检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1366-1367,1372页

作者：陈翠萍董思国朱卫华中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京绿竹生物制药有限公司北京100176

目的采用竞争抑制ELISA法检测霍乱灭活疫苗中脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的含量,以替代小鼠免疫力试验方法。方法用竞争抑制ELISA法检测霍乱灭活疫苗中LPS的含量,并分析与小鼠免疫力试验检测结果的一致性。结果霍乱灭活疫苗中LPS的... 详细信息

目的采用竞争抑制ELISA法检测霍乱灭活疫苗中脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的含量,以替代小鼠免疫力试验方法。方法用竞争抑制ELISA法检测霍乱灭活疫苗中LPS的含量,并分析与小鼠免疫力试验检测结果的一致性。结果霍乱灭活疫苗中LPS的含量与疫苗保护力呈正相关。结论采用竞争抑制ELISA法检测霍乱灭活疫苗中LPS的含量,能够反映疫苗的保护力,为进一步替代小鼠免疫力试验方法奠定了基础。

关键词：竞争抑制ELISA 免疫力试验霍乱灭活疫苗脂多糖

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我国伤寒Vi多糖疫苗的质量检定及多糖含量检测的趋势分析

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中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1402-1404页

作者：王斌梁昊宇计国欣曾明中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

伤寒是由伤寒沙门菌感染引起的急性全身性传染病，通过粪．口途径传播，其临床特征为持续发热、神经系统中毒症状、肝脾肿大及白细胞减少等，少数可并发肠出血及肠穿孔。人群对伤寒沙门菌普遍易感，但儿童和青壮年发病率最高。伤寒是发... 详细信息

伤寒是由伤寒沙门菌感染引起的急性全身性传染病，通过粪．口途径传播，其临床特征为持续发热、神经系统中毒症状、肝脾肿大及白细胞减少等，少数可并发肠出血及肠穿孔。人群对伤寒沙门菌普遍易感，但儿童和青壮年发病率最高。伤寒是发展中国家常见的肠道传染病，

关键词：伤寒Vi多糖疫苗质量多糖含量趋势分析

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阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制作用

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中国生物制品学杂志 2012年第6期25卷 704-708页

作者：陈沁田万红许恒毅喻刚魏华曾明南昌大学食品科学与技术国家重点实验室南昌330047 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的研究阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制作用。方法采用双层平板法、琼脂扩散法及液体培养活菌计数法等考察10株阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制效果;分析白色念珠菌的耐酸性;通过琼脂扩散法分析不同pH值的乳酸杆菌发酵上... 详细信息

目的研究阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制作用。方法采用双层平板法、琼脂扩散法及液体培养活菌计数法等考察10株阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制效果;分析白色念珠菌的耐酸性;通过琼脂扩散法分析不同pH值的乳酸杆菌发酵上清液对白色念珠菌的抑菌效果;并分析10株乳酸杆菌产酸能力的差异。结果10株阴道源乳酸杆菌中,ZDY78、ZDY128、ZDY159a、ZDY162a 4株对白色念珠菌的抑制能力较强;白色念珠菌的耐酸能力较强,当发酵上清液的pH≤3.0时,才能观察到明显的抑菌圈;乳酸杆菌的发酵上清液具有抑制白色念珠菌生长的能力,且抑菌效果与培养液中发酵上清所占比例呈正相关;抑菌能力较强的4株乳酸杆菌其产酸能力强于其余6株乳酸杆菌。结论 4株阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌具有明显的抑制作用,且与其产酸能力呈正相关。

关键词：阴道乳酸杆菌白色念珠菌抑菌机理

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我国无细胞百白破联合疫苗中百日咳疫苗的批签发及效力试验的回顾性分析

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中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 1072-1074页

作者：王丽婵张路民侯启明卫辰徐颖华骆鹏张庶民中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

现在几乎全世界都在实施百日咳疫苗的免疫接种,但百日咳仍然是威胁人类健康的重要传染病之一,也是导致婴幼儿死亡的主要原因之一[1]。目前,百白破联合疫苗包括全细胞百白破联合疫苗（DTwP）和无细胞百白破联合疫苗（DTaP）,前者于1948... 详细信息

现在几乎全世界都在实施百日咳疫苗的免疫接种,但百日咳仍然是威胁人类健康的重要传染病之一,也是导致婴幼儿死亡的主要原因之一[1]。目前,百白破联合疫苗包括全细胞百白破联合疫苗（DTwP）和无细胞百白破联合疫苗（DTaP）,前者于1948年研制成功，其百日咳部分为全菌体灭活后制成。全细胞百日咳疫苗接种后副反应大，日本于1981年率先研制无细胞百日咳疫苗［2］。

关键词：无细胞百白破联合疫苗全细胞百日咳疫苗效力试验全细胞百白破联合疫苗批签发无细胞百日咳疫苗免疫接种人类健康

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重组细胞中鼠细小病毒检测方法的建立及初步应用

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中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 1030-1034,1042页

作者：吴雪伶樊金萍冯建平宋丽京孟淑芳李德富中国食品药品检定研究院细胞室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 中国医学科学院肿瘤医院实验动物室北京100021

目的建立生物技术产品用重组细胞中鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)污染的检测方法,并进行验证及初步应用。方法以NB324K细胞为指示细胞,建立MMV感染性检测方法,并以不同CCID50的MMV分别感染NB324K细胞,验证方法的灵敏度;通过设计... 详细信息

目的建立生物技术产品用重组细胞中鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)污染的检测方法,并进行验证及初步应用。方法以NB324K细胞为指示细胞,建立MMV感染性检测方法,并以不同CCID50的MMV分别感染NB324K细胞,验证方法的灵敏度;通过设计针对编码非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1)保守序列的引物和探针,建立用于重组细胞中MMV检测的实时荧光定量PCR,并对其线性、特异性、精密性、灵敏度、最低检测限及试验可行性和干扰性进行验证;将NB324K细胞感染试验与荧光定量PCR法相结合,建立NB324K细胞感染-PCR法,并通过对大量样本的检测,分析荧光定量PCR法和NB324K细胞感染-PCR法的可行性。结果 NB324K细胞感染试验的灵敏度为0.2 CCID50;荧光定量PCR检测方法最佳线性范围为1×108～1×104拷贝/μl,R2达0.99以上,特异性良好,与其他种属的细小病毒均无交叉反应,试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均小于5%,试验内病毒定量拷贝数的CV在20%～30%之间,试验间病毒定量拷贝数的CV在20%～50%之间,灵敏度为5×103拷贝/μl,最低感染性病毒颗粒检测限为2 CCID50。该方法能够用于细胞样品中MMV的检测,部分样品基质对病毒的检测具有一定的干扰性。NB324K细胞感染-PCR法的灵敏度为0.02 CCID50,检测时间可缩短为96 h,与荧光定量PCR法分别对47份样品进行检测,结果均为阴性。结论成功建立了MMV荧光定量PCR检测方法和NB324K细胞感染-PCR法,可应用于重组细胞中MMV污染的检测,为进一步提高生产用重组细胞的安全性奠定了基础。

关键词：小鼠细小病毒荧光定量PCR 重组细胞感染

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金黄葡萄球菌肠毒素C2对小鼠移植瘤的抑制作用

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中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 999-1002页

作者：张华捷李洪义骆鹏张庶民侯启明马霄中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 沈阳协合生物制药股份有限公司沈阳110179

目的采用小鼠移植瘤模型,对金黄葡萄球菌肠毒素C2的抗肿瘤作用进行研究,以进一步揭示超抗原在肿瘤治疗方面的意义。方法从金葡菌发酵液中提纯SEC2蛋白,并经SDS-PAGE及测序分析;构建小鼠S180肉瘤和Lewis肺癌移植瘤模型,分别腹腔注射高、... 详细信息

目的采用小鼠移植瘤模型,对金黄葡萄球菌肠毒素C2的抗肿瘤作用进行研究,以进一步揭示超抗原在肿瘤治疗方面的意义。方法从金葡菌发酵液中提纯SEC2蛋白,并经SDS-PAGE及测序分析;构建小鼠S180肉瘤和Lewis肺癌移植瘤模型,分别腹腔注射高、中、低剂量(800、400、200 ng/kg)的SEC2,连续给药10 d,同时以环磷酰胺为阳性对照,生理盐水为阴性对照。于给药后第11天处死小鼠,将肿瘤组织分离并称重,比较SEC2对S180肉瘤及Lewis肺癌移植瘤的抑瘤效果。结果在相对分子质量约30 000处可见目的条带,与理论值相符,N-未端氨基酸测序与文献报道一致;SEC2对两种移植瘤均产生较明显抑制作用,高、中、低剂量SEC2对S180肉瘤的抑瘤率分别达到50.60%、31.81%和19.38%,对Lewis肺癌的抑瘤率分别达到55.62%、45.70%和37.78%。结论从动物水平上确认了SEC2的抑瘤效果,为进一步开展超抗原抗肿瘤研究奠定了基础。

关键词：葡萄球菌肠毒素超抗原肿瘤

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以百白破疫苗为基础的联合疫苗研究进展和展望

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中华预防医学杂志 2012年第9期46卷 853-856页

作者：卫辰侯启明张庶民陈平纡马霄中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 兰州生物制品研究所有限责任公司

百日咳、白喉和破伤风联合疫苗（DTP）作为最早纳入WHO扩大免疫规划（EPI）的疫苗，已经在预防和控制这3种传染病方面发挥了重要作用。20世纪70年代，由于接种灭活全细胞百白破疫苗（DTwP）后出现了严重的不良反应，

关键词：百白破疫苗联合疫苗扩大免疫规划不良反应百日咳 WHO 破伤风全细胞

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A、C群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗免疫学效果观察

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中国生物制品学杂志 2012年第9期25卷 1190-1194,1197页

作者：李亚南梁丽李艳萍叶强中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 广西壮族自治区疾病预防控制中心临床研究中心南宁530023

目的观察A、C群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌(Meningococcal group A&C/Haemophilus influenzae type b,ACHib)多糖结合疫苗的免疫原性。方法采用开放、完全随机、盲态观察的方法,将1 800名观察对象分为临床试验组和对照组,每组各900... 详细信息

目的观察A、C群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌(Meningococcal group A&C/Haemophilus influenzae type b,ACHib)多糖结合疫苗的免疫原性。方法采用开放、完全随机、盲态观察的方法,将1 800名观察对象分为临床试验组和对照组,每组各900名,两组又按3个年龄段分为3～5、6～11和12～71月龄组。试验组仅经上臂三角肌肌内注射试验疫苗(ACHib多糖结合疫苗),对照组分别经左右上臂同时注射两种对照疫苗(A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗和Hib结合疫苗)。3～5月龄组免疫3针,每针间隔1个月;6～11月龄组免疫2针,每针间隔1个月;12～71月龄组免疫1针。分别于免疫前、全程免疫后30～35 d采集静脉血,分离血清,采用功能性抗体杀菌力法检测A、C群脑膜炎球菌血清杀菌抗体滴度,间接ELISA法检测Hib抗体水平,并计算抗体阳转率及抗体增长倍数。结果免疫后,3个年龄段的试验组与对照组血清A、C群脑膜炎球抗体和Hib抗体阳转率差异均无统计学意义(P>0.05)。3个年龄段试验组与对照组易感和非易感人群A、C群脑膜炎球菌抗体滴度差异均无统计学意义(P均>0.05),而试验组Hib抗体水平低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.001)。结论 ACHib多糖结合疫苗具有良好的免疫原性,可作为上述3种病原菌的预防制剂推广使用。

关键词：脑膜炎球菌多糖疫苗 b型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫原性

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甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白的原核表达、纯化及其免疫保护性

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中国生物制品学杂志 2012年第6期25卷 672-675页

作者：王斌李娜董晓宇梁昊宇陈翠萍陈薇曾明军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR从甲型副伤寒沙门菌(CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋... 详细信息

目的原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR从甲型副伤寒沙门菌(CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经分子筛和亲和层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中抗BtuB IgG抗体效价,并用最小绝对致死剂量活菌攻毒,计算小鼠的保护率。结果重组原核表达质粒pET-30a-btuB经双酶切和测序证实构建正确;重组蛋白的相对分子质量约为67 000,表达量约为菌体总蛋白的25%,主要以包涵体形式表达;纯化的重组蛋白纯度大于90%,可与鼠抗His-Tag单抗特异性结合;纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠可获得高效价的抗BtuB IgG抗体,且可获得60%的保护率。结论成功原核表达并纯化了甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,重组蛋白免疫原性良好,并能够为小鼠提供一定的保护作用。

关键词：甲型副伤寒沙门菌细菌外膜蛋白质类 BtuB蛋白原核细胞基因表达免疫原性免疫保护性

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猴腺病毒(SAdV)PCR检测方法的建立及初步应用

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中国比较医学杂志 2012年第12期22卷 41-47页

作者：张荣建贺争鸣中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立SAdV特异的PCR检测方法并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况。方法比对分析多株SAdV序列,设计SAdV特异引物,优化PCR实验条件,建立的PCR方法经验证后检测实验猴群和猴源性生物制品,阳性产物测序并构建进化树。... 详细信息

目的建立SAdV特异的PCR检测方法并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况。方法比对分析多株SAdV序列,设计SAdV特异引物,优化PCR实验条件,建立的PCR方法经验证后检测实验猴群和猴源性生物制品,阳性产物测序并构建进化树。结果经特异性和敏感性鉴定,在设计的5对引物中确定一对最佳引物,可以区分SAdV和MAD,ICH,CELO且可以检测到的最小DNA量为47.9 pg/mL。PCR方法检测实验猴群,阳性率49.2%,测序及进化分析表明,SAdV感染型别呈广泛基因多样性。主要分布在G亚属和以SAdV-49为代表的分支。结论经测序验证,PCR检测方法具有很好准确性,初步应用表明我国实验猴群中SAdV高度流行,应加强实验猴群及相关生物制品中SAdV的监测,避免人类感染SAdV的潜在风险。

关键词：猴腺病毒 PCR 检测应用猴

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