检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2022年第5期42卷 752-757页

作者：佟可心蔡孟华何维张建民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的筛选对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV2)不同突变株具有广谱特异性的、高亲和性中和抗体,并进行功能验证。方法用脂质体包被的SARS-CoV2刺突蛋白(S蛋白)mRNA疫苗对Balb/c小鼠进行2次免疫,测定小鼠血清中特异性抗体含量,选取... 详细信息

目的筛选对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV2)不同突变株具有广谱特异性的、高亲和性中和抗体,并进行功能验证。方法用脂质体包被的SARS-CoV2刺突蛋白(S蛋白)mRNA疫苗对Balb/c小鼠进行2次免疫,测定小鼠血清中特异性抗体含量,选取抗体含量较高的小鼠进行冲击免疫;取冲击免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用有限稀释法和ELISA筛选出上清能特异性结合S蛋白及S蛋白受体结合域(RBD)的杂交瘤细胞克隆;纯化单克隆抗体,进行假病毒中和实验,验证抗体中和活性;并通过ELISA筛选对4种SARS-CoV2突变株的重组RBD蛋白具有广谱结合特性的单克隆抗体。结果经2次免疫,检测到高剂量组4号小鼠血清中针对S蛋白的抗体含量最高;经过冲击免疫、细胞融合后,共筛选到12株与S蛋白具有结合活性的杂交瘤细胞,其中9株特异性结合RBD蛋白;假病毒中和实验结果显示,41、46和47这3株抗体在体外有显著的中和病毒活性(P<0.05);与另2株抗体相比,46号抗体显示出与SARS-CoV24种包括Omicron在内的突变株的RBD蛋白的广谱结合活性。结论46号抗体是对SARS-CoV2四种不同突变株具有广谱特异性的中和抗体,有望进一步进行人源化改造,用于新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的治疗。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV2) 杂交瘤细胞广谱中和抗体

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小鼠乳腺癌肺特异性转移细胞亚系的建立和验证

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基础医学与临床 2022年第7期42卷 1083-1091页

作者：王子辕段昭君罗云萍中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的筛选和建立乳腺癌的自发性高器官特异性转移亚系,验证所建立的细胞亚系的细胞特征和肺转移器官特异性。方法利用实验性肺转移模型,尾静脉注射小鼠乳腺癌细胞系4T07,回收肺转移灶细胞,体外扩增培养后,再重复2次,获得高肺转移乳腺癌细... 详细信息

目的筛选和建立乳腺癌的自发性高器官特异性转移亚系,验证所建立的细胞亚系的细胞特征和肺转移器官特异性。方法利用实验性肺转移模型,尾静脉注射小鼠乳腺癌细胞系4T07,回收肺转移灶细胞,体外扩增培养后,再重复2次,获得高肺转移乳腺癌细胞;再利用小鼠乳腺脂肪垫原位接种构建自发肺转移模型;在此之间,结合肺转移灶体外培养扩增,重复3次,获得肺高转移细胞亚系及自发性肺转移模型;转染筛选稳定表达荧光素酶的高转移细胞亚系,显微镜下观察细胞形态学变化;小动物活体成像和HE染色来检测肺特异性转移和体外迁移能力的变化;流式细胞测量术分析原发灶、转移灶及脾脏中免疫细胞的变化。细胞划痕实验和Transwell小室法检测细胞亚系的体外迁移能力的变化。结果成功建立了小鼠乳腺癌4T07肺特异性转移细胞亚系4T07LuM。将稳定表达荧光素酶的4T07LuM细胞接种于小鼠乳腺脂肪垫后,小动物活体成像结果发现荧光信号主要集中于肺器官,HE切片可见肺脏中的肿瘤转移灶。4T07LuM相较于亲本细胞4T07体外迁移能力有明显提升,48 h的划痕闭合程度是亲本细胞的1.64倍(P<0.001),12 h时迁移过小室的细胞数是亲本细胞的1.91倍(P<0.001)。4T07LuM细胞荷瘤鼠的脾脏、原位灶和转移器官的免疫细胞比例发生显著变化,体内免疫微环境均更倾向于免疫抑制状态。结论实验性转移和自发性转移的连续筛选联合体外培养扩增可以建立高器官特异性转移的细胞亚系。

关键词：乳腺癌肺转移器官特异性自发转移模型

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小鼠乳腺癌干细胞免疫相关分子表达和免疫浸润的分析

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基础医学与临床 2022年第6期42卷 876-882页

作者：李昱阳李钊璇罗云萍陈翀中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的分析小鼠乳腺癌干细胞(BCSCs)中免疫相关分子的表达和肿瘤组织中免疫细胞的浸润。方法用成球培养的方法在体外富集小鼠乳腺癌细胞系4T1和4T07的肿瘤干细胞(CSCs);用实时定量PCR检测BCSCs中免疫检查点与抗原递呈相关基因的表达;用小... 详细信息

目的分析小鼠乳腺癌干细胞(BCSCs)中免疫相关分子的表达和肿瘤组织中免疫细胞的浸润。方法用成球培养的方法在体外富集小鼠乳腺癌细胞系4T1和4T07的肿瘤干细胞(CSCs);用实时定量PCR检测BCSCs中免疫检查点与抗原递呈相关基因的表达;用小鼠乳腺癌原位移植瘤模型和流式细胞测量术分别检测脾脏和肿瘤组织中各类免疫细胞的比例。结果用成球培养的方法可以成功富集小鼠乳腺癌干细胞4T1和4T07;与贴壁培养的肿瘤细胞相比,小鼠BCSCs中免疫检查点和抗原递呈相关基因的表达有明显差异(P<0.05)。体内的结果表明,与贴壁肿瘤细胞来源的肿瘤组织相比,肿瘤干细胞来源的肿瘤组织中浸润更多的CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞(P<0.05),但是CD11b^(+)F4/80^(+)的巨噬细胞浸润更少(P<0.05)。结论小鼠BCSCs中免疫检查点与抗原递呈相关基因的表达有改变,且在体内可招募更多的T细胞到肿瘤组织中去。

关键词：肿瘤干细胞免疫检查点抗原递呈肿瘤免疫逃逸肿瘤免疫浸润

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早期糖尿病肾脏病病人营养代谢状况的调查研究

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肠外与肠内营养 2022年第2期29卷 75-79页

作者：丁丽丽刘承宇程博陈丽如王丽娟崔红元徐涛朱明炜北京医院国家老年医学中心中国医科院老年医学研究院营养科北京100730 北京医院国家老年医学中心中国医科院老年医学研究院普通外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所流行病学与统计学系北京100730

目的:调查分析早期2型糖尿病肾脏病病人饮食结构、实验室指标及人体成分等营养代谢状况。方法:2019年12月到2020年12月在北京医院内分泌科住院,符合中国2型糖尿病防治指南(2020年版)中糖尿病及糖尿病肾脏病的诊断标准,早期糖尿病肾病12... 详细信息

目的:调查分析早期2型糖尿病肾脏病病人饮食结构、实验室指标及人体成分等营养代谢状况。方法:2019年12月到2020年12月在北京医院内分泌科住院,符合中国2型糖尿病防治指南(2020年版)中糖尿病及糖尿病肾脏病的诊断标准,早期糖尿病肾病125例病人纳为研究组(DKD组);同期住院的糖尿病非肾病113例病人(Non-DKD组)纳为对照组;分别进行饮食回顾、人体成分测定、营养代谢相关实验室检查等,分析糖尿病肾脏病病人的代谢特点,以及可能影响肾脏功能(肾小球滤过率)的营养代谢相关因素。结果:DKD组饮食中碳水化合物摄入与Non-DKD组比较差异有显著性意义[278(113)g vs 249(93)g,P=0.006],实验室指标中血肌酐、尿素、尿酸、估算肾小球滤过率、浮肿指数、维生素D水平等指标的差异均有显著性意义(P<0.05)。其中估算肾小球滤过率[94.42(38.70)mL/min/1.73m^(2)vs 104.60(84.24)mL/min/1.73m^(2),P<0.001],浮肿指数[0.39(0.02)vs 0.39(0.01),P=0.028],维生素D[15.20(11.20)ng/mL vs 16.50(9.30)ng/mL,P=0.038]。估算肾小球滤过率与浮肿指数有负相关性(r=-0.474),与白蛋白、维生素D水平等有弱正相关性。结论:2型糖尿病早期肾脏病病人饮食中碳水化合物摄入较多,血浆维生素D水平较低,体成分中浮肿较重;肾脏功能损伤程度与血浆白蛋白和维生素D水平呈正相关。

关键词： 2型糖尿病糖尿病肾脏病糖尿病肾病 25-羟基维生素D 微量白蛋白尿人体成分

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PABPC1对人单核白血病细胞系THP-1翻译活性的影响

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基础医学与临床 2023年第5期43卷 751-754页

作者：翟雪莹王芳余佳中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究细胞质多聚腺苷酸结合蛋白-1(PABPC1)对人单核细胞白血病细胞系THP-1翻译活性的影响。方法在THP-1细胞中转染shPABPC1,Western blot验证敲低效率,多聚核糖体分析技术检测细胞翻译活性变化。结果转染后THP-1细胞中PABPC1表达被抑... 详细信息

目的研究细胞质多聚腺苷酸结合蛋白-1(PABPC1)对人单核细胞白血病细胞系THP-1翻译活性的影响。方法在THP-1细胞中转染shPABPC1,Western blot验证敲低效率,多聚核糖体分析技术检测细胞翻译活性变化。结果转染后THP-1细胞中PABPC1表达被抑制(P<0.001);与对照组相比,敲低PABPC1组的翻译活性减弱。结论敲低PABPC1可抑制THP-1细胞翻译活性,PABPC1可能成为治疗急性髓系白血病(AML)的潜在靶点。

关键词：急性髓系白血病(AML) 细胞质多聚腺苷酸(A)结合蛋白-1 翻译

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AHR抑制剂CH223191提高辐照小鼠骨髓移植效果

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基础医学与临床 2023年第2期43卷 233-240页

作者：庞瑞洋周力吕家迪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探究骨髓移植过程中辐射诱导的旁观者效应对供体骨髓细胞的影响以及芳香烃受体(AHR)抑制剂CH223191对供体骨髓细胞的保护作用。方法将小鼠分为9 Gy辐照组和12 Gy辐照组,不同辐照剂量辐射后移植相同数量供体骨髓细胞,流式细胞术检测... 详细信息

目的探究骨髓移植过程中辐射诱导的旁观者效应对供体骨髓细胞的影响以及芳香烃受体(AHR)抑制剂CH223191对供体骨髓细胞的保护作用。方法将小鼠分为9 Gy辐照组和12 Gy辐照组,不同辐照剂量辐射后移植相同数量供体骨髓细胞,流式细胞术检测外周血细胞总数、外周血供体细胞嵌合率及数量;ELISA检测未辐照小鼠和辐照小鼠血清活性氧(ROS)水平;将供体骨髓细胞分为对照组、9 Gy辐照组和12 Gy辐照组体外培养,分别加入未辐照小鼠血清、9 Gy和12 Gy辐照小鼠血清处理,ATP活力测定法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT-qPCR检测Cyp1a1与Cyp1b1的mRNA表达;将辐照血清处理后的骨髓细胞分为CH223191治疗组与对照组,加入CH223191处理后,比较细胞活力、细胞凋亡、细胞内ROS水平,RT-qPCR检测Cyp1a1与Cyp1b1的mRNA表达;将骨髓移植小鼠分为CH223191治疗组和对照组,治疗组腹腔注射CH223191,记录小鼠体质量、外周血供体细胞嵌合率及数量、骨髓内供体细胞嵌合率及数量。结果小鼠经9 Gy或12 Gy辐照后,12 Gy辐照组外周血细胞总数少于9Gy辐照组(P<0.05),而骨髓移植后外周血供体细胞嵌合率无明显差异,并且12 Gy辐照组外周血供体细胞数明显少于9Gy辐照组(P<0.05);小鼠经辐照后,血清内ROS水平上升(P<0.01);经辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞活力降低,凋亡比例升高(均P<0.01),辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞中Cyp1a1与Cyp1b1 mRNA均升高(P<0.05);辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞加入CH223191后,Cyp1a1与Cyp1b1 mRNA水平降低(P<0.05),细胞活力升高,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡比例减少(均P<0.01);骨髓移植后,CH223191治疗组小鼠体质量相对于对照组减轻较少,外周血供体细胞嵌合率与细胞数高于对照组,骨髓内供体细胞比例与数量均高于对照组(均P<0.05)。结论CH223191通过抑制AHR激活,减少辐射诱导的旁观者效应对移植骨髓细胞的损伤,提升小鼠骨髓移植效果。

关键词：骨髓移植辐射诱导的旁观者效应芳香烃受体活性氧

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IgG N-糖基化修饰在糖尿病视网膜病变中作用的研究进展

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基础医学与临床 2023年第3期43卷 509-513页

作者：张艺馨蔡善君李智立于伟泓张华遵义医科大学附属医院眼科贵州遵义563003 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物物理及结构生物学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院眼科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院继续教育学院北京100730

糖尿病视网膜病变(DR)是免疫炎性疾病,免疫球蛋白G(IgG) N-糖基化修饰与DR密切相关。其中,IgG的半乳糖基化修饰、岩藻糖基化修饰、唾液酸化和平分型N-乙酰葡糖胺修饰发生变化,导致机体处于促炎状态,诱导视网膜发生病变。

关键词：糖尿病视网膜病变免疫球蛋白G 糖基化修饰

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利用类器官培养构建小鼠肝脏衰老模型

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基础医学与临床 2023年第4期43卷 554-559页

作者：卢琰周雅博陈洁中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、免疫学系、医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用类器官培养构建体外快速诱导的小鼠肝脏衰老模型。方法通过两步灌注法获取小鼠肝细胞并对其进行类器官培养。通过形态学、qPCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定,通过检测其对LDL的摄取能力判断肝脏类器官的功能。用油酸(OA)处理... 详细信息

目的利用类器官培养构建体外快速诱导的小鼠肝脏衰老模型。方法通过两步灌注法获取小鼠肝细胞并对其进行类器官培养。通过形态学、qPCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定,通过检测其对LDL的摄取能力判断肝脏类器官的功能。用油酸(OA)处理肝脏类器官,检测其生长情况、衰老相关分泌表型、LDL的摄取能力和肝细胞活性氧(ROS)水平,分析肝脏衰老模型构建是否成功。进一步使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理肝细胞,检测以上表型和功能的变化,利用此模型探究ROS对衰老的影响。结果两步灌注法获取到大量有活性的原代小鼠肝细胞,通过在基质胶中3D培养可获得具有自我复制能力的肝脏类器官,qPCR显示其表达肝脏标志基因,免疫荧光结果显示其高表达白蛋白(ALB),并且肝脏类器官具有对LDL正常的摄取功能。用油酸处理后,肝脏类器官生长减慢,衰老相关分泌表型基因表达上调(P<0.001),对LDL的摄取能力降低(P<0.001),ROS明显上升(P<0.001)。以上表型在使用NAC处理后均得以缓解(P<0.01或P<0.001)。结论油酸处理可在体外成功构建小鼠肝脏的衰老模型,加入NAC后可清除ROS,减缓衰老的发生。

关键词：原代肝细胞类器官油酸活性氧衰老

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泛癌中SMYD3的表达与预后及免疫浸润之间的关系

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基础医学与临床 2023年第1期43卷 68-75页

作者：陈浩然司甜姜懿珅王殿恒周雅博吕家迪中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、免疫学系、医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究SMYD3表达在泛癌中的预后价值,分析SMYD3对于肿瘤组织免疫浸润的影响。方法从TCGA、GTEx、HPA等数据库收集基因表达矩阵以及蛋白质表达等数据。使用Kaplan-Meier算法评价了SMYD3在不同肿瘤中的预后价值。使用ESTIMATE算法和Time... 详细信息

目的研究SMYD3表达在泛癌中的预后价值,分析SMYD3对于肿瘤组织免疫浸润的影响。方法从TCGA、GTEx、HPA等数据库收集基因表达矩阵以及蛋白质表达等数据。使用Kaplan-Meier算法评价了SMYD3在不同肿瘤中的预后价值。使用ESTIMATE算法和Timer数据库的信息分析SMYD3与免疫浸润的关系。以小鼠黑色素瘤细胞系B16为例,在细胞水平验证SMYD3对抗原提呈基因表达的影响。结果转录组和蛋白组学数据表明SMYD3在肿瘤组织中表达升高,并且SMYD3的高表达和泛癌的不良预后相关(P<0.05);SMYD3抑制了多种免疫细胞的浸润(P<0.05),敲除Smyd3的B16细胞抗原呈递基因表达水平升高(P<0.05)。结论Smyd3是一个重要的肿瘤预后相关基因,其通过下调抗原递呈基因的表达,抑制免疫细胞浸润,诱导肿瘤细胞免疫逃逸。

关键词： SMYD3 泛癌分析免疫浸润免疫逃逸 MHC-Ⅰ类分子

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鉴定顺铂对人肝癌细胞系转录物组的影响

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基础医学与临床 2024年第3期44卷 352-360页

作者：郭鑫冀梦蝶王琦李雪媛陈阳中国医学科学院、北京协和医学院基础医学研究所、生物化学与分子生物学系、重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005

目的通过不同浓度顺铂(CDDP)处理人肝癌细胞系并进行转录物组测序分析,旨在揭示顺铂处理对肝癌细胞转录水平的影响。方法使用终浓度为0、20、50、100和200μmol/L的顺铂处理肝癌细胞系HepG2、Huh712 h后进行细胞活性检测、免疫荧光和转... 详细信息

目的通过不同浓度顺铂(CDDP)处理人肝癌细胞系并进行转录物组测序分析,旨在揭示顺铂处理对肝癌细胞转录水平的影响。方法使用终浓度为0、20、50、100和200μmol/L的顺铂处理肝癌细胞系HepG2、Huh712 h后进行细胞活性检测、免疫荧光和转录物组测序(RNA-seq),并进行差异表达(DEG)、KEGG及蛋白质相互作用网络分析。结果顺铂处理后HepG2、Huh7细胞活性下降,且DNA损伤增多,不同顺铂浓度处理下两种细胞系中共同上调的基因共有59个,共同下调的基因有81个。共同上调的基因主要富集在肿瘤发生发展相关通路,共同下调的81个基因主要富集在Rap1信号通路、Ras信号通路、调控干细胞多能性的信号通路、轴突的指导和黏附连接等相关通路。分析共同上下调基因的蛋白质相互作用网络中关键节点的生存预后,Jun原癌基因,AP-1转录因子(JUN)的高表达与患者生存期的延长呈显著相关,生长停滞DNA损伤可诱导蛋白α(GADD45A)的低表达与患者生存期的延长呈显著相关。结论揭示了肝癌细胞在顺铂处理下的共性转录物变化。JUN和GADD45A的表达差异可能是耐药机制的关键节点,也为临床治疗提供了重要的预后指标。

关键词：肝癌转录物组测序顺铂基因转录

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