检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2021年第8期48卷 898-906页

作者：路亚岚周澧韩云林王克维秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家人类疾病动物模型资源库北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

随着全球老龄化日益严重,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)作为神经退行性疾病的最常见类型,以进行性认知障碍为主要临床表现,以老年斑、神经纤维缠结和神经元及突触的凋亡缺失为主要病理特征.细胞凋亡抑制家族蛋白(inhibitor of ... 详细信息

随着全球老龄化日益严重,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)作为神经退行性疾病的最常见类型,以进行性认知障碍为主要临床表现,以老年斑、神经纤维缠结和神经元及突触的凋亡缺失为主要病理特征.细胞凋亡抑制家族蛋白(inhibitor of apoptosis family protein,IAP)是一类内源性细胞凋亡抑制蛋白,它们在AD病理进程中的功能尚未十分明确.本研究从AD患者数据库、动物模型和诱导的脑片模型分析IAPs蛋白表达,并通过EMSA和免疫印迹实验初步探索了NFκB信号通路的活化.结果表明:存活蛋白(Survivin)在AD患者、小鼠模型以及Aβ、冈田酸和LPS诱导脑片中共同上调,同时NFκB通路被显著激活,两者变化趋势相似,可能通过NFκB-Survivin轴抵抗神经元凋亡. Survivin蛋白在AD中的进一步深入研究将成为AD治疗和预防的重要靶标.

关键词：阿尔茨海默病细胞凋亡抑制家族蛋白 APP/PS1小鼠模型脑片 NFκB通路

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内皮细胞条件性敲除EMCN小鼠模型建立及肿瘤肺转移对比分析

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中国实验动物学报 2022年第2期30卷 185-190页

作者：张国新高苒国家人类疾病动物模型资源库国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的建立内皮细胞条件性敲除EMCN基因小鼠模型,探讨C57BL/6小鼠与内皮细胞条件性敲除EMCN小鼠模型体内肿瘤肺转移存在的差异。方法将内皮细胞特异性Tek-CreERT2小鼠与EMCN^(flox/flox)小鼠杂交,将子代雄性EMCNflox/wt/Tek-CreERT2+与雌... 详细信息

目的建立内皮细胞条件性敲除EMCN基因小鼠模型,探讨C57BL/6小鼠与内皮细胞条件性敲除EMCN小鼠模型体内肿瘤肺转移存在的差异。方法将内皮细胞特异性Tek-CreERT2小鼠与EMCN^(flox/flox)小鼠杂交,将子代雄性EMCNflox/wt/Tek-CreERT2+与雌性EMCN^(flox/flox)小鼠交配,取得内皮细胞特异性敲除EMCN基因小鼠(EMCN^(flox/flox)/Tek-CreERT2+,EMCN^(ecko))。通过在DNA和蛋白水平验证基因敲除准确性及效率,提取小鼠基因组DNA后,PCR扩增检测Tek-CreERT2及FLOX位点,Tamoxifen诱导后,Western Blot检测组织中EMCN蛋白的表达。对正常C57BL/6小鼠与EMCN^(ecko)小鼠表型进行观察及脏器HE染色。为了证实EMCN敲除对肿瘤转移的影响,将LLC细胞尾静脉注射C57BL/6与EMCN^(ecko)小鼠,2周后解剖取肺检测肺转移情况,并对2组小鼠的肺转移结果统计对比分析。将LLC细胞皮下注射C57BL/6与EMCN^(ecko)小鼠,2周后手术切除皮下肿瘤,分别在术后2、3周观察肺转移情况,将两组肺组织进行HE染色,并对两组小鼠的肺转移结果统计对比分析。结果从DNA和蛋白水平证实EMCN^(flox/flox)/Tek-creERT2^(+)小鼠成功构建。小鼠组织HE切片分析显示基因敲除小鼠脏器发育无异常。尾静脉注射LLC及皮下注射LLC后切除肿瘤的C57BL/6和EMCN^(ecko)小鼠均可以发生肺转移,与C57BL/6小鼠相比,内皮细胞EMCN的缺失显著促进了小鼠肺转移。结论成功获得内皮细胞EMCN条件性敲除小鼠,内皮细胞EMCN敲除小鼠肿瘤肺转移的能力显著优于正常C57BL/6小鼠,预期为肿瘤肺转移动物模型各项研究提供快速发生肺转移的动物模型。

关键词： EMCN基因内皮细胞 Tek-CreERT2/EMCN^(flox/flox) 肺转移

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中国比较医学杂志 2021年第4期31卷 27-32页

作者：左旺盛张钰张玲秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的观察不同剂量丁苯酞(N-butylphthalide,NBP)对db/db小鼠认知功能及海马区突触素(synaptophysin,SYN)、突触后致密物95(postsynaptic density-95 protein,PSD-95)的表达以及线粒体结构的影响。方法实验共分5组,将20只db/db小鼠随机分4组,模型组、低、中、高剂量治疗组,每组5只,同窝正常db/m小鼠5只作为对照组。在6周龄时,分别给予db/db小鼠腹腔注射低、中、高剂量(20、40、60 mg/kg)的丁苯酞注射液,对照组和模型组均给予等体积的生理盐水腹腔注射,每日1次,连续6周。每周监测体重与空腹血糖水平,运用Morris水迷宫实验检测小鼠的空间学习记忆能力,Western blot技术检测小鼠海马区SYN、PSD-95表达,电镜观察海马区线粒体的结构。结果与模型组相比,各治疗组对小鼠的体重及血糖影响无显著差异,但水迷宫探索期逃避潜伏时间减少(P<0.05),测试期跨越平台次数增加(P<0.01),海马区SYN、PSD-95蛋白表达量均升高(P<0.05),且认知改善和蛋白表达增加呈剂量依赖关系;电镜下正常组的线粒体结构正常,嵴结构清晰并且排列紧密,膜结构完整;模型组线粒体受损,嵴结构稀疏,融合,逐渐空泡化;各剂量治疗组海马区线粒体大部分结构完整,嵴结构有少量破坏,膜结构也相对完整。结论丁苯酞可能通过调节海马突触相关蛋白SYN、PSD-95的表达和线粒体结构改善db/db小鼠的认知功能障碍,高剂量治疗效果优于低剂量与中剂量组。

关键词：丁苯酞糖尿病突触素突触后致密蛋白95 认知线粒体

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SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法

SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法

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作者：柳青马元武张旭张信哲谌浩东王高杰 100010 北京市东城区王府井帅府园一号

本发明提供了一种SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法，所述方法包括：获得核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的gRNA2；获得有活性的Cas9mRNA；将所述gRNA、Cas9mRNA和核苷... 详细信息

标准号: CN117887760A

本发明提供了一种SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法，所述方法包括：获得核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的gRNA2；获得有活性的Cas9mRNA；将所述gRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的打靶供体(doner)混合后显微注射到小鼠受精卵中，获得F0代小鼠；选择F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配，获得具有稳定基因型的F1代小鼠；后筛选获得SQSTM1/p62基因突变敲入模式小鼠。该方法基因编辑效率高，可表达人SQSTM1/p62突变蛋白。

关键词：核苷酸序列小鼠小鼠受精卵野生型小鼠基因突变模式小鼠突变蛋白稳定基因显微注射小鼠模型阳性小鼠基因交配供体构建突变筛选

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蓝狐细小病毒VP2基因的测序及遗传进化分析

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中国病原生物学杂志 2024年第6期19卷 621-624,630页

作者：曹思凡祁少华王建忠赵永坤闫飞虎冯娜夏咸柱东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150036 中国农业科学院长春兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室北京协和医学院比较医学中心吉林农业大学动物医学院

目的探究山东省潍坊市蓝狐细小病毒VP2基因的遗传进化特征,了解国内蓝狐细小病毒流行毒株的分子特性。方法根据GenBank公布的BFPV及CPV参考株基因序列设计VP2基因引物,应用细小病毒PCR检测方法对来自山东省潍坊市某蓝狐养殖场的健康和... 详细信息

目的探究山东省潍坊市蓝狐细小病毒VP2基因的遗传进化特征,了解国内蓝狐细小病毒流行毒株的分子特性。方法根据GenBank公布的BFPV及CPV参考株基因序列设计VP2基因引物,应用细小病毒PCR检测方法对来自山东省潍坊市某蓝狐养殖场的健康和腹泻粪便样品进行核酸检测,扩增核酸阳性样品的VP2全基因序列,使用MegAlign软件进行拼接整理,之后借助DNASTAR和MEGA7.0软件构建进化树进行遗传进化分析并完成核苷酸与氨基酸序列分析。结果20份样品中有15份样品(9份腹泻蓝狐样品、6份健康蓝狐样品)均呈细小病毒核酸阳性且扩增出符合预期长度的VP2基因特异性条带。序列同源性比对结果显示,BFPV/WF/2023株与国内CPV-2c参考株同源性最高,可达99.7%~99.9%,与疫苗参考株(CPV-2)同源性为98.7%;与FPV、MEV、BFPV参考株同源性最低,为98.1%~98.4%。系统进化树结果显示,BFPV/WF/2023株与国内CPV-2c参考株处于一个大分支且与BFPV参考株距离较远。蛋白氨基酸分析结果显示,BFPV/WF/2023株与国内CPV-2c参考株关键氨基酸位点(297 A、324 I、370 R、426 E)一致。结论山东省潍坊市健康和腹泻的蓝狐种群中均存在细小病毒感染,且蓝狐细小病毒已演变为犬科的优势毒株CPV-2c亚型,需加强对狐细小病毒感染情况的追踪和监测。

关键词：狐细小病毒 VP2基因基因型遗传进化

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小型猪肺部三维重建与脉管3D打印模型

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中国比较医学杂志 2022年第4期32卷 102-106页

作者：张润东赵琳娜姚华北京农学院动物科学技术学院北京102206 强生医疗专业教育学院北京100016 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨小型猪肺部三维重建模型建立方法及3D打印模型的应用。方法4头巴马小型猪行全身麻醉做肺部CT血管成像,获取数据采用MIMICS软件重建肺段组织结构,3D打印肺部脉管的实体模型。结果基于CT血管成像数据重建的三维模型,清晰展现小型... 详细信息

目的探讨小型猪肺部三维重建模型建立方法及3D打印模型的应用。方法4头巴马小型猪行全身麻醉做肺部CT血管成像,获取数据采用MIMICS软件重建肺段组织结构,3D打印肺部脉管的实体模型。结果基于CT血管成像数据重建的三维模型,清晰展现小型猪肺部血管和支气管3~4级分支的解剖结构,并显示叶裂和部分段间平面,可任意旋转和缩放。结论利用三维重建和3D打印技术可成功创建巴马小型猪肺部解剖结构模型,为比较医学研究和胸外科手术培训材料提供基础。

关键词：肺三维重建 3D打印小型猪

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FEM1B促进TRAIL诱导的HIV潜伏库细胞ACH-2的细胞凋亡

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中国比较医学杂志 2023年第5期33卷 1-7页

作者：杨晨波陆佳涵丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的探究FEM1B对HIV潜伏库细胞ACH-2的凋亡影响及作用。方法利用慢病毒转染构建FEM1B过表达的ACH-2细胞株,采用FITC-Annexin-V/7-AAD染色检测FEM1B过表达的ACH-2细胞株的细胞自发凋亡以及TRAIL作用24 h后的细胞凋亡情况,以及用qPCR检测T... 详细信息

目的探究FEM1B对HIV潜伏库细胞ACH-2的凋亡影响及作用。方法利用慢病毒转染构建FEM1B过表达的ACH-2细胞株,采用FITC-Annexin-V/7-AAD染色检测FEM1B过表达的ACH-2细胞株的细胞自发凋亡以及TRAIL作用24 h后的细胞凋亡情况,以及用qPCR检测TRAIL作用前后细胞上清病毒载量。结果FEM1B过表达的细胞株的细胞自发凋亡没有显著变化,但在TRAIL作用下,过表达FEM1B的细胞株的凋亡率显著增加,同时FEM1B过表达后TRAIL作用下ACH-2的上清病毒载量明显上升。结论FEM1B能够促进TRAIL作用下HIV潜伏细胞的细胞凋亡和病毒载量。

关键词：细胞凋亡 FEM1B TRAIL HIV潜伏库

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肺原位移植瘤小鼠模型的建立

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中国实验动物学报 2022年第8期30卷 1064-1070页

作者：杨星九张文龙史旭东李梦媛张国新高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库北京100021 国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的本研究拟建立一种小鼠肺癌原位移植瘤模型,用于模拟临床患者肺癌的发生及发展。方法构建表达荧光素酶报告基因的小鼠肺癌细胞LLC-luc,通过手术将LLC-luc细胞注射至小鼠左肺,构建原位移植瘤模型。使用CT和活体荧光成像系统对原位移... 详细信息

目的本研究拟建立一种小鼠肺癌原位移植瘤模型,用于模拟临床患者肺癌的发生及发展。方法构建表达荧光素酶报告基因的小鼠肺癌细胞LLC-luc,通过手术将LLC-luc细胞注射至小鼠左肺,构建原位移植瘤模型。使用CT和活体荧光成像系统对原位移植瘤模型进行示踪监测,并于肿瘤移植后第14天取材,IHC检测组织免疫学及免疫微环境特征。结果LLC-luc细胞注射后,原位移植肿瘤成功定植于左肺,可通过CT和活体荧光成像示踪监测肿瘤的发展过程,IHC结果显示肿瘤具备转移潜质,肿瘤内部存在免疫细胞浸润。结论本研究成功建立了一种易于评价,贴近于临床患者肺癌的发展的小鼠肺癌原位移植瘤模型。

关键词：肺癌原位移植瘤模型影像学

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一种啮齿类动物脑内微透析记录的清醒活动装置的设计和应用研究

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中国实验动物学报 2022年第3期30卷 350-357页

作者：张钰周澧张玲孙秀萍李祥磊秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库北京100021 国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的通过自行设计制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并进行小鼠清醒活动的脑内微透析采样应用和验证。方法设计并利用相关材料自行制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并通过小鼠黑质-纹状体神经环路的多巴胺相关神经... 详细信息

目的通过自行设计制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并进行小鼠清醒活动的脑内微透析采样应用和验证。方法设计并利用相关材料自行制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并通过小鼠黑质-纹状体神经环路的多巴胺相关神经递质进行测定和验证。向C57BL/6小鼠的黑质、纹状体埋置微透析探针,手术7 d后进行小鼠清醒活动下的黑质、纹状体的多巴胺(DA)及其代谢中间产物二羟基苯乙酸(DOPAC)两种神经递质的微透析采样。微透析流速为2μL/min,每20 min收集一管样品,共收集200 min,分析两种化学物质浓度随时间的变化。结果(1)啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置可保证动物在装置内清醒活动的同时可顺利进行微透析采样。(2)啮齿动物脑内样品的可检测到稳定的神经递质含量,样品测得小鼠的多巴胺浓度为黑质(0.11±0.01)nmol/L,纹状体(0.22±0.05)nmol/L;小鼠的DOPAC浓度为黑质(3.38±0.59)nmol/L,纹状体(20.35±6.87)nmol/L。各记录时段之间无明显差异。结论啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置设计实用、稳定,具有较好的时间、空间应用效果。已申请并授权获批国家专利两项:发明专利(202110525342.5),实用新型专利(202121027247.4)。

关键词：神经递质微透析清醒活动装置多巴胺纹状体黑质

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血清剥夺反应因子(Sdpr)敲除及转基因小鼠的建立与表型分析

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中国比较医学杂志 2022年第5期32卷 7-15页

作者：李欣悦石桂英雷雪裴黄艺滢李珂雅侯丽雅王凯瑜汤家鸣白琳国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的建立Sdpr基因敲除小鼠及Sdpr转基因小鼠模型,为Sdpr基因功能的研究提供小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Sdpr基因敲除小鼠,利用过表达质粒构建Sdpr转基因小鼠模型,利用PCR鉴定小鼠基因型,利用qRT-PCR和Western blot检测mRNA... 详细信息

目的建立Sdpr基因敲除小鼠及Sdpr转基因小鼠模型,为Sdpr基因功能的研究提供小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Sdpr基因敲除小鼠,利用过表达质粒构建Sdpr转基因小鼠模型,利用PCR鉴定小鼠基因型,利用qRT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达情况,获取小鼠组织进行组织病理学分析,利用流式细胞术对小鼠免疫细胞比较分析。结果获得Sdpr基因敲除及转基因小鼠模型。与野生型小鼠相比,基因敲除小鼠Sdpr基因表达降低;组织多处出现炎性灶,肺、脂肪有炎性细胞浸润;肝出现脂肪变性,中央静脉周围可见髓外造血;脾组织红髓出现髓外造血;骨髓中T细胞比例降低,胸腺中CD4^(-)CD8^(-)细胞增多,CD4^(+)CD8^(+)细胞减少。转基因小鼠Sdpr基因表达增加;肝组织轻微脂肪变性;肺泡间隔增宽;脾组织淋巴细胞增生,红髓细胞增多;外周血中B细胞比例增加,M细胞、T细胞比例降低,胸腺CD4^(+)细胞增多,CD4^(+)CD8^(+)细胞减少。结论建立和鉴定了Sdpr敲除和转基因小鼠,可以为研究SDPR蛋白及其相关胞膜窖蛋白在不同组织器官中的作用机理提供模型。

关键词：血清剥夺反应蛋白因子 Sdpr 基因敲除转基因小鼠

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