检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2006年第11期27卷 749-752页

作者：葛薇李长虹李云涛孟恒星徐燕邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究人脐血来源的间充质干细胞(UCBMSC)的免疫表型、生物学特性及其向成骨细胞分化的能力。方法分离脐血单个核细胞,以干细胞培养液培养间充质干细胞(MSC),观察其体外生长特性;用流式细胞术进行免疫表型测定和细胞周期分析;以含地... 详细信息

目的研究人脐血来源的间充质干细胞(UCBMSC)的免疫表型、生物学特性及其向成骨细胞分化的能力。方法分离脐血单个核细胞,以干细胞培养液培养间充质干细胞(MSC),观察其体外生长特性;用流式细胞术进行免疫表型测定和细胞周期分析;以含地塞米松、β-磷酸甘油和维生素C的诱导液定向诱导向成骨细胞分化;以碱性磷酸酶染色、矿化结节染色、骨桥蛋白mRNA的表达以及Ⅰ型胶原表达鉴定MSC向成骨细胞分化的潜能。结果从脐血中可以培养出MSC,为成纤维细胞样的贴壁细胞。免疫表型分析显示CD45、CD34、CD11a、CD14、HLA-DR阳性细胞占1％～30％; CD166、CD44、CD106、CD29、CD105、CD49e、CD90、CD73表达率达91％～98％。细胞周期分析显示95％以上的细胞处于G0／G1期。定向成骨细胞诱导后,可以检测到碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达,矿化结节的形成和骨桥蛋白mRNA的表达。结论UCBMSC是基质细胞的祖细胞,在合适的条件下可被诱导向成骨细胞分化,因此有可能作为有潜力的骨组织工程的种子细胞来源。

关键词：胎血间充质干细胞成骨细胞

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人可溶性TRAIL蛋白在衣藻叶绿体中的表达

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科学通报 2006年第12期51卷 1400-1405页

作者：杨宗岐李轶女陈凤李董张志芳刘彦信郑德先王勇沈桂芳南开大学生命科学学院中国农业科学院生物技术研究所北京100081 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性．以衣藻叶绿体基因组的clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2为同源重组片段,壮观霉素抗性基因为选择标记,构建了编码TRAIL胞外区可溶性片段(sTRAIL)... 详细信息

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性．以衣藻叶绿体基因组的clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2为同源重组片段,壮观霉素抗性基因为选择标记,构建了编码TRAIL胞外区可溶性片段(sTRAIL)的cDNA衣藻叶绿体表达载体p64TRAIL,通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中,经壮观霉素抗性筛选,获得了3个抗性衣藻转化子．转化子经过抗性继代筛选后,经PCR,Southern blot检测分析及暗培养,证实sTRAIL编码区DNA已整合到衣藻叶绿体基因组中,Western blot检测分析表明,sTRAIL编码区在衣藻叶绿体中获得了表达．Western blot影像摄录分析表明,表达的sTRAIL蛋白占衣藻细胞可溶性总蛋白的0．43％-0．67％．实验结果证明,用衣藻叶绿体作为生物反应器生产医药蛋白是可行的．

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL) 衣藻叶绿体叶绿体表达同源重组

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GLI3基因与单纯性马蹄内翻足的关联分析及其突变筛查

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中华医学遗传学杂志 2006年第5期23卷 551-554页

作者：张炫金春莲刘丽英赵宁张立军吉士俊孙开来中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学附属第二临床医院小儿骨科

目的对GLI3基因与单纯性马蹄内翻足进行关联分析和突变筛查,探讨GLI3基因与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性分析技术,分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系中GLI3基因内两个单核苷酸多态(singlenuc leotide polymo... 详细信息

目的对GLI3基因与单纯性马蹄内翻足进行关联分析和突变筛查,探讨GLI3基因与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性分析技术,分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系中GLI3基因内两个单核苷酸多态(singlenuc leotide polymorphisms,SNP)位点的基因型,并应用ETDT软件统计分析各SNP位点基因型与单纯性马蹄内翻足的关联;应用变性梯度凝胶电泳技术对103例单纯性马蹄内翻足患者GLI3基因的第9至12外显子进行突变筛查。结果经ETDT分析,位于GLI3基因第4外显子的cSNPrs846266差异无统计学意义(χ2=3.3582,P>0.05);第14外显子的cSNPrs929387差异有统计学意义(χ2=7.2466,P<0.05),在单纯性马蹄内翻足核心家系中存在传递不平衡;发现1例患者及其母亲的第9外显子有108(G→A)的同义点突变。结论GLI3基因与单纯性马蹄内翻足相关,其第9至12外显子可能并非该病的突变热点。

关键词：单纯性马蹄内翻足 GLI3基因单核苷酸多态突变

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去卵巢小鼠造血系统的改变对骨细胞的影响

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天津医药 2006年第7期34卷 473-475页

作者：杨福军孙元明晁爱军刘征李雨民天津中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所生物室 300192 天津医科大学总医院内分泌科

目的:研究卵巢切除后小鼠造血系统中破骨细胞和成骨细胞的前体细胞的改变。方法:实验组6～8周龄C57BL/6J小鼠行双侧卵巢切除术(OVX,ovariectomized);对照组行小鼠双侧卵巢假切除(sham-operated)。术后8～10周观察各组小鼠的脾集落形成单... 详细信息

目的:研究卵巢切除后小鼠造血系统中破骨细胞和成骨细胞的前体细胞的改变。方法:实验组6～8周龄C57BL/6J小鼠行双侧卵巢切除术(OVX,ovariectomized);对照组行小鼠双侧卵巢假切除(sham-operated)。术后8～10周观察各组小鼠的脾集落形成单位(CFU-S)、成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)和粒/巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的变化。结果:实验组小鼠的CFU-GM、CFU-F均高于对照组小鼠(均P<0.01);实验组小鼠与对照组小鼠的CFU-S比较差别无统计学意义(P=0.098)。结论:切除卵巢后,小鼠破骨细胞和成骨细胞的前体细胞均增多。

关键词：卵巢切除术造血干细胞骨细胞小鼠

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人神经系统特异表达RNA结合蛋白HuC cDNA的克隆、表达及纯化

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基础医学与临床 2006年第6期26卷 608-612页

作者：强华王先平狄文娜胡洁淼彭小忠贾连顺阴彬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室第二军医大学长征医院上海200003

目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利... 详细信息

目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利用GST纯化系统,对HuC重组蛋白进行纯化。结果经过表达及纯化条件的摸索,最终获得重组HuC蛋白。结论HuC蛋白是一种神经系统表达RNA结合蛋白,重组HuC蛋白的获得为HuC抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

关键词： RNA结合蛋白HuC cDNA克隆原核表达纯化

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猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用

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中国实验动物学报 2006年第1期14卷 32-35页

作者：于浩蒋虹佟巍丛喆孙敏冯育芳王卫涂新明魏强中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部北京100021

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上... 详细信息

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。

关键词：猴副流感病毒SV5 聚合酶链反应巢式PCR 检测

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木立芦荟中BACE抑制活性成分的研究

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药学学报 2006年第10期41卷 1000-1003页

作者：高博姚春所周金云陈若芸方唯硕中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100050

目的从木立芦荟(Aloe arborescens)中寻找新的BACE(β-分泌酶)抑制活性成分。方法用硅胶正相色谱及反相色谱技术进行活性成分的分离纯化,根据理化性质、光谱资料进行结构鉴定。结果从木立芦荟95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分,... 详细信息

目的从木立芦荟(Aloe arborescens)中寻找新的BACE(β-分泌酶)抑制活性成分。方法用硅胶正相色谱及反相色谱技术进行活性成分的分离纯化,根据理化性质、光谱资料进行结构鉴定。结果从木立芦荟95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分,分离得到了8个化合物:异丁酰基芦荟宁A(1),芦荟宁A(2),芦荟大黄素(3),(E)-2-acetonyl-8-(2′-O-feru loxyl)-β-D-glucopyranosyl-7-m ethoxy-5-m ethyl-chromone(4),7-O-m ethyl aloeresin A(5),芦荟苷A(6),elgon ica-d im er A(7)和elgon ica-d im er B(8)。结论化合物1为新化合物,化合物4为首次从该植物中分离得到。活性测试结果表明,化合物2,4,5,6对BACE有一定的抑制活性。

关键词：木立芦荟 BACE抑制活性芦荟宁衍生物

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转录因子FoxO1、FoxO3a在KKAy胰岛素抵抗糖尿病小鼠肌肉和肝组织中的表达

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基础医学与临床 2006年第8期26卷 860-862页

作者：李玉秀王姮曾静波孙琦中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室北京100730

目的研究FoxO1和FoxO3 a在胰岛素抵抗糖尿病动物模型KKAy小鼠肌肉和肝中的表达,了解它们在胰岛素抵抗机制中所起的作用。方法对照组为16周龄C57BL小鼠7只,实验组为KKAy糖尿病小鼠7只;小鼠4周龄开始普通饲料喂养至12周龄,随后高脂饲料喂... 详细信息

目的研究FoxO1和FoxO3 a在胰岛素抵抗糖尿病动物模型KKAy小鼠肌肉和肝中的表达,了解它们在胰岛素抵抗机制中所起的作用。方法对照组为16周龄C57BL小鼠7只,实验组为KKAy糖尿病小鼠7只;小鼠4周龄开始普通饲料喂养至12周龄,随后高脂饲料喂养4周,连续2次随机血糖≥16.7 mmol/L诊断为糖尿病。取股四头肌和肝加上组织裂解液B radford法测定蛋白浓度,W estern B lot方法检测肌肉和肝组织中FoxO1和FoxO3 a蛋白的表达。结果KKAy糖尿病小鼠FoxO1肝和肌肉中表达显著高于对照组小鼠;FoxO3 a肝表达对照组和糖尿病组之间没有差别,肌肉组织表达在糖尿病组显著高于对照组。结论FoxO1和FoxO3 a在胰岛素抵抗和糖尿病状态下表达显著增加,可能在胰岛素抵抗和糖尿病的发病机制中起重要作用。

关键词： KKAy糖尿病小鼠胰岛素抵抗 FoxO1 FoxO3a

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断乳后不同饲料构成对大鼠体重、体脂含量及激素敏感性脂肪酶基因表达的影响

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卫生研究 2006年第5期35卷 569-572页

作者：张晓宏王晓春赵丽军孙长颢宁波大学医学院宁波315211 中国协和医科大学肿瘤研究所哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室

目的研究断乳后不同饲料构成对高脂膳食大鼠体脂含量及脂肪组织中激素敏感性脂肪酶(HSL)基因表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24天断乳,按体重随机分为A、B、C、D四组,分别给予高碳水化合物构成的基础饲料、高蛋白质构成饲料、高不... 详细信息

目的研究断乳后不同饲料构成对高脂膳食大鼠体脂含量及脂肪组织中激素敏感性脂肪酶(HSL)基因表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24天断乳,按体重随机分为A、B、C、D四组,分别给予高碳水化合物构成的基础饲料、高蛋白质构成饲料、高不饱和脂肪酸和高饱和脂肪酸构成饲料喂养3周。然后均转为基础饲料喂养2周后,按体重将A组随机分为A1、A2两组。A1组继续喂饲基础饲料作为对照组,A2和B、C、D四组给予高脂饲料喂养6周,结束实验;A2组则为高碳水化合物组。动态观察大鼠的体重、体脂含量、血糖变化及白色脂肪组织HSLmRNA水平。结果实验末期,断乳后喂饲高不饱和脂肪酸构成饲料的C组,体重、体脂含量和血糖均显著低于高碳水化合物组A2(P<0·05);断乳后喂饲高蛋白质的B组体重和体脂含量明显低于A2组(P<0·05),但血糖水平高于A2(P>0·05);断乳后摄取高饱和脂肪酸饲料的D组,尽管体重明显低于A2(P<0·05),但血糖和体脂含量与A2组无差异(P>0·05)。动态观察表明,断乳后喂饲高不饱和脂肪酸的C组大鼠,白色脂肪组织HSL基因表达水平持续升高。结论断乳后喂饲高不饱和脂肪酸饲料不仅可以降低高脂膳食大鼠的体重、体脂含量,还可明显改善血糖异常,抑制肥胖形成;对基因表达的调控可能参与早期饮食对后续肥胖的程序性影响。

关键词：断乳饲料构成激素敏感性脂肪酶肥胖

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纳米粒子作为药物输送和药物控释体系的应用前景

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基础医学与临床 2006年第7期26卷 684-688页

作者：杨菁宋存先中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所天津市生物材料重点实验室天津300192

纳米粒子作为药物和基因的载体显现出极大的潜力并被广泛研究。纳米粒子的超微小体积可使药物输送智能化,例如靶向定位地将药物投递到病灶局部或专一性地作用于靶细胞。纳米粒子的载体材料可屏蔽药物不良气味、维持药物长期缓慢释放、... 详细信息

纳米粒子作为药物和基因的载体显现出极大的潜力并被广泛研究。纳米粒子的超微小体积可使药物输送智能化,例如靶向定位地将药物投递到病灶局部或专一性地作用于靶细胞。纳米粒子的载体材料可屏蔽药物不良气味、维持药物长期缓慢释放、延长药物半衰期和减小毒副作用等。本文将从纳米药物输送、控释制剂的制备和应用前景等方面进行综述。

关键词：纳米粒子药物载体基因载体控制释放

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