检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2021年第5期29卷 83-91页

作者：裴宇茹王晓泉刘晓文胡顺林顾敏胡娇刘秀梵扬州大学兽医学院农业农村部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制联合创新中心扬州225009

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基... 详细信息

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基因片段虽起源相同,但分布于不同分支。关键氨基酸位点分析表明,6株毒株均具有优先结合哺乳动物α-2、6 Gal受体的关键氨基酸位点:HA 226L、155T;内部基因片段出现多个哺乳动物适应性的关键位点变异,如PB2蛋白的I292V和A588V、PA蛋白的K356R、S409N等;M2蛋白均存在对金刚烷抗性的S31N突变。综上,H9N2亚型AIV近10年基因组相对稳定,但不同蛋白均出现一致的位点变异,使其对哺乳动物宿主适应性增强,提示我们应进一步加强对H9N2亚型AIV的监测。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型遗传进化

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A型流感病毒神经氨酸酶蛋白功能研究进展

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动物医学进展 2021年第10期42卷 66-70页

作者：郑沁玫顾敏刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase,NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过... 详细信息

A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase,NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过切割宿主细胞表面唾液酸与血凝素(hemagglutinin,HA)之间的α-2,6或α-2,3糖苷键以促进新生病毒粒子释放的功能方面,而近来不断有证据表明,神经氨酸酶蛋白在受体结合和宿主适应性方面同样发挥关键作用。论文综述了神经氨酸酶蛋白的结构特征,并对神经氨酸酶蛋白的酶催化活性、受体结合功能以及与HA蛋白的功能平衡方面进行了总结,以期为深入理解IAV感染的分子机制提供参考。

关键词： A型流感病毒神经氨酸酶受体结合唾液酸血凝素-神经氨酸酶平衡

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PH826噬菌体与抗生素联用有效抑制多重耐药铜绿假单胞菌生物被膜的形成

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微生物学报 2024年第2期64卷 473-488页

作者：胡紫萌陈伟叶陈欣仪李培李敏周璐杜鸿刘玉庆张炜谈忠鸣南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210095 南京农业大学三亚研究所海南三亚572024 江苏省疾病预防控制中心急性传染病防制所江苏南京210009 苏州大学第二附属医院临床检验科江苏苏州215004 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100

【目的】铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种重要的革兰氏阴性病原体,可以加重囊性纤维化患者的肺部感染,最终会导致患者的死亡。然而由于多重耐药(multi-drug resistant,MDR)和泛耐药(pan-drug resistant,PDR)铜绿假单胞菌菌... 详细信息

【目的】铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种重要的革兰氏阴性病原体,可以加重囊性纤维化患者的肺部感染,最终会导致患者的死亡。然而由于多重耐药(multi-drug resistant,MDR)和泛耐药(pan-drug resistant,PDR)铜绿假单胞菌菌株的出现,使其防控变得更为严峻。【方法】从养殖场污水中分离能有效裂解多重耐药铜绿假单胞菌的噬菌体,研究其形态特征、生物学特性、宿主谱范围、基因组特征和体外抑菌能力等,并采用噬菌体和抗生素联用的方法进行生物被膜的抑制试验。【结果】透射电子显微镜的形态分析和基因组分析结合表明,该噬菌体属于Nankokuvirus病毒属。生物学特性试验表明,PH826具有广泛的温度稳定性(4-60℃)和pH稳定性(3.0-11.0)。宿主谱测试显示,PH826可以裂解13株铜绿假单胞菌(包括人源和动物源),体外抑菌试验显示,PH826在感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别为10、1、0.1时对铜绿假单胞菌均有强烈的裂解作用。根据基因组分析,PH826噬菌体的基因组大小为87956 bp,G+C含量为54.70%,编码165个开放阅读框(open reading frames,ORFs),并预测携带有裂解酶。值得注意的是,在24 h和48 h内,PH826和环丙沙星联用在1×、2×、4×最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)的条件下都减少了80%以上的生物被膜的形成;PH826和美罗培南联用在24h和48h内,在2×MIC和4×MIC的条件下也减少了80%以上的生物被膜的形成。【结论】PH826可能是一种潜在的消毒剂和治疗剂,可以单独使用或与抗生素联合使用,用于预防和治疗致病性铜绿假单胞菌。

关键词：噬菌体铜绿假单胞菌生物被膜多重耐药性抗生素

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1株鸭源H1亚型禽流感病毒的分离鉴定与全基因遗传进化分析

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中国兽医学报 2021年第12期41卷 2325-2332页

作者：张鑫煜才天宇赵颖葛志闯徐凡顾欣怡徐欣然王晓泉顾敏扬州大学兽医学院/农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

对2018年分离自江苏地区某活禽市场家鸭体内的1株H1亚型禽流感病毒进行了全基因组序列测定和遗传进化分析。BLAST检索结果显示,该分离株的HA、NA基因分别与A/pintail/Taiwan/WB2478/2017(H1N3)和A/chicken/Yuhuan/YH14/2016(H1N2)具有... 详细信息

对2018年分离自江苏地区某活禽市场家鸭体内的1株H1亚型禽流感病毒进行了全基因组序列测定和遗传进化分析。BLAST检索结果显示,该分离株的HA、NA基因分别与A/pintail/Taiwan/WB2478/2017(H1N3)和A/chicken/Yuhuan/YH14/2016(H1N2)具有最高的核苷酸一致性,表明其为H1N2亚型,命名为A/duck/Huaian/0151/2018(H1N2)。进一步结合各基因的系统发生分析,发现该0151株的6个内部基因均与水禽群中的多种亚型低致病性禽流感病毒亲缘关系密切,其中PB2和NS基因分别与国内2013年的鸭源H7N3和H7N7病毒高度同源。关键氨基酸位点分析显示,该病毒HA蛋白裂解位点处的基序为具有低致病性特征的PSIQSR↓GLF,受体结合位点226Q与228G提示其亲嗜禽类受体;NA蛋白未出现可能导致病毒在陆禽中适应性增强的茎部氨基酸缺失;PB2蛋白也未发生E627K、D701N等与对小鼠毒力增强有关的突变。综上所述,0151分离株基因组来源复杂,可能由不同亚型低致病性禽流感病毒发生重组而形成,但尚未出现利于其宿主范围扩大的重要分子标记。该研究结果将为H1亚型禽流感病毒的流行病学监测提供参考。

关键词：禽流感病毒 H1N2 基因组遗传进化 H7亚型

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表达绿色荧光和红色荧光蛋白重组新城疫病毒的构建

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中国家禽 2021年第6期43卷 104-107页

作者：王杨杨薛玲王文莉陈卿胡顺林刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

试验旨在探究以新城疫病毒为载体进行多联疫苗的构建。通过将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和红色荧光蛋白(DsRed)基因用T2A肽串联后克隆入嵌合新城疫病毒AI4-2FHN的P和M基因之间,获得重组质粒pAI4-2FHN-GRFP。该质粒与pCI-NP、pCI-P和p... 详细信息

试验旨在探究以新城疫病毒为载体进行多联疫苗的构建。通过将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和红色荧光蛋白(DsRed)基因用T2A肽串联后克隆入嵌合新城疫病毒AI4-2FHN的P和M基因之间,获得重组质粒pAI4-2FHN-GRFP。该质粒与pCI-NP、pCI-P和pCI-L 3个辅助质粒共转染至稳定表达T7 RNA聚合酶的BSR细胞后,获得可同时表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的重组新城疫病毒。拯救病毒在SPF鸡胚中繁殖传代,通过RT-PCR验证,并检测重组病毒的生物学活性和外源蛋白的表达效率。结果显示:重组病毒在鸡胚内传3代后,鸡胚尿囊液HA效价稳定在8 log2,感染细胞24 h、36 h、48 h后在荧光显微镜下观察到EGFP与DsRed的荧光亮度逐渐增强,且相同时间内红色荧光蛋白与绿色荧光蛋白表达量相似。重组病毒的构建为新城疫病毒作载体用于多联多价疫苗的研发提供了参考。

关键词：重组新城疫病毒绿色荧光蛋白红色荧光蛋白串联

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表达双拷贝H7N9亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒免疫原性的评价

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中国兽医科学 2021年第12期51卷 1512-1518页

作者：胡增垒黄雅石磊胡顺林甘军纪刘秀梵扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

为评价新城疫病毒(NDV)载体携带的外源基因大小对其免疫原性的影响,将2个拷贝的H7N9亚型禽流感病毒HA基因插入NDV的P与M基因之间非编码区最佳插入位点,构建重组NDV并评价其生物学特性及对鸡的免疫原性。结果显示,表达单、双拷贝HA基因... 详细信息

为评价新城疫病毒(NDV)载体携带的外源基因大小对其免疫原性的影响,将2个拷贝的H7N9亚型禽流感病毒HA基因插入NDV的P与M基因之间非编码区最佳插入位点,构建重组NDV并评价其生物学特性及对鸡的免疫原性。结果显示,表达单、双拷贝HA基因的重组NDV与亲本株在鸡胚中的复制水平均相似,而携带双拷贝HA基因使重组NDV诱导鸡产生的NDV抗体显著下降;表达双拷贝HA基因的重组NDV的HA蛋白表达量明显提高,但其诱导鸡产生的H7N9血凝抑制、IgG抗体水平均与表达单拷贝HA基因的重组NDV相当。结果表明,在NDV的P和M基因之间插入双拷贝HA基因能够显著提高HA蛋白表达量,但却使重组NDV在鸡体内的复制能力下降,而不能提高NDV载体疫苗诱导机体产生的H7N9特异性抗体应答的水平。本研究对NDV疫苗载体的构建和优化具有重要参考意义。

关键词：新城疫病毒疫苗载体载体容量免疫原性 H7N9亚型禽流感病毒 HA基因

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HA蛋白S227N突变对H7N9亚型禽流感病毒生物学特性与疫苗免疫原性的影响

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中国兽医学报 2021年第3期41卷 505-511页

作者：胡增垒石磊赵江艳顾晗胡娇曹永忠刘秀梵扬州大学教育部农业与农产品安全国际联合实验室江苏扬州225009 扬州大学农业科技发展研究院江苏扬州225009 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

某些种类H7N9亚型禽流感疫苗诱导的血凝抑制(HI)抗体较低,可能与诊断抗原受体结合特性和HI试验的敏感性有关。本研究主要评价H7N9亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白受体结合区第227位丝氨酸(S)到天冬氨酰(N)的突变对病毒复制、受体结合特性与... 详细信息

某些种类H7N9亚型禽流感疫苗诱导的血凝抑制(HI)抗体较低,可能与诊断抗原受体结合特性和HI试验的敏感性有关。本研究主要评价H7N9亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白受体结合区第227位丝氨酸(S)到天冬氨酰(N)的突变对病毒复制、受体结合特性与免疫原性的影响。结果显示,S227N突变对H7N9亚型AIV的复制性能无明显影响,可显著降低病毒与α-2,3及α-2,6唾液酸受体的亲和力,并导致该位点在HA蛋白表面构象改变。此外,S227N突变显著提高HI试验的敏感性与H7N9亚型灭活疫苗诱导的HI抗体滴度,对H7N9亚型免疫血清的交叉反应性无明显影响。结果表明,HA S227N突变可改变H7N9亚型AIV的受体结合特性、提高HI试验的敏感性、增强H7N9亚型疫苗的免疫原性。研究结果对于H7N9亚型禽流感疫苗免疫原性的改善及疫苗的临床评价有重要参考意义。

关键词： H7N9亚型禽流感 HA蛋白受体结合特性免疫原性疫苗 HI试验

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影响H1N1亚型猪流感病毒致病性与传播性的分子机制研究进展

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中国兽医学报 2020年第2期40卷 435-440页

作者：施丽薇顾敏刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

猪流感(swine influenza,SI)是规模化猪场普遍存在的疾病之一,全球广泛传播的猪流感病毒(swine influenza viruses,SIVs)亚型包括H1N1、H1N2和H3N2,我国以H1N1亚型的流行最为常见。进化上,H1N1亚型SIVs通常分为经典H1N1和欧亚类禽H1N1两... 详细信息

猪流感(swine influenza,SI)是规模化猪场普遍存在的疾病之一,全球广泛传播的猪流感病毒(swine influenza viruses,SIVs)亚型包括H1N1、H1N2和H3N2,我国以H1N1亚型的流行最为常见。进化上,H1N1亚型SIVs通常分为经典H1N1和欧亚类禽H1N1两大HA分支,分别于1930,1979年被首次分离,且都有直接感染人的病例报道;此后,两者参与重配生成的2009年大流行流感病毒(pdmH1N1/2009)又入侵猪群和人群,严重危害养猪业发展和公共卫生安全。现对致使H1N1 SIVs致病性发生改变或获得跨宿主传播能力的关键氨基酸位点变异及相关机制进行了总结,以期为SI的传播研究和防控提供一定参考。

关键词： SIVs H1N1亚型分子机制致病性传播性

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新城疫病毒HN标记疫苗的构建及免疫效力

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中国家禽 2020年第2期42卷 21-25页

作者：郭丽丽廖天星高晓敏徐立胡顺林刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

将新城疫病毒AI4株的HN蛋白胞外区替换成禽副黏病毒2型T4株HN相应部分,构建获得了一株重组病毒r AI4-T4HNECD,该病毒具有较高繁殖性能,且毒力弱。将该病毒制成灭活疫苗免疫2周龄SPF鸡后,定期采血用于血凝抑制试验(HI),免疫后3周以基因Ⅶ... 详细信息

将新城疫病毒AI4株的HN蛋白胞外区替换成禽副黏病毒2型T4株HN相应部分,构建获得了一株重组病毒r AI4-T4HNECD,该病毒具有较高繁殖性能,且毒力弱。将该病毒制成灭活疫苗免疫2周龄SPF鸡后,定期采血用于血凝抑制试验(HI),免疫后3周以基因Ⅶd亚型NDV强毒株JS-5-05攻毒,攻毒后定期采血用于HI检测。结果显示:免疫后,该疫苗可有效诱导抗体的产生,并能提供较强的免疫保护。血清学测定数据显示:攻毒前,免疫组鸡血清对AI4株的HI平均效价低于2 log2,但感染后第5、7天免疫组鸡血清对AI4株的HI平均效价可分别达4.3 log2和9.4 log2,而免疫未攻毒组对AI4株的HI效价仍低于2 log2,根据血清对AI4株HI效价的变化可区分免疫动物和感染动物。因此,重组病毒rAI4-T4HNECD可用于新城疫标记疫苗的开发。

关键词：新城疫病毒 HN蛋白标记疫苗血凝抑制试验

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长链非编码RNAs在调控流感病毒复制中的作用

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中国预防兽医学报 2020年第7期42卷 733-738页

作者：郑新新王国庆张蕾胡娇扬州大学兽医学院/农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

流感病毒(Influenza A virus,IAV)是一种单股负链分节段的RNA病毒,属于正粘病毒科(Orthomyxo⁃viridae),流感病毒属[1]。根据IAV颗粒内部核蛋白(Nuclear protein,NP)和基质蛋白(Matrix protein,M)抗原性的不同,可将其分为A、B、C三型,其中A型流感病毒宿主谱最为广泛,危害也最严重。除了可以感染人之外,IAV还可感染禽、马、猪等动物,曾多次引起世界性的大流行。

关键词：流感病毒正粘病毒科基质蛋白 RNA病毒抗原性

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