魏万惠尹跃平 David Anderson 王红春 Mary L Garcia Huy Van 朱小宇陈凯陈祥生中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所中国疾病预防控制中心性病控制中心参比实验室南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所中国疾病预防控制中心性病控制中心南京210042 Burnet Institute

目的评估Burnet研究所自制的IgA快速检测试剂（POC）对早期梅毒的诊断性能。方法利用性病中心参比实验室库存的455份血清标本进行梅毒IgA-POC应用性评估，标本根据梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）及... 详细信息

目的评估Burnet研究所自制的IgA快速检测试剂（POC）对早期梅毒的诊断性能。方法利用性病中心参比实验室库存的455份血清标本进行梅毒IgA-POC应用性评估，标本根据梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）及IgM酶联免疫吸附试验（IgM-ELISA）结果分为未感染组、既往感染组和早期现症组。对3组标本进行IgA—POC盲样检测，评估其对现症梅毒的诊断能力。结果IgA—POC对早期现症组的诊断灵敏度为92．6％（147／163），对既往感染组的排除诊断特异性为72．22％（104／144）；对未感染的排除诊断特异性为97．97％（145／148），总特异性为85．27％，达到了WHO对梅毒快速诊断试剂的最低要求。IgA—POC对早期现症梅毒诊断灵敏度高于IgM—ELISA（59．51％）（Z=6．88，P〈0．05），但其对既往感染的排除诊断特异性低于lgM-ELISA（98．61％）（Z=6．18，P〈0．05），两种方法对未感染的排除诊断特异性差异无统计学意义（Z=1．16，P=0．25）。结论IgA—POC对早期现症梅毒的发现能力较IgM—ELISA强，可以应用于早期现症梅毒的筛查。

关键词：梅毒梅毒血清诊断即时检验

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广西地区淋球菌临床分离株对庆大霉素的药物敏感性研究

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中华皮肤科杂志 2023年第8期56卷 737-741页

作者：朱邦勇周潜韦江平甘泉黄寅杰尹跃平徐文绮广西壮族自治区皮肤病防治研究所中心实验室南宁530007 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院性病参比实验室南京210042

目的评估中国广西地区淋球菌临床分离株对庆大霉素的药物敏感性以及庆大霉素与其他7种抗生素最小抑菌浓度(MIC)之间的相关性。方法2020年12月至2021年12月在广西地区14个地级市的37家医疗机构收集淋球菌临床分离株584株,采用琼脂稀释法... 详细信息

目的评估中国广西地区淋球菌临床分离株对庆大霉素的药物敏感性以及庆大霉素与其他7种抗生素最小抑菌浓度(MIC)之间的相关性。方法2020年12月至2021年12月在广西地区14个地级市的37家医疗机构收集淋球菌临床分离株584株,采用琼脂稀释法测定淋球菌对头孢曲松、头孢克肟、阿奇霉素、大观霉素、青霉素、四环素、环丙沙星和庆大霉素的药物敏感性。将各抗生素MIC值进行以2为底数的对数转换,采用Spearman相关性分析评估庆大霉素MIC与其他7种抗生素MIC之间的相关性。结果庆大霉素的MIC范围为1~16 mg/L,MIC_(50)及MIC_(90)值分别为4、8 mg/L;361株(61.8%)庆大霉素MIC≤4 mg/L,为完全敏感菌株,223株(38.2%)MIC为8~16 mg/L,为中度敏感株,未见耐药株。淋球菌对阿奇霉素、青霉素、四环素、环丙沙星的耐药菌株数分别为136(23.3%)、415(71.1%)、339(58.0%)和574(98.3%),对头孢曲松和头孢克肟的低敏菌株数分别为17(2.9%)和6(1.0%),未发现对大观霉素耐药的菌株。Spearman相关分析显示,庆大霉素MIC与阿奇霉素、大观霉素、青霉素、四环素、环丙沙星MIC弱相关(均P<0.05),与头孢曲松、头孢克肟MIC之间无相关性(均P>0.05)。结论本研究中测试的所有淋球菌分离株均对庆大霉素表现出一定程度的敏感性,庆大霉素与其他抗生素之间存在交叉耐药性的可能性较小。

关键词：淋病奈瑟球菌庆大霉素类青霉素类微生物敏感性试验最小抑菌浓度

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小鼠真皮成纤维细胞成脂分化对金黄色葡萄球菌感染的抵抗效应及机制研究

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中华皮肤科杂志 2023年第7期56卷 630-635页

作者：刘惟诏段志敏王嘉宁李岷陈旭南京医科大学南京211166 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的探讨小鼠真皮成纤维细胞(MdFB)成脂分化过程抗金黄色葡萄球菌感染的效应及机制。方法从新生C57BL/6小鼠提取MdFB,采用脂肪诱导分化培养基培养48 h诱导成脂分化,之后采用分化维持培养基继续培养。采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)... 详细信息

目的探讨小鼠真皮成纤维细胞(MdFB)成脂分化过程抗金黄色葡萄球菌感染的效应及机制。方法从新生C57BL/6小鼠提取MdFB,采用脂肪诱导分化培养基培养48 h诱导成脂分化,之后采用分化维持培养基继续培养。采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)检测MdFB成脂分化0~6 d抗菌肽蛋白(CAMP)基因mRNA相对表达水平;采用Western印迹法检测MdFB成脂分化培养基上清液CAMP蛋白表达趋势。取12孔板每孔加入1 ml 1×10^(6) CFU MdFB,再加入1×10^(7) CFU灭活金黄色葡萄球菌悬液或磷酸盐缓冲液(对照)刺激,分别采用成脂分化培养基或普通培养基培养4 h,分为共同作用组、分化对照组、金葡菌刺激组、对照组,收集细胞,采用Western印迹及RT-PCR检测CAMP蛋白及mRNA表达。采用成脂分化5 d的MdFB培养基上清液培养金黄色葡萄球菌(5×10^(4) CFU/ml),在10~24 h内每2小时评估生长活性,以普通培养基培养的MdFB上清液(正常对照组)和不含细胞的培养基上清液(阴性对照组)作为对照。采用非配对t检验或方差分析比较组间差异。结果成脂分化后0、1、2、4、6 d时CAMP mRNA相对表达差异(1.14±0.74、68.04±12.72、683.12±38.06、1390.68±226.21、454.57±204.12)有统计学意义(F=50.08,P<0.001),1、2、4、6 d时均高于0 d时(t=9.09、31.03、10.63、3.85,均P<0.05),CAMP基因的表达呈先升后降趋势。培养基上清液中CAMP蛋白含量在第2~5天达到较高水平,之后下降。对照组、金葡菌刺激组、分化对照组、共同作用组MdFB CAMP蛋白(0.433±0.176、0.574±0.176、1.007±0.176、1.217±0.176)及mRNA相对表达(0.08±0.02、0.38±0.10、0.49±0.11、0.80±0.03)差异均有统计学意义(F=46.79、43.25,均P<0.05),共同作用组蛋白及mRNA相对表达均高于分化对照组、金葡菌刺激组、对照组(P<0.05)。成脂分化组细胞上清液培养金黄色葡萄球菌10 h时生长活性(0.053±0.015)均低于正常对照组、阴性对照组(0.109±0.015、0.106±0.015,t=11.30、13.26,均P<0.05),在培养10~24 h的余时间点成脂分化组生长活性均低于正常对照组及阴性对照组(均P<0.05)。结论MdFB在成脂分化过程中向胞外分泌抗菌肽蛋白,可抑制金黄色葡萄球菌的增殖。

关键词：成纤维细胞小鼠近交C57BL 金黄色葡萄球菌成脂分化固有免疫抗菌肽蛋白

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