检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 2021年第5期73卷 821-827页

作者：冯月瑶张玉洁常永生天津医科大学基础医学院生理与病理生理学系中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

3-肾上腺素受体激动剂能够刺激棕色脂肪适应性产热,并能促进白色脂肪米色化。然而到目前为止,有哪些代谢产物参与介导β3-肾上腺素受体激动剂促进脂肪产热作用尚不清楚。本研究通过给予8周龄C57/BL6J雄性小鼠腹腔注射β3-肾上腺素受体... 详细信息

3-肾上腺素受体激动剂能够刺激棕色脂肪适应性产热,并能促进白色脂肪米色化。然而到目前为止,有哪些代谢产物参与介导β3-肾上腺素受体激动剂促进脂肪产热作用尚不清楚。本研究通过给予8周龄C57/BL6J雄性小鼠腹腔注射β3-肾上腺素受体激动剂CL316,243,分离提取小鼠脂肪组织进行RNA-Seq检测,结果显示组胺合成限速酶组氨酸脱羧酶(histidine decarboxylase, HDC)在脂肪中被CL316,243强烈诱导,因此推测HDC的代谢产物组胺可能参与了脂肪组织的产热过程。通过给予正常饮食与高脂饮食C57BL/6J小鼠静脉注射组胺,以明确组胺促进脂肪产热的生理作用和机制。结果显示,组胺可刺激正常饮食小鼠棕色脂肪和皮下白色脂肪中产热基因的表达,包括过氧化物酶体增殖物激活受体γ-辅活化因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α, PGC-1α)和解耦联蛋白1 (uncoupling protein 1, UCP1)。HE染色表明,组胺处理降低了脂肪细胞中脂滴的大小。此外,组胺还可以促进高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪产热,改善糖耐量和脂肪肝表型。最后,我们通过脂肪原代前体细胞实验验证了组胺促进产热是细胞的自主特性。本研究结果表明,组胺可能参与介导了β3-肾上腺素受体激动剂促进脂肪的产热。

关键词：组胺产热肥胖 UCP1 PGC-1α

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新型冠状病毒非结构蛋白14的表达及酶活性分析

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基础医学与临床 2023年第1期43卷 51-58页

作者：陈双徐婧雯丁开云刘建生彭小忠刘红旗昆明医科大学、基础医学院、免疫学系云南昆明650500 中国医学科学院、北京协和医学院、医学生物学研究所云南昆明650118 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的获得纯度较高和有酶活性的新型冠状(新冠)病毒(SARS-CoV-2)非结构蛋白14(Nsp14)。方法根据大肠埃希氏菌(***)的密码子偏好性,分析新冠病毒原始株基因nsp14的稀有密码子,并对其进行优化。将nsp14克隆至4个不同的表达载体并进行表达;... 详细信息

目的获得纯度较高和有酶活性的新型冠状(新冠)病毒(SARS-CoV-2)非结构蛋白14(Nsp14)。方法根据大肠埃希氏菌(***)的密码子偏好性,分析新冠病毒原始株基因nsp14的稀有密码子,并对其进行优化。将nsp14克隆至4个不同的表达载体并进行表达;通过对表达量和可溶性的比较分析,选择一个表达效果最好的重组表达质粒并优化表达条件;目的蛋白经谷胱甘肽亲和柱纯化后,用半胱氨酸家族蛋白酶(3C)切除融合标签,再分别利用谷胱甘肽亲和柱和分子筛柱纯化蛋白质。最后通过尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对其活性进行鉴定。结果Nsp14的基因在大肠杆菌中表达存在较多的稀有密码子,其中部分稀有密码子呈现近距离分布和串联分布。pGEX6P1-GST-OPTI-Nsp14重组质粒在大肠杆菌中表达的可溶性效果最好,其最佳表达温度为30℃。经纯化后获得了较纯的不含标签的Nsp14,该蛋白具有核酸酶活性。结论本研究成功地表达和纯化出具有核酸酶活性的新冠病毒Nsp14,为进一步推进对新冠病毒Nsp14的结构和功能研究奠定了基础,为筛选靶向Nsp14的抗病毒治疗药物提供了有利的条件。

关键词：新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 非结构蛋白14(Nsp14) 原核表达蛋白质纯化核酸酶活性

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羧胺三唑乳清酸盐对小鼠胶质瘤相关巨噬细胞系促癌表型的影响

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基础医学与临床 2022年第5期42卷 701-707页

作者：马瑞杨黎星陈秋霞仇佳星王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理系北京100005

目的初步探索羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对小鼠胶质瘤细胞系GL261和肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)系促癌表型的调控作用及其机制。方法以GL261细胞培养上清诱导骨髓来源巨噬细胞(BMDM)或巨噬细胞系RAW264.7作为研究对象,用qPCR检测TAMs促癌介质mRN... 详细信息

目的初步探索羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对小鼠胶质瘤细胞系GL261和肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)系促癌表型的调控作用及其机制。方法以GL261细胞培养上清诱导骨髓来源巨噬细胞(BMDM)或巨噬细胞系RAW264.7作为研究对象,用qPCR检测TAMs促癌介质mRNA水平;通过Seahorse细胞能量测定方法检测TAMs耗氧速率(OCR);用Western blot检测TAMs中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、低氧诱导因子-2α(HIF-2α)及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)共激活因子-1β(PGC-1β)蛋白水平。结果CTO降低TAMs中IL-1β、IL-6、TNF-α等经典活化巨噬细胞(M1)相关介质(P<0.001)及IL-10、Arg-1、TGF-β1等替代性活化巨噬细胞(M2)相关介质的mRNA水平(P<0.001);CTO显著下调TAMs中OCR(P<0.01);CTO下调TAMs中HIF-1α及HIF-2α蛋白水平(P<0.01),这一作用与促进线粒体耗氧的氧化磷酸化解偶联剂碳酰氰-4-三氟甲氧基苯腙(FCCP)作用相反;CTO显著降低TAMs中PGC-1β蛋白水平(P<0.001),这一作用与线粒体呼吸链抑制剂鱼藤酮(RTN)的作用一致。结论CTO抑制氧化磷酸化下调PGC-1β表达,并且使HIF-1α及HIF-2α不稳定,从而影响TAMs中M1及M2表型的促癌介质生成。

关键词：羧胺三唑乳清酸盐肿瘤相关巨噬细胞氧化磷酸化低氧诱导因子 PPAR共激活因子-1β

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传统与光谱流式细胞仪对自发荧光样本检测的比较

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基础医学与临床 2023年第5期43卷 809-816页

作者：陈家欢李丹丹孙艳王艺蕾王铎孔杰刘晓玲中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院、北京协和医院检验科北京100730 长治医学院山西长治046000

目的比较传统与光谱流式细胞仪检测自发荧光样本的性能。方法以annexin V(AV)/碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡为模型,制备带有自发荧光的单细胞样本,分别用传统与光谱流式细胞仪采集同一样本荧光信号。结果自发荧光干扰异硫氰酸荧光素(FI... 详细信息

目的比较传统与光谱流式细胞仪检测自发荧光样本的性能。方法以annexin V(AV)/碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡为模型,制备带有自发荧光的单细胞样本,分别用传统与光谱流式细胞仪采集同一样本荧光信号。结果自发荧光干扰异硫氰酸荧光素(FITC)通道荧光信号,传统流式细胞仪应避免使用FITC通道的荧光素;而光谱流式细胞仪可以清楚分辨FTIC通道的荧光素和自发荧光。同时优化了样本制备方法和annexin V/PI染色方案。结论光谱流式细胞仪对于自发荧光样本的检测在一定条件下具有相对优良的性能。

关键词：自发荧光流式细胞术光谱异硫氰酸荧光素(FITC)

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羧胺三唑乳清酸盐抑制人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株增殖及线粒体能量代谢

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基础医学与临床 2022年第4期42卷 570-576页

作者：陈秋霞杨黎星马瑞赵永晶王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理系北京100005

目的研究羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对人胰腺癌耐吉西他滨细胞株(AG细胞)增殖、代谢和凋亡的影响。方法体外培养AG细胞。将细胞分为对照组和不同浓度CTO组;用磺酰罗丹明B(SRB)检测细胞活力;用annexin V/PI双染色及流式细胞测量术检测细胞凋... 详细信息

目的研究羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对人胰腺癌耐吉西他滨细胞株(AG细胞)增殖、代谢和凋亡的影响。方法体外培养AG细胞。将细胞分为对照组和不同浓度CTO组;用磺酰罗丹明B(SRB)检测细胞活力;用annexin V/PI双染色及流式细胞测量术检测细胞凋亡;用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色及流式细胞测量术检测细胞分裂速度;通过Seahorse生物能量仪检测细胞耗氧率(OCR);MTT法检测胞内NAD+、NADH含量,计算NAD+/NADH比率;Western blot检测细胞内自噬相关蛋白表达。结果与对照组相比,CTO处理组中AG活细胞数目明显减少,细胞凋亡比例增加,药物作用呈时间-剂量依赖性。20μmol/L CTO组AG细胞内CFSE染色荧光强度明显升高(P<0.05);与对照组相比,不同浓度CTO处理后细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的还原态(NADH)含量升高(P<0.05或P<0.01)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的氧化态(NAD+)含量无明显变化、NDA+/NADH比值降低(P<0.01);与对照组相比,CTO处理组中AG细胞内的OCR明显降低,自噬相关蛋白的表达水平明显降低(P<0.05)。结论CTO通过诱导AG细胞凋亡,损伤AG细胞线粒体呼吸作用,并下调细胞自噬相关蛋白表达水平从而达到抑制AG增殖的作用。

关键词：羧胺三唑胰腺癌吉西他滨耐药凋亡

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青少年乙型肝炎疫苗加强免疫的证据与必要性

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中华传染病杂志 2023年第9期41卷 614-618页

作者：鲁凤民曲春枫北京大学基础医学院病原学系北京大学人民医院肝病研究所北京100191 国家癌症中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室北京100021

我国自1992年在全国开展新生儿乙型肝炎疫苗普种并于2005年纳入免疫规划以来, 垂直传播及婴幼儿时期早期暴露导致的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染显著减少。但我国目前仍属于HBV感染的中高流行区, 慢性HBV感染人数超过8 000万例。此外, 越... 详细信息

我国自1992年在全国开展新生儿乙型肝炎疫苗普种并于2005年纳入免疫规划以来, 垂直传播及婴幼儿时期早期暴露导致的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染显著减少。但我国目前仍属于HBV感染的中高流行区, 慢性HBV感染人数超过8 000万例。此外, 越来越多的证据显示在新生儿时期完成乙型肝炎疫苗全程接种的儿童, 因暴露而感染HBV甚至感染后慢性化的比例随着年龄的增长而增加。现综述接种乙型肝炎疫苗后, 随年龄增长, 接种者的乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)水平下降、部分接种者抗-HBs免疫记忆消退的证据, 分析通过加强免疫降低HBV感染的可能性、研究证据及相应的卫生经济学。建议结合国情进一步优化我国的乙型肝炎疫苗接种策略, 对于青少年儿童, 特别是母亲为HBsAg阳性且成功阻断垂直传播、家庭及亲密接触者中有慢性HBV感染者的儿童和青少年, 应在适当年龄段进行加强免疫以进一步降低HBV感染风险。

关键词：乙型肝炎疫苗乙型肝炎病毒加强免疫疫苗接种策略

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抗N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体脑炎儿童伴阵发性交感神经过度兴奋综合征的临床及预后观察

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中华医学杂志 2021年第43期101卷 3600-3603页

作者：冯硕陈金晓刘硕郑萍孙静张学陈倩首都儿科研究所附属儿童医院神经内科北京100020 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005

分析了2018年5月至2021年1月首都儿科研究所附属儿童医院神经内科收治的22例抗N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎中,6例伴发交感神经过度兴奋综合征(PSH)患儿的临床特征、花费及预后,发现伴PSH的抗NMDAR脑炎意识障碍重(入院时GCS中位评... 详细信息

分析了2018年5月至2021年1月首都儿科研究所附属儿童医院神经内科收治的22例抗N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎中,6例伴发交感神经过度兴奋综合征(PSH)患儿的临床特征、花费及预后,发现伴PSH的抗NMDAR脑炎意识障碍重(入院时GCS中位评分7.5分)、意识障碍持续时间长(中位天数53 d)、住院花费高(中位花费23.0万元)、起病时神经功能损伤重(入院时mRS中位分数4分)、神经功能恢复时间长(mRS恢复至0~2分,中位时间7个月),与不伴PSH的抗NMDAR脑炎患儿比较差异均有统计学意义(P<0.05)。故应重视抗NMDAR脑炎的交感神经兴奋症状,早期识别并干预PSH,以期减少疾病对患者神经功能的损伤及经济负担。

关键词：儿童抗NMDAR脑炎阵发性交感神经过度兴奋综合征

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基于因子分析的科研院所行政管理人员职业压力评估

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黑龙江人力资源和社会保障 2022年第8期 116-118页

作者：朱明中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100000

科研院所行政管理本身就是一项高层次的、困难的、复杂的系统管理。本文通过阐述目前科研所管理人员的发展现状,对相关问题提出相应的措施,希望在实际的发展过程中能够给相关的工作人员提供一定的理论性支持和实际参考。

关键词：科研院所行政管理人员职业压力评估解决措施

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尘肺病免疫发病机制研究进展

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中华劳动卫生职业病杂志 2022年第6期40卷 471-476页

作者：张喆张新日王婧山西医科大学第一医院呼吸与危重症医学科国家卫生健康委员会尘肺病重点实验室太原030001 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

尘肺病是职业病中影响广泛、危害严重的一类疾病, 是由于生产性粉尘被吸入肺部进而蓄积所致的, 以肺组织弥漫性纤维化为主的全身性疾病, 且脱离了粉尘源, 尘肺病仍可持续进展, 最终导致呼吸衰竭, 甚至死亡。随着新材料、新技术和新工艺... 详细信息

尘肺病是职业病中影响广泛、危害严重的一类疾病, 是由于生产性粉尘被吸入肺部进而蓄积所致的, 以肺组织弥漫性纤维化为主的全身性疾病, 且脱离了粉尘源, 尘肺病仍可持续进展, 最终导致呼吸衰竭, 甚至死亡。随着新材料、新技术和新工艺的广泛应用, 工业性材料需求的日益上涨, 以及20世纪工业繁荣期大量接尘工人的存留, 尘肺病的发病率及累计病例数仍持续呈高位, 给社会造成了一定的经济负担。尘肺病的发病机制较为复杂, 目前报道的机制与机械刺激、氧化应激、炎症、免疫反应和基因的多态性等相关。免疫系统作为保护机体的调控者, 在尘肺病的发生发展中发挥重要作用, 本文就尘肺病免疫发病机制的研究进展予以综述。

关键词：尘肺职业病免疫巨噬细胞 T细胞

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基于KRIF的科研院所行政管理人员绩效考核体系设计

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黑龙江人力资源和社会保障 2022年第12期 55-57页

作者：朱明中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

本文改进了对中国科研院所行政管理绩效的评估,提高了中国科研院所行政管理的质量,并提出:新时期我国科研院所管理绩效评价研究采用平衡的计分形式,制定了科研院所战略地图的实施方案,明确科研院所的使命和战略目标;利用平衡计分卡中的... 详细信息

本文改进了对中国科研院所行政管理绩效的评估,提高了中国科研院所行政管理的质量,并提出:新时期我国科研院所管理绩效评价研究采用平衡的计分形式,制定了科研院所战略地图的实施方案,明确科研院所的使命和战略目标;利用平衡计分卡中的指标分解矩阵建立绩效考核管理指标体系;绩效评估是通过设计科研院所绩效评估的管理算法来完成的。实验结果表明,采用该方法对科研院所的管理绩效进行评估,提高了38.87%,证明了该方法的有效性。本文结合实践,从分析全面目标管理绩效考核存在的问题入手,提出了全面目标管理绩效考核的组织结构、体系结构、考核内容和形式,综合目标管理绩效考核的结果评价与应用,为未来的研究机构实施和推进综合目标管理评价提供参考。

关键词： KRIF 科研院所行政管理人员绩效考核体系设计

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