检索结果-内蒙古大学图书馆

BVDV、BRV和BCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立

中国动物检疫 2021年第3期38卷 99-106页

作者：孙亚杰关平原周伟光徐晓静希尼尼根于景丽内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古大学生态与环境学院内蒙古呼和浩特010021

为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛冠状病毒(BCoV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因序列设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,建立了同时检测上述3种病毒的TaqMan三... 详细信息

为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛冠状病毒(BCoV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因序列设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,建立了同时检测上述3种病毒的TaqMan三重RT-qPCR方法。该方法仅对BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因扩增呈阳性,而对牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒、魏氏梭菌(A型、B型和D型)、多杀性巴氏杆菌(A型和B型)等犊牛腹泻相关病原扩增均呈阴性;最低检出限为10拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于2%。利用本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法对29份临床样品进行检测,获得BVDV、BRV、BCoV的4种混合感染型,其中BVDV与BCoV的混合感染率最高(27.6%);与已有单重RT-qPCR方法比较,发现两种方法检测BVDV、BRV和BCoV的符合率分别为100%、96.5%、100%。结果表明,本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好、可行性高等优点,可为今后BVDV、BRV和BCoV共感染引起的牛腹泻性疾病的鉴别诊断和流行病学调查提供新技术手段。

关键词：牛病毒性腹泻病毒牛轮状病毒牛冠状病毒 TaqMan三重RT-qPCR 混合感染

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1例绒山羊链球菌病的诊断

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兽医导刊 2024年第3期 16-19页

作者：李新跃李静李怡潞米腾腾丁玉林张迪郭咏华梅花王金玲内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区科学技术厅内蒙古自治区转制科研院所离退休人员服务中心内蒙古呼和浩特010010 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站内蒙古通辽028000 内蒙古阿拉善右旗巴丹吉林镇综合保障和技术推广中心内蒙古阿拉善737300 内蒙古阿拉善右旗农业技术推广中心内蒙古阿拉善737300

本研究通过临床病史及症状、尸体剖检、组织病理学和病原学方法确诊1例绒山羊链球菌病。患病羔羊临床表现口腔黏膜坏死,严重腹泻,流清液,眼有脓性分泌物,体温升高;发病后期病例出现头颈扭曲的神经症状,病程4~5 d。尸体剖检见坏死性口炎... 详细信息

本研究通过临床病史及症状、尸体剖检、组织病理学和病原学方法确诊1例绒山羊链球菌病。患病羔羊临床表现口腔黏膜坏死,严重腹泻,流清液,眼有脓性分泌物,体温升高;发病后期病例出现头颈扭曲的神经症状,病程4~5 d。尸体剖检见坏死性口炎,口腔黏膜散在大小不等的坏死灶和溃疡灶;全身淋巴结肿大,表面和切面散在深红色出血点;纤维素性胸膜肺炎,右肺尖叶、心叶和膈叶前下缘严重黑红色实变,与胸壁发生粘连;胸部肌肉、心外膜、肾脏、瘤胃浆膜面和膀胱黏膜等组织散在出血斑点。组织病理学表现为严重的纤维素性坏死性肺炎、出血性坏死性淋巴结炎和化脓性脑炎。脑、肺触片镜检可见典型的短链或长链状的革兰氏阳性链球菌,菌体周围可见薄层红染荚膜。本研究可为羊链球菌病的诊断和防控提供参考。

关键词：绒山羊链球菌病化脓性脑炎革兰氏染色链球菌

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内蒙古部分地区绵羊胃肠道线虫感染率及驱虫效果比较研究

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东北农业大学学报 2020年第10期51卷 63-69页

作者：何秀玲贡庆扎布其力木格海鹰额叶勒德格哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 鄂尔多斯市乌审旗动物疫病控制中心内蒙古鄂尔多斯017300

为研究内蒙古典型牧业旗县绵羊胃肠道线虫病流行特点和耐药性,分别在鄂尔多斯乌审旗和锡林郭勒西乌珠穆沁旗开展绵羊主要线虫病流行病学调查,比较常用抗蠕虫药驱虫效果。采集新鲜粪样,定性和定量检查粪便虫卵,给予不同抗蠕虫药开展驱虫... 详细信息

为研究内蒙古典型牧业旗县绵羊胃肠道线虫病流行特点和耐药性,分别在鄂尔多斯乌审旗和锡林郭勒西乌珠穆沁旗开展绵羊主要线虫病流行病学调查,比较常用抗蠕虫药驱虫效果。采集新鲜粪样,定性和定量检查粪便虫卵,给予不同抗蠕虫药开展驱虫效果比较试验。结果表明,连续两年鄂尔多斯细毛羊胃肠道线虫总感染率分别为84.4%和36.9%,乌珠穆沁羊胃肠道线虫感染率分别为70.9%和48.0%。两个地区优势虫种均为捻转血矛线虫和细颈线虫,且伊维菌素和多拉菌素已完全失去对绵羊消化道线虫的驱杀作用,阿苯达唑和噻嘧啶驱虫效果亦较差。左旋咪唑在鄂尔多斯细毛羊体内驱虫效果较差,但在乌珠穆沁羊体内驱虫效果较好。碘硝酚、氯氰碘柳胺钠和硝碘酚腈对优势线虫具有强大驱杀作用,给药后虫卵减少率(FECR)均超过97%。因此,研究发现试验区域绵羊胃肠道线虫感染较严重,且优势虫种已对目前广泛应用的伊维菌素、多拉菌素和阿苯达唑等多种驱虫药均产生强抗药性。研究结果为试验区域制定合理驱虫方案提供科学依据。

关键词：绵羊线虫病流行病学调查抗药性驱虫效果

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牛源多杀性巴氏杆菌PlpE蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

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中国动物检疫 2021年第1期38卷 94-99页

作者：张智刘泽乌吉斯古楞刘重阳权璞宏任旭荣宋庆庆关平原内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 金宇保灵生物药品有限公司兽用疫苗国家工程实验室内蒙古呼和浩特010020

为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质... 详细信息

为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG进行诱导,对诱导蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定;使用纯化蛋白PlpE免疫北京大耳白兔,制备多克隆抗体,并进行间接ELISA和Western Blot分析。结果显示,扩增的PlpE基因大小为1050 bp,在原核细胞中诱导表达的PlpE蛋白约56 kDa。间接ELISA结果显示,所制备多克隆抗体效价可达1:512000;Western Blot结果显示,所制备多克隆抗体反应性良好。PlpE蛋白的成功表达和多克隆抗体的成功制备,为下一步多杀性巴氏杆菌诊断方法的建立和疫苗研发奠定了基础。

关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达 PlpE基因多克隆抗体

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转录组学及其在动物寄生虫研究中的应用

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黑龙江畜牧兽医 2020年第21期 38-43页

作者：侯斌母晓佳樊雅茹尚世杰牛杰康李泽浩乔一丹符江涛王瑞内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心呼和浩特010010 内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018

转录组学是一门在整体水平上研究细胞中基因转录情况及转录调控规律的学科。对活细胞所转录的所有RNA进行分析是研究细胞表型和基因功能的一个重要手段。文章在扼要介绍转录组学特点及相关技术的基础上,对其近年来在动物寄生虫研究中的... 详细信息

转录组学是一门在整体水平上研究细胞中基因转录情况及转录调控规律的学科。对活细胞所转录的所有RNA进行分析是研究细胞表型和基因功能的一个重要手段。文章在扼要介绍转录组学特点及相关技术的基础上,对其近年来在动物寄生虫研究中的应用进行了全面综述,分析了动物寄生虫转录组学研究中面临的问题与挑战,并对未来动物寄生虫转录组学研究趋势进行了展望,以期为今后系统研究基因、RNA、蛋白质和其他小分子间的相互作用和相关系统机制提供新思路,为寄生虫疾病的相关研究提供参考。

关键词：转录组学基因组学基因功能动物寄生虫研究细胞表型

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三株美洲驼源狂犬病病毒N基因遗传进化分析

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野生动物学报 2021年第1期42卷 120-123页

作者：王金玲郑秉武曹霞杨龙峰葛金英卢爱桃内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010010 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 呼和浩特市园林管理局动物园管理处呼和浩特010050 北京市延庆区动物疫病预防控制中心北京102100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010031

为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析。结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100%,且都与201... 详细信息

为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析。结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100%,且都与2011年呼和浩特奶牛源和犬源毒株、2013年内蒙古牛源毒株、2007年湖北犬源毒株、2016和2018年北京犬源毒株、2006年天津犬源毒株和2009年福建犬源毒株的亲缘性最高,同源率为100%。这些毒株位于同一个遗传进化群内,均属于CTN-1(Asian谱系)。研究结果说明3株美洲驼源RABV的N基因与参考的内蒙古、湖北、北京、福建和天津毒株起源于共同的祖先。

关键词：美洲驼狂犬病病毒 N基因遗传进化

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三例美洲驼狂犬病自然病例的诊断

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野生动物学报 2020年第2期41卷 447-450页

作者：曹霞郑秉武丁玉林甘迪刘淑英王金玲内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 呼和浩特市园林管理局动物园管理处呼和浩特010050

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种人畜共患性传染病,一直威胁着人类和动物生命。本研究采用病理学、直接免疫荧光法和免疫组织化学方法在内蒙古自治区确诊了3例美洲驼狂犬病自然病例。尸体剖检显示3只病死美洲驼表现角弓反张、心衰和脑... 详细信息

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种人畜共患性传染病,一直威胁着人类和动物生命。本研究采用病理学、直接免疫荧光法和免疫组织化学方法在内蒙古自治区确诊了3例美洲驼狂犬病自然病例。尸体剖检显示3只病死美洲驼表现角弓反张、心衰和脑水肿。病理组织学观察在小脑浦金野细胞、脑干多极神经元、大脑多形细胞和海马多形细胞胞浆内均可观察到大小不等的嗜酸性狂犬病病毒包涵体(Negri body),其中病程长的1只美洲驼的脑组织内观察到典型的病毒性脑炎。直接免疫荧光试验结果显示在3只美洲驼小脑组织内检测到亮绿色的狂犬病病毒抗原的特异性阳性信号。免疫组织化学结果显示在3只美洲驼小脑浦金野细胞的胞浆内检测到圆形、椭圆形的典型的棕色狂犬病病毒抗原的特异性阳性信号。本研究在国内首次报道了美洲驼狂犬病。

关键词：美洲驼狂犬病包涵体直接免疫荧光试验免疫组织化学

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布鲁氏杆菌S2株DUF2326基因克隆与生物信息学分析

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黑龙江畜牧兽医 2020年第5期 9-14,148页

作者：孙柯赵学亮白丽艳苏倩王姝懿呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010018

为了分析布鲁氏杆菌猪种S2疫苗株DUF2326基因编码蛋白的结构、功能以及抗原表位,试验对DUF2326基因进行克隆、生物信息学分析及抗原表位预测。结果表明:DUF2326基因全长1653 bp,编码550个氨基酸,分子质量为61.775 ku,理论等电点为5.34,... 详细信息

为了分析布鲁氏杆菌猪种S2疫苗株DUF2326基因编码蛋白的结构、功能以及抗原表位,试验对DUF2326基因进行克隆、生物信息学分析及抗原表位预测。结果表明:DUF2326基因全长1653 bp,编码550个氨基酸,分子质量为61.775 ku,理论等电点为5.34,呈酸性,不稳定指数为35.17,该蛋白无跨膜区,不存在信号肽,α-螺旋为二级结构的主要成分(59.64%)。DUF2326蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,含有较多潜在的B细胞抗原表位。说明DUF2326蛋白具有良好的抗原性,具备成为鉴别布鲁氏杆菌病疫苗免疫和自然感染抗原的潜力。

关键词：布鲁氏杆菌布鲁氏杆菌S2株 DUF2326基因生物信息学抗原表位鉴别诊断

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牛病毒性腹泻病毒E2基因生物信息学分析及可溶性表达

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中国动物传染病学报 2020年第1期28卷 63-67页

作者：赵洪哲李新培范峻豪宋前进张静关平原温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 中国农业科学院特产研究所长春130112

为了获得牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2基因的最佳可溶性蛋白,本试验根据GenBank已公布的BVDV E2基因序列,利用DNAStar等软件进行生物信息学分析,截取抗原性和亲水性较高的序列进行稀有密码子优化,串联信号肽... 详细信息

为了获得牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2基因的最佳可溶性蛋白,本试验根据GenBank已公布的BVDV E2基因序列,利用DNAStar等软件进行生物信息学分析,截取抗原性和亲水性较高的序列进行稀有密码子优化,串联信号肽序列后合成并连接到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-Opti-E2;转化至*** BL21(DE3)宿主菌,经SDS-PAGE和Western blot分析,成功获得大小为43 kDa的BVDV E2基因的最佳可溶性蛋白,且该蛋白特异性较好。本试验E2蛋白的成功表达可为后续ELISA方法的建立和亚单位疫苗的开发奠定基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒囊膜结构蛋白E2 原核表达

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组学技术在乳酸菌分离鉴定及功能研究中的应用

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中国畜牧兽医 2020年第12期47卷 3882-3889页

作者：牛春宇石琳琳孙苗刘彦民黄少磊程超李培锋内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古双奇药业股份有限公司呼和浩特010010 集宁师范学院集宁012000

乳酸菌具有黏附宿主细胞或黏膜、抑制病原菌生长、维持机体微生态平衡、增强宿主免疫力等促进宿主健康的作用,同时在食品工业、抗菌剂生产和体内发酵中也发挥重要作用,但目前对乳酸菌发挥益生作用的具体分子机制的描述不多。为探明乳酸... 详细信息

乳酸菌具有黏附宿主细胞或黏膜、抑制病原菌生长、维持机体微生态平衡、增强宿主免疫力等促进宿主健康的作用,同时在食品工业、抗菌剂生产和体内发酵中也发挥重要作用,但目前对乳酸菌发挥益生作用的具体分子机制的描述不多。为探明乳酸菌自身及其在宿主中的新功能和调控机制,可采用组学技术进行研究。根据中心法则衍生出的组学方法包括基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学。单组学技术在乳酸菌研究中的应用可深入探索乳酸菌发挥的功能及其作用机制。多组学技术的应用可突破单一组学技术的局限性,从不同维度综合分析乳酸菌的潜在功能,进一步预测乳酸菌自身及其在宿主中发挥的作用。作者综述了几种常用于乳酸菌分离鉴定及功能研究领域的组学技术,阐述了多组学技术在乳酸菌功能及其机制研究中的应用概况,为进一步探明乳酸菌的潜在功能提供可行的技术方法和方向。

关键词：乳酸菌基因组学转录组学蛋白质组学代谢组学多组学联合分析

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