检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2024年第5期19卷 507-513页

作者：杨盼刘乐乐田莉韩越赵忠欣孙培录郑学星夏咸柱郑文文山东大学齐鲁医学院公共卫生学院山东济南250012 山东省临沂市人民医院山东第一医科大学(山东省医学科学院)药物研究所军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

目的评估和比较采用H_(2)O_(2)与β-丙内酯为灭活剂制备新型发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)灭活疫苗的免疫原性。方法将SFTSV分别用H_(2)O_(2)与β-丙内酯灭活,并与铝胶佐剂配伍制成灭活疫苗免疫小鼠,持续21 d测小鼠体重、进食量、... 详细信息

目的评估和比较采用H_(2)O_(2)与β-丙内酯为灭活剂制备新型发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)灭活疫苗的免疫原性。方法将SFTSV分别用H_(2)O_(2)与β-丙内酯灭活,并与铝胶佐剂配伍制成灭活疫苗免疫小鼠,持续21 d测小鼠体重、进食量、精神状态等,评估疫苗的安全性。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中SFTSV特异性抗体水平,中和实验测定小鼠血清中SFTSV中和抗体水平,使用流式细胞术测定脾脏中B细胞的募集与活化水平。结果研究制备的两种灭活疫苗均表现出良好的安全性,SFTSV中和抗体均值在免疫后8周效价均能达到1∶300以上,诱导的免疫反应均倾向于Th2型,且具有较高的B细胞的活化水平,其中H_(2)O_(2)灭活剂组诱导产生的中和抗体效价高于β-丙内酯灭活剂组。结论成功制备了两种在小鼠中诱导强烈体液免疫反应的SFTSV灭活候选疫苗,并提供了相关的免疫参数。H_(2)O_(2)作为灭活剂已显示出一定的优势,有助于开发有效的疫苗,为制备发热和血小板减少综合征病毒新型灭活疫苗提供研究依据。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒灭活疫苗中和抗体灭活剂 H_(2)O_(2)

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多杀性巴氏杆菌攻毒小鼠肺脏的转录组分析

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基因组学与应用生物学 2022年第4期41卷 778-788页

作者：陈杰陈巧玲陈思程逸文刘志勇李彬刘昂满初日嘎王凤阳杜丽李昌金宁一海南大学动物科技学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口570228 军事医学科学院军事兽医研究所长春130122

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)可感染多种动物宿主并引发败血症和呼吸道疾病,危害动物健康,给养殖业带来严重经济损失。本研究为探究多杀性巴氏杆菌感染期间对宿主肺脏基因表达的影响,选取羊源A型多杀性巴氏杆菌对小鼠(Mus mus... 详细信息

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)可感染多种动物宿主并引发败血症和呼吸道疾病,危害动物健康,给养殖业带来严重经济损失。本研究为探究多杀性巴氏杆菌感染期间对宿主肺脏基因表达的影响,选取羊源A型多杀性巴氏杆菌对小鼠(Mus musculus)进行攻毒实验,攻毒后72 h采集小鼠肺脏组织并提取总RNA。基于转录组测序,与对照组相比,攻毒组获得2443个差异表达基因,其中有1437个基因上调,1006个基因下调。对2443个差异表达基因进行GO富集分析,结果显示,差异基因显著富集的GO terms主要有B细胞稳态、T细胞迁移的正调控、整合素复合物和胶原蛋白结合;KEGG富集分析结果显示,差异基因显著富集于11条免疫炎症信号通路,包括细胞因子与细胞因子受体互作、趋化因子信号通路等;免疫炎症相关信号通路中,差异基因经蛋白质-蛋白质互作分析,结果显示,C3、C3ar1、C5ar1、Cxcl10、Cxcr2和Gng11基因处于网络中心,说明这些基因在多杀性巴氏杆菌感染过程中发挥了重要作用;从11条免疫炎症通路的基因中挑选10个进行实时荧光定量PCR验证,发现有8个基因表达趋势与测序结果相符,说明测序数据可靠。本研究展示了小鼠在多杀性巴氏杆菌感染过程中参与免疫反应的关键基因,为探索宿主抗多杀性巴氏杆菌感染分子机制提供了理论依据。

关键词：多杀性巴氏杆菌小鼠肺脏转录组实时荧光定量PCR

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尼帕病毒受体结合糖蛋白在哺乳动物细胞中的可溶性表达和纯化及小鼠抗血清制备

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中国兽医学报 2022年第1期42卷 82-88,106页

作者：高子函宋丽娜许汪李乐天郝鹏飞伊立超郝嘉翼时小双于成东李凯徐鹏金宁一李昌军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元吉林长春130122

参照GenBank中尼帕病毒受体结合蛋白(G蛋白)编码序列,使用DNAStar软件对各基因型尼帕病毒G蛋白进行核苷酸、氨基酸同源性分析,并绘制进化树,选择代表性毒株(NCBI登录号:AF212302.2),截取合成G蛋白头部结构域(sG)的核苷酸序列,连接至pcDN... 详细信息

参照GenBank中尼帕病毒受体结合蛋白(G蛋白)编码序列,使用DNAStar软件对各基因型尼帕病毒G蛋白进行核苷酸、氨基酸同源性分析,并绘制进化树,选择代表性毒株(NCBI登录号:AF212302.2),截取合成G蛋白头部结构域(sG)的核苷酸序列,连接至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,构建为重组质粒pcDNA-sG,将测序正确的重组质粒在Expi293F细胞中进行表达,利用蛋白免疫印迹(Western blot)进行鉴定。通过Strep-Tactin XT亲和层析纯化目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度。用获得的sG免疫小鼠制备抗sG蛋白的多克隆抗体血清,并通过间接ELISA鉴定结合活性。结果显示,尼帕病毒G蛋白在Expi293F细胞中获得可溶性表达,纯化得到的目的蛋白大小正确,纯度大于99%;制备的抗血清能特异性结合目的蛋白。

关键词：尼帕病毒病毒受体结合蛋白真核表达多克隆抗体

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一种多糖化合物在预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用

一种多糖化合物在预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用

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作者：王铁成高玉伟周义发孙琳吕朝相原野李元果孙伟洋王雪峰冯娜齐静郭瑾司马明威杨松涛夏咸柱 130000 吉林省长春市净月开发区柳莺西路666号

本发明公开了一种多糖化合物在预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用，通过构建MDCK、A549两种流感病毒感染细胞模型及MDCK犬冠状病毒感染模型，使用五味子多糖对细胞模型进行治疗处理，结果显示五味子多糖在细胞水平上可显著抑制流感... 详细信息

标准号: CN114917285A

本发明公开了一种多糖化合物在预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用，通过构建MDCK、A549两种流感病毒感染细胞模型及MDCK犬冠状病毒感染模型，使用五味子多糖对细胞模型进行治疗处理，结果显示五味子多糖在细胞水平上可显著抑制流感病毒、犬冠状病毒对细胞的损伤。其次，小鼠的体内实验证明，对小鼠接种流感病毒后，采用五味子多糖对小鼠进行连续治疗处理，结果显示五味子多糖可降低小鼠肺部病毒载量，对小鼠肺部具有一定保护作用，且可以延长小鼠存活时间。表明五味子多糖可用于流感病毒等呼吸道感染的预防和治疗，拓展了五味子多糖的功效范围，为预防或治疗呼吸道病毒感染的药物研发提供了新的方向。

关键词：五味子多糖小鼠治疗呼吸道病毒感染流感病毒犬冠状病毒细胞模型小鼠肺部预防流感病毒感染抑制流感病毒多糖化合物呼吸道感染病毒载量体内实验细胞水平小鼠接种药物研发构建可用存活损伤细胞感染拓展应用

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鸡源九次跨膜蛋白TM9SF2基因克隆及其蛋白特征分析

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中国兽医学报 2023年第11期43卷 2298-2307页

作者：张敏霞池周颖瞿孝云刘杨曾庆航李昌廖明华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室广东广州510642 广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东广州510640 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元吉林长春130122

根据鸡九次跨膜超家族成员2(chicken transmembrane 9 superfamily 2,chTM9SF2)预测序列设计引物,以原代鸡胚成纤维细胞CEF、鸡成纤维细胞系DF1和鸡肝癌细胞LMH的cDNA为模板,采用PCR方法扩增chTM9SF2编码序列,并利用MEGA 7.0、Clustal W... 详细信息

根据鸡九次跨膜超家族成员2(chicken transmembrane 9 superfamily 2,chTM9SF2)预测序列设计引物,以原代鸡胚成纤维细胞CEF、鸡成纤维细胞系DF1和鸡肝癌细胞LMH的cDNA为模板,采用PCR方法扩增chTM9SF2编码序列,并利用MEGA 7.0、Clustal W、SWISS-MODEL等生物信息学工具对鸡、鸭、人、鼠等不同物种来源的九次跨膜超家族成员2(transmembrane 9 superfamily 2,TM9SF2)进行遗传进化、同源性、结构域及结构模拟等分析;进而通过构建真核表达质粒,利用Western blot、激光共聚焦显微镜探究chTM9SF2的表达和亚细胞定位。结果显示,分别在3类细胞中均可成功获得编码序列一致的chTM9SF2基因,与禽类的同源性最高,且高度保守;该基因能够在DF-1细胞中表达,且主要定位于晚期内体或溶酶体膜。结果表明,成功扩增获得chTM9SF2基因,并在DF-1细胞成功表达,分析其定位于晚期内体或溶酶体膜,为进一步研究chTM9SF2的生理功能及在病原感染中的作用奠定了基础。

关键词： chTM9SF2 克隆序列分析表达

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TGEV-RBD基因在昆虫杆状病毒中的表达及鉴定

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动物医学进展 2021年第9期42卷 65-70页

作者：伊立超李乐天郝嘉翼时小双张爽徐鹏任世斌高旭李昌延边大学农学院吉林延吉133000 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所/中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元吉林长春130122

旨在获得具有天然结构且有反应原性的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)受体结合域(RBD)蛋白。受体结合域是决定病毒宿主和嗜性的关键因素。根据猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白(S)序列(GenBank:ABC72414.1),设计、优化并合成其受体结合域(RBD)部分... 详细信息

旨在获得具有天然结构且有反应原性的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)受体结合域(RBD)蛋白。受体结合域是决定病毒宿主和嗜性的关键因素。根据猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白(S)序列(GenBank:ABC72414.1),设计、优化并合成其受体结合域(RBD)部分,亚克隆至杆状病毒pFastBacTMDual上,获得重组质粒,命名为pFBD-TGR。将该质粒转化DH10Bac感受态细胞中,筛选较大的白色菌落,获得重组杆状质粒Bacmid-TGR,转染至sf9细胞中进行拯救病毒,转染后5 d~7 d,收上清,传至第3代,应用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot检测sf9细胞上清,进行目的蛋白表达鉴定。结果显示,重组穿梭质粒Bacmid-TGR构建成功,Western blot结果证明,杆状病毒表达了TGEV-RBD蛋白且能与Strep tag抗体和抗猪传染性胃肠炎病毒多克隆抗体发生特异性反应,间接免疫荧光结果证明,成功地表达了TGEV-RBD蛋白,为进一步开展猪传染性胃肠炎病毒抗体研究以及新型疫苗的研发奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒杆状病毒受体结合域蛋白表达

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5/7型猪细小病毒双重PCR检测方法的建立

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中国兽医学报 2021年第8期41卷 1458-1463页

作者：王茂鹏王伟伟李笨李乐天鲁会军金宁一韩硕米志强李昌温州大学病毒学研究所浙江温州325035 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元吉林长春130122 辽宁省农业发展服务中心辽宁沈阳110031 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起猪呼吸和繁殖障碍的重要病原体,感染比例逐年上升,现有PPV5和PPV7的检测效率低,故建立针对PPV5/7的多重检测方法,可增加样品利用率,提高检测效率。本研究根据2种病原的保守序列,设计特异性引物... 详细信息

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起猪呼吸和繁殖障碍的重要病原体,感染比例逐年上升,现有PPV5和PPV7的检测效率低,故建立针对PPV5/7的多重检测方法,可增加样品利用率,提高检测效率。本研究根据2种病原的保守序列,设计特异性引物,通过对反应条件和体系优化,建立快速检测PPV5和PPV7双重PCR方法,并对该方法的灵敏性、特异性进行验证。结果显示,建立的双重PCR方法仅对PPV5、PPV7的基因组DNA有特异性扩增,对猫细小病毒(FPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的核酸均无特异性扩增;对病原核酸混合模板的检出下限为10拷贝/μL,与单一PCR检测结果一致。本研究建立一种特异性强、敏感性高的多型PPV双重检测方法,为调查PPV5和PPV7在猪群中的感染情况提供快速检测方法。

关键词：猪细小病毒5型猪细小病毒7型双重PCR

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悬钩子根多糖对2型糖尿病小鼠胰腺线粒体功能的改善作用

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吉林大学学报（医学版） 2022年第4期48卷 938-945页

作者：代敏敏常影许娜王燕徐梦徐文悦马佳旺刘文森陈正爱延边大学基础医学院药理学教研室吉林延吉133002 吉林医药学院药学院药理学教研室吉林吉林132013 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130118 吉林农业大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室吉林长春130118

目的:探讨悬钩子根多糖(RRP)对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺线粒体功能的改善作用,并阐明其作用机制。方法:70只健康雄性C57BL/6J小鼠适应性饲养1周,随机选取10只小鼠作为对照组,其余60只小鼠按照高脂肪饮食联合腹腔注射低剂量链脲佐菌素(S... 详细信息

目的:探讨悬钩子根多糖(RRP)对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺线粒体功能的改善作用,并阐明其作用机制。方法:70只健康雄性C57BL/6J小鼠适应性饲养1周,随机选取10只小鼠作为对照组,其余60只小鼠按照高脂肪饮食联合腹腔注射低剂量链脲佐菌素(STZ)的方法建立T2DM小鼠模型。从52只造模成功的小鼠中随机选取50只小鼠分为模型组,低、中和高剂量RRP组,二甲双胍组,每组10只。每日1次连续10周灌胃给药,对照组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水。实验过程中每日观察小鼠的一般状态,每周监测空腹血糖(FBG)水平,每4周进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。连续灌胃10周后,计算各组小鼠OGTT时间-血糖曲线下面积(AUC)和稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测各组小鼠血清中空腹胰岛素(FINS)、C肽、胰高血糖素(GC)水平和线粒体功能相关指标。取各组小鼠胰腺组织,计算胰腺指数,HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理形态表现。结果:与对照组比较,模型组小鼠精神萎靡,毛发粗糙,自主活动减少;与模型组比较,各剂量RRP组和二甲双胍组小鼠精神状态较好,毛发有光泽,自主活动增加。与对照组比较,模型组小鼠体质量明显降低(P<0.05),饮水量和摄食量明显增加(P<0.05),血清FBG水平、OGTT的AUC和HOMA-IR明显升高(P<0.05);与模型组比较,中和高剂量RRP组及二甲双胍组小鼠体质量明显增加(P<0.05),饮水量和摄食量明显减少(P<0.05),OGTT的AUC明显降低(P<0.05),各剂量RRP组小鼠血清FBG水平和HOMA-IR均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠血清FINS和C肽水平明显降低(P<0.05),GC水平明显升高(P<0.05),磷氧比(ADP/O)、呼吸控制率(RCR)、基础呼吸耗氧量和胰腺指数均明显降低(P<0.05);与模型组比较,中和高剂量RRP组及二甲双胍组小鼠血清FINS和C肽水平明显升高(P<0.05),GC水平明显降低(P<0.05),ADP/O和RCR明显升高(P<0.05),各剂量RRP组和二甲双胍组小鼠胰腺指数和基础呼吸耗氧量明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠胰腺组织中胰岛形状不规则,胰岛细胞大小和数量明显减少,且伴有炎性浸润和坏死;与模型组比较,各剂量RRP组和二甲双胍组小鼠胰腺组织中胰岛形态完整,胰岛大小和数量增多,坏死面积减少。结论:RRP可以通过改善胰腺线粒体功能,促使胰岛素分泌增多,进而调节T2DM小鼠的血糖。

关键词：悬钩子根多糖糖尿病,2型胰腺线粒体功能

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五株登革病毒的分离鉴定及E基因序列分析

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病毒学报 2021年第4期37卷 816-823页

作者：杜寿文王宇航张星艳花群义任琴戴少波李体远金宁一周伯平李昌吴诗品暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院深圳518000 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元长春130062 深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳51800

登革病毒作为一种重要的蚊媒传播病毒,威胁全球人类健康,及时甚至实时了解病毒的变异和流行病学规律,对科学防控登革热具有重要意义。因此,本研究利用广东省深圳市发现的登革热患者血清进行病毒分离、鉴定及囊膜蛋白E基因的扩增、测序... 详细信息

登革病毒作为一种重要的蚊媒传播病毒,威胁全球人类健康,及时甚至实时了解病毒的变异和流行病学规律,对科学防控登革热具有重要意义。因此,本研究利用广东省深圳市发现的登革热患者血清进行病毒分离、鉴定及囊膜蛋白E基因的扩增、测序及生物信息学分析病毒E基因进化特点。结果显示,应用Vero和C6/36细胞培养法从登革热病患血清中分离获得5株登革病毒,利用MEGA7软件对囊膜蛋白E的核苷酸和氨基酸序列进行分析显示,5株均属血清Ⅱ型登革病毒,其中输入性SZ926株和本地株SZ38株同源性为99.5%,均与泰国16681经典毒株关系密切,可能衍生于同一祖先;SZ868株和SZ871株为境外输入性病患分离株,两株病毒核苷酸同源性达到99.9%,说明两株病毒可能源于同一毒株;SZ29株与新几内亚的New Guinea C毒株同源性为99.8%,显示出进化保守、稳定传播的特点。基因型分析显示,SZ926和SZ38为基因型Ⅲ型,SZ868和SZ871为基因型Ⅳ型,SZ29为基因型Ⅰ型。本研究成功分离获得5株血清Ⅱ型登革病毒,分属于3个基因型,且不同基因型的E基因整体变异较低,而且我国存在多种基因型感染的潜在威胁,必须加强防范意识和研究力度。

关键词：登革病毒囊膜蛋白基因型进化分析

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H5N6亚型禽流感的流行特点与防控要点

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中国兽医学报 2021年第8期41卷 1634-1638页

作者：郭康康张诚崔欢孟利佳张博陈立功张春茂刘聚祥郭振东董世山河北农业大学动物医学院河北保定071000 军事科学院军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130122 农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站河北保定071000

H5N6亚型禽流感病毒(AIV)于2013年在我国家禽中首次出现,2014年报道H5N6亚型AIV感染人案例,同年H5N6亚型取代H5N1亚型成为优势毒株,也是目前我国家禽中主要流行的血清亚型之一。H5N6亚型禽流感疫情不仅对家禽养殖业造成巨大经济损失,同... 详细信息

H5N6亚型禽流感病毒(AIV)于2013年在我国家禽中首次出现,2014年报道H5N6亚型AIV感染人案例,同年H5N6亚型取代H5N1亚型成为优势毒株,也是目前我国家禽中主要流行的血清亚型之一。H5N6亚型禽流感疫情不仅对家禽养殖业造成巨大经济损失,同时也对公共健康构成重大威胁,现对H5N6亚型AIV的病原学、致病性、传播途径以及国内外H5N6亚型AIV的流行特点进行综述,并提出防控措施建议,以期为H5N6亚型AIV的预防控制提供理论基础,保障公共卫生安全。

关键词： H5N6亚型禽流感病毒流行特点防控要点

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