检索结果-内蒙古大学图书馆

2’,4’-二羟基-3’-甲基-3-甲氧基查耳酮上调p21抑制人肝癌HepG2细胞的生长

药物评价研究 2024年第5期47卷 994-1001页

作者：王龙燕张云封王柱国谭鹏魏雪娇李军胡仲冬北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

目的探讨2’,4’-二羟基-3’-甲基-3-甲氧基查耳酮(C20)对人肝癌HepG2细胞的体外抗肿瘤作用及其潜在的作用机制。方法通过CCK-8法、集落形成实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测C20对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;通过彗星实验检... 详细信息

目的探讨2’,4’-二羟基-3’-甲基-3-甲氧基查耳酮(C20)对人肝癌HepG2细胞的体外抗肿瘤作用及其潜在的作用机制。方法通过CCK-8法、集落形成实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测C20对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;通过彗星实验检测C20(10μmol·L^(-1))对HepG2细胞DNA损伤的影响;通过流式细胞术检测C20(5、10μmol·L^(-1))对HepG2细胞周期阻滞的影响;通过Hoechst染色和流式细胞术检测C20(5、10μmol·L^(-1))对HepG2细胞凋亡的影响。借助Western blotting法检测C20(5、10μmol·L^(-1))处理对HepG2细胞中与凋亡、DNA损伤、细胞周期阻滞相关蛋白表达水平的调控作用。结果与对照组比较,C20显著抑制HepG2细胞的活力(P<0.001),给药48 h的半数抑制浓度(IC50)为7.937μmol·L^(-1);5μmol·L^(-1)C20能够显著抑制HepG2细胞的集落形成能力(P<0.01);EdU染色结果显示5、10μmol·L^(-1)的C20能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖能力;5、10μmol·L^(-1)的C20显著诱导HepG2细胞G2/M期阻滞(P<0.001);5、10μmol·L^(-1)的C20显著促进HepG2细胞凋亡(P<0.001),并显著上调Caspas-3、Caspase-9以及PARP的剪切水平(P<0.01);10μmol·L^(-1)的C20能够诱导HepG2细胞发生DNA损伤,并且5、10μmol·L^(-1)的C20显著上调γH2AX、p21的蛋白水平(P<0.01)。结论C20能够造成HepG2细胞发生DNA损伤,上调p21蛋白水平,导致细胞G2/M期阻滞,并进一步诱发凋亡,发挥体外抗肝癌作用。

关键词： 2’,4’-二羟基-3’-甲基-3-甲氧基查耳酮肝癌 DNA损伤 G2/M周期阻滞 p21

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乳香中二萜类化学成分研究

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中国中药杂志 2023年第9期48卷 2464-2470页

作者：王嵘晔夏晖王永祥黄豪王勃开杜梦宋月林赵云芳郑姣霍会霞李军北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

采用硅胶、Sephadex LH-20和ODS柱色谱以及半制备HPLC等色谱技术对乳香进行化学成分研究。通过其理化性质及IR、UV、MS、NMR等波谱数据鉴定化合物结构。从乳香正己烷部位分离纯化了7个二萜类化合物,分别鉴定为(1S,3E,7E,11R,12R)-11-hyd... 详细信息

采用硅胶、Sephadex LH-20和ODS柱色谱以及半制备HPLC等色谱技术对乳香进行化学成分研究。通过其理化性质及IR、UV、MS、NMR等波谱数据鉴定化合物结构。从乳香正己烷部位分离纯化了7个二萜类化合物,分别鉴定为(1S,3E,7E,11R,12R)-11-hydroxy-1-isopropyl-4,8,12-trimethyl-15-oxabicyclo[10.2.1]pentadeca-3,7-dien-5-one(1)、(1R,3S,4R,7E,11E)-4,8,12,15,15-pentamethyl-14-oxabicyclo[11.2.1]hexadeca-7,11-dien-4-ol(2)、incensole(3)、(-)-(R)-nephthenol(4)、euphraticanoid F(5)、dilospirane B(6)、dictyotin C(7)。其中化合物1和2为新化合物,通过比较计算和实验ECD确定了其绝对构型。化合物6和7为首次从该植物中分离得到。

关键词：乳香化学成分二萜西松烷香木兰烷

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香贝散通过激活AMPK/mTOR信号通路抑制人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231生长

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药物评价研究 2024年第6期47卷 1249-1258页

作者：谢锦欣王文艺全晓敏邢昊晴贾智王飞魏雪娇谭鹏王柱国胡仲冬安超北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学东方医院肿瘤科北京100078

目的探讨香贝散体外抗乳腺癌作用及其分子机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231,给予香贝散1、2、3、4、5 mg·mL^(-1)加药处理,对照组不加药。利用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞... 详细信息

目的探讨香贝散体外抗乳腺癌作用及其分子机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231,给予香贝散1、2、3、4、5 mg·mL^(-1)加药处理,对照组不加药。利用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕和细胞侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,借助吖啶橙染色法观察细胞自噬,借助转录组测序技术探索香贝散诱导乳腺癌细胞死亡的作用机制,并采用Western blotting法检测AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、LC-3、Beclin-1蛋白表达水平。结果与对照组比较,香贝散显著抑制人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞活力(P<0.05、0.001),48 h半数抑制浓度(IC50)分别为2.344、1.961 mg·mL^(-1),且具有时间、浓度相关性;显著抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞的集落形成能力;显著诱导MCF-7、MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.001);明显抑制人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞的体外迁移能力和侵袭能力;吖啶橙染色实验结果提示香贝散能够诱导MCF-7、MDA-MB-231细胞发生自噬,Western blotting实验结果显示香贝散能够显著上调MCF-7、MDA-MB-231细胞中自噬关键蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达(P<0.01、0.001);转录组测序技术发现差异基因变化最明显的通路包括mTOR信号通路、自噬信号通路等,Western blotting实验结果显示香贝散显著下调mTOR的磷酸化水平(P<0.001),显著上调AMPK的磷酸化水平(P<0.001)。结论香贝散能够显著抑制人乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,能够诱导凋亡和自噬的发生,激活AMPK/mTOR信号通路可能是其重要机制。

关键词：香贝散乳腺癌增殖迁移侵袭凋亡自噬 AMPK/mTOR信号通路

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沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分及其胃保护活性

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中草药 2023年第19期54卷 6208-6213页

作者：常闯张航马家乐黄豪王永祥王勃开杜梦赵云芳宋月林郑姣霍会霞李军北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488

目的研究沉香Aquilariae Lignum Resinatum的2-(2-苯乙基)色酮类成分及其胃黏膜上皮细胞保护活性。方法采用硅胶和ODS等多种色谱技术对沉香中2-(2-苯乙基)色酮进行分离纯化,结合波谱数据及其理化性质对化合物进行结构鉴定;采用牛磺胆酸... 详细信息

目的研究沉香Aquilariae Lignum Resinatum的2-(2-苯乙基)色酮类成分及其胃黏膜上皮细胞保护活性。方法采用硅胶和ODS等多种色谱技术对沉香中2-(2-苯乙基)色酮进行分离纯化,结合波谱数据及其理化性质对化合物进行结构鉴定;采用牛磺胆酸诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤模型对分离得到的单体化合物进行胃黏膜保护活性筛选。结果从沉香醋酸乙酯萃取部位中分离得到5个化合物,分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-苯乙基-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮(1)、(6S,7S,8S)-6,7,8-三羟基-2-(3-羟基-4-甲氧基)-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮(2)、oxidoagarochromone C(3)、rel-(1αR,2R,3R,7βR)-1α,2,3,7β-tetrahydro-2,3-dihydroxy-5-[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]-7H-oxireno[f][1]benzopyran-7-one(4)、沉香色酮J(5)。化合物3~5在20μmol/L浓度时,相对模型组细胞存活率分别提高(27.17±4.38)%、(16.02±2.95)%和(14.84±2.86)%。结论化合物1为新化合物,命名为四氢色酮N,通过计算电子圆二色谱(electronic circular dichroism,ECD)确定了其绝对构型。化合物3~5能显著改善牛磺胆酸诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤,表现出一定的胃黏膜上皮细胞保护活性。

关键词：沉香白木香 2-(2-苯乙基)色酮四氢色酮N 沉香色酮J 胃黏膜上皮细胞保护作用

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普洱茶素Ⅱ改善高脂血症ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化作用机制研究

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中草药 2023年第4期54卷 1157-1163页

作者：王鑫玉赵一慕高云阴紫钰王凌潇马家乐赵云芳郑姣李军北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488

目的研究普洱茶素Ⅱ对高脂血症诱发动脉硬化ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)的治疗效果及作用机制。方法ApoE-/-小鼠通过喂养高脂饲料建立动脉粥样硬化动物模型,造模成功后将小鼠随机分为对照组、模型组、阿托伐他汀(30mg/kg)组和普洱茶素... 详细信息

目的研究普洱茶素Ⅱ对高脂血症诱发动脉硬化ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)的治疗效果及作用机制。方法ApoE-/-小鼠通过喂养高脂饲料建立动脉粥样硬化动物模型,造模成功后将小鼠随机分为对照组、模型组、阿托伐他汀(30mg/kg)组和普洱茶素Ⅱ低、高剂量(50、100 mg/kg)组,给药6周后检测小鼠血浆总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和非高密度脂蛋白胆固醇(nonhigh density lipoprotein cholesterol,non-HDL-C)水平,以及主动脉流出道斑块面积等指标的差异。体外培养人脐静脉内皮细胞HUVEC和人外周血单核细胞THP-1,检测普洱茶素Ⅱ对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density protein,ox-LDL)诱发单核与内皮细胞黏附的影响,利用Western blotting对蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/血管细胞黏附因子(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)通路相关蛋白表达进行检测。结果普洱茶素Ⅱ显著抑制了高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠的体质量、肝脏质量、肝脏指数、附睾脂肪质量和附睾脂肪指数(P<0.05、0.01),降低血浆TC、TG、non-HDL-C水平(P<0.05、0.01),升高HDL-C水平(P<0.05),减少主动脉流出道脂质沉积。体外实验证实,普洱茶素Ⅱ显著抑制HUVEC与THP-1细胞间的黏附(P<0.05),抑制ox-LDL诱导的HUVEC细胞中VCAM-1、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和Akt/NF-κB通路相关蛋白表达(P<0.05、0.01)。结论普洱茶素Ⅱ能够显著改善ApoE-/-小鼠的肥胖、脂代谢紊乱、主动脉斑块沉积,通过调控Akt/NF-κB/VCAM-1通路抑制内皮细胞与单核细胞的黏附,进而抑制动脉粥样硬化的发生与发展。

关键词：普洱茶素Ⅱ 高脂血症 ApoE-/- 脂代谢异常动脉粥样硬化蛋白激酶B/核因子-κB通路

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滇龙胆草中香叶醇10-羟化酶基因的克隆、蛋白结构及表达分析

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天然产物研究与开发 2024年第9期36卷 1542-1553页

作者：王迎夏赵赛静田维圣崔晓雪黄文倩屠鹏飞史社坡刘晓北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京中医药大学中药学院北京100029

本研究基于滇龙胆草转录组数据分析,使用RT-PCR技术克隆获得两条香叶醇10-羟化酶基因,命名为GrG10H1和GrG10H2。使用在线软件对其进行了生物信息学分析,两条基因全长分别为1548 bp、1482 bp。系统进化分析显示该基因与细胞色素P450家族... 详细信息

本研究基于滇龙胆草转录组数据分析,使用RT-PCR技术克隆获得两条香叶醇10-羟化酶基因,命名为GrG10H1和GrG10H2。使用在线软件对其进行了生物信息学分析,两条基因全长分别为1548 bp、1482 bp。系统进化分析显示该基因与细胞色素P450家族中CYP76B亚家族亲缘关系最近。通过对该蛋白进行三维结构预测、同源模建和分子对接,分析了GrG10H蛋白活性口袋中可能参与催化功能发挥的关键氨基酸残基。荧光定量PCR表明GrG10H1基因在叶中表达水平最高,茎次之,根最低。而GrG10H2基因在根和叶中表达水平较高,在茎中几乎不表达。本研究还建立了能够生产龙胆苦苷的愈伤组织细胞培养体系,为进一步解析龙胆苦苷生物合成机制奠定了基础。

关键词：滇龙胆草龙胆苦苷生物信息学分析香叶醇10-羟化酶基因克隆

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没药中2个新倍半萜类化合物

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中草药 2023年第3期54卷 688-694页

作者：梁乃允黄惠铭王超超裴钰洁王勃开杜梦霍会霞宋月林郑姣赵云芳李军北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学、北京中医药研究院、中药现代研究中心北京100029

目的研究没药(地丁树Commiphora myrrha的干燥树脂)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对没药的化学成分进行分离纯化,结合理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果从没药正己烷部位... 详细信息

目的研究没药(地丁树Commiphora myrrha的干燥树脂)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对没药的化学成分进行分离纯化,结合理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果从没药正己烷部位共分离得到了8个倍半萜类化合物,分别鉴定为(4R,5S)-呋喃杜松-6(1),7(8),9(10)-三烯-5-醇乙酸酯(1)、(1E,3S,4R,8S)-吉玛-3-甲氧基-8-羟基-1,10(15),7(11)-三烯-6-羰基-8,12-内酯(2)、gajutsulactone A(3)、1-hydroxyeudesma-3,7(11)-dien-8-one(4)、1-hydroxyeudesma-4(14),7(11)-dien-8-one(5)、5β-10α-hydroxy-2α-methoxy-6-oxoguaia-7(11),8-dien-8,12-olide(6)、(2R,4R,5S)-2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)E-烯-6-酮(7)、1(10)Z,4Z-蓬莪术二烯-6-酮(8)。结论化合物1和2为新化合物,命名为去甲氧基没药萜烯B和没药萜G。化合物3~5为首次从没药属植物中分离得到。化合物5对人肝癌HepG2细胞增殖具有明显的抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)为(4.43±1.39)μmol/L。

关键词：没药属没药倍半萜去甲氧基没药萜烯B 没药萜G gajutsulactone A 1-hydroxyeudesma-4(14) 7(11)-dien-8-one

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白芷中非香豆素类成分研究

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天然产物研究与开发 2023年第10期35卷 1724-1731页

作者：王阳石璠钰卢姿含温建牛肖瑞牛梦荣王冰冰史社坡北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心北京102401

为研究临床常用中药白芷中的化学成分,本实验利用各种色谱分离技术,结合核磁共振波谱对分离得到的单体化合物进行结构鉴定,结果从白芷乙醇提取物中共鉴定出18个非香豆素类化合物,分别为甘草素(1)、柚皮素(2)、橙皮素(3)、柚皮素-7-O-β... 详细信息

为研究临床常用中药白芷中的化学成分,本实验利用各种色谱分离技术,结合核磁共振波谱对分离得到的单体化合物进行结构鉴定,结果从白芷乙醇提取物中共鉴定出18个非香豆素类化合物,分别为甘草素(1)、柚皮素(2)、橙皮素(3)、柚皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、橙皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、柚皮苷(6)、新橙皮苷(7)、柚皮芸香苷(8)、3-羟基-5,6,7,8,3′,4′-六甲氧基黄酮醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、开环异落叶松脂醇(10)、松脂素单甲基醚-β-D-葡萄糖苷(11)、连翘苷(12)、牛蒡子苷(13)、(-)-松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、金钱草碱(15)、1-H-咪唑并[4,5-d]哒嗪-2-胺(16)、咖啡酸乙酯(17)、咖啡酸甲酯(18)。除化合物15外,其他17个化合物均为首次从白芷中分离得到,对所有化合物进行抗炎活性筛选,结果表明化合物3和18对zymosan诱导中性粒细胞释放超氧化物具有一定的抑制作用,IC_(50)分别为77.8±2.4μmol/L和44.7±13.5μmol/L;化合物1和18对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7的NO产生有一定抑制活性,IC_(50)分别为44.7±4.1μmol/L和94.5±1.9μmol/L。

关键词：杭白芷黄酮木脂素金钱草碱抗炎

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丹参SmIAA7基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

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药学学报 2025年第2期60卷 514-525页

作者：黄钰莹陈颖王宝纬关范圆郑语嫣范菁王金铃胡秀华王晓晖北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 安徽科技学院生物医学与健康学院安徽滁州233100 北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488

Auxin/indole-3-acetic acid(Aux/IAA)是植物中一个重要的基因家族,在生长素信号传导中扮演着关键的角色,参与了植物的生长、发育以及对逆境胁迫的响应和调节过程。本研究通过分析丹参(Salvia miltiorrhiza)不同羽状复叶的转录组数据筛... 详细信息

Auxin/indole-3-acetic acid(Aux/IAA)是植物中一个重要的基因家族,在生长素信号传导中扮演着关键的角色,参与了植物的生长、发育以及对逆境胁迫的响应和调节过程。本研究通过分析丹参(Salvia miltiorrhiza)不同羽状复叶的转录组数据筛选了潜在的与叶片发育相关的基因SmIAA7,设计特异引物成功从丹参中克隆了SmIAA7,并进行生物信息学分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、生长素及非生物胁迫下的诱导表达分析。SmIAA7基因全长684 bp,编码227个氨基酸,蛋白分子质量25.3 kD。保守结构域分析表明SmIAA7含有超家族保守结构域Aux_IAA(pfam02309),序列分析及系统进化树结果表明SmIAA7和其他植物中的IAA7以及IAA14同源性较高,可能参与植物的生长发育并响应逆境胁迫。构建原核表达载体pET28a-SmIAA7并在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中成功表达SmIAA7重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。亚细胞定位实验结果表明SmIAA7定位于植物细胞的细胞核中。实时荧光定量PCR结果表明,SmIAA7基因能够响应生长素的诱导导致表达水平升高。干旱、低温以及盐胁迫均能够显著提高SmIAA7基因的表达水平。本研究为进一步揭示SmIAA7在丹参叶片发育、信号传递及逆境防御中的作用奠定基础。

关键词：丹参 SmIAA7 原核表达亚细胞定位表达分析

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基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术的异绿原酸A体内代谢产物分析

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4220-4229页

作者：刘文静曹耘畅冯素香麻秋娟李军宋月林河南中医药大学药学院河南郑州450046 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046

异绿原酸A(ICA)为茵陈等多种中药的主要药效成分。该研究旨在鉴定口服给药ICA的大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物,并推测其潜在的代谢途径。ICA灌胃大鼠后,收集不同时间点(段)的血浆、尿液和粪便样品,利用高效液相色谱-四极杆静电场轨... 详细信息

异绿原酸A(ICA)为茵陈等多种中药的主要药效成分。该研究旨在鉴定口服给药ICA的大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物,并推测其潜在的代谢途径。ICA灌胃大鼠后,收集不同时间点(段)的血浆、尿液和粪便样品,利用高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术,结合对照品比对保留时间、裂解规律总结和文献数据,对生物样品中代谢产物进行结构鉴定。从大鼠样品中初步鉴定了ICA的39个代谢产物(M1~M39),其中31个来自于血浆(M1~M10、M12~M24、M26~M28、M30、M34~M35、M38~M39)、34个来自于尿液(M1~M11、M13~M15、M19~M25、M27~M39)、11个来自于粪便(M2~M3、M6、M15、M21~M23、M32、M34、M36~M37),主要代谢途径包括水解、葡萄糖醛酸化、甲基化和磺酸化反应等。该研究揭示了ICA在大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢情况,对深入阐明其药理活性成分提供参考。

关键词：异绿原酸A HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS 代谢产物代谢途径

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