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一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

北京医科大学学报 1999年第6期31卷 524-527页

作者：姜志胜符民桂赵文庞永正刘乃奎唐朝枢北京医科大学第一医院心血管病研究所北京100034 北京医科大学心血管基础研究所

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）及一氧化碳（ＣＯ）对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ，ＶＳ... 详细信息

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）及一氧化碳（ＣＯ）对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ，ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以３ＨＴｄＲ参入法测定平滑肌细胞增殖程度，放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度、蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）及丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）活性。结果：孵育２４ｈ后，ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖较对照组增加１．１倍（Ｐ＜０．０１），细胞内蛋白磷酸化程度增加３８．２％（Ｐ＜０．０１），ＰＫＣ及ＭＡＰＫ活性分别增加１．５和２．５倍（Ｐ＜０．０１）；ＣＯ前体ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ（ＨＬＬｙｓ）及ＮＯ前体ＬＡｒｇｉｎｉｎｅ（ＬＡｒｇ）对静止期ＶＳＭＣ生长无显著影响，亦未引起细胞内蛋白磷酸化、ＰＫＣ及ＭＡＰＫ活性发生显著改变；５、１０、２０ μｍｏｌ·Ｌ－１ＨＬＬｙｓ使ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖分别减少４３．４％、４６．６％和４７．６％

关键词：一氧化氮一氧化碳药理学 bFGF 血管平滑肌

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败血症大鼠心肌核被膜和肌浆网ryanodine受体的变化

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生理学报 1999年第3期51卷 100-104页

作者：王培勇杨军董林旺王晓红唐朝枢刘乃奎第三军医大学高原医学研究室北京医科大学第一临床医学院心血管病研究所北京医科大学心血管基础研究所

为观察败血症时心肌肌浆网（ＳＲ）和核被膜（ＮＥ）的ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的变化，采用结扎及穿刺盲肠（ＣＬＰ）制作败血症动物模型，用密度梯度离心分离ＳＲ和ＮＥ，用放射配体结合法研究ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的特征。结果表明... 详细信息

为观察败血症时心肌肌浆网（ＳＲ）和核被膜（ＮＥ）的ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的变化，采用结扎及穿刺盲肠（ＣＬＰ）制作败血症动物模型，用密度梯度离心分离ＳＲ和ＮＥ，用放射配体结合法研究ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的特征。结果表明，大鼠早期败血症（ＣＬＰ后９ｈ）时，ＳＲ的ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的最大结合（Ｂｍａｘ）增加２３％，ＮＥ的ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的Ｂｍａｘ则增加１倍，二者比值降低３９％（Ｐ＜００１）；在晚期败血症（ＣＬＰ后１８ｈ）时，ＳＲｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的Ｂｍａｘ降低了３８％，ＮＥ的ｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的Ｂｍａｘ增加１６倍，二者比值降低７６％；ＳＲ和ＮＥｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体的离解常数无显著改变。败血症时，ＳＲｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体早期上调，晚期下调，而ＮＥｒｙａｎｏｄｉｎｅ受体均上调，这些变化可能与休克时相有关。

关键词：败血症肌浆网核被膜 ryanodine受体

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运动性肥大心脏心肌和血浆降钙素基因相关肽含量变化

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中国运动医学杂志 1999年第1期18卷 7-8页

作者：李昭波高云秋李维根唐朝枢北京医科大学第三医院运动医学研究所北京医科大学心血管基础研究所

我们的前期研究发现心血管系统自身产生和分泌的调节肽参与运动性心肌肥大形成机制，但对心血管系统肽能神经纤维分泌的神经递质是否参与其机制尚不清楚。本实验采用放射免疫方法对运动性肥大心脏心肌局部降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉ... 详细信息

我们的前期研究发现心血管系统自身产生和分泌的调节肽参与运动性心肌肥大形成机制，但对心血管系统肽能神经纤维分泌的神经递质是否参与其机制尚不清楚。本实验采用放射免疫方法对运动性肥大心脏心肌局部降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）含量变化进行研究。结果表明，大鼠游泳运动１０周后，心系数比对照组增加３５％，心肌ＣＧＲＰ含量明显提高７０％，血浆ＣＧＲＰ含量提高４７％。这一结果提示，ＣＧＲＰ这一心血管神经调节肽在运动性心肌肥大形成中具有重要的调节作用，从已知ＣＧＲＰ作用机理推断。

关键词：心肌肥大运动性疾病 CGRP 心肌血浆

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运动对自发性高血压大鼠心肌血管内皮生长因子及其基因表达的影响

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中国运动医学杂志 1999年第2期18卷 115-116页

作者：李维根李昭波高云秋唐朝枢北京医科大学第三医院运动医学研究所北京100083 北京医科大学心血管基础研究所

为探讨血管内皮生长因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）是否参与运动改善高血压性心肌肥大机制，采用免疫组化和分子杂交方法，研究了自发性高血压大鼠（ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ... 详细信息

为探讨血管内皮生长因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）是否参与运动改善高血压性心肌肥大机制，采用免疫组化和分子杂交方法，研究了自发性高血压大鼠（ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｒａｔｓ，ＳＨＲ）游泳运动后心肌细胞ＶＧＥＦ及其基因表达的改变。免疫组化结果表明，ＳＨＲ经１０周游泳后，心肌细胞浆内ＶＥＧＦ特异染色颗粒比安静ＳＨＲ明显增多。Ｎｏｒｔｈｅｍ分子杂交结果表明，ＳＨＲ运动后心肌ＶＥＧＦ　ｍＲＮＡ表达比安静ＳＨＲ降低。目前对这一结果的生理意义还不清楚，推测可能与改善高血压肥大心肌间质血管增生机制有关。

关键词：心肌以大高血压基因表达运动 VEGF

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阳离子脂质体DOTAP介导报道基因转染骨关节病滑膜细胞的实验研究

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中国运动医学杂志 1999年第2期18卷 106-108页

作者：裴明曲绵域于长隆赵文北京医科大学第三医院运动医学研究所北京100083 北京医科大学心血管基础研究所

目的：探索阳离子脂质体ＤＯＴＡＰ介导目的基因转染骨关节病滑膜细胞的最佳条件。方法：分离培养骨关节病滑膜细胞，使用荧光质粒pＥＧＦＰ－Ｃ３作为报道基因，与阳离子脂质体ＤＯＰＡＰ一起转染骨关节病滑膜细胞；通过设立不同转染... 详细信息

目的：探索阳离子脂质体ＤＯＴＡＰ介导目的基因转染骨关节病滑膜细胞的最佳条件。方法：分离培养骨关节病滑膜细胞，使用荧光质粒pＥＧＦＰ－Ｃ３作为报道基因，与阳离子脂质体ＤＯＰＡＰ一起转染骨关节病滑膜细胞；通过设立不同转染时间组、不同表达时间组以及不同ＤＯＴＡＰ剂量组，观察绿色荧光蛋白的表达。结果：使用阳离子脂质体ＤＯＴＡＰ介导荧光质粒转染骨关节病滑膜细胞，转染时间在６ｈ左右，ＤＯＴＡＰ（μｌ）／ＤＮＡ（μｇ）比值在７：１左右，可于转染后４８ｈ左右表达出的蛋白量最大。结论：阳离子脂质体ＤＯＴＡＰ介导荧光质粒转染骨关节病滑膜细胞转染条件的优化，为今后骨关节病滑膜细胞非病毒基因转移的研究提供实验依据。

关键词：阳离子脂质体骨关节病 DOTAP 滑膜细胞转染

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关节腔内注射裸露DNA治疗关节炎机制的实验研究

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中国运动医学杂志 1999年第2期18卷 103-105页

作者：裴明曲绵域于长隆赵文北京医科大学第三医院运动医学研究所北京100083 北京医科大学心血管基础研究所

关节腔内注射裸露ＤＮＡ，是实现关节内基因转移的一种最简便的方法，但其机制尚不了解。本实验利用差速离心法，提取类风湿性关节炎患者关节滑膜细胞的非核膜蛋白，以大鼠肝细胞非核膜蛋白作为对照，应用32Ｐ标记的ＤＮＡ，进行ＤＮ... 详细信息

关节腔内注射裸露ＤＮＡ，是实现关节内基因转移的一种最简便的方法，但其机制尚不了解。本实验利用差速离心法，提取类风湿性关节炎患者关节滑膜细胞的非核膜蛋白，以大鼠肝细胞非核膜蛋白作为对照，应用32Ｐ标记的ＤＮＡ，进行ＤＮＡ膜蛋白结合实验。我们发现在滑膜细胞微粒体膜的抽提物中存在一种非核ＤＮＡ结合蛋白质，分子量约为８３ＫＤａ，这种蛋白质能特异地与双链线状ＤＮＡ结合，可能在关节滑膜介导的基因转移中起一定作用。

关键词：关节炎关节腔注射裸露质粒DNA 基因转移

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肾上腺髓质素在心血管系统的分布及在心血管功能调节中的作用

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中国病理生理杂志 1999年第3期15卷 225-229页

作者：魏英杰朱燕青曹怡雯付爱华张肇康汤健北京医科大学心血管基础研究所黑龙江省武警总队医院

目的：观察肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ，ＡｄＭ）在大鼠心血管系统的分布及缩血管活性肽对血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素表达的影响。方法与结果：应用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）证实，在大鼠的外周组织，尤其是主动... 详细信息

目的：观察肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ，ＡｄＭ）在大鼠心血管系统的分布及缩血管活性肽对血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素表达的影响。方法与结果：应用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）证实，在大鼠的外周组织，尤其是主动脉和心肌等心血管组织以及培养的血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和心肌细胞，均含有丰富的免疫活性的肾上腺髓质素。应用半定量反转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）分析方法证实，缩血管活性肽－内皮素（ＥＴ－１）和血管紧张素Ⅱ（ＡＧＴ）可明显地降低培养的血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素ｍＲＮＡ水平，这一作用可选择性地分别被ＥＴ－１的特异性受体阻断剂ＢＱ１２３和ＡＧＴ的特异性受体阻断剂Ｄｕｐ７５３所抑制，提示ＥＴ－１／ＡＧＴ可抑制肾上腺髓质素的表达。应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入和细胞计数发现，肾上腺髓质素可抑制培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞的ＤＮＡ合成和细胞增殖。结论：心血管系统含有丰富的肾上腺髓质素，其表达受ＥＴ－１和ＡＧＴ的调控，它可能作为一种增殖抑制因子而抑制ＳＨＲ血管平滑肌细胞ＤＮＡ合成和细胞增殖。

关键词：肾上腺髓质系心血管平滑肌细胞大鼠

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早发冠心病患者甲烯四氢叶酸还原酶基因的C677T多态性研究

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 118-121页

作者：许海燕陈在嘉汤健朱大明张晨晖杨跃进陈纪林中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院冠心病研究室北京医科大学心血管基础研究所

目的探讨同型半胱氨酸代谢过程的关键酶之一——甲烯四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因Ｃ６７７Ｔ多态性与早发冠心病发病的关系。方法采用限制性内切酶片段长度多态性方法检测患者的ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ位碱基突变。结果６７例患... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸代谢过程的关键酶之一——甲烯四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因Ｃ６７７Ｔ多态性与早发冠心病发病的关系。方法采用限制性内切酶片段长度多态性方法检测患者的ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ位碱基突变。结果６７例患者中Ｔ纯合基因型占３４．３％（２３／６７）、杂合基因型占４３．３％（２９／６７），Ｃ纯合基因型占２２．４％（１５／６７）；Ｔ等位基因频率为５５．９％（７５／１３４），Ｃ等位基因频率为４４．１％（５９／１３４）；与正常对照组比较，差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结论ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ点突变可能是中国人早发冠心病发病的危险因素之一。

关键词：冠心病甲烯四氢叶酸还原酶

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胰岛素对大鼠主动脉血红素氧合酶活性的影响

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中华心血管病杂志 1999年第4期27卷 304-306页

作者：程友琴曹少军武珊珊王士雯崔吉君唐朝枢北京军区总医院干部病房一科北京100700 解放军总医院老年心血管病研究所北京医科大学心血管基础研究所

目的　观察胰岛素对Wistar鼠主动脉组织及体外培养主动脉平滑肌细胞基础和诱导状态血红素氧合酶 (HO)活性的影响 ,探讨胰岛素与血红素氧合酶 -一氧化碳系统 (HO -CO)以及血管舒缩功能的关系。方法　应用离体Wistar鼠主动脉且织孵育技术... 详细信息

目的　观察胰岛素对Wistar鼠主动脉组织及体外培养主动脉平滑肌细胞基础和诱导状态血红素氧合酶 (HO)活性的影响 ,探讨胰岛素与血红素氧合酶 -一氧化碳系统 (HO -CO)以及血管舒缩功能的关系。方法　应用离体Wistar鼠主动脉且织孵育技术和主动脉平滑肌细胞培养技术 ,以胆红素生成量作为HO活性的指标 ,以培养上清液中碳氧血红蛋白 (COHb)含量作为内源性一氧化碳 (CO)产量的指标 ,从组织和细胞水平观察生理范围内不同浓度胰岛素对血管局部HO活性和内源性CO产生量的影响。结果　 ( 1)基础状态下 ,梯度浓度胰岛素 4 0、80、160、3 2 0、64 0 μU/ml使主动脉HO活性分别增高 4 8 2 %、60 8%、80 7%、70 5 %、62 2 % (P <0 0 5或 0 0 1) ,使主动脉平滑肌细胞培养上清液中COHb产量分别增加 8 7%、18 6%、4 0 2 %、17 4 %、7 9% (P <0 0 5或 0 0 1)。 ( 2 )诱导状态下 ,胰岛素对主动脉组织HO活性及血和平滑肌细胞培养上清液中COHb产量均无影响。结论　胰岛素对血管局部HO -CO系统的影响与HO -CO系统的状态有关 ;在基础状态下 ,胰岛素可引起血管局部HO活性增强 ,在生理范围内呈浓度依赖关系 ,过高浓度的胰岛素对HO活性作用反而减弱 ;但在诱导状态下 ,胰岛素对HO活性并无明显影响。

关键词：胰岛素血红素氧化酶一氧化碳高血压

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内源性CO对内皮素促大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及MAPK活性的影响

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生理学报 1999年第3期51卷 77-82页

作者：欧和生严丽梅符民桂王晓红庞永政苏静怡唐朝枢北京医科大学第一临床医院心血管研究所衡阳医学院内基诊断学教研室

血红素加氧酶（ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ＨＯ）是血红素分解代谢过程中的限速酶，它能使细胞内的血红素降解成胆绿素和一氧化碳（ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅ，ＣＯ）。近来资料表明内源性一氧化碳对生理和病理状态下的血管张力... 详细信息

血红素加氧酶（ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ＨＯ）是血红素分解代谢过程中的限速酶，它能使细胞内的血红素降解成胆绿素和一氧化碳（ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅ，ＣＯ）。近来资料表明内源性一氧化碳对生理和病理状态下的血管张力有重要的调节作用。目前尚不清楚内源性ＨＯ／ＣＯ系统是否参与平滑肌细胞增殖过程的调节。本实验在体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞模型上，用血色素加氧酶抑制剂卟啉锌９（ｚｉｎｃｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎＩＸ，ＺｎＰＰ９）及酶底物血色素左旋赖氨酸盐（ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ，ＨＬＬ）作用于内皮素处理的平滑肌细胞，同时观察细胞ＨＯ活性、ＣＯ产生和释放以及丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性的变化，以探讨细胞内源性ＨＯ／ＣＯ系统对细胞增殖的调节作用。结果发现：内皮素明显刺激细胞的３ＨＴｄＲ参入，其ＭＡＰＫ活性亦明显增加，同时伴有ＨＯ活性上调和ＣＯ产生释放增加；同时给予ＥＴ１和ＺｎＰＰ９时，ＨＯ活性和ＣＯ的生成释放明显减少，此时３ＨＴｄＲ参入和ＭＡＰＫ活性比单独ＥＴ１组分别增加３１８％（Ｐ＜００１）和３４６％（Ｐ＜００１）；而同时加入ＥＴ１和ＨＬＬ时，ＨＯ活性和ＣＯ生成释放明显

关键词：血色素加氧酶一氧化碳血管平滑肌细胞丝裂素活化蛋白激酶

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