检索结果-内蒙古大学图书馆

中国鲎(Tachypleus tridentatus)微卫星标记筛选及种群遗传多样性和遗传结构分析

海洋与湖沼 2020年第2期51卷 345-353页

作者：翁朝红谢仰杰肖志群王志勇集美大学水产学院农业农村部东海海水健康养殖重点实验室厦门361021

采用FIASCO方法构建了中国鲎(Tachypleus tridentatus)(CA)_n微卫星富集文库,对214个阳性克隆进行测序,筛选获得60条含有微卫星的序列,其中可设计引物的序列共38条。38对微卫星引物在37个中国鲎个体中PCR检测发现,只有9个位点具有多态性... 详细信息

采用FIASCO方法构建了中国鲎(Tachypleus tridentatus)(CA)_n微卫星富集文库,对214个阳性克隆进行测序,筛选获得60条含有微卫星的序列,其中可设计引物的序列共38条。38对微卫星引物在37个中国鲎个体中PCR检测发现,只有9个位点具有多态性,其等位基因数为5-14个,每个位点平均具有8.1个等位基因。9个位点之间不存在连锁。利用该9个具有多态性微卫星标记分析了中国沿海9个中国鲎地理群体的种群遗传多样性和遗传结构。结果表明:中国沿海的中国鲎种群遗传多态性水平仍较高,9个地方群体间无遗传差异,它们之间未见显著分化,且有着较高的基因流;推测人为的迁移是造成遗传无分化的主要原因。我们建议中国鲎已绝迹的海域可从其他海域引入中国鲎个体来恢复地方群体资源。

关键词：中国鲎微卫星标记 FIASCO 遗传多样性遗传结构

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生物纳米硒的制备及其在水产养殖中的应用研究进展

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饲料研究 2025年第4期48卷 161-164页

作者：任佳玉王馥容张玉玮王龙齐胡睿同王连顺卢亚楠杨国军大连海洋大学水产与生命学院水产养殖学国家级实验教学示范中心辽宁大连116023 大连海洋大学水产与生命学院农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023 大连市虾蟹繁育与健康养殖重点实验室辽宁大连116023

硒(Se)作为水产动物必需的微量元素,可增强机体免疫与抗感染能力。纳米硒因毒性低、活性高,成为开发新型富硒饲料添加剂的重要方向。生物纳米硒可通过优化肠道菌群、激活抗氧化酶系统及调节免疫相关基因表达,显著提升水产动物的健康水... 详细信息

硒(Se)作为水产动物必需的微量元素,可增强机体免疫与抗感染能力。纳米硒因毒性低、活性高,成为开发新型富硒饲料添加剂的重要方向。生物纳米硒可通过优化肠道菌群、激活抗氧化酶系统及调节免疫相关基因表达,显著提升水产动物的健康水平。文章系统综述了生物纳米硒的制备方法及其对水产动物生长性能、抗氧化能力、免疫功能的调控作用,并分析了其作用机制,探讨了纳米硒的应用安全性、生物利用度及现存问题,提出了未来需深入解析其代谢机制并开发标准化生产工艺,为推动水产养殖业的可持续发展提供参考。

关键词：生物纳米硒水产动物抗氧化功能免疫调控

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软颗粒饲料中鲅鱼和鱿鱼的配比对近方蟹摄食行为的影响

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河北渔业 2025年第5期 8-12页

作者：王舒骐王盛鑫陈伟成白雨涛李瑞学左然涛姜玉声大连海洋大学大连市虾蟹繁育与健康养殖重点实验室农业农村部北方海水增养殖重点实验室

为研究软颗粒饲料中鲅鱼(Scomberomorus niphonius)和鱿鱼(Uroteuthis chinensis)不同配比对近方蟹(Hemigrapsus sinensis)生长、摄食及饵料利用率的影响，本试验设计了5种鲅鱼和鱿鱼比例(4:0、3:1、2:2、1:3、0:4)的试验饲料，对初始... 详细信息

为研究软颗粒饲料中鲅鱼(Scomberomorus niphonius)和鱿鱼(Uroteuthis chinensis)不同配比对近方蟹(Hemigrapsus sinensis)生长、摄食及饵料利用率的影响，本试验设计了5种鲅鱼和鱿鱼比例(4:0、3:1、2:2、1:3、0:4)的试验饲料，对初始体质量为(5.00±0.30)g的近方蟹进行40 d投喂。结果显示，鲅鱼与鱿鱼比例为2:2时，增重率最高且饵料系数(FCR)最低，饵料利用率最佳；比例为1:3时，摄食耗时最短且摄食率最高，饵料诱食效果最佳。

关键词：近方蟹(Hemigrapsus sinensis) 蓝点马鲛鱼(Scomberomorus niphonius) 中国枪乌贼(Uroteuthis chinensis) 软颗粒饲料诱食效果摄食

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时间分辨荧光免疫分析高灵敏检测嗜水气单胞菌

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化学学报 2017年第4期75卷 398-402页

作者：林鹏卢洁郭松林冯建军王艺磊陈锦民集美大学水产学院农业部东海海水健康养殖重点实验室厦门361021

建立了生物素-链霉亲和素时间分辨荧光免疫分析(BAS-TRFIA)高灵敏检测嗜水气单胞菌的新方法.以兔抗IgG包被微孔板,加入嗜水气单胞菌菌株B18和生物素化IgG,生成的夹心复合物用Eu^(3+)-链霉亲和素作为示踪物,Eu^(3+)可与离解增强液形成时... 详细信息

建立了生物素-链霉亲和素时间分辨荧光免疫分析(BAS-TRFIA)高灵敏检测嗜水气单胞菌的新方法.以兔抗IgG包被微孔板,加入嗜水气单胞菌菌株B18和生物素化IgG,生成的夹心复合物用Eu^(3+)-链霉亲和素作为示踪物,Eu^(3+)可与离解增强液形成时间分辨荧光(TRF),通过TRF值对病原菌定量.方法的检测限为1.0×10~2 cfu/mL,在1.0×10~1.0×10~6 cfu/mL范围内线性良好,相关系数0.9716.用该法检测时,不同来源的嗜水气单胞菌以及其它气单胞菌均呈阴性.板内和板间的变异系数分别小于5.00%和9.00%.所有相关检测试剂37℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变.对60份人工感染的美洲鳗鲡组织样品,包括肝、肾、肠、鳃和肌肉等组织进行检测,阳性检测率为98.33%.结果表明,BAS-TRFIA法检测嗜水气单胞菌,灵敏度高、特异性好、操作简便,该方法为水产养殖病原菌检测提供了新的思路.

关键词：时间分辨荧光免疫分析嗜水气单胞菌生物素-亲和素系统美洲鳗鲡水产养殖

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中国鲎室内人工繁育和鲎卵、幼体常见病原鉴定及其防治

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中国水产科学 2023年第6期30卷 799-811页

作者：钟赟民翁朝红王志婷李佳怡谢仰杰集美大学水产学院农业农村部东海海水健康养殖重点实验室福建厦门361021

为了鉴定中国鲎(Tachypleus tridentatus)人工繁育过程中感染受精卵和低龄幼体的细菌或真菌等病原,同时探索防治措施,本研究开展了中国鲎在自然受精条件下的育苗实验。采用16S r DNA和ITS测序技术分别对感染病原的中国鲎受精卵表面细菌... 详细信息

为了鉴定中国鲎(Tachypleus tridentatus)人工繁育过程中感染受精卵和低龄幼体的细菌或真菌等病原,同时探索防治措施,本研究开展了中国鲎在自然受精条件下的育苗实验。采用16S r DNA和ITS测序技术分别对感染病原的中国鲎受精卵表面细菌和真菌进行鉴定和微生物群落组成分析,同时选择溴氯海因溶液做为消毒剂开展不同浓度溴氯海因溶液对中国鲎1龄幼体的急性毒性研究,并根据安全浓度探索和确定适用于鲎卵和幼体的有效消毒浓度。结果表明,4对亲鲎共产卵16493粒,平均受精率66.25%,平均孵化率52.25%,病原感染率为47.75%,感染病菌的鲎卵死亡率100%,最终得到5704只1龄幼体。感染病原的中国鲎受精卵表面优势细菌为希瓦氏菌属(Shewanella)、海王星杆菌属(Neptuniibacter)、脱硫杆菌属(Desulfobacter)、寺崎菌属(Terasakiella)和哈拉科杆菌属(Halarcobacter),相对丰度分别为23.67%、7.21%、6.64%、5.41%和5.16%;优势真菌为肉座菌科(Hypocreaceae)的一未知种和曲霉菌属(Aspergillus),相对丰度为81.81%和10.48%。溴氯海因对1龄幼鲎的96 h半致死浓度为945.06 mg/L,安全浓度为94.51 mg/L,在安全浓度下溴氯海因对鲎卵孵化和1龄幼鲎培育有效消毒浓度为30~90 mg/L,此浓度范围内能够显著提高鲎卵孵化率(P<0.05),并降低鲎卵和1龄幼鲎的死亡率(P<0.05)。研究结果显示溴氯海因可有效降低受精卵和幼体被细菌、真菌等微生物感染的风险,可用于中国鲎人工繁育过程中的日常消毒。

关键词：中国鲎人工繁育病原鉴定溴氯海因受精卵幼体

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大黄鱼slitrk3基因启动子克隆及转录调控分析

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南方水产科学 2023年第4期19卷 68-76页

作者：周锐涛岳珠峰纪焦军温靖姜丹王志勇方铭集美大学水产学院/农业农村部东海海水健康养殖重点实验室福建厦门361021

神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他... 详细信息

神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他物种的Slitrk3氨基酸进行多重序列比对和系统进化树分析,并预测大黄鱼slitrk3基因启动子区域相关的调控元件,采用双荧光素酶报告基因系统检测大黄鱼slitrk3基因启动子区域的转录活性。生物信息学分析结果显示,Slitrk3氨基酸序列在鱼类中具有较高的保守性;大黄鱼slitrk3基因启动子区域预测存在2个潜在的转录起始位点、2个CpG岛以及Sp1、GR、C/EBPα和C/EBPβ等多种转录因子结合位点。双荧光素酶报告基因系统结果显示,大黄鱼slitrk3基因启动子区域的−1970—−1614 bp、−1210—−667 bp存在正调控元件,−1614—−1210 bp、−667—−376 bp、−376—−147 bp存在负调控元件,推测−147—+16 bp为核心启动子。

关键词：大黄鱼 slitrk3基因启动子转录调控

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大黄鱼cGPDH和mGPDH基因克隆及低温胁迫下的表达差异分析

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中国水产科学 2021年第3期28卷 253-264页

作者：张东玲徐浩张震西王志勇集美大学水产学院农业农村部东海海水健康养殖重点实验室福建厦门361021

为探究cGPDH和mGPDH在大黄鱼(Larimichthyscrocea)适应低水温过程中所起的调控作用,本研究采用RACE-PCR技术克隆了大黄鱼cGPDH和mGPDH基因全长cDNA序列,cGPDH和mGPDH基因序列全长分别为1577 bp和2319 bp,包含长度为1050 bp和2193 bp的开放阅读框,分别编码349和730个氨基酸;氨基酸比对分析发现大黄鱼cGPDH和mGPDH与其他硬骨鱼类同源性较高,cGPDH包含一个特征性序列GXGXXG,mGPDH包含2个EF-hand功能结构域;进化树分析表明大黄鱼cGPDH和mGPDH与其他硬骨鱼类聚为一枝,与棘头梅童鱼(Collichthyslucidus)亲缘关系最近。生物信息学分析发现大黄鱼cGPDH和mGPDH均不含跨膜结构域,cGPDH亚细胞定位于细胞质可能性最大,三维结构包含一个C端α螺旋底物结合结构,8个N端β折叠结构和一个单体结构,mGPDH定位于线粒体的可能性最大。qRT-PCR分析显示cGPDH和mGPDH在所检测的12个组织中均有表达,cGPDHmRNA主要表达在血液,其次为鳃、头肾和肠道,肌肉组织中表达量最低;而mGPDHmRNA在头肾表达量最高,肌肉组织表达量最低。在持续的冷胁迫下,水温15℃到9℃每天降温2℃,9℃到7℃每天降温1℃,7℃保持5d,大黄鱼cGPDH和mGPDH在脑和肌肉表达趋势均显著上调。研究结果表明,cGPDH和mGPDH基因可能在大黄鱼适应冬季低水温过程中发挥重要作用。

关键词：大黄鱼 cGPDH mGPDH 低温基因调控基因表达

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luxR基因调控嗜水气单胞菌耐药性的分子机制初探

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渔业科学进展 2019年第4期40卷 147-155页

作者：毛磊磊鄢庆枇黄力行张梅梅王素云张萌萌覃映雪农业农村部东海海水健康养殖重点实验室集美大学水产学院

LuxR家族蛋白是一类在革兰氏阴性细菌中发挥重要作用的调控蛋白,参与细菌多项重要生理活动。采用RNAi技术构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) luxR05735稳定沉默菌株luxR05735-RNAi,并利用qRT-PCR检测基因沉默效果。结果显示,与野... 详细信息

LuxR家族蛋白是一类在革兰氏阴性细菌中发挥重要作用的调控蛋白,参与细菌多项重要生理活动。采用RNAi技术构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) luxR05735稳定沉默菌株luxR05735-RNAi,并利用qRT-PCR检测基因沉默效果。结果显示,与野生株相比,沉默株中luxR05735的表达量降低了96.8%。药物敏感性实验表明,与野生株相比,luxR05735-RNAi对庆大霉素、诺氟沙星、卡那霉素、吡哌酸的耐药性显著降低。对野生株与沉默株luxR05735-RNAi的转录组数据进行分析发现,表达差异显著的基因共有1286个,其中,上调基因353个,下调基因933个;显著富集的通路4条,分别是核糖体通路、精氨酸生物合成通路、硫代谢通路、硒化合物代谢通路;在这4条通路中可能与嗜水气单胞菌耐药性相关的重要功能基因包括metE、glnA、rplB、rplX、rpsA、rpsJ等,这些功能基因编码的蛋白主要与细菌的生物成膜及核糖体蛋白合成相关。综合以上研究结果,可以推测嗜水气单胞菌的luxR05735通过调控细菌的生物膜形成相关基因及核糖体蛋白相关基因的表达,从而调控细菌对药物的耐受性。

关键词：嗜水气单胞菌 LuxR调控蛋白耐药转录组

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大黄鱼高温适应的转录组学分析

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水产学报 2018年第11期42卷 1673-1683页

作者：邓素贞韩兆方陈小明李庆昌肖世俊李佳凯刘贤德集美大学水产学院农业部东海海水健康养殖重点实验室

为了探究大黄鱼高温胁迫条件下基因表达水平的变化,实验利用Illumina Hiseq 2500的125 pair-ended测序模式分别对大黄鱼高温处理组和常温对照组进行了转录组测序。对照组(3个生物学重复)和高温处理组(3个生物学重复)分别获得15.28和13.9... 详细信息

为了探究大黄鱼高温胁迫条件下基因表达水平的变化,实验利用Illumina Hiseq 2500的125 pair-ended测序模式分别对大黄鱼高温处理组和常温对照组进行了转录组测序。对照组(3个生物学重复)和高温处理组(3个生物学重复)分别获得15.28和13.92 Gb测序数据,GC含量平均值约为51%。过滤后的高质量测序reads使用Bowtie2软件比对到大黄鱼参考转录组序列上估计基因表达量,进而进行基因表达差异统计学检验。以常温对照组为参比,高温处理组中阈值设为|log2(FC)|>2和FDR<0.05,共检测到1 259条显著差异表达基因。其中,821条基因为高表达,438条基因为低表达。随机选取12条差异表达基因,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行了验证,结果证实转录组分析可靠。进一步将所有差异表达的基因进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,结果发现大量差异表达基因的功能与氧化还原反应、蛋白质折叠和去折叠、糖和脂代谢以及某些疾病的发生相关。该研究结果为下一步深入研究大黄鱼高温适应的调控机制提供了重要的参考材料。

关键词：大黄鱼转录组测序差异表达基因 qRT-PCR

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杂色鲍一种编码CRAD功能域基因的克隆及其在发育和应激中的表达

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水产学报 2018年第10期42卷 1520-1530页

作者：张丽莉和四梅王国栋王艺磊集美大学水产学院农业部东海海水健康养殖重点实验室

为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长c DNA,命名为Hd CRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,Hd... 详细信息

为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长c DNA,命名为Hd CRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,Hd CRAD的c DNA全长1 371 bp,开放阅读框735 bp,编码244个氨基酸。编码蛋白具有保守的CRAD功能域。该基因在各检测组织中均可表达,在黏液腺中表达量最高;在发育各阶段也均有表达,面盘幼虫晚期表达量最高。在细菌感染、高温或缺氧应激处理后,血细胞的Hd CRAD表达水平均有显著性变化。在担轮幼虫时期,RNA干扰该基因会显著提高幼虫畸形率;幼虫的caspase-8和DAD1的表达水平会显著上升,而caspase-3的表达水平会下降。研究表明,该基因参与了鲍幼虫发育过程;在成体免疫、耐高温和抗低氧中发挥了一定作用。

关键词：杂色鲍 Caspase募集功能域(CRAD) 基因表达发育应激 RNAi

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