检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第11期16卷 1357-1360页

作者：徐颖华徐苗中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

钩端螺旋体病,是由致病性钩端螺旋体引起的一种人兽共患的自然疫源性疾病。近些年,伴随着全球气候的变暖和日益城市化,发病率呈现上升趋势。近20年高通量测序技术的发展,已有上千株钩端螺旋体完成了全基因组测序,促进了对该病原菌遗传... 详细信息

钩端螺旋体病,是由致病性钩端螺旋体引起的一种人兽共患的自然疫源性疾病。近些年,伴随着全球气候的变暖和日益城市化,发病率呈现上升趋势。近20年高通量测序技术的发展,已有上千株钩端螺旋体完成了全基因组测序,促进了对该病原菌遗传多样性、分子进化和致病机制的认识。本文就致病性钩端螺旋体基因组特征、基因分型、种群结构和重要毒力因子四个方面对其基因组学研究进展进行归纳总结,以期为后续钩端螺旋体的分子流行病监测、病原溯源和新疫苗研发等工作的提供借鉴。

关键词：钩端螺旋体病致病性钩端螺旋体基因组种群结构毒力因子综述

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流感嗜血杆菌D蛋白作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果评价

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中国生物制品学杂志 2021年第9期34卷 1023-1027,1032页

作者：王丽婵谭亚军卫辰张庶民张华捷马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/... 详细信息

目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,每次加强免疫前及末次免疫后7 d经眼眶采血,分离血清,间接ELISA法检测抗体水平及亚类,同时在末次免疫后7 d取小鼠脾脏,检测细胞免疫水平。结果 PD与A群多糖结合后能增强抗-多糖抗体的IgG水平,第3次免疫后抗体水平达1∶12 800,显著高于单独多糖组(1∶400)(P<0.05);其脾细胞经多糖及多糖蛋白混合物刺激后,IFNγ和IL-4的斑点形成细胞数量与多糖组比较均升高(P<0.05);但Th1/Th2亚群比值与单独多糖组比较并未增高(P>0.05),反而显著低于GAMP-TT组和单独PD组(P<0.05)。结论重组PD与A群多糖结合后能够增强多糖的免疫原性,既可提高体液免疫反应能力,又可激发细胞免疫反应,提示PD具备作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白载体的潜力。

关键词：流感嗜血杆菌 D蛋白 A群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖载体体液免疫细胞免疫

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鼠疫疫苗的临床应用及研究进展

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中国生物制品学杂志 2021年第9期34卷 1120-1125页

作者：魏东(综述) 王国治赵爱华(审校) 中国食品药品检定研究院结核病和过敏原产品室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

鼠疫是一种烈性传染病,具有高度的传染性和致病性,免疫接种是预防鼠疫的重要措施之一。目前使用的鼠疫疫苗主要是减毒活疫苗,近期开展临床研究的疫苗主要是亚单位疫苗。本文就鼠疫减毒活疫苗的临床应用及鼠疫亚单位疫苗的临床研究进展... 详细信息

鼠疫是一种烈性传染病,具有高度的传染性和致病性,免疫接种是预防鼠疫的重要措施之一。目前使用的鼠疫疫苗主要是减毒活疫苗,近期开展临床研究的疫苗主要是亚单位疫苗。本文就鼠疫减毒活疫苗的临床应用及鼠疫亚单位疫苗的临床研究进展作一综述,以期为新疫苗的研制提供参考。

关键词：鼠疫耶尔森菌鼠疫疫苗抗原临床试验

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口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗(Vero细胞)DNA残留检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2024年第12期37卷 1505-1511页

作者：刘艳何鹏李娟娟申瑷琳肖瑶彭小欢郭旭梦姚瑞宁胡忠玉施金荣中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430207

目的利用磁珠分离法结合荧光染色法,建立口服六价重配轮状病毒(rotavirus,RV)减毒活疫苗(Vero细胞)原液及成品中DNA残留量的检测方法,并进行验证。方法采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取样品中的残留Vero细胞DNA,再利... 详细信息

目的利用磁珠分离法结合荧光染色法,建立口服六价重配轮状病毒(rotavirus,RV)减毒活疫苗(Vero细胞)原液及成品中DNA残留量的检测方法,并进行验证。方法采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取样品中的残留Vero细胞DNA,再利用荧光染色对样品中残留DNA进行测定,采用直线回归拟合标准曲线并对样品中的DNA残留量进行分析。对建立的方法进行线性范围、精密度、准确度、专属性、耐用性、定量限验证。对6个血清型的单价原液和成品中的残留宿主细胞DNA进行测定,并采用3种不同方法(荧光染色法、qPCR法、分子杂交法)进行检测,比较检测结果的一致性。结果该方法检测口服六价重配RV减毒活疫苗(Vero细胞)DNA残留量的定量限为1.25 ng/mL,标准品浓度在1.25~80 ng/mL范围内线性关系良好,线性相关系数(r)为1.00;单价原液重复检测6次的加标回收率在93.8%~132.1%之间,成品重复检测6次的加标回收率在66.0%~90.0%之间;同一人员对单价原液和成品重复检测6次的相对标准差(relative standard deviation,RSD)在5.5%~16.1%之间,不同人员对单价原液和成品重复检测6次的RSD分别为7.7%和15.6%;用干扰溶液与RNase-free Water分别稀释标准品至25μg/mL,Vero细胞DNA残留量检测结果的回收率在98.0%~138.8%之间,RSD <12%;单价原液和成品不同孵育时间检测结果的RSD分别<16.3%和8.6%;不同时间和不同实验室对6个不同血清型的单价原液和3批成品中DNA残留量检测结果的RSD <7.1%和6.1%;3种不同方法对同一份样品的检测结果一致性较好。结论磁珠分离法和荧光染色法相结合可用于口服六价重配RV减毒活疫苗(Vero细胞)DNA残留的含量测定,同时也可作为工艺过程中对中间品等关键步骤的评价手段。

关键词： DNA残留荧光染色法磁珠分离法 Vero细胞轮状病毒

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淋病奈瑟菌脂寡糖疫苗研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第5期42卷 415-419页

作者：晏相如孙世洋孙述学张庶民徐颖华夏焕章沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110000 北京成大天和生物科技有限公司北京102600 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

淋病奈瑟菌感染所致淋病是最常报告的传染病之一,随着淋病奈瑟菌抗生素耐药性的不断增加,淋病感染已成为全球重要的公共卫生问题,迫切需要开发安全有效的疫苗。脂寡糖(Lipooligosaccharide,LOS)存在于革兰阴性细菌外膜表面,其包含许多... 详细信息

淋病奈瑟菌感染所致淋病是最常报告的传染病之一,随着淋病奈瑟菌抗生素耐药性的不断增加,淋病感染已成为全球重要的公共卫生问题,迫切需要开发安全有效的疫苗。脂寡糖(Lipooligosaccharide,LOS)存在于革兰阴性细菌外膜表面,其包含许多重要的抗原决定簇。近些年,大量研究表明LOS可能成为淋病奈瑟菌疫苗及其免疫疗法的最有潜力靶点。本文将就LOS结构、在淋病奈瑟菌感染作用机制、LOS疫苗研究进展以及面临的挑战进行综述,以期为后续相关研究提供参考。

关键词：淋病奈瑟菌疫苗脂寡糖免疫原性免疫保护

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基于基因修饰细胞系的生物检定法研究进展

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中国药品标准 2022年第2期23卷 101-107页

作者：于雷周勇王军志中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

以药物的作用机制为基础,采用细胞与分子生物学技术构建特定基因修饰细胞系并开发相应的检测方法,可用于相关产品的生物检定。这种基于基因修饰细胞系的生物检定法在药物的质量控制领域具有广泛的应用前景。本文探讨了基因修饰细胞系的... 详细信息

以药物的作用机制为基础,采用细胞与分子生物学技术构建特定基因修饰细胞系并开发相应的检测方法,可用于相关产品的生物检定。这种基于基因修饰细胞系的生物检定法在药物的质量控制领域具有广泛的应用前景。本文探讨了基因修饰细胞系的构建策略及检测方法的基本原理,并概述了基于基因修饰细胞系的生物检定法在重组蛋白类、疫苗类、基因治疗类等不同产品质量评价中的研究进展及应用情况。

关键词：基因修饰细胞系生物检定法细胞法报告基因法活性/效价测定

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抗破伤风类毒素单克隆抗体的制备与鉴定

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中国免疫学杂志 2021年第18期37卷 2252-2256页

作者：董国霞张华捷晁哲田霖侯启明谭亚军马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

目的:制备抗破伤风类毒素单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法:用破伤风类毒素免疫BALB/c小鼠,经细胞融合及筛选,将阳性杂交瘤细胞株扩大培养后免疫BALB/c小鼠,收获的腹水用Protein G柱纯化;对获得的单克隆抗体进行鉴定,对杂交瘤细胞株进... 详细信息

目的:制备抗破伤风类毒素单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法:用破伤风类毒素免疫BALB/c小鼠,经细胞融合及筛选,将阳性杂交瘤细胞株扩大培养后免疫BALB/c小鼠,收获的腹水用Protein G柱纯化;对获得的单克隆抗体进行鉴定,对杂交瘤细胞株进行稳定性检测。结果:筛选出5株稳定分泌抗破伤风类毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为T1、T2、T3、T4、T5,其分泌的单克隆抗体分别为IgG1、IgG2b、IgG1、IgG2b和IgG1亚类,轻链均为к型;均与百白破疫苗中的T抗原具有较好的反应,与D抗原、PT抗原、FHA抗原和PRN抗原无交叉反应;其中2株单克隆抗体为中和性抗体。结论:获得5株抗破伤风类毒素单克隆抗体,其中2株为中和性抗体,为破伤风疫苗效价检测新方法的建立等奠定了基础。

关键词：破伤风类毒素单克隆抗体制备鉴定

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重组腺相关病毒中游离与错误包装宿主细胞DNA检测的两种前处理方法的比较

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中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 527-531页

作者：王光裕胡倩史新昌闫书美周勇刘宾中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 上海泰昶生物技术有限公司上海201413 上海天泽云泰生物医药有限公司上海201203

目的采用DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)处理与填料亲和两种前处理方法检测重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)游离与错误包装宿主细胞DNA(host cell DNA,HCDNA)残留量,并进行比较。方法分别采用DNase处理法和填料亲和法分离游离与错误包装HCDNA,再进行核酸提取及qPCR检测。比较两种前处理方法检测HCDNA残留量的准确度和重复性。结果采用DNase处理的方式,DNase未处理组核酸定量检测结果为HCDNA总残留量,DNase处理组为错误包装HCDNA量,二者差值为游离HCDNA残留量。DNase未处理和处理组回收率均为75%以上,重复性RSD小于30%。采用亲和提取方式,填料偶联亲和配基,结合rAAV,检测错误包装HCDNA回收率为75%以上,检测游离HCDNA回收率仅为36%。结论DNase处理法可有效检出游离与错误包装HCDNA,可为后续研究奠定基础。

关键词：腺相关病毒 DNA酶亲和填料 PCR 宿主细胞DNA 游离错误包装

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不同来源粪肠球菌的比较基因组学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第7期17卷 784-789页

作者：孙淑玥王珊珊崔生辉徐颖华卢雪梅广东药科大学生命科学与生物制药学院广东省生物活性药物研究重点实验室广东广州510006 中国食品药品检定研究院中国医学细菌保藏管理中心卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的分析不同来源粪肠球菌全基因组特征及其分子进化规律。方法对收集的不同来源粪肠球菌进行全基因组序列测序,利用比较基因组学分析粪肠球菌的基因特征、耐药基因和毒力基因携带情况,并以此进行泛基因组和核心基因组分析,构建系统发育... 详细信息

目的分析不同来源粪肠球菌全基因组特征及其分子进化规律。方法对收集的不同来源粪肠球菌进行全基因组序列测序,利用比较基因组学分析粪肠球菌的基因特征、耐药基因和毒力基因携带情况,并以此进行泛基因组和核心基因组分析,构建系统发育树,进行系统进化分析。结果6株不同来源粪肠球菌染色体全基因组序列全长为2450754~2731452 bp,共含有2669~3085个基因,基因组的平均GC含量为38.0%。粪肠球菌具有开放型泛基因组,而核心基因组为稳定型。不同来源菌株基因组中均含有3~14种耐药基因和8~17种毒力基因。基于核心基因系统进化树分析显示,不同来源的粪肠球菌分子进化均匀分布,相互重叠,无明显聚类趋势。结论粪肠球菌具有开放型泛基因组,其核心基因为稳定型,不同来源分离菌株进化均匀分布,这些结果为后续揭示粪肠球菌分子遗传进化规律等研究奠定了基础。

关键词：粪肠球菌全基因组测序系统发育分析比较基因组学

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流行性脑脊髓膜炎的流行趋势变化与其疫苗接种

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实用预防医学 2022年第8期29卷 1015-1019页

作者：徐颖华徐苗叶强中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

在过去几十年,随着疫苗的广泛使用,不同国家和区域引起流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原体的血清群也发生了变迁。本文将脑膜炎球菌疫苗免疫接种、感染人群、不同区域和国家流脑的流行趋势及其内在机制研究进展进行综述,为进一步了解流... 详细信息

在过去几十年,随着疫苗的广泛使用,不同国家和区域引起流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原体的血清群也发生了变迁。本文将脑膜炎球菌疫苗免疫接种、感染人群、不同区域和国家流脑的流行趋势及其内在机制研究进展进行综述,为进一步了解流脑流行趋势变化与其疫苗接种和后续制定免疫策略提供参考。

关键词：流行性脑脊髓膜炎流行趋势疫苗接种感染人群

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