目的：通过网络药理学和分子对接的方法，探讨当归-黄精药对治疗单纯性肥胖的活性成分、靶点通路，通过动物实验验证探讨其作用机制。方法：检索中药系统药理学数据库及分析平台（TCMSP）对当归-黄精的化学成分和靶点进行预测，搜寻人类基因的综合数据库（Gene Cards）、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、药物基因组学知识库（Pharm GKB）和疾病基因网络数据库（Dis Ge NET）预测单纯性肥胖相关靶点。对药物与疾病的靶标基因取交集后采用Cytoscape软件构建活性成分-靶点网络图，并导入STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，进行拓扑分析寻找核心基因。采用生物信息数据库（DAVID）数据库和微生信平台进行基因本体（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析及其作图。应用Auto Dock 1.5.7软件对排名前5的活性成分与核心靶点进行分子对接；实验采用高脂饲料喂养C57BL/6J的方法建立单纯性肥胖模型，当归-黄精给药10周，给药量为当归(2.06 g·kg-1)、黄精(2.06 g·kg-1)、当归-黄精(4.11 g·kg-1)，模型组小鼠予等体积纯净水灌胃。给药结束后处死小鼠，检测小鼠体脂重、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）指标，观察肝脏和脂肪细胞的苏木素-伊红（HE）病理切片，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清细胞因子瘦素、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF）-α表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠肝脏组织中的人表皮生长因子受体（EGFR）、信号转导和转录激活因子3（STAT3） m RNA表达水平。结果：网络药理学及分子对接结果显示当归-黄精治疗单纯性肥胖可能是通过其主要化学成分MOL009760（西伯利亚苷A＿qt）、MOL003889（甲基原薯蓣皂苷＿qt）、MOL009766（白藜芦醇）、MOL006331（4′，5-二羟基黄酮）、MOL004941（黄芩素）影响核心靶点EGFR、STAT3的蛋白表达，进而调节PI3K/Akt、JAK/STAT信号通路。动物实验结果显示，与正常组比较，模型组的体质量、体脂重、血清中TG、TC、TNF-α、IL-6、瘦素水平显著升高（P<0.01）;EGFR m RNA表达水平明显升高（P<0.05）,STAT3 m RNA表达水平显著降低（P<0.01）；组织形态学研究表明模型小鼠肝组织结构紊乱，有明显的脂肪空泡，胞质疏松，脂质积累，脂肪变性；模型组小鼠白色脂肪（WAT）和棕色脂肪（BAT）中脂肪细胞直径明显增大，单位面积细胞数量减少，形状不规则。与模型组比较，当归-黄精组显著降低肥胖大鼠的体质量、体脂重、TC、IL-6、TNF-α、瘦素、EGFR m RNA表达水平（P<0.01）,TG明显降低（P<0.05）;STAT3 m RNA表达水平明显增高（P<0.01）；肝细胞异常结构明显改善，脂肪空泡体积明显缩小及数量显著减少，肝细胞形态向正常组接近；脂肪细胞的直径明显变小，单位面积脂肪细胞数目变多。结论：当归-黄精能通过关键的活性成分影响EGFR、STAT3等靶点蛋白的表达及调控PI3K/Akt、JAK/STAT等信号通路，修复损伤的肝脏和脂肪细胞，缓解小鼠肥胖疾病的进展。
暂无评论