检索结果-内蒙古大学图书馆

寄生虫与医学昆虫学报 2025年第1期32卷 1-9,15页

作者：张明明郝瑜琬程喻力黄京京贾智惠诸欣平首都医科大学基础医学院病原生物学系寄生虫学教研室北京100069 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心WHO热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的本研究旨在探索旋毛虫Ts87蛋白是否可以通过对小鼠NETs DNA骨架的降解作用实施宿主免疫逃避。方法首先,利用生物信息学软件分析Ts87蛋白的理化性质,通过序列同源性比对确认其属于核酸酶家族。随后,通过分子克隆及蛋白纯化技术,获得... 详细信息

目的本研究旨在探索旋毛虫Ts87蛋白是否可以通过对小鼠NETs DNA骨架的降解作用实施宿主免疫逃避。方法首先,利用生物信息学软件分析Ts87蛋白的理化性质,通过序列同源性比对确认其属于核酸酶家族。随后,通过分子克隆及蛋白纯化技术,获得高纯度的Ts87蛋白,并证实其具有核酸酶活性。将Ts87与已知酶活性位点的人溶酶体DNaseⅡα以及结构已解析的泰国伯克霍尔德氏菌DNaseⅡ的一级序列进行比对,预测出其可能的活性位点,并通过定点突变技术获得Ts87酶活突变体,酶活性实验证实其功能。在体外检测小鼠骨髓中性粒细胞胞外核酸量及免疫荧光染色小鼠NETs,来证实Ts87蛋白酶活突变体降解NETs能力是否有所下降。最后,Ts87免疫小鼠后,通过免疫荧光染色小鼠肠道NETs的MPO与CitH3表达量,观察小鼠体内NETs的降解情况及虫荷。结果成功获得高纯度Ts87蛋白,并证实其具有核酸酶活性,在体外可以降解小鼠NETs,且Ts87突变体降解NETs的能力下降。体内实验结果表明,免疫小鼠产生抗Ts87抗体后,体内NETs降解减少,利于NETs对虫体攻击,使小鼠体内虫荷降低。结论旋毛虫能利用Ts87核酸酶逃避NETs的捕获,该研究为旋毛虫病的防治提供潜在的疫苗与药物靶点。

关键词：旋毛虫核酸酶Ts87 中性粒细胞胞外捕获网免疫逃避

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体外转录小鼠MAGE-A3 mRNA在NIH/3T3细胞中的表达

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安徽医科大学学报 2020年第8期55卷 1157-1160页

作者：陈鹤丹林煊谢颖陈尧杨君仪王赟张世超胡祖权曾柱刘丽娜贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳550025 贵州医科大学生物与医学工程重点实验室/贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心/医药生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得MAGE-A3 mRNA,在哺乳动物细胞NIH/3T3中表达MAGE-A3蛋白。方法通过逆转录PCR从三阴型乳腺癌细胞系4T1中扩增得到MAGE-A3编码基因,插入到载体pcDNA3.1(+)中,成功构建重组表达载体pcDNA3.1... 详细信息

目的构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得MAGE-A3 mRNA,在哺乳动物细胞NIH/3T3中表达MAGE-A3蛋白。方法通过逆转录PCR从三阴型乳腺癌细胞系4T1中扩增得到MAGE-A3编码基因,插入到载体pcDNA3.1(+)中,成功构建重组表达载体pcDNA3.1-MAGE作为体外转录RNA的模板。利用T7体外转录试剂盒获得MAGE-A3 RNA,添加poly(A)尾后进行mRNA纯化。将纯化后的MAGE-A 3 mRNA转染到NIH/3T3细胞中,Western blot实验检测MAGE-A3蛋白的表达。结果pcDNA3.1-MAGE-A3正确表达和构建。体外转录MAGE-A3 mRNAA(260)/A(280)为1.92,浓度是872.3 ng/μl,长度约为500 bp。转染MAGE-A3 mRNA后,NIH/3T3能表达大小约35 ku的MAGE-A3蛋白。结论成功构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得纯度较高的MAGE-A3 mRNA,该mRNA能在NIH/3T3细胞中表达MAGE-A3蛋白。

关键词： MAGE-A3 体外转录mRNA 蛋白表达

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牙源性角化囊肿SMO基因突变检测

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中华口腔医学杂志 2022年第2期57卷 149-153页

作者：翟洁梅王珊洪瑛瑛曲佳菲杨春李铁军北京大学口腔医学院·口腔医院病理科国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 昆明医科大学口腔医学院口腔基础医学教研室昆明650500 北京大学口腔医学院·口腔医院门诊部国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 天津市口腔医院国际诊疗中心天津市口腔功能重建重点实验室天津300041

目的检测牙源性角化囊肿(odontogenic keratocyst,OKC)是否存在SMO基因突变,进一步完善对OKC发病机制的认识。方法收集2012年9月至2017年6月就诊于北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科的OKC患者,10例为痣样基底细胞癌综合征性... 详细信息

目的检测牙源性角化囊肿(odontogenic keratocyst,OKC)是否存在SMO基因突变,进一步完善对OKC发病机制的认识。方法收集2012年9月至2017年6月就诊于北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科的OKC患者,10例为痣样基底细胞癌综合征性OKC(女性4例,男性6例),20例为散发性OKC(女性7例,男性13例)。采集患者的病变组织,分离衬里上皮和纤维间质,采用Sanger测序法分别检测上皮与间质DNA中SMO基因突变情况。结果检测发现3个SMO基因突变位点,即1例综合征性OKC携带c.2081C>G(p.P694R)突变,2例散发性OKC分别携带c.907C>T(p.L303F)突变和c.1247_1248delinsAA(p.G416E)突变,前2例突变为未被报道过的SMO新突变,且2例散发性OKC均不伴PTCH1突变。结论除PTCH1突变外,OKC还存在SMO基因突变,可能与OKC的发病机制有关。

关键词：牙源性囊肿牙源性角化囊肿 SMO基因基因突变 SHH通路抑制剂

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斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-1β表达的特点

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 993-999页

作者：赵砚驰李化李丹杨雁竹杨晓凤黄江涛莫大双舒莉萍贵州医科大学基础医学院免疫学教研室细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨野生型斑马鱼胚胎早期发育中白细胞介素1β(IL-1β)的表达特点。方法选取美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中人类、斑马鱼、猪、绵羊、水牛、小鼠、大鼠、家兔以及豚尾猴9个不同物种IL-1β氨基酸序列进行同源性比对,采... 详细信息

目的探讨野生型斑马鱼胚胎早期发育中白细胞介素1β(IL-1β)的表达特点。方法选取美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中人类、斑马鱼、猪、绵羊、水牛、小鼠、大鼠、家兔以及豚尾猴9个不同物种IL-1β氨基酸序列进行同源性比对,采用分子进化遗传分析软件(MEGA X)绘制系统进化树;收集4组72受精后小时(hpf)斑马鱼胚胎、25枚/组,提取总RNA及合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),构建pGEMT-IL-1β重组质粒并合成地高辛标记的IL-1β反义RNA探针;分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf斑马鱼胚胎、25枚/组,采用整胚原位杂交技术检测IL-1β在斑马鱼早期不同时间胚胎发育中的表达及分布状况。结果 IL-1β氨基酸序列在不同物种中相对保守;限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示,重组质粒构建无误;原位杂交实验结果表明,4 hpf斑马鱼胚胎中开始观察到IL-1β阳性杂交信号表达,6~12 hpf斑马鱼胚胎中观察到IL-1β阳性杂交信号持续表达,12 hpf斑马鱼胚胎中表达尤为明显,18 hpf斑马鱼胚胎躯干背侧、眼睛以及中后部中间细胞群等部位观察到不同程度的IL-1β阳性杂交信号表达,24 hpf斑马鱼胚胎全身躯干观察到IL-1β广泛表达,且头部及眼睛部位表达尤为明显,48~72 hpf斑马鱼胚胎观察到IL-1β表达逐渐从头部延伸至全身躯干且于肌肉组织中表达尤为明显。结论斑马鱼IL-1β在进化过程中具有相对保守性,斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-1β有不同程度的表达。

关键词：斑马鱼白细胞介素1β 原位杂交细胞因子类胚胎早期发育重组质粒构建

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喜炎平注射液抗Ⅱ型登革病毒作用的体内及体外实验研究

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中国热带医学 2020年第12期20卷 1142-1148页

作者：范东瀛高娜蒋春红吴娜首都医科大学实验动物部北京100069 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 江西青峰药业有限公司创新天然药物与中药注射剂国家重点实验室江西赣州341000

目的分别通过体外和体内实验研究喜炎平注射液对Ⅱ型登革病毒(Dengue virus serotype 2,DENV2)的抗病毒作用。方法体外实验以利巴韦林注射液作为阳性对照药物,分别以灭活、抑制进入、治疗性给药以及预防联合维持治疗的方式处理人肝癌细... 详细信息

目的分别通过体外和体内实验研究喜炎平注射液对Ⅱ型登革病毒(Dengue virus serotype 2,DENV2)的抗病毒作用。方法体外实验以利巴韦林注射液作为阳性对照药物,分别以灭活、抑制进入、治疗性给药以及预防联合维持治疗的方式处理人肝癌细胞株HepG2细胞,在不同时相点收获上清和细胞,分别利用间接免疫荧光(indirect immuno-fluorescence assay,IFA)和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测DENV2的病毒载量,从而评价喜炎平注射液的体外抗DENV2作用。体内实验以SCID小鼠为实验鼠,腹腔注射HepG2细胞,建立模型小鼠,腹腔注射感染DENV2,次日给予不同剂量(1、2、4 mg/只)的喜炎平注射液,连续给药4 d,部分小鼠于感染第6日取材,利用IFA检测实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并观察实验鼠的生存率。结果体外实验显示,喜炎平注射液能够灭活DENV2,并抑制DENV2进入细胞,同时无论是治疗还是治疗联合预防给药,均可对DENV2的复制具有良好的抑制作用,即在病毒感染早期及晚期,喜炎平均可发挥抗病毒作用,且优于利巴韦林。进一步在体内实验中同样显示喜炎平具有较好的抗病毒作用,可以降低实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并可提高实验鼠的生存率。结论喜炎平注射液具有明显的抗DENV2病毒的作用,可为DENV感染的治疗提供新的候选药物。

关键词： Ⅱ型登革病毒喜炎平注射液抗病毒作用体内实验体外实验

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斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-10表达的特点

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 1000-1006,1013页

作者：赵砚驰李化李丹孔鹏张乙进吴洁玲莫大双舒莉萍贵州医科大学基础医学院免疫学教研室细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨野生型斑马鱼白细胞介素10(IL-10)在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法在美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置,与Ensemble数据库中的数据进行比对,采用软件分子进化遗... 详细信息

目的探讨野生型斑马鱼白细胞介素10(IL-10)在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法在美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置,与Ensemble数据库中的数据进行比对,采用软件分子进化遗传分析软件(MEGA X)绘制系统进化树;收集3组72受精后小时(hpf)斑马鱼胚胎、30枚/组,提取总RNA(Total RNA)及合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),构建斑马鱼重组质粒pCS^(2+)-IL-10,体外转录合成地高辛标记的IL-10反义RNA探针;分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf的斑马鱼胚胎75枚(25枚/组、3组),采用全胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎不同发育时间点IL-10表达及分布情况。结果野生型斑马鱼IL-10基因与人类IL-10基因相似度较高,且在进化过程中相对保守;限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示,重组质粒构建无误;全胚胎原位杂交结果显示,4~12 hpf野生型斑马鱼胚胎中未观察到阳性杂交信号,18 hpf野生型斑马鱼胚胎中后部中间细胞群观察到IL-10阳性杂交信号,24~72 hpf野生型斑马鱼胚胎胚胎头部区域IL-10广泛表达,头部背侧、心脏、眼眶以及卵黄囊背侧部位的信号尤为明显。结论斑马鱼IL-10在进化过程中具有相对保守性,在早期胚胎发育过程中IL-10有不同程度的表达,提示IL-10在斑马鱼胚胎早期发育中发挥重要作用。

关键词：斑马鱼白细胞介素10 原位杂交细胞因子类胚胎早期发育重组质粒构建

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骨髓造血干祖细胞改善慢性约束应激诱导的小鼠脾细胞数减少

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山西医科大学学报 2020年第3期51卷 231-236页

作者：付慧常芬王浩玉白芃康杰山西医科大学汾阳学院科技中心汾阳032200 山西医科大学汾阳学院医学检验系病原生物学与病原生物学检验教研室汾阳032200 北京大学基础医学院细胞生物学教研室山西医科大学汾阳学院基础医学部解剖教研室

目的观察CD34+骨髓造血干祖细胞(CD34+HSPC)对慢性约束应激小鼠脾细胞数的影响。方法将10只8周龄雄性BALB/c小鼠分为2组(n=5):①慢性应激组:小鼠放入约束应激管中约束12 h/d(早9:00-晚9:00),解除约束12 h/d(晚9:00-早9:00),连续处理3 d... 详细信息

目的观察CD34+骨髓造血干祖细胞(CD34+HSPC)对慢性约束应激小鼠脾细胞数的影响。方法将10只8周龄雄性BALB/c小鼠分为2组(n=5):①慢性应激组:小鼠放入约束应激管中约束12 h/d(早9:00-晚9:00),解除约束12 h/d(晚9:00-早9:00),连续处理3 d以建立慢性约束应激的小鼠模型;②对照组:正常饲养不施加任何处理。慢性应激第3天结束时即取每组小鼠脾并计数脾细胞。HSPC体内干预实验中,20只雄性BALB/c小鼠分为4组(n=5):HSPC干预+慢性应激组,溶剂对照+慢性应激组,HSPC干预组和溶剂对照组。HSPC干预+慢性应激组和溶剂对照+慢性应激组慢性应激第3天结束时即取每组小鼠脾并计数脾细胞,流式细胞术检测其中活细胞、凋亡细胞及坏死细胞比例。绿色荧光标记HSPC做体内示踪试验,检测迁移至脾的HSPC。HSPC体外干预实验中,细胞培养分为4组:HSPC干预+地塞米松组,脾细胞+地塞米松组,HSPC干预组和脾细胞单独培养组,培养18 h,流式细胞术检测其中活细胞、凋亡细胞及坏死细胞的比例。结果脾细胞计数结果表明,与对照组相比,慢性应激组小鼠的脾细胞总数显著减少(P<0.05)。HSPC体内干预实验中,与溶剂对照+慢性应激组相比,HSPC干预+慢性应激组小鼠脾细胞计数增加(P<0.05)。流式细胞术结果表明,与溶剂对照组相比,溶剂对照+慢性应激组小鼠脾细胞凋亡及坏死比例增加(P<0.05);与溶剂对照+慢性应激组相比,HSPC干预+慢性应激组小鼠脾细胞凋亡比例减少,活细胞比例增加(P<0.05)。体内示踪试验结果显示,慢性应激过程中HSPC可迁移至脾中。体外实验结果表明,与脾细胞单独培养组相比,脾细胞+地塞米松组脾细胞凋亡及坏死比例增加(P<0.05);与脾细胞+地塞米松组相比,HSPC干预+地塞米松组脾细胞坏死比例减少,活细胞比例增加(P<0.05)。结论CD34+HSPC可改善慢性约束应激诱导的小鼠脾细胞数的减少。

关键词：造血干祖细胞慢性约束应激脾细胞细胞凋亡细胞坏死小鼠

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原发性肝癌的分层筛查与监测指南(2020版)

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中华肝胆外科杂志 2021年第1期27卷 12-29页

作者：中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会肿瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组杨永平卢实春丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元不详解放军总医院肝病医学部北京100853 解放军总医院肝胆胰外科医学部北京100853 首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践... 详细信息

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践的低危、中危、高危和极高危4个层次的肝癌风险人群辨识特征。在医院和社区人群中筛查伴肝癌风险的患者,并科学地进行分层监测。伴有肝癌风险的患者需要终生监测,指南根据风险层次推荐了不同的肝癌监测间隔和工具,对于肝癌高危人群,6个月1次腹部超声联合血清甲胎蛋白监测(常规监测);对于肝癌极高危人群,3个月1次常规监测,6~12个月增强CT或MRI检查1次,以提高早期肝癌诊断率和降低监测成本;低中危人群中,肝癌年发生率低,可延长监测间隔为1年或以上。指南部分推荐意见的成本-效益仍需要进一步评价。

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测

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原发性肝癌的分层筛查与监测指南(2020版)

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肿瘤 2021年第1期41卷 1-23页

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数仍占全球的55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床... 详细信息

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数仍占全球的55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践的低危、中危、高危和极高危4个层次的肝癌风险人群辨识特征。在医院和社区人群中筛查伴肝癌风险的患者,并科学地进行分层监测。伴有肝癌风险的患者需要终生监测,指南根据风险层次推荐了不同的肝癌监测间隔和工具,对于肝癌高危人群,6个月1次腹部超声联合血清甲胎蛋白监测(常规监测);对于肝癌极高危人群,3个月1次常规监测,6~12个月进行增强CT或MRI检查1次,以提高早期肝癌诊断率和降低监测成本;低中危人群中,肝癌年发生率低,可延长监测间隔为1年或以上。指南部分推荐意见的成本-效益仍需要进一步评价。

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测

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原发性肝癌的分层筛查与监测指南(2020版)

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临床肝胆病杂志 2021年第2期37卷 286-295页

作者：中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会肿瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元杨永平卢实春不详首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科解放军总医院肝病医学部肝癌诊疗中心解放军总医院肝胆胰外科医学部

关键词：肝肿瘤肝硬化乙型肝炎,慢性筛查监测诊疗准则(主题)

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