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UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分及其溶出规律探究

中成药 2022年第4期44卷 1177-1183页

作者：张聪聪刘瀚泽王永丽张定棋陈佳美刘伟刘平王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的建立UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量,并探讨不同配比药对中其溶出规律。方法分析采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源... 详细信息

目的建立UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量,并探讨不同配比药对中其溶出规律。方法分析采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,一级负离子全扫模式。测定单煎液、大黄-桃仁药对不同配比合煎液中,以及单药组、药对组温浸不同时间16种成分的含量。结果16种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9994),加样回收率95.39%~104.90%,RSD≤4.14%,单煎液和不同配比大黄桃仁药对煎液中16种成分的溶出量差异明显。大黄总蒽醌苷类和桃仁氰苷类成分的含量随着大黄占比减少具有先增加后降低的趋势。在温浸试验中,除没食子酸、番泻苷B、番泻苷A、大黄素外,其他12种成分含量在单药组与药对组的组间差异显著。结论该方法可用于快速、准确测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量。大黄-桃仁药对中的糖苷及相对应苷元含量受到大黄占比的影响。

关键词：大黄-桃仁药对化学成分蒽醌苦杏仁苷 UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS

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牡荆素减轻小鼠溃疡性结肠炎的药效作用及机制研究

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中国药理学通报 2014年第12期30卷 1677-1681页

作者：孙阿宁任改艳邓超张晶晶王峥涛窦薇中国药科大学生药学研究室江苏南京210038 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203

目的探讨牡荆素对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分成3组(n=10):正常对照组、模型组(4%DSS)和牡荆素组(4%DSS+牡荆素,50 mg·kg... 详细信息

目的探讨牡荆素对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分成3组(n=10):正常对照组、模型组(4%DSS)和牡荆素组(4%DSS+牡荆素,50 mg·kg-1)。除正常对照组外,其他组小鼠饮用水中加入4%DSS造模,造模同时牡荆素灌胃给药,每天1次,并每天称重和观察血便等症状,直到实验结束。于造模7 d处死小鼠,截取结肠做HE染色并进行组织损伤和炎性细胞浸润评分;ELISA方法检测小鼠结肠黏膜髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;反转录荧光定量PCR方法检测小鼠结肠组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)及环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)mRNA的表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠体重明显减轻,组织病理评分增高,同时结肠匀浆MPO水平明显升高,结肠组织TNF-α、IL-6和COX-2表达升高。与模型组比较,牡荆素组小鼠上述指标明显改善。结论牡荆素能有效减轻小鼠实验性溃疡性结肠炎,缓解炎症反应,其机制可能与抑制中性粒细胞浸润和减少炎症因子释放有关。

关键词：牡荆素溃疡性结肠炎葡聚糖硫酸钠 MPO TNF-α IL-6 COX-2

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生、制何首乌水提物改善MCD饲料诱导小鼠非酒精性脂肪性肝炎的研究

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中国中药杂志 2020年第19期45卷 4732-4739页

作者：胡菲菲郝占霞张少波盛雨辰季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学创新中药研究院药物安全评价研究中心上海201203

该研究观察生何首乌和制何首乌水提物对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的改善作用及其初步机制。采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine-choline-deficient diet,MCD)喂养小鼠6周进行造模,开始造模2周后小鼠灌胃5... 详细信息

该研究观察生何首乌和制何首乌水提物对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的改善作用及其初步机制。采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine-choline-deficient diet,MCD)喂养小鼠6周进行造模,开始造模2周后小鼠灌胃50,100,200 mg·kg^-1的生何首乌水提物(Polygoni Multiflori Radix water extract,PMRWE)或制何首乌水提物(Polygoni Multiflori Radix Praeparata water extract,PMRPWE),连续给药4周。6周后结束实验,过程中持续监测小鼠体质量变化并记录;检测血清生化指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)与谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的活力;进行肝脏病理切片染色观察以及NAFLD活动性评分(NAFLD activity score,NAS)的计算;检测肝组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,甘油三酯(triglyceride,TG)和游离脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)的含量,并进行肝组织油红O染色观察;应用荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测肝组织中β氧化相关分子mRNA的表达。结果显示,100,200 mg·kg^-1的PMRWE及50,100,200 mg·kg^-1的PMRPWE能够改善MCD诱导NASH病变中的肝损伤;100,200 mg·kg^-1的PMRWE及50,100,200 mg·kg^-1的PMRPWE能够减少MCD诱导NASH病变中肝脏的脂质堆积;不同剂量的PMRPWE均能够逆转MCD诱导NASH病变中肝组织中下降的β氧化相关分子mRNA的水平。以上研究表明,PMRPWE与PMRWE能够通过促进肝脏脂肪酸β氧化,减少肝脏脂质累积,减轻肝脏损伤,从而发挥改善NASH的作用,且PMRPWE的作用明显优于PMRWE。

关键词：生何首乌水提物制何首乌水提物非酒精性脂肪性肝炎 β氧化

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异鼠李素对CYP3A4的调节及药物相互作用分析

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药学学报 2012年第8期47卷 1006-1010页

作者：丁丽丽张晶晶窦薇上海中医药大学中药研究所、中药标准化教育部重点实验室及上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 中国药科大学生药学研究室江苏南京210038

观察异鼠李素对CYP3A4的转录激活、mRNA诱导及酶活性的影响,并对其在联合用药中的药物相互作用进行评价。在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验检测异鼠李素对PXR介导的CYP3A4的转录激活作用;荧光定量RT-PCR方法检测其对CYP3A4 mRN... 详细信息

观察异鼠李素对CYP3A4的转录激活、mRNA诱导及酶活性的影响,并对其在联合用药中的药物相互作用进行评价。在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验检测异鼠李素对PXR介导的CYP3A4的转录激活作用;荧光定量RT-PCR方法检测其对CYP3A4 mRNA的诱导作用;底物化学发光法检测其对细胞CYP3A4酶活性的影响;细胞增殖实验检测其对化疗药物伊立替康肝癌细胞毒性的影响。结果表明,异鼠李素(1、10及25μmol·L 1)可以剂量依赖性通过激活PXR而诱导CYP3A4的转录,同时可剂量依赖性上调CYP3A4mRNA表达,但对CYP3A4酶活性无影响,对化疗药物伊立替康肝癌细胞毒作用也无影响。提示异鼠李素对CYP3A4 mRNA的诱导可能与PXR途径有关,并且可能不会干扰与其联用的其他药物的代谢。本研究可以为异鼠李素临床合理用药提供参考。

关键词：孕烷X受体 CYP3A4 药物相互作用异鼠李素

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NF-κB在细胞凋亡中调节作用的研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2015年第2期29卷 323-327页

作者：任改艳孙阿宁张晶晶邓超王峥涛窦薇上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 中国药科大学生药学研究室江苏南京210038

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程,主要有3条通路参与引起细胞凋亡,即细胞内的线粒体通路、内质网通路和细胞外的死亡受体通路。近年研究表明,NF-κB与细胞凋亡关系密切,具有抑制凋亡和促进凋亡的双向调节作用,其在细... 详细信息

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程,主要有3条通路参与引起细胞凋亡,即细胞内的线粒体通路、内质网通路和细胞外的死亡受体通路。近年研究表明,NF-κB与细胞凋亡关系密切,具有抑制凋亡和促进凋亡的双向调节作用,其在细胞凋亡中调节作用与凋亡抑制蛋白家族、B细胞淋巴瘤/白血病-2家族、肿瘤坏死因子受体相关因子家族、c-Jun氨基端激酶、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和Fas相关死亡域蛋白样白细胞介素1β转化酶抑制蛋白等有关。探索NF-κB在细胞凋亡中的调控机制,对凋亡相关疾病的药物开发具有重要意义。本文就NF-κB在细胞凋亡中的调节作用进行综述。

关键词： NF-κB 细胞凋亡

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芒果苷对实验性结肠炎小鼠的保护作用

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中国药理学通报 2013年第9期29卷 1205-1208页

作者：张晶晶丁丽丽任改艳窦薇王峥涛中国药科大学生药学研究室江苏南京210038 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203

目的探讨芒果苷对小鼠实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的保护作用和机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为4组(n=10):正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP,350 mg·kg-1,腹腔注射)以及芒果苷组(MA,50 mg·kg-1,灌胃... 详细信息

目的探讨芒果苷对小鼠实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的保护作用和机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为4组(n=10):正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP,350 mg·kg-1,腹腔注射)以及芒果苷组(MA,50 mg·kg-1,灌胃)。除正常对照组外,其他组小鼠均以饮用水中添加葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)造模。SASP组和MA组分别于造模前2 d每日给予SASP和MA直到实验结束。于造模7 d处死小鼠,对结肠行HE染色后进行组织损伤和炎性细胞浸润评分,以ELISA方法检测结肠黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性和TNF-α水平。结果模型组小鼠的病理损伤和评分、MPO活性和TNF-α水平均明显高于正常对照组,MA组上述指标比模型组明显改善,但改善效果不如SASP组明显。结论芒果苷可以减轻实验性UC小鼠的结肠黏膜损伤,其UC保护作用机制可能与其抑制中性粒细胞浸润和减少炎症细胞因子产生有关。

关键词：实验性溃疡性结肠炎炎症性肠病保护 MPO TNF—α 芒果苷

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千里光与欧洲千里光非生物碱部位HPLC特征指纹图谱比较研究

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中国中药杂志 2011年第6期36卷 725-728页

作者：杨雪晶熊爱珍杨莉王长虹王峥涛中国药科大学生药学研究室江苏南京210038 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:建立千里光Senecio scandens和欧洲千里光***非生物碱部位的HPLC特征指纹图谱分析方法,并对二者进行比较研究。方法:采用HPLC-UV方法对7批千里光药材和6批欧洲千里光药材的指纹图谱进行了比较,并分别以绿原酸、金丝桃苷为对照品,... 详细信息

目的:建立千里光Senecio scandens和欧洲千里光***非生物碱部位的HPLC特征指纹图谱分析方法,并对二者进行比较研究。方法:采用HPLC-UV方法对7批千里光药材和6批欧洲千里光药材的指纹图谱进行了比较,并分别以绿原酸、金丝桃苷为对照品,对指纹峰进行了半定量分析;采用Shiseido Capcell Pak MGⅡC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.2%乙酸,梯度洗脱。结果:2种千里光属植物HPLC非生物碱部位的特征指纹图谱差异显著,分别在千里光和欧洲千里光指纹谱中检出11个共有峰,HPLC-DAD及HPLC-MS分析结果表明上述共有峰主要为有机酸类(包括绿原酸类和原儿茶酸类化合物)和黄酮类化合物。半定量分析的结果表明千里光中有机酸和黄酮类化合物的含量较高,其平均含量分别为欧洲千里光中的2.39,15.56倍。结论:所建立HPLC方法稳定可靠,同时适用于千里光属植物千里光和欧洲千里光的指纹图谱研究,可用于千里光药材的质量评价。

关键词：千里光欧洲千里光有机酸黄酮指纹图谱

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二氢杨梅素抗肿瘤活性及作用机制研究进展

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中国新药与临床杂志 2020年第8期39卷 454-458页

作者：张婧罗晓平于之伦岳备任君宇王浩窦薇上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203

二氢杨梅素是存在于自然界的一种小分子二氢黄酮醇类化合物,在诸多植物中含量丰富,药理活性多样。由于其具备安全、低毒的特点,现已成为天然抗肿瘤药物研发的热点。近年研究表明二氢杨梅素具有抗肿瘤作用,其作用机制包括诱导肿瘤细胞凋... 详细信息

二氢杨梅素是存在于自然界的一种小分子二氢黄酮醇类化合物,在诸多植物中含量丰富,药理活性多样。由于其具备安全、低毒的特点,现已成为天然抗肿瘤药物研发的热点。近年研究表明二氢杨梅素具有抗肿瘤作用,其作用机制包括诱导肿瘤细胞凋亡、阻滞细胞周期和抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞侵袭和迁移、拮抗肿瘤细胞耐药等。目前,针对二氢杨梅素的抗肿瘤研究多集中于细胞层面,主要涉及Akt-mTOR、NF-κB、ERK、p53等信号通路,少见体内药效研究。

关键词：二氢杨梅素抗肿瘤药理作用分子作用机制

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UPLC-MS同时测定千里光和欧洲千里光中阿多尼弗林碱和千里光碱的含量

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中国中药杂志 2011年第6期36卷 702-705页

作者：熊爱珍杨莉杨雪晶王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 中国药科大学生药学研究室江苏南京210038 上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:建立同时测定千里光和欧洲千里光中阿多尼弗林碱和千里光碱含量的UPLC-MS方法。方法:采用Wa-ters公司UPLC-Micro 2000仪器ESI+离子模式下选择离子监控,以野百合碱为内标计算浓度;色谱分离采用Shiseido CapcellPak MG色谱柱(2.0 mm&... 详细信息

目的:建立同时测定千里光和欧洲千里光中阿多尼弗林碱和千里光碱含量的UPLC-MS方法。方法:采用Wa-ters公司UPLC-Micro 2000仪器ESI+离子模式下选择离子监控,以野百合碱为内标计算浓度;色谱分离采用Shiseido CapcellPak MG色谱柱(2.0 mm×50 mm,3μm),流动相乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 ***-1,柱温30℃,进样量2μL。结果:阿多尼弗林碱进样质量浓度在1.02～816.00μg.L-1呈现良好线性关系(r=0.998 0),50%,100%,150%浓度水平下加样回收率在95.73%～103.0%,RSD不超过2.5%;千里光碱进样质量浓度在1.08～860.56μg.L-1呈现良好线性关系(r=0.997 6),50%,100%,150%浓度水平下加样回收率在95.67%～101.5%,RSD不超过2.3%;方法重复性及精密度良好。结论:所建立UPLC-MS方法灵敏、准确,重现性好,适用于千里光和欧洲千里光中阿多尼弗林碱和千里光碱的含量测定,可用于千里光药材中吡咯里西啶类生物碱的限量检查以及其混用品种如欧洲千里光的监控,为千里光药材2010年版《中国药典》的质量标准研究奠定基础。

关键词：千里光欧洲千里光吡咯里西啶类生物碱液质联用

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骆驼蓬子总生物碱改善小鼠学习记忆能力

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中成药 2015年第3期37卷 478-482页

作者：何丹丹张磊刘力吴晓俊程雪梅王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的采用多种小鼠记忆障碍模型筛选骆驼蓬子抗老年痴呆的有效部位(总生物碱和非生物碱部位)。方法采用避暗实验法分别对骆驼蓬子总生物碱和非生物碱部位对东莨菪碱和30%乙醇所致的记忆获得性障碍和记忆再现障碍性小鼠学习记忆能力的影... 详细信息

目的采用多种小鼠记忆障碍模型筛选骆驼蓬子抗老年痴呆的有效部位(总生物碱和非生物碱部位)。方法采用避暗实验法分别对骆驼蓬子总生物碱和非生物碱部位对东莨菪碱和30%乙醇所致的记忆获得性障碍和记忆再现障碍性小鼠学习记忆能力的影响进行考察。通过小鼠跳台实验法进一步验证有效部位对东莨菪碱、30%乙醇和亚硝酸钠所致小鼠记忆获得性障碍、记忆再现障碍及记忆巩固障碍模型的改善作用。结果避暗实验结果表明总生物碱在较高剂量下对东莨菪碱和30%乙醇所致记忆获得性障碍和记忆再生性障碍有一定的改善作用(与模型组比较,可显著延长小鼠潜伏期,P<0.01)。小鼠跳台实验法进一步证明高剂量骆驼蓬子总生物碱对东莨菪碱和30%乙醇诱导的学习记忆障碍具有改善作用,但对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍无明显改善作用。结论总生物碱是骆驼蓬子改善小鼠学习记忆的有效部位。

关键词：骆驼蓬总生物碱学习记忆障碍避暗法跳台法阿尔茨海默病

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