检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2010年第5期31卷 294-299页

作者：张磊顾东生杜伟廷刘鹏霞卢士红杨仁池中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的通过高压尾静脉注射将携带attB和人凝血因子Ⅸ（hFⅨ）的质粒与表达phiC31的质粒共同导入血友病B小鼠肝脏细胞,检测目的质粒能否整合入小鼠基因组并持续表达.方法 ①构建表达hFⅨ并携带attB核心序列的真核表达载体attB-hFⅨ-pIRES... 详细信息

目的通过高压尾静脉注射将携带attB和人凝血因子Ⅸ（hFⅨ）的质粒与表达phiC31的质粒共同导入血友病B小鼠肝脏细胞,检测目的质粒能否整合入小鼠基因组并持续表达.方法 ①构建表达hFⅨ并携带attB核心序列的真核表达载体attB-hFⅨ-pIRES2-EGFP,并在体外验证该载体能否表达目的基因.②用高压尾静脉注射法将该载体与表达phiC31的质粒CMV-int共注入血友病B小鼠,attB-hFⅨ-pIRES2-EGFP单独注射为对照.③ELISA的方法检测hFⅨ在其体内的表达用出血时间评价血友病小鼠出血症状是否改善用巢式PCR检测attB-hFⅨ-pIRES2-EGFP是否整合到基因组的整合热点mpsL1（mouse pseudo-site from liver 1）位点.结果经鉴定,attB-hFⅨ-pIRES2-EGFP载体构建成功,并在体外表达hFⅨ.高压尾静脉注入血友病B小鼠24 h后,hFⅨ血清水平达到最高值为（1533±239）ng/ml,此时小鼠的出血症状明显改善.但是不论是否与CMV-int共注射,此后hFⅨ水平迅速下降,在注射后10 d内降到本底水平.巢式PCR的结果证实,attB-hFⅨ-pIRES2-EGFP整合到小鼠肝脏基因组的mpsL1位点.结论 phiC31可以将34 bp的attB最短序列整合到小鼠基因组的整合热点mpsL1 由CMV启动hFⅨ的能够瞬间高表达并有效改善血友病小鼠的出血症状但是外来DNA进入细胞后,无论是否整合到基因组均被迅速沉默,说明肺脏和肝脏对整合入基因组的CMV启动子表达调控的机制不尽相同,因此对用于基因治疗的裸DNA进行改进使其适合在靶器官表达是十分必要的.

关键词：位点特异性整合基因治疗血友病B 小鼠

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慢性淋巴细胞白血病的临床研究进展——2009美国血液学年会深度报道

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中华血液学杂志 2010年第9期31卷 647-648页

作者：李增军易树华邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

一年一度的美国血液学（ASH）年会是国际血液学界的盛事，也日益受到我国血液学工作者的重视。我们总结了2009年度（第51届）ASH会议上报道的慢性淋巴细胞白血病（CLL）的临床研究，以使国内医师熟悉国际CLL的最新治疗研究现状。

关键词：慢性淋巴细胞白血病血液学年会临床研究美国 2009年工作者 CLL 国际

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富甘氨酸寡核苷酸抗白血病细胞增殖作用的研究

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中国实验血液学杂志 2010年第1期18卷 25-30页

作者：李艳支蕾田征饶青贾海蓉王慧君王敏秘营昌中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

富甘氨酸寡核苷酸(G-rich oligonucleotides,GROs)是一类新型的磷酸二酯寡核苷酸,可以形成G-四聚体(G-quartet)结构,能诱导多种白血病细胞系的细胞周期停滞于S期,通过非反义途径发挥抑制生长作用。本研究旨在探讨GRO-26B对白血病细胞系... 详细信息

富甘氨酸寡核苷酸(G-rich oligonucleotides,GROs)是一类新型的磷酸二酯寡核苷酸,可以形成G-四聚体(G-quartet)结构,能诱导多种白血病细胞系的细胞周期停滞于S期,通过非反义途径发挥抑制生长作用。本研究旨在探讨GRO-26B对白血病细胞系的增殖抑制及对细胞周期和形态的影响,并探讨相关机制。采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞周期改变;Western blot观察细胞周期调控相关蛋白的表达变化;光学倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构改变。结果表明,实验药物GRO-26B对髓系白血病细胞系如U937、NB4等起作用,抑制细胞增殖,诱导细胞周期停滞于S期,进而导致细胞死亡。对淋巴细胞系如Jurkat、Nalm6的增殖抑制作用不明显,GRO-26B处理后可观察到细胞体积明显变大,部分细胞内可见大量空泡,部分晚期细胞皱缩,细胞核碎裂,逐渐死亡裂解。电子显微镜下超微结构变化更明显。GRO-26B处理的U937细胞周期蛋白B1表达下降(处理24小时即开始下降,72小时更加明显);CDC2表达增加。周期蛋白A、CDK2培养24小时表达无明显变化,72小时则不同程度升高。结论:GRO-26B明显抑制髓系白血病细胞系U937、NB4等的增殖,诱导细胞周期停滞于S期,细胞周期的停滞与细胞周期蛋白/细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)有关。

关键词： GRO 白血病细胞增殖细胞周期

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Wt1基因与Ph^＋白血病细胞系K562的生物学特性

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中国实验血液学杂志 2010年第3期18卷 564-569页

作者：李艳李晓燕王琳田征饶青贾海蓉王慧君王敏秘营昌中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

Wt1基因是与造血调控、白血病发生及治疗预后密切相关的双功能基因,在急性髓系白血病及慢性粒细胞白血病进展期呈高表达,且与预后呈负相关,已用于临床微量残留病的监测。WT1蛋白不同亚细胞定位发挥不同生物学功能。本研究旨在探讨Ph+白... 详细信息

Wt1基因是与造血调控、白血病发生及治疗预后密切相关的双功能基因,在急性髓系白血病及慢性粒细胞白血病进展期呈高表达,且与预后呈负相关,已用于临床微量残留病的监测。WT1蛋白不同亚细胞定位发挥不同生物学功能。本研究旨在探讨Ph+白血病细胞系K562中wt1 mRNA及蛋白的表达与定位,wt1抑制剂——姜黄素(curcumin)对K562细胞的增殖及细胞周期的影响及wt1在白血病发生发展中的相关作用机制。采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞周期改变;免疫荧光技术及Western blot观察WT1蛋白的亚细胞定位及药物处理后表达水平的变化;实时定量PCR法观察药物处理后wt1及bcr/ablp210转录本水平的变化。结果表明,wt1 mRNA及蛋白在K562细胞高表达,姜黄素及格列卫均能降低wt1 mRNA及蛋白的表达水平,抑制细胞增殖;姜黄素使K562细胞停滞于G2/M期,而格列卫使其停滞于G0/G1期。结论:wt1基因表达改变可以影响Ph阳性细胞—K562的生长、增殖,调控wt1表达有可能成为Ph阳性白血病的新的治疗策略。

关键词： wt1基因 Ph^+白血病 K562细胞细胞增殖细胞周期

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重型再生障碍性贫血免疫抑制治疗疗效预测因素研究进展

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中华血液学杂志 2010年第4期31卷 279-281页

作者：葛美丽郑以州中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

免疫抑制疗法（IST）与同胞供者骨髓移植（BMT）并列为获得性重型再生障碍性贫血（SAA）标准疗法.由于BMT受供受者诸多因素限制,致可接受BMT者不足30%,IST则为其余患者的首选疗法.临床研究证实抗淋巴细胞球蛋白（ALG）/抗胸腺细胞球蛋白... 详细信息

免疫抑制疗法（IST）与同胞供者骨髓移植（BMT）并列为获得性重型再生障碍性贫血（SAA）标准疗法.由于BMT受供受者诸多因素限制,致可接受BMT者不足30%,IST则为其余患者的首选疗法.临床研究证实抗淋巴细胞球蛋白（ALG）/抗胸腺细胞球蛋白（ATG）联合环孢素（CsA）的强化IST有效率为70%～80%,然而仍有约30%的SAA患者IST无效,这类难治性患者机会性感染风险增加,并错失BMT最佳时机.因此预测IST疗效反应成为亟待解决的临床难题.

关键词：重型再生障碍性贫血免疫抑制疗法预测因素治疗疗效抗胸腺细胞球蛋白抗淋巴细胞球蛋白标准疗法临床研究

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淋巴浆细胞淋巴瘤/Waldenstri？m巨球蛋白血症的诊断及治疗

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中华血液学杂志 2010年第4期31卷 285-287页

作者：周可树邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

淋巴浆细胞淋巴瘤（Lymphoplasmacytic lymphoma,LPL）/Waidenstri（o）m巨球蛋白血症（Waldenstr（o）m＇s macroglo-bulinemia,WM）是一种较为罕见的惰性淋巴系统恶性肿瘤,占血液系统恶性肿瘤的1%～2%,占非霍奇金淋巴瘤的不足5%,年发... 详细信息

淋巴浆细胞淋巴瘤（Lymphoplasmacytic lymphoma,LPL）/Waidenstri（o）m巨球蛋白血症（Waldenstr（o）m＇s macroglo-bulinemia,WM）是一种较为罕见的惰性淋巴系统恶性肿瘤,占血液系统恶性肿瘤的1%～2%,占非霍奇金淋巴瘤的不足5%,年发病率约3/10^6.其中位发病年龄为63～68岁,男性多于女性,有症状患者中位生存时间为5～6年.

关键词：细胞淋巴瘤巨球蛋白血症淋巴系统恶性肿瘤 lymphoma 治疗诊断血液系统非霍奇金

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新型血友病B基因治疗的腺病毒-整合酶嵌合系统的构建及其体外表达鉴定

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中国实验血液学杂志 2010年第5期18卷 1229-1234页

作者：张磊顾东生薛峰杜伟廷刘鹏霞周泽平卢士红杨仁池中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究构建一种既可高效感染靶细胞又能实现安全定点整合入宿主基因组的腺病毒嵌合载体。通过一系列DNA操作构建腺病毒-整合酶嵌合系统,该系统包含两个腺病毒载体:一个携带转基因表达框,表达框内有hFⅨ,红色荧光蛋白编码序列以及attB(ph... 详细信息

本研究构建一种既可高效感染靶细胞又能实现安全定点整合入宿主基因组的腺病毒嵌合载体。通过一系列DNA操作构建腺病毒-整合酶嵌合系统,该系统包含两个腺病毒载体:一个携带转基因表达框,表达框内有hFⅨ,红色荧光蛋白编码序列以及attB(phiC31识别位点),表达框两侧各有1个loxP(Cre识别位点);另一个腺病毒载体携带Cre和phiC31基因。同时构建只表达Cre和只表达phiC31的载体作为对照载体。在体外分别用脂质体转染293A细胞,用荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,用RT-PCR鉴定各个基因的表达。结果表明,该腺病毒-整合酶嵌合系统构建成功。体外分别用脂质体转染293A细胞后,可见绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白表达。RT-PCR鉴定表明,该系统能够成功表达各种目的蛋白。结论:成功构建了腺病毒-整合酶嵌合系统,为进一步研究其治疗作用提供良好基础。

关键词：腺病毒载体嵌合载体 phiC31 Cre 血友病B 位点特异性整合

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弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗现状及展望

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中华血液学杂志 2010年第10期31卷 718-720页

作者：易树华邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

近年来,随着抗CD20单克隆性抗体-利妥昔单抗（rituximab R）的应用,弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）的疗效取得了里程碑式的进步,患者整体长期缓解率提高30%以上.针对利妥昔单抗联合化疗的几项国际多中心前... 详细信息

近年来,随着抗CD20单克隆性抗体-利妥昔单抗（rituximab R）的应用,弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）的疗效取得了里程碑式的进步,患者整体长期缓解率提高30%以上.针对利妥昔单抗联合化疗的几项国际多中心前瞻性随机临床试验的开展,确立了DLBCL依据危险度、年龄等因素进行分层治疗的策略,但随着研究的深入,基于利妥昔单抗联合化疗的治疗策略中仍有不少问题亟待解决,如利妥昔单抗的最佳疗程数和最佳联合方案的确立,放疗在DLBCL治疗中的地位,年轻高危DLBCL患者的标准治疗方案等.我们就DLBCL的治疗现状及下一步研究方向作一介绍.

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤分层治疗前瞻性随机临床试验利妥昔单抗 DLBCL lymphoma 标准治疗方案联合化疗

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PHⅡ-7逆转肿瘤细胞K562/A02耐药机制的研究

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中国药理学通报 2010年第6期26卷 750-753页

作者：李向上林阳胡藴慧苏晔程昕杨铭杨纯正王金宏中国医学科学院·北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的阐明PHⅡ-7逆转肿瘤耐药的机制。方法用MTT法测定阿霉素、PHⅡ-7及二者联合用药对人白血病细胞系K562及其多药耐药细胞系K562/A02的IC50值,提取不同浓度PHⅡ-7作用48h后K562和K562/A02细胞RNA,以实时定量PCR的方法分析PHⅡ-7对MDR1... 详细信息

目的阐明PHⅡ-7逆转肿瘤耐药的机制。方法用MTT法测定阿霉素、PHⅡ-7及二者联合用药对人白血病细胞系K562及其多药耐药细胞系K562/A02的IC50值,提取不同浓度PHⅡ-7作用48h后K562和K562/A02细胞RNA,以实时定量PCR的方法分析PHⅡ-7对MDR1基因表达水平的影响,最后通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察PHⅡ-7作用前后,K562和K562/A02细胞内阿霉素浓度的改变。结果 PHⅡ-7本身具有抗肿瘤活性,对K562和K562/A02IC50值分别为(1.37±0.37)μmol·L-1;(1.48±0.34)μmol·L-1。此外PHⅡ-7还能协同提高阿霉素的细胞毒作用,K562组CDI值为0.22,K562/A02组CDI值为0.09,其对耐药细胞的协同作用更为明显。阿霉素和PHⅡ-7同时作用于K562/A02,随着PHⅡ-7作用剂量的增加,K562/A02细胞MDR1基因表达水平逐渐下降;细胞内阿霉素浓度伴随PHⅡ-7作用时间的延长而逐渐提高。结论 PHⅡ-7不仅本身是有效的肿瘤细胞化疗药物,还具有下调MDR1耐药基因表达的作用,从而有效逆转K562/A02细胞的耐药现象,增强化疗药物阿霉素的细胞杀伤作用。

关键词：多药耐药 PHⅡ-7 MDR1 Pgp 氧化吲哚衍生物

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新药时代年轻的多发性骨髓瘤患者的治疗选择——2009美国血液学会年会深度报道

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中华血液学杂志 2010年第5期31卷 356-358页

作者：邹德慧邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

第51届美国血液学会（ASH）年会中，作为重要热点之一，超过800篇的摘要涉及多发性骨髓瘤（MM）的临床和基础研究。在此，对会议中有关年轻（〈65岁）而适合造血干细胞（HSCT）移植的MM患者的主要研究结果进行总结。

关键词：多发性骨髓瘤血液学会年会美国患者年轻治疗新药

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