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蛇足石杉内生真菌Cercospora lagenariae MT-45的代谢产物研究

中草药 2019年第3期50卷 546-550页

作者：吴云罗源齐博文贾放放莫婷江芳芳杨洪芸丁宁张鑫刘晓屠鹏飞史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 宁夏回族医药研究所宁夏银川750021

目的研究蛇足石杉内生真菌Cercospora lagenariae MT-45的代谢产物。方法利用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法进行化合物的分离纯化,并根据化合物的理化性质及MS、NMR数据鉴定其结构;利用体外模型进行抗炎活性筛选。结果从内生真菌C. ... 详细信息

目的研究蛇足石杉内生真菌Cercospora lagenariae MT-45的代谢产物。方法利用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法进行化合物的分离纯化,并根据化合物的理化性质及MS、NMR数据鉴定其结构;利用体外模型进行抗炎活性筛选。结果从内生真菌C. lagenariae MT-45的糙米发酵物中分离得到9个聚酮类化合物,分别鉴定为尾孢菌酸A(1)、格链孢酚(2)、交链孢醇单甲醚(3)、(+)-nigrosporaol A(4)、alternarienonic acid B(5)、2-methyl-5-carboxymethyl-7-hydroxychromone(6)、2,5-dimethyl-7-hydroxychromone(7)、1-deoxyrubralactone(8)、(-)-alternarlactam(9)。结论其中化合物1为新化合物,化合物6对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7一氧化氮(NO)产生具有一定的抑制作用,IC50为(57.5±1.2)μmol/L。

关键词：蛇足石杉内生真菌尾孢菌属聚酮类化合物尾孢菌酸A 格链孢酚一氧化氮抑制活性

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保元汤调控AT1/P38 MAPK/TGF-β途径改善心肌纤维化防治心力衰竭的机制研究

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中华中医药杂志 2019年第5期34卷 2292-2297页

作者：孟慧王启新卢文吉孙小仟董健藤刘一舟李春屠鹏飞北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的:探讨保元汤对心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响及其机制。方法:体内实验通过利用左冠状动脉前降支结扎术制备MI后HF动物模型,利用超声、血生化、病理切片染色和WesternBlot等技术进行相应指标的检测。在机制研... 详细信息

目的:探讨保元汤对心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响及其机制。方法:体内实验通过利用左冠状动脉前降支结扎术制备MI后HF动物模型,利用超声、血生化、病理切片染色和WesternBlot等技术进行相应指标的检测。在机制研究中,体外实验采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激构建H9C2大鼠心肌细胞损伤模型,给予400、600、800μg/mL保元汤提取物冻干粉以及AngⅡ1型受体(AT1)抑制剂RNH6270进行干预,利用Western Blot技术检测相关蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,保元汤可以显著提高HF大鼠的左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)(P<0.05),同时抑制左心室内径(LVID)的扩张;此外,可以有效降低循环中ANP、BNP以及AngⅡ的含量(P<0.01);病理结果显示,保元汤可以能够有效抑制MF程度以及心肌组织中AngⅡ的生成(P<0.05);Western Blot结果显示保元汤可以下调缺血心肌组织中血管紧张素转化酶(ACE)1以及AT1的表达;同时下调AT1受体下游的磷酸化-P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、转化生长因子β(TGF-β)、Smad3的表达以及上调ACE2的表达;细胞实验结果显示保元汤可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞中AT1以及其下游P38 MAPK的激活,同时下调TGF-β以及Smad3蛋白的表达。结论:保元汤能有效抑制MI后大鼠缺血区域的纤维化程度,减缓HF进程,其机制与保元汤调控AT1/P38 MAPK/TGF-β途径相关。

关键词：保元汤心衰心肌纤维化 AT1/P38 MAPK/TGF-β途径

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大川芎方制剂类天麻素类、苯酞类以及酚酸类成分测定方法研究

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药物评价研究 2019年第12期42卷 2369-2376页

作者：陈炼明刘洁李乾苏汝彬王明霞贾志鑫肖红斌北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 新疆石河子大学药学院新疆石河子832000

目的建立3个内标、3个波长法测定大川芎方不同制剂的天麻素类、苯酞类以及酚酸类3类成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长为220、278、322 nm,柱温为35oC,体积流... 详细信息

目的建立3个内标、3个波长法测定大川芎方不同制剂的天麻素类、苯酞类以及酚酸类3类成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长为220、278、322 nm,柱温为35oC,体积流量为1 mL/min。以天麻素、藁本内酯、阿魏酸为内标,建立天麻素类(巴利森苷、巴利森苷B)、苯酞类(洋川芎内酯I、H、A和欧当归内酯A)以及酚酸类(绿原酸)成分的相对校正因子(RCF),在不同进样体积、不同色谱柱、不同添加剂条件下验证其耐用性,利用RCF值计算2种大川芎方制剂中10个成分的含量,并与外标法测定结果进行比较,验证方法的可行性。结果所建立的方法相对校正因子耐用性良好(RSD≤3.5%),与外标法的含量测定结果基本一致。结论该3内标、3波长法可用于大川芎方制剂的药效成分测定。

关键词：大川芎方制剂类成分天麻素类苯酞类酚酸类

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蛇足石杉内生真菌Cladosporium tenuissimum MT-35的代谢产物研究

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天然产物研究与开发 2022年第6期34卷 981-986页

作者：石璠钰杨洪芸莫婷齐博文王雯静张蓓蓓刘晓史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 宁夏回族医药研究所银川750021

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴... 详细信息

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴定为4-hydroxy-3-methoxy-2(1 H)-quinolinone(1)、acropyrone(2)、lumichrome(3)、(1 H-indol-3-yl)oxoacetamide(4)、1,6-dihydro-1-methyl-6-oxo-3-pyridinecarboxylic acid(5)、尿嘧啶(6)、过氧化麦角甾醇(7)、麦角固醇(8)、9(Z),12(Z)-十八碳二烯酰胺(9)、8-O-4-dehydrodiferulic acid(10)。除化合物7和8外,其他化合物均为首次从***中分离得到。对分离鉴定的化合物进行体外抗炎和抗乙酰胆碱酯酶活性筛选,结果表明化合物3、7、8、9对脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞释放一氧化氮具有抑制活性,IC_(50)值分别为36.8±1.0、13.9±0.2、36.6±0.0、53.2±1.4μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对RAW 264.7细胞NO释放无明显抑制活性;化合物3对乙酰胆碱酯酶具有一定的抑制活性,IC_(50)为77.9±11.1μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对乙酰胆碱酯酶无明显抑制活性.

关键词：蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌结构鉴定抗炎活性抗乙酰胆碱酯酶活性

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龙血通络胶囊对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2020年第7期26卷 50-56页

作者：陈孝男杨爱琳赵亚楠田颖颖屠鹏飞胡仲冬李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药品质评价北京市重点研究室北京102488

目的:本文探讨过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤后,龙血通络胶囊的神经保护作用及其潜在作用机制。方法:以500μmol·L-1H2O2构建PC12细胞损伤模型,实验分为空白组,模型组(H2O2,500μmol·L^-1),龙血通络胶囊组(LTC,1,2,4 mg... 详细信息

目的:本文探讨过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤后,龙血通络胶囊的神经保护作用及其潜在作用机制。方法:以500μmol·L-1H2O2构建PC12细胞损伤模型,实验分为空白组,模型组(H2O2,500μmol·L^-1),龙血通络胶囊组(LTC,1,2,4 mg·L^-1)。通过细胞增殖毒性检测(CCK-8),胞内活性氧(ROS)水平,线粒体膜电位水平(JC-1),细胞凋亡率以及蛋白免疫印迹法(Western blot)评价龙血通络胶囊对H2O2诱导PC12细胞损伤的神经保护作用。结果:与空白组比较,模型组的细胞存活率显著降低(P<0.01),ROS水平显著上升(P<0.01),线粒体膜电位水平下降,细胞凋亡率显著升高(P<0.01),剪切的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)水平显著上升(P<0.01)。与模型组比较,LTC组(1,2,4 mg·L^-1)能浓度依赖性升高细胞的存活率(P<0.01),降低ROS水平(P<0.05),维持线粒体膜电位水平,降低细胞的凋亡水平(P<0.01),并显著降低PARP蛋白的剪切水平(P<0.01)。结论:龙血通络胶囊对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用,其作用机制可能是通过抑制胞内氧化应激,维持线粒体功能,促进DNA修复等途径进而抑制神经细胞凋亡。

关键词：龙血通络胶囊氧化应激聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP) 细胞凋亡

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沉香精油通过抑制p-STAT3和IL-1β/IL-6产生抗炎作用

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1951-1957页

作者：高小力张倩霍会霞朱枝祥赵云芳屠鹏飞李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药品质评价北京市重点研究室北京102488

目的沉香是常用名贵药材,因具有多种药效且药用资源稀缺,是目前研究的热点。沉香精油(Chinese eaglewood essential oil,CEEO)是其主要有效成分,本实验旨在研究CEEO的抗炎作用及分子机制。方法采用小鼠耳肿胀实验和大鼠足肿胀实验评价C... 详细信息

目的沉香是常用名贵药材,因具有多种药效且药用资源稀缺,是目前研究的热点。沉香精油(Chinese eaglewood essential oil,CEEO)是其主要有效成分,本实验旨在研究CEEO的抗炎作用及分子机制。方法采用小鼠耳肿胀实验和大鼠足肿胀实验评价CEEO的抗炎活性;通过脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞模型研究CEEO对白细胞介素(IL)-1β、IL-6等的影响;采用Western blot方法研究CEEO对大鼠组织蛋白p-STAT3,p-IκBα/p-NF-κBp65的影响;通过气相色谱-质谱联用(GCMS)方法分析CEEO的化学成分。结果CEEO(60~960 mg·kg^-1,ig)剂量依赖地抑制二甲苯所致耳肿胀(P<0.001),最高抑制率为73%;CEEO(680 mg·kg^-1,ig)明显抑制角叉菜胶所致足肿胀(P<0.001),最高抑制率为51%。ELISA和RTPCR结果显示,CEEO(10、5、2.5μg·m L-1)显著抑制IL-1β和IL-6的产生及其mRNA水平(P<0.001),最高抑制率分别为68%和39%,64%和52%。Western blot结果显示,CEEO(680 mg·kg^-1,ig)明显抑制p-STAT3蛋白的表达,抑制率为21%(P<0.05)。通过GC-MS鉴定了沉香中的117个化合物,其主要成分为倍半萜类(68.83%)。结论本实验首次发现中国沉香精油灌胃给药具有显著的抗炎活性,其机制可能是通过降低p-STAT3的过表达,进而抑制前炎症细胞因子IL-1β和IL-6的产生和释放,从而抑制炎症的发生与发展。沉香精油的抗炎作用可能与其所含的主成分倍半萜有关。

关键词：沉香精油抗炎作用转录因子转录激活因子3(STAT3) 白细胞介素-1β 白细胞介素-6 倍半萜

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基于代谢组学的中药质量及机制研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第8期20卷 1373-1380页

作者：贾志鑫徐文娟马恺悦肖红斌北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学生命科学学院北京100029 北京中医药大学中药学院北京100029

中药质量控制及作用机制阐明是中药现代化面临的关键科学问题。代谢组学具有整体性、系统性的特点,与中药多靶点、整体协调机制具有一致性,已成为系统论指导下研究中药质量及作用机制的有效平台,其应用有利于提高中药质量,推动中药新药... 详细信息

中药质量控制及作用机制阐明是中药现代化面临的关键科学问题。代谢组学具有整体性、系统性的特点,与中药多靶点、整体协调机制具有一致性,已成为系统论指导下研究中药质量及作用机制的有效平台,其应用有利于提高中药质量,推动中药新药研发。本文对基于代谢组学的中药质量及机制研究进行了综述,介绍了代谢组学研究进展及其在中药整体性评价、中药质量标志物、中药药效/毒性作用机制研究中的应用,并对代谢组学在中药相关领域的发展趋势进行了展望。

关键词：代谢组学中药质量标志物作用机制毒性机制

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白木香丙二烯氧化物合酶基因的表达分析

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药学学报 2017年第12期52卷 1962-1969页

作者：冯莹莹张钟秀董先娟刘晓闫雅如王金铃王晓晖史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中国中医科学院中药研究所北京100700

茉莉酸(jasmonic acid,JA)为植物防御反应的重要信号分子,其生物合成途径的关键酶是丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase,AOS)。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异引物,克隆了白木香As AOS1基因的c DNA序列,并... 详细信息

茉莉酸(jasmonic acid,JA)为植物防御反应的重要信号分子,其生物合成途径的关键酶是丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase,AOS)。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异引物,克隆了白木香As AOS1基因的c DNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、组织特异性分析及非生物胁迫和激素诱导表达分析。白木香As AOS1基因的开放阅读框(ORF)长1 575 bp,编码524个氨基酸,其蛋白分子质量是58.70 k Da。As AOS1蛋白包含细胞色素P450的保守区域。系统进化树显示As AOS1蛋白与甜橙(Citrus sinensis)AOS蛋白同源性较高。构建原核表达载体p ET28a-As AOS1并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达As AOS1重组蛋白,利用Ni2+亲和色谱纯化得到可溶性As AOS1重组蛋白。荧光定量PCR结果显示As AOS1基因在茎中表达最高,根次之,叶中表达最低。盐、低温和重金属胁迫能够诱导白木香愈伤组织中As AOS1基因表达,诱导12 h表达量达到最高;激素茉莉酸甲酯、水杨酸和脱落酸诱导后,愈伤组织中As AOS1基因的表达量明显上升,而干旱胁迫和赤霉素处理对本As AOS1基因的表达量影响不大。本研究为进一步研究茉莉酸途径在白木香结香机制和植物防御反应中作用奠定基础。

关键词：白木香丙二烯氧化物合酶茉莉酸原核表达表达分析

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基于电子舌技术评价黄芩酒炙前后滋味变化及其在黄芩饮片鉴别中的应用研究

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中国中药杂志 2020年第11期45卷 2552-2559页

作者：柴冲冲曹妍毛民王靖越刘娜李欣欣张凯陈东玲魏龙吟尹怡慧李飞北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂北京100079

黄芩是临床常用的清热药,生用苦寒,酒炙可缓和苦寒之性。研究黄芩酒炙前后滋味变化对鉴别黄芩、酒黄芩及阐明传统酒炙理论具有重要意义。该实验制备黄芩片、酒黄芩各10批,采用HPLC测定5种黄酮类成分含量,以5种黄酮类成分含量为变量做PC... 详细信息

黄芩是临床常用的清热药,生用苦寒,酒炙可缓和苦寒之性。研究黄芩酒炙前后滋味变化对鉴别黄芩、酒黄芩及阐明传统酒炙理论具有重要意义。该实验制备黄芩片、酒黄芩各10批,采用HPLC测定5种黄酮类成分含量,以5种黄酮类成分含量为变量做PCA分析,结果不同批次黄芩饮片之间含量有一定的差异,但无法将黄芩片、酒黄芩区分开。通过人工口尝评价2种饮片的酸、咸、鲜、甜、苦5种感官属性,再利用电子舌检测代表饮片滋味的7根传感器(AHS,PKS,CTS,NMS,CPS,ANS,SCS)响应值。分析感官评价与电子舌响应值的相关性,结果显示感官评价的酸,咸,鲜,甜,苦与AHS,CTS,NMS,ANS,SCS 5根传感器具有不同程度的相关关系,表明电子舌技术可作为一种代替人工口尝并且量化检测味觉的手段,应用于中药饮片的滋味评价。采用味觉法对电子舌响应值进行分析,发现酒黄芩苦味降低,咸味增加;PCA分析黄芩酒炙前后滋味变化,结果显示2种饮片的滋味差异将其分成2类,PCA载荷图表明咸味和苦味的响应值是影响黄芩与酒黄芩整体味道的主要因素。基于电子舌响应值建立黄芩片、酒黄芩的Fisher判别模型,可对黄芩酒炙前后能进行有效的判别,判别识别率为100%。实验结果表明,电子舌检测结合多元统计分析可用于评价中药滋味,同时为鉴别不同炮制品提供一种快速、简便的技术手段。

关键词：黄芩酒黄芩滋味检测多元统计分析鉴别

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苗药血人参中黄酮类化学成分研究

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中草药 2021年第12期52卷 3485-3492页

作者：张云封昝妮利朱枝祥王文萱刘莉张仕林宋月林霍会霞屠鹏飞赵云芳李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 贵州汉方药业有限公司贵州贵阳550081

目的研究苗药血人参(茸毛木蓝Indigofera stachyodes干燥根)中的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对血人参中的化学成分进行分离纯化,通过其理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果... 详细信息

目的研究苗药血人参(茸毛木蓝Indigofera stachyodes干燥根)中的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对血人参中的化学成分进行分离纯化,通过其理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果从血人参乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分离鉴定了24个黄酮类化合物,分别鉴定为芒柄花素(1)、7-羟基-3’,4’-二甲氧基异黄酮(2)、染料木素(3)、毛蕊异黄酮(4)、大豆素(5)、farnisin(6)、3’,4’,7-三羟基黄酮(7)、木犀草素(8)、漆黄素(9)、甘草素(10)、erycibenin D(11)、3,4’,7-三羟基二氢黄酮(12)、二氢山柰酚(13)、黄颜木素(14)、6,4’-二羟基-3’-甲氧基橙酮(15)、硫黄菊素(16)、(–)-3,4’,7-三羟基-3’-甲氧基黄烷(17)、儿茶素(18)、表儿茶素(19)、(-)-epicatechin-3-O-p-hydroxybenzoate(20)、美迪紫檀素-3-O-β-D-葡萄糖苷(21)、2’,4’-二甲氧基-3’-羟基异黄烷-6-O-β-D-葡萄糖苷(22)、7-羟基色原酮(23)和5,7-二羟基色原酮(24)。结论化合物2、5~7、11~15、17、20~24为首次从木蓝属植物中分离得到,化合物1、10和16为首次从血人参中分离得到。化合物3、7、8、10、15和16能够抑制LPS诱导巨噬细胞RAW 264.7释放NO,其半数抑制浓度(IC50)在7.3~27.3μmol/L。

关键词：血人参黄酮抗炎甘草素黄颜木素 6 4’-二羟基-3’-甲氧基橙酮硫黄菊素美迪紫檀素-3-O-β-D-葡萄糖苷

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