检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2021年第12期45卷 955-960页

作者：游旸杜宗敏军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

核酸检测在病原体筛查、基因分型、癌症相关基因突变检测、单核苷酸多态性识别等方面有着重要作用。基于CRISPR-Cas系统的核酸检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速廉价以及多重检测等优势,在核酸检测特别是现场快速检测领域具有良好... 详细信息

核酸检测在病原体筛查、基因分型、癌症相关基因突变检测、单核苷酸多态性识别等方面有着重要作用。基于CRISPR-Cas系统的核酸检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速廉价以及多重检测等优势,在核酸检测特别是现场快速检测领域具有良好的应用前景。目前,基于不同的CRISPR-Cas系统已开发出多种核酸检测方法,如DETECTR、HOLMES以及SHERLOCK等。该文综述了CRISPR核酸检测方法的原理、特性以及研究进展,可为该技术的应用推广提供参考。

关键词：核酸检测 Cas12 Cas13 Cas14 等温扩增

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携带Kpn1酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性克隆的构建与鉴定

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军事医学 2021年第12期45卷 908-912,918页

作者：韦傢郑黄星耀孙梦许王洪江李晓峰秦成峰军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建携带特定酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性克隆,并对拯救病毒的生物学特征进行鉴定。方法利用分子克隆和反向遗传学技术,在日本脑炎病毒全长感染性克隆pJE70质粒的基础上引入Kpn1单酶切位点,获得pJE70_Kpn1重组质粒。将质粒线... 详细信息

目的构建携带特定酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性克隆,并对拯救病毒的生物学特征进行鉴定。方法利用分子克隆和反向遗传学技术,在日本脑炎病毒全长感染性克隆pJE70质粒的基础上引入Kpn1单酶切位点,获得pJE70_Kpn1重组质粒。将质粒线性化后进行体外转录,将转录体RNA转染BHK-21细胞,拯救获得恢复病毒E70-Kpn1。通过间接免疫荧光、蚀斑形成实验、生长曲线测定、小鼠神经毒力评价等方法鉴定恢复病毒E70-Kpn1的生物学特性。结果成功构建了携带Kpn1的日本脑炎病毒全长感染性克隆,该克隆能拯救出重组的日本脑炎病毒E70-Kpn1,其生物学特征与亲本株E70无显著差异。结论研究获得携带Kpn1酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性cDNA克隆,并成功拯救获得一株重组日本脑炎病毒,为下一步进行反向遗传学操作提供了可靠的工具。

关键词：脑炎病毒,日本克隆,分子 pJE70质粒 Kpn1酶切位点恢复病毒E70-Kpn1

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KL2型鲍曼不动杆菌噬菌体解聚酶克隆及抗菌活性分析

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微生物学通报 2021年第9期48卷 3141-3153页

作者：王灿高明明俞鑫婷刘艳楠米志强安徽医科大学附属阜阳医院呼吸内科安徽阜阳236000 解放军总医院第五医学中心呼吸与危重症医学科北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【背景】噬菌体解聚酶是噬菌体在裂解细菌过程中产生的一种抗菌蛋白,关于鲍曼不动杆菌荚膜分型及常见型别噬菌体解聚酶的研究报道较少。【目的】以KL2型鲍曼不动杆菌为研究对象,从噬菌体IME-AB2中克隆解聚酶,在大肠杆菌中进行可溶性表... 详细信息

【背景】噬菌体解聚酶是噬菌体在裂解细菌过程中产生的一种抗菌蛋白,关于鲍曼不动杆菌荚膜分型及常见型别噬菌体解聚酶的研究报道较少。【目的】以KL2型鲍曼不动杆菌为研究对象,从噬菌体IME-AB2中克隆解聚酶,在大肠杆菌中进行可溶性表达并研究其体外抗菌活性。【方法】应用二代测序及生物信息学方法鉴定鲍曼不动杆菌荚膜型,分析IME-AB2全基因组。应用分子克隆技术克隆ORF76假定的尾丝蛋白(Putative Tail Fiber)基因,构建重组表达载体pEASY-Blunt-E1-gp76,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析纯化解聚酶,研究解聚酶体外抗菌活性。【结果】构建了pEASY-Blunt-E1-gp76解聚酶重组表达质粒,该重组质粒在大肠杆菌中得到可溶性表达;体外活性分析显示,该重组蛋白在体外能够对所有的KL2型鲍曼不动杆菌具有较好的抗菌活性,解聚酶联合人和狗的血清具有很好的杀菌活性。【结论】鉴定解聚酶并提高其抗菌谱具有重要意义,也是噬菌体及解聚酶用于治疗耐药菌研究领域急需解决的重要问题之一。

关键词：鲍曼不动杆菌分型解聚酶血清

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肠道菌群与结直肠癌关系及其研究技术进展

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2021年第2期8卷 211-216页

作者：常宇骁杨瑞馥毕玉晶病原微生物生物安全国家重点实验室军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

结直肠癌是常见的肿瘤之一,在中国肿瘤发病率中排名第三。肠道菌群对肿瘤增殖、存活、转移与肿瘤发生都产生重要影响,特别是肿瘤微环境中的代谢物可以刺激炎症细胞诱导慢性炎症反应。肠道菌群会影响机体和调节结直肠甚至整个消化系统的... 详细信息

结直肠癌是常见的肿瘤之一,在中国肿瘤发病率中排名第三。肠道菌群对肿瘤增殖、存活、转移与肿瘤发生都产生重要影响,特别是肿瘤微环境中的代谢物可以刺激炎症细胞诱导慢性炎症反应。肠道菌群会影响机体和调节结直肠甚至整个消化系统的生理功能,这与结直肠癌有着密切的关系。目前测序技术和细菌-宿主机制相互作用是研究肠道菌群和结直肠癌的主要方法,测序技术可以快速大量的对粪便样本进行菌群的种类、基因和功能上的分析,细菌-宿主相互作用技术可以从实验角度研究细菌对疾病发生发展的机制,更精准地确定肠道菌群和结直肠癌的关系。但DNA提取差异、引物偏差、测序深度,以及细菌菌株差异、未知细菌的影响等都制约着研究的进展。随着研究技术的发展,培养组学以及肠道类器官技术为肠道菌群和结直肠癌关系研究带来了新的技术和方法,一定程度上弥补了测序技术和实验技术的不足。本文就针对肠道菌群和结直肠癌关系的研究技术展开综述,讨论了其研究进展及发展方向。

关键词：肠道菌群结直肠癌宏基因组培养组学类器官

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流感病毒免疫逃逸机制研究进展

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中华实验和临床病毒学杂志 2020年第6期34卷 671-676页

作者：黄梦婷张森李靖姜涛安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

流感病毒是重要的呼吸道传染病病原体,可引起季节性流感流行和全球性流感大暴发,对公共卫生造成严重威胁。流感病毒对宿主的致病性取决于病毒毒力及其对宿主的免疫逃逸,本文概述了流感病毒逃避宿主先天免疫反应和适应性免疫反应的各种策... 详细信息

流感病毒是重要的呼吸道传染病病原体,可引起季节性流感流行和全球性流感大暴发,对公共卫生造成严重威胁。流感病毒对宿主的致病性取决于病毒毒力及其对宿主的免疫逃逸,本文概述了流感病毒逃避宿主先天免疫反应和适应性免疫反应的各种策略,以及相关机制的最新研究进展。对流感病毒免疫逃逸的深入研究,将有助于了解病毒与宿主之间的相互作用,阐明流感病毒致病机制,为抗流感病毒药物的研发提供新策略。

关键词：流感病毒免疫逃逸先天性免疫适应性免疫

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基于MaxEnt模型对我国三带喙库蚊潜在分布区的预估研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2022年第4期29卷 203-211页

作者：刘庆杜雨彤邢丹贾楠谢静文王明张恒端赵彤言赣南医学院公共卫生与健康管理学院江西赣州341000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

为探讨三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus在我国的潜在适生分布,利用MaxEnt模型结合19个与三带喙库蚊生存相关性强的环境因子对其潜在适生区进行分析预测。结果显示,当前气候条件下,三带喙库蚊主要分布于我国东南地区和华中地区,其高... 详细信息

为探讨三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus在我国的潜在适生分布,利用MaxEnt模型结合19个与三带喙库蚊生存相关性强的环境因子对其潜在适生区进行分析预测。结果显示,当前气候条件下,三带喙库蚊主要分布于我国东南地区和华中地区,其高适生区面积266.29万km^(2),中适生区面积153.77万km^(2);在SSP126气候情景模式下,三带喙库蚊高适生区在2021-2040和2041-2060年将分别增加到362.81万和356.67万km2。测试集AUC值为0.978,说明预测结果准确可靠。影响我国三带喙库蚊适生区分布的环境因子中,贡献率前4位的因子为最暖季度降水量(51.6%)、等温性(19.1%)、降水量季节性变化(13.0%)和最冷季度平均温度(7.8%);刀切法分析结果显示最暖季度降水量、年平均气温和最干季度平均温度对三带喙库蚊的分布状况影响最大。预测结果表明,我国三带喙库蚊的适生区有向西北地区扩张的趋势,2041—2060年东南沿海地区三带喙库蚊高适生区将缩小。

关键词：三带喙库蚊潜在适生区最大熵模型

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基于分布滞后非线性模型探讨上海市诺如病毒感染性腹泻的发病与气象因素的关联

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中华疾病控制杂志 2021年第10期25卷 1180-1185,1193页

作者：周士夏张海洋王丽萍刘玮方立群国家科技重大专项腹泻症候群监测团队安徽医科大学公共卫生学院合肥230032 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国疾病预防控制中心传染病预防控制处传染病监测预警重点实验室北京102206 北京大学公共卫生学院卫生检验学系北京100191 不详

目的探讨上海市腹泻患者中诺如病毒感染与气象因素的关联,为诺如病毒感染性腹泻的防控提供科学依据。方法收集上海市2012—2019年腹泻病例与上海市各气象监测点逐日气象资料,利用分布滞后非线性模型(distributed lag non-linear model,D... 详细信息

目的探讨上海市腹泻患者中诺如病毒感染与气象因素的关联,为诺如病毒感染性腹泻的防控提供科学依据。方法收集上海市2012—2019年腹泻病例与上海市各气象监测点逐日气象资料,利用分布滞后非线性模型(distributed lag non-linear model,DLNM)分析诺如病毒感染性腹泻的发病与气象因素的关联。结果在21148名腹泻入院的就诊患者中,诺如病毒检出率为18.75%。其中45~<60岁人群的检出率最高(22.72%)。DLNM结果显示,相对于日平均气温18℃(P50),当日平均气温为-6℃时对诺如病毒感染的影响最大(RR=3.06,95%CI:1.49~6.30);日平均气温在滞后2 d时对诺如病毒感染产生最大影响(RR=1.15,95%CI:1.02~1.29)。相对于日降水量0 mm(P50),当日降水量195 mm时出现最大负效应(RR=0.31,95%CI:0.06~1.66)。结论上海市腹泻入院就诊患者的诺如病毒感染率较高,低温增加诺如病毒感染性腹泻发病风险,应根据诺如病毒流行特征针对性地开展防控工作。

关键词：诺如病毒哨点监测分布滞后非线性模型腹泻

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制霉菌素引起的肠道菌群失衡及代谢物水平的变化

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军事医学 2021年第5期45卷 363-366页

作者：宫赛赛孙娅坤李佳佳高洁南楠罗德炎王慧军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究广谱抗真菌药对肠道菌群平衡改变及代谢产物的影响。方法选用C57BL/6雌性小鼠,用含广谱抗真菌药制霉菌素饮用水喂养7 d,分离小鼠血清进行代谢组学分析。分离口服制霉菌素7 d后小鼠结肠内容物,提取肠道菌群基因组进行16S rDNA扩... 详细信息

目的研究广谱抗真菌药对肠道菌群平衡改变及代谢产物的影响。方法选用C57BL/6雌性小鼠,用含广谱抗真菌药制霉菌素饮用水喂养7 d,分离小鼠血清进行代谢组学分析。分离口服制霉菌素7 d后小鼠结肠内容物,提取肠道菌群基因组进行16S rDNA扩增子测序、构建SMRT Bell文库,利用PacBio公司SMRT分析软件进行操作分类单元(OTU)物种注释。通过PCoA和PCA、NMDS等降维图和样品聚类树分析群落结构差异,选用t检验、MetaStat、LEfSe、Anosim和MRPP等方法对物种组成和群落结构进行差异显著性检验。结果结肠内容物菌群基因组测序结果表明,微生物多样性分析显示制霉菌素降低肠道菌群多样性;与对照组比较,服药组硬壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)细菌增加;拟杆菌门(Bacteroidetes)、糖杆菌门(Saccharobacteria)细菌丰度降低;血清代谢组检测结果显示,服药组增加的物质包括葡萄糖、甘氨酸、丙氨酸、4-羟基丁酸、亮氨酸、谷氨酰胺,降低的物质为谷氨酸、乳酸。结论小鼠肠道菌群稳态的改变可能与连续服用制霉菌素有关,厚壁菌门和拟杆菌门等优势菌种的变化明显,而且瘤胃菌群、毛螺菌科及拟杆菌群在两组之间结构差异显著,导致谷氨酸、亮氨酸等氨基酸代谢增加,而糖类代谢减慢。

关键词：肠道微生物组肠道菌群制霉菌素代谢组

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鼠疫耶尔森菌铁转运系统研究进展

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军事医学 2021年第11期45卷 868-872页

作者：陈雨露宋凯焦扬宋亚军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

几乎所有的生物均需要微量的铁。从宿主体内获取铁是病原菌在致病过程中的关键步骤。目前,铁获取机制的重要性已在许多致病菌中得到证实。鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)为A类生物恐怖细菌,可导致人类腺鼠疫、肺鼠疫及败血症鼠疫等。与大多... 详细信息

几乎所有的生物均需要微量的铁。从宿主体内获取铁是病原菌在致病过程中的关键步骤。目前,铁获取机制的重要性已在许多致病菌中得到证实。鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)为A类生物恐怖细菌,可导致人类腺鼠疫、肺鼠疫及败血症鼠疫等。与大多数细菌一样,鼠疫菌也能编码多种铁摄取系统,这些系统在其生长繁殖和致病性方面均发挥着重要作用,是其不可或缺的毒力因子。该文综述了近年来鼠疫菌的铁摄取系统及其在致病过程中的作用研究进展。

关键词：鼠疫耶尔森菌铁摄取系统耶尔森杆菌素鼠疫

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AlphaLISA检测新型冠状病毒

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军事医学 2021年第11期45卷 848-851页

作者：曹鹤译邓永强刘鹏江华孔德聪律清宇姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。方法采用新型冠状病毒抗体偶联发光微球,生物素标记另一抗体,以及链霉亲和素偶联感光微球构建新型冠状病毒AlphaLISA检测体系。采用SARS-CoV-2真核... 详细信息

目的建立均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。方法采用新型冠状病毒抗体偶联发光微球,生物素标记另一抗体,以及链霉亲和素偶联感光微球构建新型冠状病毒AlphaLISA检测体系。采用SARS-CoV-2真核表达抗原和灭活病毒对AlphaLISA方法进行评价,并与商业化ELISA试剂盒进行比对。结果确定单抗1#与多抗组别作为新型冠状病毒AlphaLISA检测的抗体对,AlphaLISA对新型冠状病毒抗原的检出限为0.39 ng/ml,具有较好的重复性,批内差1.90%~8.93%,批间差1.75%~9.04%,对不同临床样本的检测具有较好的耐受性,与ELISA试剂盒相比对灭活病毒的检测敏感性更高。结论AlphaLISA可实现对SARSCoV-2的高效快速检测。

关键词：均相光激化学发光免疫分析法新型冠状病毒酶联免疫吸附测定

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