检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业大学学报 2020年第1期25卷 123-130页

作者：赵学亮孙柯苏倩呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE... 详细信息

为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE分析蛋白表达的特征,并利用在线软件对GST蛋白进行生物信息学分析。结果表明:捻转血矛线虫GST基因大小为618 bp;诱导后的pET30a(+)-GST重组菌最佳诱导条件为0.05 mmol/L的IPTG在37℃时诱导6 h,以包涵体的形式存在,大小约为29 ku。生物信息学分析表明:GST分子式为C1083H1657N277O294S6,属于不含信号肽和跨膜区的亲水性蛋白;二级结构主要由α螺旋形成;潜在的抗原表位主要位于25~48、55~63、92~106、113~124、139~147、170~189和195~205位氨基酸附近。本试验成功构建GST基因原核表达系统,优化表达条件下能稳定纯化GST重组蛋白,为进一步探索捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制及GST蛋白的生物学特性提供研究基础。

关键词：捻转血矛线虫 GST基因原核表达生物信息学

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Nesfatin-1对糖代谢和脂肪代谢调节的研究进展

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动物医学进展 2020年第12期41卷 108-114页

作者：白兆星吴贞思李慧萍么宏强玉斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

Nesfatin-1作为一种新的能量调节肽,在对机体的糖代谢和脂肪代谢调节中具有重要的作用。其中nesfatin-1在调节机体脂肪代谢中,通过影响机体自身的能量消耗、抑制食欲以及抑制脂肪细胞的分化以起到对脂肪代谢的调节作用。其在调节机体糖... 详细信息

Nesfatin-1作为一种新的能量调节肽,在对机体的糖代谢和脂肪代谢调节中具有重要的作用。其中nesfatin-1在调节机体脂肪代谢中,通过影响机体自身的能量消耗、抑制食欲以及抑制脂肪细胞的分化以起到对脂肪代谢的调节作用。其在调节机体糖代谢的过程中,通过中枢和外周的方式对机体的血糖稳态和机体胰岛素的分泌进行刺激以达到调节机体糖代谢的功能。通过调节机体的糖代谢和脂肪代谢,nesfatin-1对糖尿病患者具有潜在治疗作用。nesfatin-1通过对机体的能量调节说明其对肥胖具有潜在的治疗作用。探究nesfatin-1调节机体的糖代谢和脂肪代谢的具体作用,以期为nesfatin-1在应对肥胖和糖尿病以及临床应用方面提供理论依据。

关键词： Nesfatin-1 糖代谢脂肪代谢肥胖

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奶牛子宫内膜组织α7-nAChR介导的抗炎效应

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中国兽医学报 2020年第1期40卷 147-152页

作者：阿如娜刘科陈灰曹金山贺鹏飞内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

产后奶牛子宫内膜炎高发并导致严重的繁殖机能障碍使该病防治成为当前研究重点。胆碱能抗炎症通路为新药开发提供新的靶点,主要通过烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)发挥抗炎作用,但α7-nAChR能否成为治疗奶牛子宫内膜炎的潜在药物靶点尚无... 详细信息

产后奶牛子宫内膜炎高发并导致严重的繁殖机能障碍使该病防治成为当前研究重点。胆碱能抗炎症通路为新药开发提供新的靶点,主要通过烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)发挥抗炎作用,但α7-nAChR能否成为治疗奶牛子宫内膜炎的潜在药物靶点尚无数据报道。本研究的目的是调查奶牛子宫内膜组织α7-nAChR是否参与抗炎效应。结果表明,LPS刺激子宫内膜组织8和12 h il-6 mRNA表达量最高,因此选择8和12 h作为本研究炎症模型最佳LPS作用时间;α7-nAChR特异性激动剂PNU-282987在5,10和15mmol/L浓度下可显著下调促炎细胞因子il-1β、il-6、tnf-α及炎症趋化因子il-8 mRNA表达,同时环氧合酶-2(cox-2)和微粒体前列腺素E合成酶-1(mpges-1)表达水平明显下降,这种效应可被α7-nAChR特异性拮抗剂甲基牛扁碱(MLA)逆转。上述结果初步表明激动子宫内膜α7-nAChR具有抑制炎症效应。

关键词：奶牛子宫内膜炎 α-7烟碱乙酰胆碱受体烟碱抗炎通路环氧合酶-2

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直接PCR方法在捻转血矛线虫耐苯丙咪唑类药物检测中的应用

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内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2022年第3期43卷 1-5页

作者：昭日格图侯斌林鑫毛冉哈斯苏荣赤峰市农牧科学研究所赤峰024031 内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为临床上能快速准确的鉴定捻转血矛线虫对阿苯达唑的耐药性情况,本研究建立了一种快速、灵敏、特异性强、成本低的捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法,合成通用引物后,对PCR退火温度进行筛选、进行特异性、敏感性、重复性试... 详细信息

为临床上能快速准确的鉴定捻转血矛线虫对阿苯达唑的耐药性情况,本研究建立了一种快速、灵敏、特异性强、成本低的捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法,合成通用引物后,对PCR退火温度进行筛选、进行特异性、敏感性、重复性试验,建立了捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法。该方法能特异性的扩增出捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白基因中一段385 bp序列,最佳退火温度为60℃,最低检测限度为19 ng。本研究应用建立的Direct-PCR方法和常规PCR方法对32份样品进行Ⅰ型β微管蛋白的提取,结果表明,Direct-PCR扩增阳性率为97%,而常规PCR扩增总阳性率为83%,2种方法差异不显著(P>0.05),但扩增阳性率比常规PCR方法效率高,说明该方法更具有推广和应用价值。该试验成功建立了捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法,为捻转血矛线虫耐阿苯达唑的快速诊断提供了一种新的方法。

关键词：捻转血矛线虫直接PCR耐药性阿苯达唑

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奶牛子宫组织a-7nAChR介导LPS上调PGE2合成抑制效应

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中国兽医学报 2020年第7期40卷 1372-1377页

作者：阿如娜杨超陈灰魏泓毓刘科贺鹏飞内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

产后奶牛子宫内膜炎是我国奶牛养殖业高发病之一,因此开发防治子宫内膜炎的药物及筛选药物靶点是当前研究热点。前期研究表明,脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)可明显促进奶牛子宫组织前列腺素E2(PGE2)合成,PGE2是炎症反应中疼痛和发热... 详细信息

产后奶牛子宫内膜炎是我国奶牛养殖业高发病之一,因此开发防治子宫内膜炎的药物及筛选药物靶点是当前研究热点。前期研究表明,脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)可明显促进奶牛子宫组织前列腺素E2(PGE2)合成,PGE2是炎症反应中疼痛和发热的重要介质,抑制PGE2合成可有效控制炎症损伤。在多种组织中激动α-7烟碱乙酰胆碱受体(α-7 nicotinic acetylcholine receptor,α-7 nAChR)具有抗炎效应,但是否通过PGE2合成途径发挥抗炎作用尚有争议。本研究目的在于调查在LPS刺激奶牛子宫内膜组织中,α-7nAChR能否调控PGE2合成。结果表明,LPS刺激子宫内膜组织12 h IL-6 mRNA表达量最高,因此作本研究炎症模型最佳LPS作用时间;α-7nAChR特异性激动剂PNU-2829875,10和15μmol/L浓度下可显著抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)和微粒体前列腺素E合成酶-1(Microsomal prostaglandin E synthase-1,m PGES-1)mRNA和蛋白表达及PGE2分泌,该抑制效应可被α-7nAChR特异性抑制剂甲基牛扁碱(MLA)逆转。上述结果表明奶牛子宫内膜组织α-7nAChR可抑制LPS上调PGE2合成效应,是防治奶牛子宫内膜炎潜在的药物靶点。

关键词：奶牛子宫内膜炎 α-7烟碱乙酰胆碱受体环氧合酶-2 微粒体前列腺素E合成酶-1 前列腺素E2

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Dectin-2和TLR-2在酿酒酵母甘露聚糖诱导SBD-1表达过程中的作用

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中国兽医学报 2020年第1期40卷 122-128页

作者：金鑫张曼王云鹤魏方温婧怡杨银凤内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了探索膜受体Dectin-2和TLR-2在酿酒酵母甘露聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)β-防御素-1(sheepβ-defensin-1,SBD-1)表达过程中的作用。本研究首先利用免疫组化、RT-PCR和Western blot方法确定Dectin-2是否在ORECs内表达;然后采用qPCR和Western blot方法检测甘露聚糖刺激ORECs后Dectin-2和TLR-2的表达变化;最后用qPCR和ELISA方法检测不同质量浓度(0.1,1.0,10.0 mg/L)的Dectin-2和TLR-2特异性封闭抗体对甘露聚糖诱导SBD-1表达的影响。结果显示:ORECs内表达Dectin-2,且甘露聚糖刺激ORECs后Dectin-2和TLR-2的表达量均显著增加(P<0.01);同时甘露聚糖可以诱导SBD-1的表达(P<0.01),但是该表达过程可以被不同质量浓度的Dectin-2封闭抗体和TLR-2封闭抗体所抑制(P<0.05),且随着抗体浓度的增加,这种抑制作用越明显。此外,在封闭抗体质量浓度相同时,Dectin-2封闭抗体比TLR-2封闭抗体抑制SBD-1表达的作用更明显(P<0.05)。结果表明,酿酒酵母甘露聚糖诱导SBD-1的表达与Dectin-2和TLR-2受体有关,但是Dectin-2在此过程中发挥更主要的作用。

关键词：甘露聚糖 β-防御素-1 绵羊瘤胃上皮细胞 Dectin-2 TLR-2

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Ⅱ型牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定

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中国动物传染病学报 2020年第1期28卷 45-49页

作者：范峻豪赵洪哲王昊张静王凤雪温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

为了解内蒙古呼和浩特部分地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况,本研究采用RTPCR技术从采集自内蒙古某屠宰场的32份牛肺脏样品中检测出两株BVDV,命名为BVDV-HT1704、BVDV-HT1723株。通过在MDBK细胞上传... 详细信息

为了解内蒙古呼和浩特部分地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况,本研究采用RTPCR技术从采集自内蒙古某屠宰场的32份牛肺脏样品中检测出两株BVDV,命名为BVDV-HT1704、BVDV-HT1723株。通过在MDBK细胞上传代、免疫荧光试验、5’-UTR基因序列测定及分子进化分析对检测出BVDV阳性的肺脏组织进行鉴定。结果显示:在MDBK细胞中盲传10代后没有病变产生;经IFA检测,在病毒感染的细胞浆内产生特异性荧光;序列同源性和系统进化分析表明该毒株属于BVDV-Ⅱa型,且两株分离株属于单一的分支。本研究首次在我国正常牛肺脏组织中分离到BVDV,为了解BVDV在内蒙古自治区的流行情况及地理分布提供依据,并为相关疫苗的研发奠定了基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 RT-PCR 分离鉴定

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1例绒山羊链球菌病的诊断

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兽医导刊 2024年第3期 16-19页

作者：李新跃李静李怡潞米腾腾丁玉林张迪郭咏华梅花王金玲内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区科学技术厅内蒙古自治区转制科研院所离退休人员服务中心内蒙古呼和浩特010010 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站内蒙古通辽028000 内蒙古阿拉善右旗巴丹吉林镇综合保障和技术推广中心内蒙古阿拉善737300 内蒙古阿拉善右旗农业技术推广中心内蒙古阿拉善737300

本研究通过临床病史及症状、尸体剖检、组织病理学和病原学方法确诊1例绒山羊链球菌病。患病羔羊临床表现口腔黏膜坏死,严重腹泻,流清液,眼有脓性分泌物,体温升高;发病后期病例出现头颈扭曲的神经症状,病程4~5 d。尸体剖检见坏死性口炎... 详细信息

本研究通过临床病史及症状、尸体剖检、组织病理学和病原学方法确诊1例绒山羊链球菌病。患病羔羊临床表现口腔黏膜坏死,严重腹泻,流清液,眼有脓性分泌物,体温升高;发病后期病例出现头颈扭曲的神经症状,病程4~5 d。尸体剖检见坏死性口炎,口腔黏膜散在大小不等的坏死灶和溃疡灶;全身淋巴结肿大,表面和切面散在深红色出血点;纤维素性胸膜肺炎,右肺尖叶、心叶和膈叶前下缘严重黑红色实变,与胸壁发生粘连;胸部肌肉、心外膜、肾脏、瘤胃浆膜面和膀胱黏膜等组织散在出血斑点。组织病理学表现为严重的纤维素性坏死性肺炎、出血性坏死性淋巴结炎和化脓性脑炎。脑、肺触片镜检可见典型的短链或长链状的革兰氏阳性链球菌,菌体周围可见薄层红染荚膜。本研究可为羊链球菌病的诊断和防控提供参考。

关键词：绒山羊链球菌病化脓性脑炎革兰氏染色链球菌

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猪瘟病毒Erns和E2蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

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中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 76-83页

作者：张洪亮郝占武林喜平张志王凤雪解倩倩韩先杰单虎温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 青岛农业大学动物医学院山东省新兽药创制协同创新中心青岛市兽医生物技术工程研究中心青岛266109 兴安盟五岔沟国有林管理局阿尔山137803 中国动物卫生与流行病学中心青岛266032

本研究将CSFV Erns和E2基因的主要抗原区进行克隆,构建pET32a-Erns和pET32aEK-E2重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化,以纯化的rErns、rE2重组蛋白为包被抗原,经条件优化,分别建立CSFV rErns和rE2抗体间接ELISA检测... 详细信息

本研究将CSFV Erns和E2基因的主要抗原区进行克隆,构建pET32a-Erns和pET32aEK-E2重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化,以纯化的rErns、rE2重组蛋白为包被抗原,经条件优化,分别建立CSFV rErns和rE2抗体间接ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,分别获得约为47 kDa和42 kDa的重组蛋白,rErns重组蛋白主要在上清液中存在,rE2重组蛋白主要以包涵体形式存在。Western blot结果显示,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。通过方阵试验进行了ELISA反应条件优化,确定了Erns蛋白最佳包被量为2.5μg/mL,rE2蛋白最佳包被量为0.625μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,最佳封闭液为0.25%PVA溶液,HRP标记的兔抗猪IgG二抗最佳稀释度为1∶2000,临界值分别为0.24和0.33。上述方法仅与CSFV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1∶1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%。本研究建立的间接ELISA方法可初步应用于CSFV Erns和E2抗体的检测,鉴别E2亚单位疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪瘟净化工作的实施。

关键词：猪瘟病毒 Erns基因 E2基因蛋白表达间接ELISA

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布氏杆菌S2弱毒疫苗株的S2JY3基因生物信息学分析及原核表达

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畜牧与兽医 2020年第6期52卷 76-80页

作者：苏倩白丽艳孙柯林洋呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为分析布氏杆菌S2弱毒疫苗特有的S2JY3基因的功能和作为诊断抗原的可能性,应用PCR技术扩增S2JY3基因,用限制性内切酶对目的片段与pET30a(+)原核表达载体进行双酶切,构建重组表达载体,用IPTG诱导表达,蛋白纯化,并进行Western blot检测;... 详细信息

为分析布氏杆菌S2弱毒疫苗特有的S2JY3基因的功能和作为诊断抗原的可能性,应用PCR技术扩增S2JY3基因,用限制性内切酶对目的片段与pET30a(+)原核表达载体进行双酶切,构建重组表达载体,用IPTG诱导表达,蛋白纯化,并进行Western blot检测;利用生物信息学软件对该基因理化性质、结构特点进行分析。结果表明,S2JY3基因全长1257 bp,编码418个氨基酸,蛋白质理论大小值为43 kDa,理论等电点为9.73,蛋白质不稳定系数为36.31,是稳定蛋白,总平均亲水性为-0.577,为亲水性蛋白;跨膜结构和信号肽分析表明S2JY3蛋白无跨膜区,无信号肽区域。本研究成功构建了重组表达蛋白rS2JY3,Western blot结果表明rS2JY3与布氏杆菌S2疫苗免疫羊血清发生特异性结合反应,不与自然感染羊血清反应,具有良好的抗原性和特异性。该研究为羊布氏杆菌S2疫苗免疫和自然感染快速检测和鉴定等提供理论依据。

关键词：布氏杆菌 S2JY3基因原核表达生物信息学分析

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