检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：徐欢安徽医科大学

学位级别：硕士

当前PM2.5被认为是危害人体健康的一大重要因素。研究指出，PM2.5可以引发包括气管炎，哮喘，COPD等呼吸系统疾病的发生和加重。同时，PM2.5也可通过呼吸系统深部血管屏障进入循环系统引发心血管系统疾病风险升高，包括高血压、缺血性... 详细信息

当前PM2.5被认为是危害人体健康的一大重要因素。研究指出，PM2.5可以引发包括气管炎，哮喘，COPD等呼吸系统疾病的发生和加重。同时，PM2.5也可通过呼吸系统深部血管屏障进入循环系统引发心血管系统疾病风险升高，包括高血压、缺血性心脏病、心律失常和充血性心衰等。除此之外，PM2.5还可以侵犯免疫系统、神经系统等其他重要组织器官。这些危害效应最终可促进多种疾病发生率和死亡率升高。　　本课题组在前期研究工作中，先后发现了PM2.5暴露引发支气管上皮细胞中VEGF诱导表达介导的气道炎性反应机制以及血管内皮细胞中肾素-血管紧张素（RAS）系统活化介导的血管内皮功能紊乱机制。本论文以上述工作为基础，以寻找拮抗PM2.5损伤效应的有效策略为目标，继续深入研究了PM2.5暴露条件下的损伤保护性机制。　　血红素加氧酶1（HO-1）是对多种应激源均具有强烈反应并可发挥广泛保护性作用的信号蛋白分子。在本论文第一部分，我们首先发现支气管上皮细胞Beas-2B在经PM2.5暴露后，伴随VEGF诱导表达可出现HO-1表达水平的显著升高，这提示支气管上皮细胞中可能同时存在有PM2.5引发的损伤性应激和保护性应激反应。为了揭示HO-1可能发挥损伤保护性效应的分子机制，我们首先分析了介导HO-1诱导表达的信号途径。结果发现：HO-1的表达上调源于转录调控，因此我们对HO-1基因启动子区的转录因子结合位点进行了分析，根据分析结果结合实验研究确定了PM2.5可通过激活转录因子AP-1、HIF1α进而调控HO-1的诱导表达。随后我们检测了HO-1与VEGF诱导表达反应的功能关联。结果发现：抑制HO-1表达后VEGF表达水平上调，说明HO-1可以通过拮抗支气管上皮细胞中VEGF的诱导表达进而发挥损伤保护作用。随后我们探究了H0-1拮抗VEGF诱导表达的具体机制。结果发现：HO-1可通过抑制转录因子HIF1α的转录激活活性从而拮抗VEGF表达。在后续模型动物实验中，我们验证了上述结论的准确性，并根据组织学和病理学实验揭示了HO-1对PM2.5诱导呼吸系统损伤反应的保护效应。值得特别关注的是：PM2.5可通过激活转录因子HIF1α诱导HO-1表达，而HO-1可进一步抑制HIF1α活性进而拮抗VEGF表达;但实际上在此过程中HO-1的诱导表达也会被逐渐抑制，使得这种保护性效应逐渐丧失和终止，最终会导致支气管损伤。　　在本课题组以往研究中，我们已经揭示了PM2.5可同时诱导血管内皮细胞HUVEC中RAS系统活化和HO-1表达水平上调。我们验证了这部分工作，并得到了一致结论。同时，我们发现了PM2.5能够通过活化转录因子AP-1、XBP1、HIF1α进而介导HUVEC细胞中HO-1的诱导表达。在进一步研究中，我们发现HO-1也能够通过拮抗HIF1α的聚集进而抑制RAS系统各成分的表达上调，从而发挥其对PM2.5引发心血管系统损伤的保护效应。最后，我们在模型动物中验证了上述结论的正确性，通过免疫组织化学和病理学实验揭示了PM2.5诱导血管内皮中HO-1表达及其对血管内皮损伤的保护效应。　　根据以上两个系统中的研究结果，我们认为：PM2.5不仅可以引发机体的健康危害效应，实际上还会同时引发以HO-1诱导表达为显著特征的内源性损伤保护性效应;而且HO-1的诱导表达及损伤保护性效应机制具有一定的组织共通性。上述研究结果进一步拓展了我们对PM2.5诱导机体健康危害效应机制的认识，为寻找PM2.5的损伤防护策略研究提供了新思路。　　在第二部分工作中，我们探讨了外源干预性损伤防护策略的可能性及相关机制。我们首选关注了具有广泛抗炎、抗氧化损伤效应的安全性极高的中药有效成分——姜黄素。我们首先发现了姜黄素可以抑制模型动物经PM2.5暴露所引发的呼吸系统VEGF表达水平升高并改善支气管炎症反应。随后又发现了姜黄素可抑制Beas-2B细胞中NF-κB、HIF1α、AP-1的活化和转录活性进而抑制VEGF的诱导表达。上述信号转导通路在模型动物的体内实验中也达到了充分验证。与此同时，我们也发现姜黄素可以抑制模型动物经PM2.5暴露后引发的血管内皮局部RAS系统各成分的诱导表达以及由此导致的炎性应激和氧化应激反应。在HUVEC细胞中，我们发现了姜黄素可通过抑制转录因子HIF1α、AP-1的转录活性进而抑制血管内皮细胞中RAS成分的诱导表达及炎性细胞黏附趋化反应和氧化应激反应。上述结果同样在模型动物实验中得到了验证。　　根据以上结果，我们认为：在呼吸系统中，姜黄素通过抑制VEGF上游转录因子AP-1、NF-κB、HIF1α的转录活性进而拮抗PM2.5暴露条件下VEGF的诱导表达，从而发挥其对PM2.5引发支气管炎症损伤效应的保护作用。在血管内皮局部，姜黄素通过抑制转录因子AP-1、HIF1α活性抑制R

关键词：血红素加氧酶-1 姜黄素呼吸系统损伤心血管系统损伤细颗粒物细胞保护作用

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蛭龙活血通瘀胶囊通过NLRP3信号途径抗动脉粥样硬化的分子机制研究

蛭龙活血通瘀胶囊通过NLRP3信号途径抗动脉粥样硬化的分子机制研究

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作者：刘孟楠西南医科大学

学位级别：硕士

目的:炎症反应贯穿动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)发展的始终，AS发病机制的核心是炎症细胞与炎症因子之间的相互作用。细胞焦亡是细胞程序性死亡的一种方式，致炎因子通过诱导AS中的炎症细胞表达并释放炎症因子形成联级放大参与AS... 详细信息

目的:炎症反应贯穿动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)发展的始终，AS发病机制的核心是炎症细胞与炎症因子之间的相互作用。细胞焦亡是细胞程序性死亡的一种方式，致炎因子通过诱导AS中的炎症细胞表达并释放炎症因子形成联级放大参与AS的形成，是AS病变的始动因素之一。本研究在体内实验部分通过构建高脂血症颈动脉粥样硬化家兔模型，探究蛭龙活血通瘀胶囊通过NLRP3途径对该模型疾病的影响及相关作用机制，以期为该药物防治心脑血管疾病的相关基础研究及临床应用提供依据;在体外实验部分以U937巨噬细胞为研究对象，观察不同浓度蛭龙活血通瘀胶囊成分对U937巨噬细胞焦亡模型细胞活力的影响，探讨药物对NLRP3炎症小体及相关蛋白表达的的影响，通过质粒转染探讨蛭龙活血通瘀胶囊通过NLRP3信号途径抗AS的作用机制。　　方法:1.体内实验部分:将50只新西兰大白兔随机分为对照组(Control)、模型组(Model)、蛭龙活血通瘀胶囊组(ZL)、阿托伐他汀钙组(Atorvastatin)、蛭龙活血通瘀胶囊+阿托伐他汀钙组(ZL+Atorvastatin)，每组10只，适应性喂养一周后除Control组外均行颈动脉空气干燥术，并予高脂饲料饲喂养（96％的普通饲料、2％的胆固醇、2％的猪油），Control组予普通饲料喂养。术后开始给药，蛭龙活血通瘀胶囊剂量为3.12g/kg/d，阿托伐他汀钙片0.51mg/kg/d，在实验第5周末处死家兔并取血清及颈动脉组织，检测血脂，ELISA实验检测血清IL-1β、NF-κB及IL-18蛋白表达，HE染色、油红O染色、NLRP3免疫组化观察颈动脉组织病理学变化，免疫印迹实验检测p-NF-κB、NF-κB、NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β、IL-1β、pro-IL-18、IL-18蛋白质表达。　　2.体外实验部分:利用PMA将U937单核细胞诱导为巨噬细胞，LPS+ATP激活NLRP3炎症小体建立细胞焦亡模型;CCK-8法筛选超滤后蛭龙活血通瘀胶囊成分对U937巨噬细胞活力值影响最适宜的高、中、低剂量用药浓度;将实验分为对照组(Control)、焦亡诱导组(LPS+ATP)及蛭龙活血通瘀胶囊ZL（3μg/mL，10μg/mL，30μg/mL）用药组，处理U937巨噬细胞24h后，流式细胞术检测各组细胞焦亡率，运用免疫印迹法测定各组细胞裂解物和培养上清液中Gsdmd-N、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白的表达水平;高质粒转染NLRP3蛋白在细胞中的表达，流式细胞术及免疫印迹法检测蛭龙活血通瘀胶囊成分对转染后U937巨噬细胞抑制NLRP3蛋白表达的水平。　　结果:1.体内实验部分:与Control组比较，Model组血脂各项指标显著增高(P＜0.01)，表明造模成功;与Model组比较，各用药组的血脂各项指标有所改善，差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);ELISA实验结果显示，与Model组比较，ZL组，Atorvastatin组和ZL+Atorvastatin组的血清IL-1β、NF-κB及IL-18蛋白表达均显著下降(P＜0.05或P＜0.01);HE染色提示Model组中颈动脉组织细胞显著增生，可见由大量泡沫细胞构成的脂质斑块，斑块内有炎症细胞浸润，治疗后炎症细胞减少，其中ZL+Atorvastatin组效果最好;油红染色提示Control组未见红染的脂质条纹及斑块，Model组中有大量的红染斑块，经治疗后，ZL组，Atorvastatin组和ZL+Atorvastatin组红染斑块减少，其中ZL+Atorvastatin组症状最轻;NLRP3免疫组化提示模型组颈动脉病变组织中有大量NLRP3阳性表达，比对照组中显著增多;经治疗后，ZL组，Atorvastatin组和ZL+Atorvastatin组NLRP3阳性表达减少，其中ZL+Atorvastatin组NLRP3阳性表达最少;在免疫印迹实验结果显示，与Model组比较，ZL组，Atorvastatin组和ZL+Atorvastatin组中p-NF-κB，NLRP3，Caspase-1，pro-IL-1β，IL-1β，pro-IL-18和IL-18蛋白水平均显著下降(P＜0.05或P＜0.01)。　　2.体外实验部分:流式细胞检测提示，与Control组比较，经过ZL(3μg/mL，10μg/mL，30μg/mL)治疗U937巨噬细胞细胞焦亡模型后，焦亡率下降，差异有显著性(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01);免疫印迹实验提示，与Control组相比，焦亡诱导组Gsdmd-N、IL-1β、Caspase-1、ASC、NlLRP3表达水平上升，差异有显著性(P＜0.

关键词：动脉粥样硬化蛭龙活血通瘀胶囊 U937细胞 NLRP3炎症小体细胞焦亡

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鹅掌楸苷对大鼠急性心肌梗死后保护作用的研究

鹅掌楸苷对大鼠急性心肌梗死后保护作用的研究

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作者：姚博宸天津医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨鹅掌楸苷对急性期心梗大鼠梗死后炎症的保护作用及初步探究其发挥作用的相关因子与机制,为将鹅掌楸苷作为临床心梗防治用药提供实验依据及理论基础。方法:将大鼠随机分为3组:假手术组(n=15),心梗模型组(n=15),鹅掌楸苷组(n=15... 详细信息

目的:探讨鹅掌楸苷对急性期心梗大鼠梗死后炎症的保护作用及初步探究其发挥作用的相关因子与机制,为将鹅掌楸苷作为临床心梗防治用药提供实验依据及理论基础。方法:将大鼠随机分为3组:假手术组(n=15),心梗模型组(n=15),鹅掌楸苷组(n=15)。将鹅掌楸苷粉末稀释为10g/L溶液,每次灌胃剂量为10ml/Kg(大鼠体重)。鹅掌楸苷组术前5日至术后3日每日灌胃一次。模型组及假手术组每日10ml/Kg(大鼠体重)生理盐水灌胃。心梗造模使用第四肋间入路,结扎前降支的方法。1.心梗造模术前及术后2小时,模型组及鹅掌楸苷组各随机选出10只,假手术组选出8只,经锁骨下静脉穿刺采集大鼠血液标本1ml,进行了超敏肌钙蛋白T定量的检测。2.双上肢及左下肢分别连接对应心电图电极,观察心电图变化,并记录开胸前及关胸后心电图。3.术后第3日应用超声心动图对大鼠心功能进行检测。于左室乳头肌短轴观测量LVIDs、LVIDd、EF、EDV、ESV。4.对每只大鼠进行静脉取血。处死大鼠,取出心脏,用纱布将表面血迹擦干,观察心脏外形变化;于心脏矢状位做切面,观察缺血部位心肌变化。并同时取出肺脏、肾脏。5.随机选出部分心脏、肺、肾,用10%中性福尔马林浸泡固定7天,常规脱水、透明、浸蜡、包埋,制成蜡块,将心脏组织平行于心脏长轴按4 um厚度连续切片。行HE染色对大鼠心肌行病理学分析。其余各组样本迅速至于液氮罐中,并迅速转移至-80℃冰箱中冰箱中。6.将大鼠静脉血3000转离心10分钟取血清。利用ELISA试剂盒,对血清IL-1β、IL-6水平进行定量。7.提取大鼠心肌组织总蛋白。用PBS液冲洗后取心脏前壁梗死区附近心肌组织0.1g,加入0.9ml PBS及蛋白酶抑制剂并进行匀浆。最后将匀浆液5000转离心10分钟取上清并对血清IL-1β、TNF-α水平进行定量。8.进行数据统计分析。结果:1.术后2小时假手术组(0.43±0.21ng/ml)肌钙蛋白几乎无升高鹅掌楸苷组(1.78±0.61 ng/ml)较模型组(3.27±1.73 ng/ml)肌钙蛋白抬高程度显著偏低(P<0.05)。2.结扎冠脉前降支后,即刻可见心电图II导联呈ST段抬高表现。并伴有心律不齐等反应。3.动物超声与模型组比较,鹅掌楸苷组的EF显著升高而LVIDs、LVIDd、EDV、ESV显著降低(P<0.05);而假手术组射血分数较鹅掌楸苷组显著降低(P<0.05)。其余4项指标假手术组与鹅掌楸苷组对比均无明显差异(P>0.05)。4.处死大鼠,解剖肉眼观察梗死心脏体积较假手术组及鹅掌楸苷组心脏体积增大,梗死区颜色苍白,室壁塌陷,心肌菲薄,梗死区质地变硬。5.鹅掌楸苷组及治疗组心肌细胞排列,肌纹理结构均劣于假手术组;鹅掌楸苷组大鼠心肌坏死程度明显轻于模型组,可见部分心肌纹理紊乱、消失,并可见细胞核溶解或消失。假手术组均未见肺淤血病理改变。鹅掌楸苷组肺淤血的病理改变明显轻于模型组,仅有少量毛细血管充血,纤维组织增生以及肺间质水肿均不明显。肺泡中可见少量红细胞及浆液。假手术组未见肾损害病理变化。鹅掌楸苷组大鼠有少量肾小管上皮细胞肿胀变性。上皮细胞碎片、红细胞管型以及炎细胞浸润明显减少。6.通过血清ELISA检测发现模型组中的IL-1β(111.6±88.97)与IL-6(94.96±37.20)含量均高于鹅掌楸苷组的IL-1β(35.10±21.84)与IL-6(62.52±12.64)(P<0.05),而假手术组IL-1β(16.76±19.10)与IL-6(46.43±13.16)含量与鹅掌楸苷组无明显差异(P>0.05)。7.通过组织ELISA检测发现模型组中的IL-1β(2132±48.26)与TNF-α(1167±22.36)含量均高于鹅掌楸苷组IL-1β(1718±153.4)与TNF-α(934.1±49.18)含量(P<0.05),而假手术组IL-1β(1522±284.4)与TNF-α(957.5±84.81)含量与鹅掌楸苷组无明显差异(P>0.05)。结论:第一,鹅掌楸苷可以降低心梗后肌钙蛋白含量。第二,鹅掌楸苷可改善包括心梗大鼠心功能、减轻心肌组织损伤及心、肺、肾的病理损伤在内的形态学变化。第三,鹅掌楸苷可以使心梗大鼠血清促炎细胞因子(IL-6和IL-1β)心肌组织中的促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)的表达降低。基于以上三点本研究得出鹅掌楸苷灌胃可对心梗后大鼠具有保护作用的结论。

关键词：鹅掌楸苷心梗模型急性心肌梗死炎症反应保护作用

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ICU患者下肢深静脉血栓形成的危险因素分析

ICU患者下肢深静脉血栓形成的危险因素分析

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作者：蒋国云昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]重症监护病房(Intensive Care Unit,ICU)住院患者罹患深静脉血栓(Deep Venous Thrombosis,DVT)的风险增加,并且受气管插管、镇静镇痛等因素的影响,DVT患者的临床表现常不典型,使其难以识别。由于重症患者生理储备受损严重,在出现... 详细信息

[目的]重症监护病房(Intensive Care Unit,ICU)住院患者罹患深静脉血栓(Deep Venous Thrombosis,DVT)的风险增加,并且受气管插管、镇静镇痛等因素的影响,DVT患者的临床表现常不典型,使其难以识别。由于重症患者生理储备受损严重,在出现DVT后导致不良预后的风险也更高。本研究对ICU住院患者下肢深静脉血栓形成(Lower E xtremity Deep Venous Thrombosis,LEDVT)进行危险因素分析,为各个专科及ICU进行DVT的预防性治疗提供依据。[方法]以昆明医科大学第一附属医院3号楼ICU 2019年6月至2020年3月期间收治的147例患者为样本人群,根据纳入标准及排除标准最终确定研究对象131例。在入院24h内行床旁下肢血管超声检查,根据有无血栓形成将研究对象分为血栓组(A组)32例和无血栓组(B组)99例。B组患者中排除未能进行第二次超声检查便出院或死亡的患者8例,对B组剩余患者继续行床旁血管超声检查(每周1次直至检出下肢深静脉血栓或患者出院、死亡),根据有无新的血栓形成分为新血栓形成组(B1组)35例和无新血栓形成组(B2组)56例。收集研究对象的一般临床资料、体重指数(Body Mass Index,BMI)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(Acute Myocardial And Chronic Health Evaluation,APACHEⅡ)评分、吸烟情况、基础疾病、血型、实验室检验结果、治疗用药情况等相关资料。A组和B组间比较分析ICU外LEDVT的危险因素,B1组和B2组间比较分析ICU内LEDVT的危险因素。使用spss1 7.0统计学软件,采用χ2检验、t检验、二分类logistics多因素回归分析,计算出各种因素与LEDVT的相关性,P<0.05有统计学意义。[结果]1、LEDVT入科时的发生率为24.4%,ICU内的发生率为38.5%。左侧血栓形成的比例高于右侧,血栓中周围型所占比例最高,其中小腿肌间静脉血栓最常见。血栓形成后常缺乏典型的临床表现。2、相关危险因素分析:A、B两组间比较:吸烟、肥胖、恶性肿瘤、既往VTE病史、脑卒中病史、肾脏疾病病史、年龄差异有统计学意义,二分类logistics回归分析:年龄、肥胖、吸烟、既往VTE病史是血栓形成的危险因素。B1、B2两组间比较:吸烟、肥胖、高血压病史、糖尿病病史、COPD病史、脑卒中病史、血型、脓毒血症、年龄、APACHEⅡ评分、红细胞计数、红细胞压积、中性粒细胞-淋巴细胞比值(Neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)、血小板-淋巴细胞比值(Platelet-lymphocyte ratio,PLR)、D-二聚体、C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、中心静脉导管留置时间、机械通气时间、制动时间差异有统计学意义,二分类logistics回归分析:吸烟、糖尿病、脓毒血症、制动时间、未抗凝治疗是血栓形成的危险因素。[结论]1、ICU患者LEDVT发生率较高,左侧血栓形成的比例高于右侧,血栓中周围型所占比例最高,其中小腿肌间静脉血栓最常见,血栓形成后常缺乏典型的临床表现。2、研究表明年龄、肥胖、吸烟、既往VTE病史是ICU外LEDVT的危险因素,吸烟、糖尿病、脓毒血症、制动时间、未抗凝治疗是ICU内LEDVT的危险因素。

关键词：深静脉血栓形成重症监护病房危险因素

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IVIM-MRI、DKI-MRI预测软组织肉瘤组织病理学分级及Ki-67表达水平的影像组学模型研究

IVIM-MRI、DKI-MRI预测软组织肉瘤组织病理学分级及Ki-67表达水平...

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作者：朱逸峰大连医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨基于IVIM-MRI、DKI-MRI参数图（Standard ADC、D、D*、f、MK、MD）预测STSs组织病理学分级及Ki-67表达水平的影像组学模型的可行性及其应用价值。材料与方法:一、临床资料收集2018年5月至2020年1月就诊于大连医科大学附属第二... 详细信息

目的:探讨基于IVIM-MRI、DKI-MRI参数图（Standard ADC、D、D*、f、MK、MD）预测STSs组织病理学分级及Ki-67表达水平的影像组学模型的可行性及其应用价值。材料与方法:一、临床资料收集2018年5月至2020年1月就诊于大连医科大学附属第二医院经病理证实的软组织肉瘤（Soft Tissue Sarcomas,STSs）患者42例,其中男性23例,女性19例,年龄在12-85岁之间,平均年龄48.5岁。二、MRI设备与方法MRI检查设备为GE Discovery MR 750W 3.0T超导磁共振扫描仪,采用膝关节线圈、大柔线圈、头颈联合线圈和16通道相控阵列线圈对所有入组病例行常规MRI平扫、IVIM-MRI及DKI-MRI序列检查。三、图像后处理（一）IVIM-MRI、DKI-MRI参数图计算使用GE ADW 4.7工作站Functool中的MADC软件处理42例STSs的IVIM图像得到Standard ADC、D、D*及f值灰阶图（Processed Images）,使用Functool中的DKI软件处理42例STSs的DKI图像得到MD、MK值灰阶图。（二）STSs病灶分割使用ITK-SNAP 3.8.0软件对42例STSs的Standard ADC、D、D*及f、MD、MK灰阶图进行逐层面感兴趣容积（Volume of Interest,VOI）勾画,涵盖肿瘤的所有区域。（三）影像组学特征值提取将所有VOI文件和参数图上传至慧影医疗科技（北京）有限公司影像组学云平台（http://***）进行影像组学特征值提取。IVIM-MRI、DKI-MRI的每个参数图均取两大类（基于特征类、基于过滤器类）共1409种特征值。四、STSs组织病理学分级的判定与Ki-67表达水平检测（一）组织病理学分级的判定根据FNCLCC的STSs组织病理学分级标准,由病理科医师对42例STSs病理标本进行组织切片,通过选取肿瘤实性成分观察其镜下表现对肿瘤细胞的分化程度、肿瘤的坏死面积及核分裂象分别计数评分,其中Ⅰ级定义为低级别,II级与III级定义为高级别。（二）Ki-67表达水平检测首先对42例STSs患者的病理标本进行常规HE染色,在此基础上进行Ki-67免疫组织化学染色,将其分为Ki-67高表达组（Ki-67≥25%）和低表达组（Ki-67<25%）。五、影像组学模型的建立方法（一）STSs IVIM-MRI、DKI-MRI参数图特征值降维使用方差选择法、单变量选择法和最小绝对收缩和选择算子进行三次降维分析。（二）STSs IVIM-MRI、DKI-MRI参数图机器学习将42例STSs IVIM、DKI参数图经三步降维后得到的特征值作为数据集,数据集的80%做为训练集训练机器学习模型,其余20%做为验证集对模型的准确性进行评估,分别计算随机森林、K最近邻、支持向量机、极限梯度增强树、逻辑回归和决策树六种分类器在IVIM-MRI、DKI-MRI参数图训练集和验证集的ROC曲线下面积、95%置信区间、灵敏度及特异度,并采用F1-Score值评价模型的稳定性。结果:一、STSs的MRI表现（一）常规MRI表现1、位置:四肢25例、躯干10例、臀部3例、腹膜后2例,头部2例;2、大小:瘤体最大径<5cm 17例,≥5cm 25例3、形态:类圆形26例,不规则16例;4、边界:清晰35例,模糊7例;5、均质性:均质11例,不均质31例;6、信号:T1WI呈等、稍低信号26例,稍高信号16例;T2WI呈高信号11例,高低混杂信号31例。（二）42例STSs IVIM-MRI、DKI-MRI表现在42例STSs IVIM-MRI、DKI-MRI序列中,35例呈高信号,7例呈等、稍高信号。42例STSs的Standard ADC、D、D*、f、MK、MD参数图呈高低混杂信号。二、STSs的组织病理学类型、分级及Ki-67表达水平（一）组织病理学类型:脂肪肉瘤16例、恶性外周神经鞘瘤3例、滑膜肉瘤3例、平滑肌肉瘤6例、纤维肉瘤8例、骨外粘液软骨肉瘤1例、未分化多形性肉瘤3例、恶性腱鞘巨细胞瘤1例、血管肉瘤1例。（二）组织病理学分级:低级别15例,高级别27例。（三）Ki-67表达水平:Ki-67低表达24例,Ki-67高表达18例。三、基于IVIM-MRI、DKI-MRI参数图影像组学预测STSs组织病理学分级的结果D序列经过三步降维后共选择了6个特征值进行机器学习,D-SVM取得了最佳诊断效能（AUC=0.88）,95%置信区间为0.53-1.00,灵敏度为0.75（低级别）、0.83（高级别）,特异度为0.83（低级别）、0.75（高级别）,F1-Score为0.75（低级别）、0.83（高级

关键词：影像组学软组织肉瘤组织病理学分级 Ki-67 体素内不相干运动扩散峰度成像

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呋喃酚葡萄糖醛酸结合物在呋喃丹染毒家兔体内的死后分布及死后再分布

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法医学杂志 2022年第5期38卷 601-605页

作者：文岩韩昱哲龚铎解文凯吕晨曦孟宇珍张潮尉志文贠克明山西医科大学法医学院山西太原030001 太原市公安局万柏林分局山西太原030001

目的建立呋喃丹的家兔灌胃染毒致死模型,观察呋喃丹Ⅱ相代谢物呋喃酚葡萄糖醛酸结合物(carbofuran-7-phenyl glucuronic acid,Glu-7PH)在家兔体内的死后分布及死后再分布规律。方法死后分布:对家兔使用1/2LD50、LD50、2LD50呋喃丹灌胃染... 详细信息

目的建立呋喃丹的家兔灌胃染毒致死模型,观察呋喃丹Ⅱ相代谢物呋喃酚葡萄糖醛酸结合物(carbofuran-7-phenyl glucuronic acid,Glu-7PH)在家兔体内的死后分布及死后再分布规律。方法死后分布:对家兔使用1/2LD50、LD50、2LD50呋喃丹灌胃染毒,染毒死亡家兔立即解剖,灌胃后2 h仍未死亡家兔采用二氧化碳(CO_(2))吸入法处死后立即解剖,取心肌、心血、肝、脾、肺、肾、脑和右下肢肌肉。死后再分布:家兔用4LD50呋喃丹灌胃染毒,仰卧位置于室温(15℃)条件下,分别于死后0、12、24、48、72 h取心肌、心血、肝、脾、肺、肾、脑和右下肢肌肉。采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spec⁃trometry,LC-MS/MS)法检测Glu-7PH含量。结果死后分布结果显示,3个剂量组中,各组织中Glu-7PH含量差异存在统计学意义。死后再分布研究结果显示,心血、心肌、脾、肾、脑及右下肢肌肉中Glu-7PH含量差异无统计学意义,肝、肺中Glu-7PH含量差异存在统计学意义。结论家兔心肌、心血、肝、肺、肾、脑和下肢肌肉可作为Glu-7PH检测分析样本。Glu-7PH在家兔肝和肺中存在死后再分布现象。

关键词：法医毒理学呋喃酚葡萄糖醛酸结合物死后分布死后再分布液相色谱-串联质谱家兔

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横纹肌肉瘤小鼠模型MRI-IVIM与其病理学MVD、VEGF相关性的实验研究

横纹肌肉瘤小鼠模型MRI-IVIM与其病理学MVD、VEGF相关性的实验研究

引用

作者：袁源大连医科大学

学位级别：硕士

目的:在MRI-病理对照基础上,探讨横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM参数Standard ADC值、D值、D*值及f值与其病理学MVD、VEGF表达的相关性。材料与方法:一、实验材料(一)实验动物雌性Balb/c裸鼠,22只,4-6周龄。(二)实验细胞株人胚胎性横纹肌肉瘤... 详细信息

目的:在MRI-病理对照基础上,探讨横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM参数Standard ADC值、D值、D*值及f值与其病理学MVD、VEGF表达的相关性。材料与方法:一、实验材料(一)实验动物雌性Balb/c裸鼠,22只,4-6周龄。(二)实验细胞株人胚胎性横纹肌肉瘤细胞株RD。(三)实验试剂高糖DMEM培养基、青链霉素、CD34抗体、VEGF抗体。(四)实验器材细胞培养箱、3.0T MR扫描仪、显微镜。二、实验方法(一)建立横纹肌肉瘤小鼠模型横纹肌肉瘤细胞培养于DMEM完全培养基中,收集处于对数期的细胞接种于裸鼠右背部皮下。(二)横纹肌肉瘤小鼠模型MR成像及图像后处理横纹肌肉瘤小鼠模型进行T1WI、T2WI及IVIM检查。通过GE ADW 4.7工作站的Functool软件获得Standard ADC、D、D*、f伪彩图,在IVIM原始图上信号最高处选取ROI获得相应参数值,将三次测量的平均值作为最终结果。(三)横纹肌肉瘤小鼠模型MRI-病理对照方法麻醉小鼠后,对小鼠进行体表标记,再进行MRI检查,检查完成后完整取出肿瘤,于福尔马林液中固定8小时后取出进行病理取材。(四)横纹肌肉瘤小鼠模型HE切片及观察切片依次经过二甲苯脱蜡、梯度酒精复水、苏木素染色、盐酸酒精分化、伊红复染、梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封片获得HE切片。在HE切片上选取观察范围,依次在低倍镜、中倍镜以及高倍镜下进行观察。(五)横纹肌肉瘤小鼠模型免疫组化染色及观察将切片放于烤箱中烤片,拿出后依次经过二甲苯脱蜡、梯度酒精复水、抗原修复、滴加适量一抗发生免疫反应、苏木素染色、梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封片获得免疫组化切片。在200倍镜下观察切片获取MVD计数和VEGF表达结果。三、观察指标(一)横纹肌肉瘤小鼠模型建立情况(二)横纹肌肉瘤小鼠模型MRI表现(三)横纹肌肉瘤小鼠模型组织病理学表现四、统计学方法采用SPSS 24.0软件分析获得数据。P<0.05被认为具有统计学意义。如果计数资料为正态分布,就对Standard ADC值、D值、D*值、f值分别与MVD计数、VEGF表达的相关性分析进行Pearson检验;如果计数资料为非正态分布,就对相关性分析进行Spearman检验。结果:一、横纹肌肉瘤小鼠模型建立情况22例横纹肌肉瘤小鼠模型肿瘤形成的时间为7-15天。在肿瘤细胞接种后46-60天肿瘤体积达到最大,其最大径约12.0–20.0 mm,体积约807.36–2220.10 mm3。二、横纹肌肉瘤小鼠模型MRI表现(一)常规MRI表现肿瘤位于裸鼠右背部皮下,T1WI呈均匀等信号或略高信号,T2WI呈均匀高信号,部分其内可见小斑片样更高信号。(二)IVIM表现22例横纹肌肉瘤小鼠模型肿瘤IVIM均呈高信号,其平均Standard ADC值、D值、D*值及f值分别为:1.068±0.232×10-3mm2/s、0.705±0.075×10-3mm2/s、5.920±1.815×10-3mm2/s及0.172±0.070。三、横纹肌肉瘤小鼠模型病理学表现(一)常规病理学表现病理大体检查发现肿瘤呈类圆形或不规则形,切面均呈灰白,质地较韧。显微镜下发现肿瘤细胞分布疏密不均,可见不规则坏死区,细胞呈小圆或卵圆形,核大深染,胞质少。(二)MVD计数及VEGF表达22例横纹肌肉瘤CD34免疫组化染色显示血管内皮细胞呈棕黄色,VEGF表达为细胞质或细胞间质呈棕黄色,其MVD计数平均值为21.91±9.47,VEGF表达平均值为20.33±7.89%,且MVD与VEGF表达呈中等正相关。四、横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM参数与其MVD、VEGF表达相关性(一)IVIM参数与MVD相关性横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM-D*值与MVD呈中等正相关,且具有统计学意义(P<0.05);Standard ADC值、D值及f值与MVD无相关性。(二)IVIM参数与VEGF表达相关性横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM-D*值与其VEGF呈中等正相关,且具有统计学意义(P<0.05);Standard ADC值、D值及f值与其VEGF无相关性。结论:在MRI-病理对照基础上,对22例横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数与其病理学MVD、VEGF进行相关性分析,可得出下列结论:一、横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数D*值与其MVD有相关性,且呈正相关,即随着D*值增高,其病理学MVD增加,反之则减少;而横纹肌肉瘤小鼠模型的Standard ADC值、D值及f值与其MVD无相关性。二、横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数D*值与其VEGF有相关性,且呈正相关,即随着D*值增高,其VEGF表达增加,反之则减少;而横纹肌肉瘤小鼠模型的Standard ADC值、D值及f值与其VEGF无相关性。

关键词：横纹肌肉瘤小鼠模型 IVIM MVD VEGF

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肾病综合征下代谢酶和转运体的动态变化及中药对其血脂紊乱的干预作用

肾病综合征下代谢酶和转运体的动态变化及中药对其血脂紊乱的干预...

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作者：董雅倩南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:肾病综合征(NS)是一种常见的系统免疫抑制炎症紊乱性疾病,糖皮质激素为主要治疗药物,因并发症多样,治疗时常与其它药物联合使用。高脂血症作为其重要表现之一,不仅能增加患者心血管易感性,还会引起大量脂质在肾脏沉积,... 详细信息

研究背景和目的:肾病综合征(NS)是一种常见的系统免疫抑制炎症紊乱性疾病,糖皮质激素为主要治疗药物,因并发症多样,治疗时常与其它药物联合使用。高脂血症作为其重要表现之一,不仅能增加患者心血管易感性,还会引起大量脂质在肾脏沉积,加剧炎症反应,促进肾小球硬化的发生。为了降低血脂,临床常采用他汀等药物与激素联合治疗,而联合用药更易引起不良反应的发生,使预后困难。该疾病状态下机体代谢酶与转运体表达的长期动态变化尚未见系统性报道。白茅根和白花蛇舌草均有良好的抗炎和调节免疫活性,还能改善糖脂代谢,常用于治疗急慢性肾小球肾炎,可作为NS治疗的候选药物。我们前期研究已证明白花蛇舌草的抗炎作用,但目前对NS的降脂保护作用尚未见报道。因此本课题主要研究以下两方面:(1)NS长期发展下代谢酶与转运体的动态变化趋势;(2)白茅根-白花蛇舌草对NS血脂紊乱的干预作用。研究方法:1.通过两次尾静脉注射阿霉素(4 mg/kg和2 mg/kg)成功构建阿霉素诱导肾病(AN)大鼠模型。造模6,9和12周后分别检测AN大鼠肝脏和肾脏主要代谢酶和转运体的mRNA和蛋白表达的变化趋势。2.采用LC-MS/MS方法鉴定白茅根-白花蛇舌草的合煎液中所含成分。成功构建AN大鼠模型后,灌胃给药4周,通过对肾功指标、血脂指标、炎症因子的检测及病理学检查,明确合煎液对AN大鼠的治疗作用。采用PCR和Western blot技术探究其对AN大鼠血脂紊乱的干预机制。通过分子对接技术预测合煎液的药效物质基础。结果:1.在AN大鼠模型中,大鼠肝脏和肾脏主要代谢酶和转运体的表达随疾病发展均发生变化。在肝脏,Oatp1b2,Oct1,Ntcp,Mdr1,Mrp2,Bsep 和 Mrp4mRNA的表达在不同时期出现降低,Bcrp的表达增加,其中Oct1和Mdr1的蛋白表达变化与mRNA结果一致;此外肝脏主要代谢酶Cyp3a4,2d6,2a9,7a1,7b1,8b1等表达均有所降低。在肾脏,AN大鼠Mrp2和Mrp4的mRNA表达升高,Oat1的表达持续下降,而Oat2和Oct2 mRNA水平在造模6和9周下调,12周上调,Mdr1的表达仅在造模6周高于正常组,Oct2和Mdr1的蛋白表达变化与mRNA趋势相同。2.通过LC-MS/MS鉴定出白茅根-白花蛇舌草的合煎液中包含车叶草苷酸、鸡屎藤次苷、去乙酰车叶草苷酸、绿原酸等34种成分。3.合煎液干预后,AN大鼠症状改变如下:(1)尿蛋白(upro)和尿酸(UA)水平降低,肾功能有所改善;(2)血浆胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)的含量下降,血脂水平下调;(3)血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)的水平降低,炎症反应有所缓解;(4)AN大鼠肝脏胆汁酸合成酶Cyp7b1和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达降低,合煎液干预后表达均有所上调;前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin9型(PCSK9)蛋白表达升高,低密度脂蛋白受体(LDLR)表达降低,合煎液干预后降低PCSK9的表达,升高LDLR的表达;(5)PCSK9在AN大鼠肾脏表达下调,LDLR表达上调,TNF-α、IL-1β等炎症因子水平也明显升高,给予合煎液可升高PCSK9,降低LDLR和炎症因子的表达,改善脂质在肾脏的沉积和炎症反应的发展。以上结果提示合煎液可能通过PPARγ-CYP7B1和PCSK9-LDLR通路改善脂代谢,同时抑制肾脏炎症反应。通过分子对接发现合煎液中的黄酮类、环烯醚萜类化合物与作用靶点的结合力最高,可能是发挥药效的主要成分。

关键词：肾病综合征阿霉素肾病转运体代谢酶白茅根白花蛇舌草

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阴道用雌激素对子宫内膜修复作用机制的动物实验及临床研究

阴道用雌激素对子宫内膜修复作用机制的动物实验及临床研究

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作者：刘奕彤大连医科大学

学位级别：硕士

目的：通过建立薄型子宫内膜动物实验模型，观察阴道使用雌激素后子宫内膜的组织病理学变化。同时结合临床，回顾性分析在促排卵过程中阴道使用芬吗通雌激素片患者病例的子宫内膜厚度变化情况。旨在为薄型子宫内膜的发病机制及临床治疗... 详细信息

目的：通过建立薄型子宫内膜动物实验模型，观察阴道使用雌激素后子宫内膜的组织病理学变化。同时结合临床，回顾性分析在促排卵过程中阴道使用芬吗通雌激素片患者病例的子宫内膜厚度变化情况。旨在为薄型子宫内膜的发病机制及临床治疗提供理论依据。　　方法：（一）动物实验：选取出生后8周大小性成熟雌性SD SPF级大鼠9只，体重200-250g，于动情间期建立子宫内膜损伤模型，随机分为3组，每组3只，分别为：实验组A组（内膜损伤+阴道置入芬吗通雌激素片剂组）、对照组B组（内膜损伤组）和空白组C组（生理盐水组）3组。术后第7日处死大鼠，取材时开腹观察子宫外观、与周围组织脏器粘连情况、子宫内膜大体外观及是否存在宫腔粘连等情况，同时制作石蜡切片，进行HE染色、免疫组化染色后经电子显微镜观察并分析子宫内膜情况。　　（二）临床研究：回顾性分析2018年10月至2019年12月就诊于大连医科大学附属第一医院生殖中心，以“排卵障碍”为促排卵指征，在行第二周期克罗米芬促排卵治疗时阴道置入芬吗通雌激素片剂辅助治疗的患者20例。通过阴式B超超声观察两个促排卵周期排卵日子宫内膜的厚度及分型，同时观察加用雌激素后有无不良反应等。　　结果：（一）动物实验部分：通过利用大鼠宫腔注射95%酒精建立大鼠薄型子宫内膜动物模型。A组（内膜损伤+阴道置入芬吗通雌激素片剂组）子宫局部淤血、轻微水肿，外观较为光滑，局部与周围组织粘连;B组（内膜损伤组）子宫明显淤血水肿，与周围组织粘连严重，盆腔表现为炎症反应，周围组织水肿;C组（生理盐水组）子宫外表光滑，局部水肿，子宫与周围组织界限清晰，未见明显炎症反应。HE染色后显微镜下，子宫内膜厚度：C组＞A组＞B组;A组镜下子宫内膜变薄，腺体细胞轻微减少，血管管腔减少，少量炎症细胞浸润;显微镜下B组子宫内膜明显变薄，宫腔内凹凸不平，腺体明显减少，间质纤维化，伴大量炎症细胞浸润;C组子宫内膜未见明显损伤。免疫组化检测细胞角蛋白、波形蛋白阳性率：C组＞A组＞B组。　　（二）临床分析部分：第一、二促排卵周期排卵日子宫内膜厚度分别为6.40±0.79mm和11.92±1.44mm，第二周期患者子宫内膜明显增厚，具有统计学意义;第一周期与第二周期子宫内膜A型占比分别为100%和90.0%，两组无明显差异;内膜回声及形态无明显差异。　　结论：利用大鼠宫腔灌注95%酒精可以制作出较为稳定的薄型子宫内膜动物模型。阴道置入芬吗通雌激素片剂可以使受损后的子宫内膜在一定程度上恢复连续性和完整性。临床研究分析，在应用克罗米芬促排卵周期中，阴道用芬吗通雌激素片可以在药物引起的薄型子宫内膜中起到增厚子宫内膜的作用。该结论为进一步探究内膜修复机制提供理论基础。

关键词：薄型子宫内膜雌激素厚度变化药理机制动物模型

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退变性脊柱侧凸患者免疫学功能特征的研究

退变性脊柱侧凸患者免疫学功能特征的研究

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作者：杨鑫昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]通过检测退变性脊柱侧凸患者外周静脉血及组织标本中的细胞免疫及体液免疫相关指标,与正常人血液及创伤患者相对正常组织标本的相关指标进行对比分析,明确退变性脊柱侧凸患者的免疫学功能状态,探讨其与该病发生发展间可能存在的... 详细信息

[目的]通过检测退变性脊柱侧凸患者外周静脉血及组织标本中的细胞免疫及体液免疫相关指标,与正常人血液及创伤患者相对正常组织标本的相关指标进行对比分析,明确退变性脊柱侧凸患者的免疫学功能状态,探讨其与该病发生发展间可能存在的相关关系及潜在机制,为退变性脊柱侧凸的病因研究提供理论依据,同时为退变性脊柱侧凸的诊疗提供新的理论基础。[方法]1.经过昆明医科大学第二附属医院医学伦理委员会审批,签署知情同意书后,排除患有免疫相关疾病及感染相关疾病的研究对象,收集2019年11月～2020年2月间在昆明医科大学第二附属医院收治的8例退变性脊柱侧凸患者、8例同期因脊柱创伤行手术治疗患者、以及在此期间招募的8名正常人志愿者的临床资料和组织或/及血液标本。2.分组:退变性脊柱侧凸患者8人作为观察组,年龄49～63岁(平均年龄56.5±4.50岁),患者cobb's角范围在12～16°(平均为13.38±1.51°)。同期招募的8名正常人作为正常血标本对照组,年龄在26～51岁,平均年龄为36.25±10.79岁。因脊柱创伤行手术治疗的患者8人作为组织标本对照组,年龄在38～60岁,平均年龄为47.0±7.60岁。(3)样本获取:观察组患者术前抽取外周静脉血,术中获取手术摘除的包括髓核、纤维环及软骨终板在内的椎间盘组织,黄韧带组织及椎旁肌肉组织;正常人抽取外周静脉血;组织标本对照组获取术中切除的正常椎间盘及黄韧带组织及椎旁肌肉组织。(4)标本的处理:血标本采用流式细胞仪测定CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞亚群比例,CD4+T/CD8+T细胞的比值;使用免疫比浊法测定血清中IgM、IgG、IgA、补体C3、C4水平,用电化学发光法测定血清白细胞介素6(IL-6)水平。获取的组织标本,采用4%多聚甲醛常温固定,再制成石蜡切片,常规HE染色,在镜下观察两组椎间盘组织、黄韧带组织、椎旁肌肉组织在病理学改变;同时,采用免疫组化染色方法对切片进行染色,观察不同部位标本CD4阳性、CD8阳性T淋巴细胞的分布以及细胞因子IL-6的表达,采用图像分析和数字病理系统及ImageJ方法对免疫组化的结果进行分析。所有数据采用SPSS26.0软件进行统计学分析。[结果]1.观察组血液样本中,CD8+T淋巴细胞亚群比例为34.06±8.45%,高于正常血标本对照组(20.39±2.34%),观察组CD4+/CD8+T细胞比值(1.22±0.57),低于正常血标本对照组(2.46±0.75),两组比较差异有显著性(P<0.05);观察组血标本的CD3+T淋巴细胞亚群比例(76.44±7.09%)、CD4+T淋巴细胞亚群比例(37.77±12.20%),与正常血标本对照组的CD3+T(75.03±0.75%)、CD4+T淋巴细胞亚群比例(48.78±9.03%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组的8个血液样本中,血清IgG含量为7.81±2.50g/L,低于正常血标本对照组(14.41±1.77 g/L)、IgM含量为1.06±0.26 g/L,低于正常血标本对照组(1.88±0.63 g/L)、补体C3含量为0.77±0.15 g/L,低于正常血标本对照组(0.86±0.07 g/L),两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组血清 IgA(1.54±0.77g/L)、补体 C4(0.17±0.04g/L),与正常血标本对照组的IgA(2.03±0.56 g/L)、补体C4(0.18±0.04g/L)相比,差异无统计学意义(P>0.05);2、免疫组化染色结果提示,在观察组的椎间盘、黄韧带、椎旁肌组织中,可见CD4、CD8阳性淋巴细胞的分布,椎间盘中主要分布在纤维环边缘区域,黄韧带中主要分布在骨化的多细胞类型聚集区和新生血管周围,椎旁肌肉中主要分布在血管周围;而在组织标本对照组中,未见明显的CD4、CD8阳性淋巴细胞分布。在ImageJ处理扫描图像进行半定量的观测中,观察组三种组织中的CD4、CD8阳性细胞率和免疫组化AOD值均高于组织标本对照组(P<0.05)。3、观察组血液样本中,血清IL-6含量为5.74±3.23g/L,显著高于正常血标本对照组(1.01 ±0.45g/L),两组比较差异具有统计学意义(p<0.05);两组的椎间盘、黄韧带、椎旁肌肉组织标本切片中均有IL-6的表达,但与组织标本对照组相比,观察组3种组织的IL-6阳性表现更为明显。经过图像分析和数字病理系统、ImageJ软件分析处理后,统计学结果显示,在这三种组织中,观察组IL-6阳性细胞率和免疫组化AOD值均高于组织标本对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]1.退变性脊柱侧凸患者的全身免疫系统功能与正常人存在差异,细胞免疫及体液免疫与正常人相比均存在差异,

关键词：退变性脊柱侧凸细胞免疫体液免疫细胞因子病理学免疫学

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