检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2009年第9期29卷 908-910页

作者：赵理罕园园唐东红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的建立获取恒河猴早、中、晚期不同胎龄胎猴样品的新方法。方法通过B超确定恒河猴孕猴怀孕天数后,皮下注射米非司酮,在其阴道后穹窿放置米索前列醇以促使孕猴终止妊娠,获取胎猴样品。通过b ishop评分、孕猴终止妊娠率和胎猴脑组织总RN... 详细信息

目的建立获取恒河猴早、中、晚期不同胎龄胎猴样品的新方法。方法通过B超确定恒河猴孕猴怀孕天数后,皮下注射米非司酮,在其阴道后穹窿放置米索前列醇以促使孕猴终止妊娠,获取胎猴样品。通过b ishop评分、孕猴终止妊娠率和胎猴脑组织总RNA提取质量评估该新方法效果。结果实验组孕猴的宫颈评分和胎猴3日娩出率均高于对照组(P<0.05),从胎猴脑组织中提取的总RNA质量良好。结论联合使用米索前列醇和米非司酮是一种有效而安全的获取恒河猴胎猴样品的新方法。

关键词：恒河猴米非司酮米索前列醇

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微RNA-21在肝细胞癌中的表达及其靶基因研究

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中华实验外科杂志 2009年第8期26卷 964-966页

作者：刘长征蔡磊刘卫杨克恭何小东陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100005 北京协和医院

目的探讨微RNA（miRNA）．21在肝细胞癌中的表达特征及其功能，筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因。方法用PAGE／Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征，并在3种肝癌细胞株中加以验证。用生物信息学... 详细信息

目的探讨微RNA（miRNA）．21在肝细胞癌中的表达特征及其功能，筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因。方法用PAGE／Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征，并在3种肝癌细胞株中加以验证。用生物信息学分析预测miRNA-21可能的靶基因，通过逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法克隆靶基因的调控区序列，利用荧光素酶双报告基因系统筛选，并通过Western blot、流式细胞仪在蛋白质水平进行分析验证。用体外细胞侵袭实验分析miRNA-21与肝癌细胞侵袭能力的关系。结果miRNA-21在10例肝细胞癌患者中均表达上调，与癌旁组织比较，表达量增加10倍以上。在3种肝癌细胞株中也得到相似的结果。筛选并确认了RECK为miRNA-21的调控靶基因之一。抑制miRNA-21的表达可明显降低肝癌细胞的侵袭。结论miRNA-21在肝细胞癌中表达失控，通过抑制RECK表达促进肿瘤细胞侵袭。

关键词：癌,肝细胞 miRNA RECK 侵袭

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人源DTD蛋白激活人神经母细胞瘤细胞非选择性阳离子通道

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基础医学与临床 2009年第2期29卷 139-143页

作者：朱镜羲阳洪波于晓霞郝维鲍光宏曹济民龚燕华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系北京100005

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜... 详细信息

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。

关键词：人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶表达谱非选择性阳离子通道

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Jumonji家族的无毛蛋白与毛发缺失

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生命的化学 2009年第5期29卷 669-672页

作者：米洋张业中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Jumonji家族中的一个成员hairless基因(Hr)在小鼠和人体内的突变可以导致显著的毛发生长障碍。HR影响的生理过程是出生后的毛发周期(haircycle),而非胚胎期的毛囊形态发生(hairmorphgenesis)。HR与维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)在... 详细信息

Jumonji家族中的一个成员hairless基因(Hr)在小鼠和人体内的突变可以导致显著的毛发生长障碍。HR影响的生理过程是出生后的毛发周期(haircycle),而非胚胎期的毛囊形态发生(hairmorphgenesis)。HR与维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)在体外可以直接相互作用,并对基因转录有抑制作用,提示HR是核受体的转录辅抑制因子(corepressor),转录抑制机制可能是通过组蛋白去乙酰基酶(histonedeacetylase,HDAC)等实现。HR的蛋白质结构和亚细胞定位提示其可能通过其他机制改变染色质的状态从而实现对靶基因的表达调控。

关键词： hairless基因毛发周期 JmjC结构域

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单胺氧化酶A启动子可变数目重复序列多态性与中国北方汉族人群重性抑郁症的关联分析

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 728-734页

作者：张洁旭陈彦博张克让许琪沈岩中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学第一医院精神卫生科太原030001

目的探讨单胺氧化酶A(MAOA)基因启动子可变数目重复序列(VNTR)多态性与重性抑郁症易感性的关系。方法采用PCR技术检测512例重性抑郁症患者与566名对照VNTR重复序列分布频率是否具有差异,并使用汉密顿焦虑量表对重性抑郁症患者进行评估... 详细信息

目的探讨单胺氧化酶A(MAOA)基因启动子可变数目重复序列(VNTR)多态性与重性抑郁症易感性的关系。方法采用PCR技术检测512例重性抑郁症患者与566名对照VNTR重复序列分布频率是否具有差异,并使用汉密顿焦虑量表对重性抑郁症患者进行评估。结果男性及女性重性抑郁症患者MAOA VNTR等位基因频率与对照相比差异无显著性;基因型分析显示,女性重性抑郁症患者与对照相比,L等位基因携带者频率显著升高(P=0.002),男性患者与对照相比分布频率差异无显著性(P=0.17)。表型分析显示,女性患者携带L等位基因的基因型(P=0.0056)与汉密顿焦虑量表"害怕"表型的发生显著相关。结论MAOA VNTR多态性可能与女性中国北方汉族人群重性抑郁症发病相关,且可提高抑郁症表型的发生。

关键词：重性抑郁症单胺氧化酶A基因可变数目重复序列多态性汉密顿焦虑量表

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甲状腺激素受体在调节靶基因转录中的激活和抑制作用

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生命的化学 2009年第3期29卷 370-373页

作者：裘佳陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家医学分子生物学重点实验室北京100005

甲状腺激素((TH)在个体发育、维持内环境稳定、细胞增殖和分化方面均有广泛的作用。TH结合甲状腺激素受体(TR),包括TRα和TRβ。TR属于核激素受体超家族,调节正向和负向基因转录。在缺少配体时,TR结合特异DNA序列,通过和共抑制子相互作... 详细信息

甲状腺激素((TH)在个体发育、维持内环境稳定、细胞增殖和分化方面均有广泛的作用。TH结合甲状腺激素受体(TR),包括TRα和TRβ。TR属于核激素受体超家族,调节正向和负向基因转录。在缺少配体时,TR结合特异DNA序列,通过和共抑制子相互作用主动抑制转录。配体的结合导致TR结构改变,释放共抑制子并招募共激活子而激活转录。

关键词：甲状腺素甲状腺素受体转录共激活子共抑制子

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小鼠髓母细胞瘤细胞系的建立与鉴定

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基础医学与临床 2009年第7期29卷 737-741页

作者：王月圆高云周汪兆琦沈岩佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室德国耶纳07745 Leibniz衰老研究所德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院实验动物中心北京100005

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用... 详细信息

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用Western blot法检测PARP-1蛋白的表达,用含有PARP-1蛋白功能区域的重组质粒pEGFP-C1-Hparp-1和绿色荧光蛋白空质粒pEGFP-C1转染细胞进行检测。结果新建立的小鼠髓母细胞瘤细胞系呈多角形、短梭形,免疫荧光分析可见未成熟神经元标志性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等表达阳性,Western blot检测PARP-1蛋白阴性,导入外源PAPR-1基因后呈阳性。结论成功建立了DNA损伤修复蛋白功能缺陷的小脑神经源性髓母细胞瘤细胞系,有助于深入研究髓母细胞瘤的病因及发病机制。

关键词：基因敲除 PARP—I 髓母细胞瘤细胞神经标记物

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代谢型谷氨酸受体7基因的拷贝数变异与精神分裂症的相关性

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 664-668页

作者：赵亚丽张克让许琪沈岩中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学第一医院精神卫生科太原030001

目的探讨代谢型谷氨酸受体7(GRM7)基因的拷贝数变异(CNVs)与精神分裂症的相关性。方法收集180例中国山西汉族精神分裂症患者和33名正常对照的DNA样本及资料。应用实时定量PCR方法检测位于GRM7基因外显子2上游200 bp处和外显子8附近的CNV... 详细信息

目的探讨代谢型谷氨酸受体7(GRM7)基因的拷贝数变异(CNVs)与精神分裂症的相关性。方法收集180例中国山西汉族精神分裂症患者和33名正常对照的DNA样本及资料。应用实时定量PCR方法检测位于GRM7基因外显子2上游200 bp处和外显子8附近的CNVs。同时对实时定量PCR扩增区的基因序列进行测序。结果相对拷贝数分析显示,在GRM7基因外显子2上游200 bp处,1例精神分裂症患者具有双等位基因缺失,13例患者和1名正常对照具有单个等位基因缺失。测序显示GRM7基因外显子2上游200 bp处实时定量PCR反向引物(GRM7-SV-1R)的3末'端上游第5个碱基发生了C>G变异,实时定量PCR扩增中发现的等位基因缺失均由碱基变异导致。结论实时定量PCR结合测序可以避免PCR引物序列变异导致的假阳性缺失,是检测CNVs的有效方法。本研究GRM7基因的CNVs与精神分裂症无相关性,提示GRM7基因的CNVs可能不是中国汉族精神分裂症发病的主要原因,然而其潜在的罕见CNVs可能和部分精神分裂症有关,有待于进一步研究。

关键词：精神分裂症代谢型谷氨酸受体7基因拷贝数变异

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通过核质转运调节细胞凋亡的蛋白质

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第10期25卷 883-888页

作者：李竹石许彩民中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

凋亡,也称Ⅰ型程序性细胞死亡,是细胞在面临严重威胁时发起的保护性主动死亡机制.凋亡对于个体的生长发育及各种生理功能具有不可或缺的作用.作为涉及整个细胞的复杂过程,凋亡的顺利进行有赖于众多凋亡相关因子的协调合作与精确调控.细... 详细信息

凋亡,也称Ⅰ型程序性细胞死亡,是细胞在面临严重威胁时发起的保护性主动死亡机制.凋亡对于个体的生长发育及各种生理功能具有不可或缺的作用.作为涉及整个细胞的复杂过程,凋亡的顺利进行有赖于众多凋亡相关因子的协调合作与精确调控.细胞受到凋亡刺激后,核内的某些蛋白质转运出核,将凋亡信号传递到核外,胞质内的多种蛋白质则转运入核,在细胞核这一信息整合的大本营直接发挥作用.这种双向交流机制在胞核与胞质间建立起密切的联系,同时使得相关蛋白质在特定场所发挥促进或抑制凋亡的作用,确保凋亡信号及时、通畅、有序地传递.因此,蛋白质的核质转运作为介导胞核与胞质物质交换、信号交流的关键机制,在凋亡过程中就显得尤为重要.本文主要就核质转运的机制、通过核质转运调节凋亡的蛋白质及其作用机理作一综述.

关键词：凋亡核质转运核孔复合体

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应用Affymetrix全基因组芯片检测染色体7q36区域的DNA拷贝数突变

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中华医学遗传学杂志 2009年第3期26卷 336-339页

作者：马芬吴凤霞李宁柳青杨威张学孙森中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学遗传学系McKusick-张孝骞医学遗传中心医学分子生物学国家重点实验室北京100005 辽宁省锦州医学院第一附属医院中国医科大学

目的应用Affymetrix全基因组芯片结合荧光定量PCR（quantitative real-timePCR，qPCR）技术，进行致病性DNA拷贝数变异的精细定位研究。方法以一个定位于染色体7q36的中国人遗传性三节拇指多并指综合征伴随Ⅳ型并指家系中的一例患者为... 详细信息

目的应用Affymetrix全基因组芯片结合荧光定量PCR（quantitative real-timePCR，qPCR）技术，进行致病性DNA拷贝数变异的精细定位研究。方法以一个定位于染色体7q36的中国人遗传性三节拇指多并指综合征伴随Ⅳ型并指家系中的一例患者为研究对象。收集外周血标本，常规提取基因组DNA。应用Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array6．0芯片，将基因组DNA纯化，经过酶切、连接、扩增、标记、杂交、染色和扫描等步骤后得到原始数据，应用Affymetrix Genotyping Console3．0软件进行拷贝数分析。在经芯片分析所确定的重复范围内设计引物，采用qPCR方法进行验证，并进一步缩小断端范周、精确重复区域范围。结果将患者重复区域两断端范围由原来的113kb和33kb分别缩小到5．4kb和1．8kb，致病性DNA重复范围由原来的291～437kb精确至379～387kb。结论应用Affymetrix全基因组芯片联合qPCR技术可以实现对DNA拷贝数突变的精确、可靠的检测。

关键词： Affymetrix SNP芯片荧光定量PCR DNA重复

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