检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2011年第4期42卷 503-508页

作者：梁伟李静赵春华章静波安徽医科大学第一附属医院妇产科合肥230022 北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)耐受化疗药物损伤的作用机制。方法分离培养人BMSCs;用免疫荧光等方法检测体外培养的BMSCs对3种化疗药物顺铂、长春新碱和喜树碱处理后的反应;分析凋亡诱导基因家族p53和p73的表达情况。结果与敏感的... 详细信息

目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)耐受化疗药物损伤的作用机制。方法分离培养人BMSCs;用免疫荧光等方法检测体外培养的BMSCs对3种化疗药物顺铂、长春新碱和喜树碱处理后的反应;分析凋亡诱导基因家族p53和p73的表达情况。结果与敏感的肿瘤细胞系K562相比,体外培养BMSCs对3种化疗药物有较高的耐受性;临床剂量的化疗药物处理后,细胞的表型、增殖和分化及衰老指标均无改变;与敏感的肿瘤细胞系K562相比,亚凋亡剂量化疗药物的处理导致BMSCs内出现与凋亡诱导无关的p53表达增高;BMSCs内p73的表达量明显低于K562细胞系,且药物的处理未能改变其表达水。结论体外培养的BMSCs能耐受多种化疗药物的促凋亡作用并在药物处理结束后仍保持其干细胞的特性;BMSCs的抗损伤状态可能与细胞内低水平的p73表达量有关;p73蛋白可能在BMSCs抗损伤调节中具有重要的作用。

关键词：骨髓间充质干细胞化疗抵抗免疫荧光

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脑源性神经营养因子对脑梗死大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

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中国微侵袭神经外科杂志 2012年第11期17卷 514-517页

作者：关健戴建武佟伟民杜世伟王任直中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科 100730 中国科学院遗传与发育生物学研究所组织工程研究实验室北京100101 中国医学科学院基础医学研究所实验动物中心北京100730

目的探讨侧脑室内立体定向注射脑源性神经营养因子(BDNF)对脑梗死大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 32只SD大鼠成功制作大脑中动脉闭塞模型,随机分为BDNF组(n=16)和对照组(n=16),在两组大鼠侧脑室内分别注射10μl BDN... 详细信息

目的探讨侧脑室内立体定向注射脑源性神经营养因子(BDNF)对脑梗死大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 32只SD大鼠成功制作大脑中动脉闭塞模型,随机分为BDNF组(n=16)和对照组(n=16),在两组大鼠侧脑室内分别注射10μl BDNF溶液(0.5μmol)和10μl磷酸盐缓冲液(PBS液)。注射2周后,2组大鼠分别行神经功能严重性评分(mNSS)及梗死面积测定,应用免疫组化染色、Western blot分析脑组织Bcl-2、Bax蛋白的表达,Tunel检测细胞凋亡。结果与对照组比较,BDNF组脑梗死面积缩小,神经细胞凋亡数少,Bax蛋白表达低,Bcl-2蛋白表达高,短期内神经功能恢复好,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 BDNF可能通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡,改善脑缺血大鼠的功能。

关键词：梗塞大脑中动脉神经营养因子脑源性细胞凋亡模型动物大鼠

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干扰p73基因对脂肪间充质干细胞向神经细胞分化的影响

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安徽医科大学学报 2011年第12期46卷 1260-1263页

作者：梁伟夏海龙李静赵春华安徽医科大学第一附属医院细胞治疗与组织工程中心合肥230022 清华大学北京协和医学院组织工程中心北京100005

目的研究抑制p73蛋白的表达,对体外培养的脂肪来源间充质干细胞向骨、脂肪和神经细胞方向分化的影响。方法①流式细胞仪研究抑制p73的表达对人脂肪源间充质干细胞免疫表型影响;②体外转染的脂肪间充质干细胞向成骨和脂肪方向诱导,观察抑... 详细信息

目的研究抑制p73蛋白的表达,对体外培养的脂肪来源间充质干细胞向骨、脂肪和神经细胞方向分化的影响。方法①流式细胞仪研究抑制p73的表达对人脂肪源间充质干细胞免疫表型影响;②体外转染的脂肪间充质干细胞向成骨和脂肪方向诱导,观察抑制p73的表达对其分化能力的影响;③体外诱导脂肪间充质干细胞神经细胞分化,实时定量PCR分析抑制p73的表达对其向神经细胞分化的影响。结果抑制p73的表达,对脂肪间充质干细胞的免疫表型以及成骨和成脂分化无明显影响,但影响细胞在体外向神经细胞分化的能力。结论 p53家族蛋白成员p73在脂肪间充质干细胞体外向神经细胞的分化的过程中起重要的作用。

关键词：脂肪源间充质干细胞神经细胞分化 p73 神经分化

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慢性粒细胞白血病肿瘤干细胞的免疫调节功能

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 404-408页

作者：王椋曲学彬赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院组织工程中心北京100005

目的研究慢性粒细胞白血病(CML)骨髓来源的肿瘤干细胞的免疫学特征,比较其与正常人来源的间充质干细胞(MSC)是否存在免疫功能的异常。方法分离正常人和CML患者骨髓中的MSC,MLR法检测其对T细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对T细胞周期、... 详细信息

目的研究慢性粒细胞白血病(CML)骨髓来源的肿瘤干细胞的免疫学特征,比较其与正常人来源的间充质干细胞(MSC)是否存在免疫功能的异常。方法分离正常人和CML患者骨髓中的MSC,MLR法检测其对T细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对T细胞周期、凋亡的作用情况。结果 CML和正常志愿者骨髓来源的MSC的细胞形态和表型没有差异,CML患者来源的MSC抑制T细胞增殖能力和抑制T细胞停留在G0/G1期的作用均减弱(CML MSC组74.5%±1.2%,BMSC组94.0%±1.9%,P<0.05),CML患者抑制T细胞凋亡的作用增强(CMLMSC组8.36%±1.31%,BMSC组14.10%±0.65%,P<0.05)。结论 CML患者骨髓来源的MSC存在明显的免疫调节功能缺陷,如果使用CML患者自体的MSC移植治疗可能不是一种很好的选择,对于CML患者最好是选用异基因的MSC移植。

关键词：慢性粒细胞白血病间充质干细胞免疫调节

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非病毒诱导体系高效诱导脐带来源间充质干细胞向胰岛细胞分化

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 675-678,I0017页

作者：李晶朱莉赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100005

目的探讨非病毒法诱导脐带来源间充质干细胞(UC-MSC)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,为胰岛细胞移植治疗糖尿病提供临床移植数量级的细胞。方法从人脐带分离间充质干细胞,体外分阶段诱导分化为胰岛细胞。采用RT-PCR方法比较胰岛细胞分化... 详细信息

目的探讨非病毒法诱导脐带来源间充质干细胞(UC-MSC)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,为胰岛细胞移植治疗糖尿病提供临床移植数量级的细胞。方法从人脐带分离间充质干细胞,体外分阶段诱导分化为胰岛细胞。采用RT-PCR方法比较胰岛细胞分化过程中转录因子foxa2、sox17、pdx1、ngn3、pax4、insulin和glut-2在诱导组和非诱导组中的表达水平;免疫荧光染色方法检测胰岛素和C-肽在诱导终末阶段细胞中的表达定位;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测胰岛素及C-肽的分泌以及细胞对葡萄糖刺激的反应性。结果诱导第1阶段末,诱导后细胞foxa2和sox17的表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05);诱导第2阶段末,诱导细胞pdx1、ngn3和pax4的表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05);诱导第3阶段末,诱导细胞的insulin和glut-2表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05)。免疫荧光染色结果显示,胰岛素和C-肽均表达于诱导终末分化阶段的细胞,效率可达90%以上。ELISA检测结果显示,诱导第3阶段末细胞胰岛素总量为(346.3 739±32.5 149)μU/ml,明显高于未诱导细胞的(17.69±1.46)μU/ml(P<0.01);诱导后细胞置于5.5 mmol/L葡萄糖环境检测到的基础C-肽释放量为(195.10±8.88)pmol/L/h(P<0.01),细胞置于22 mmol/L葡萄糖环境测定葡萄糖刺激C-肽释放量达到(340.99±7.91)pmol/L/h(P<0.01)。结论以UC-MSC作为种子细胞,采用体外非病毒诱导体系获得的分化终末阶段细胞是具有胰岛素分泌功能的成熟胰岛细胞。

关键词：脐带间充质干细胞胰岛细胞转录因子

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脱矿牙本质基质对人牙髓干细胞体外增殖、牙向分化能力的影响

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口腔医学 2012年第3期32卷 143-147页

作者：张红梅王永刚张晓梅谭家莉荀文兴杨海珍李蓉庞楠曾光金岩第四军医大学唐都医院口腔科西安710038 陕西中医学院心脑血管病研究所咸阳712083 解放军总医院消化内科北京100853 第四军医大学口腔医院正畸科西安710032 第四军医大学口腔医学院组织工程中心西安710032

目的观察脱矿牙本质基质(demineralized dentin matrix,DDM)与人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDP-SCs)的生物相容性及其作为支架材料的牙向诱导作用。方法体外分离培养DPSCs,分别用四唑盐比色法(MTS)、茜素红染色法、碱性... 详细信息

目的观察脱矿牙本质基质(demineralized dentin matrix,DDM)与人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDP-SCs)的生物相容性及其作为支架材料的牙向诱导作用。方法体外分离培养DPSCs,分别用四唑盐比色法(MTS)、茜素红染色法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法观察DDM生物材料对DPSCs增殖活性和牙向分化能力的影响。结果 DDM显著地刺激体外培养的DPSCs增殖,诱导了细胞的矿化和提高细胞ALP活性。RT-PCR结果显示DDM诱导后细胞mRNA水平表达牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白(dentin matrix protein1,DMP-1)。结论体外培养条件下,DDM与DPSCs有良好的生物相容性,作为支架材料对于DPSCs有较好牙向诱导作用。

关键词：牙髓干细胞脱矿牙本质基质增殖分化

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microRNA-21可调控Flk1+间充质干细胞的迁移

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 355-359页

作者：王世华黄姗边春景赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100005

目的用microRNA-21抑制剂转染Flk1+间充质干细胞(MSC),探讨microRNA-21对Flk1+MSC(MSC)迁移的影响。方法在脂质体介导下用microRNA-21抑制剂瞬时转染Flk1+MSC,用Transwell技术检测细胞迁移,用Real-time PCR技术检测micro-RNA的表达。结果与对照组相比,实验组中microRNA-21表达明显下调,实验组细胞在12、16和20 h迁移率分别是对照组的77.5%、71.3%和69.8%。结论 microRNA-21可调控Flk1+MSC的迁移。

关键词： microRNA-21 间充质干细胞迁移

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移植骨髓间充质干细胞对大鼠脑梗死后神经元凋亡的影响

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协和医学杂志 2011年第1期2卷 19-23页

作者：包新杰魏俊吉冯铭卢珊赵春华王任直中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100730

目的探讨移植骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stemcells,BMSCs)治疗大鼠脑梗死及其减轻半暗带神经元的凋亡作用。方法采集成人志愿者骨髓,分离培养BMSCs;线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlu... 详细信息

目的探讨移植骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stemcells,BMSCs)治疗大鼠脑梗死及其减轻半暗带神经元的凋亡作用。方法采集成人志愿者骨髓,分离培养BMSCs;线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)2h再灌注脑梗死模型;建模后第3天分别立体定向脑内移植5×105BMSCs和等量生理盐水,改良神经功能损害评分(modified neurological severity scores,mNSS)观察神经功能恢复;建模后第14天TUNEL法检测梗死周边神经细胞凋亡;建模后第28天免疫荧光染色检测梗死周边神经元的存活;采用依红-苏木素染色评估梗死体积。结果治疗组和对照组比较,梗死周边TUNEL阳性细胞显著减少(P=0.017),而神经元核抗原(neuronal nuclei antigen,NeuN)阳性细胞显著增多(P=0.015);同时,BMSCs可显著降低MCAO大鼠的相对梗死体积(P=0.041);mNSS评分显示,从MCAO后第14天开始,治疗组评分均显著低于对照组(P<0.05)。结论脑梗死急性期移植BMSCs可显著减少半暗带神经元凋亡,缩小梗死范围,有效促进神经功能的恢复。

关键词：脑梗死间充质干细胞神经元凋亡

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TiN/Ti纳米涂层修饰镍钛合金的体外腐蚀行为

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第3期15卷 461-464页

作者：邵安良成艳奚廷斐周艺周亮万子义温州医学院信息与工程学院浙江省温州市325035 北京大学深圳研究院生物医学工程研究中心广东省深圳市518057 北京大学前沿交叉学科研究院生物医用材料与组织工程中心北京市100871

背景:拥有超弹性、形状记忆效应及良好抗疲劳性能的镍钛合金成为封堵器支架核心部分的最佳选择,但镍钛合金含50%的镍元素,其生物相容性仍有争议。目的:通过体外浸泡实验和电化学实验测试用于治疗先天性心脏病的封堵器镍钛合金多弧离子... 详细信息

背景:拥有超弹性、形状记忆效应及良好抗疲劳性能的镍钛合金成为封堵器支架核心部分的最佳选择,但镍钛合金含50%的镍元素,其生物相容性仍有争议。目的:通过体外浸泡实验和电化学实验测试用于治疗先天性心脏病的封堵器镍钛合金多弧离子镀改性前后的抗腐蚀性能。方法:利用多弧离子镀在镍钛合金表面形成具有纳米梯度的TiN/Ti多层薄膜,通过镍钛合金在PBS中静态浸泡1个月,检测镍离子浓度;采用开路电位-时间曲线和极化曲线观察镀膜前后镍钛合金抗腐蚀性能。结果与结论:在PBS静态浸泡中镍钛合金在1个月时释放量达到顶峰,而经过多弧离子镀改性后的镍钛合金没有镍离子的释放。开路电位-时间曲线和极化曲线表明改性后的镍钛合金的抗腐蚀性得到了很大提高。

关键词：纳米涂层 TiN/Ti 镍钛合金腐蚀镀膜

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Flk-1^+骨髓间充质干细胞移植上调白细胞介素6水平:是否同时加重了胶原诱导性关节炎小鼠的症状?

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第6期14卷 1058-1063页

作者：陈斌黄姗胡建立孙昭韩钦宋增璇赵春华北京协和医学院基础学院组织工程中心北京市100005

背景:间充质干细胞的免疫调节作用是被大家普遍认可的,在以往实验中也对Flk-1+骨髓间充质干细胞体外抑制T/B淋巴细胞增殖的能力进行了确认。目的:验证Flk-1+骨髓间充质干细胞对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用。方法:健康10周龄雄性DBA-... 详细信息

背景:间充质干细胞的免疫调节作用是被大家普遍认可的,在以往实验中也对Flk-1+骨髓间充质干细胞体外抑制T/B淋巴细胞增殖的能力进行了确认。目的:验证Flk-1+骨髓间充质干细胞对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用。方法:健康10周龄雄性DBA-1(H-2Kq)小鼠18只,随机分为3组:初次免疫后细胞移植组、加强免疫后细胞移植组、模型对照组,3组小鼠均通过尾皮下注射牛Ⅱ型胶原进行初次免疫,21d后同法进行加强免疫,建立胶原诱导性关节炎模型。密度梯度离心法和贴壁筛选法体外分离DBA-1(H-2Kq)小鼠Flk-1+骨髓间充质干细胞,初次免疫后细胞移植组小鼠在初次免疫后立即经尾静脉输注Flk-1+骨髓间充质干细胞(1～2)×106个/只,加强免疫后细胞移植组小鼠在加强免疫时同法输注等量Flk-1+骨髓间充质干细胞,模型对照组小鼠于初次免疫后0或21d尾静脉输注等量生理盐水。观察初次免疫后和加强免疫后各组小鼠的爪垫增厚情况、临床评分,检测小鼠关节病理学变化及血清因子质量浓度的动态变化。结果与结论:与模型对照组比较,初次免疫后细胞移植组爪垫增厚程度及平均临床疾病得分均无明显差异(P>0.05),均可见明显的滑膜组织损伤和炎症细胞浸润,各血清细胞因子质量浓度基本相似;而加强免疫后细胞移植组爪垫明显增厚(P<0.01),平均临床疾病得分高达3.35分,滑膜损伤严重,毛细血管增生,在初次免疫后28d白细胞介素6血清浓度急剧上升(P<0.1),初次免疫后35d白细胞介素6血清浓度又明显下降(P<0.1)。提示在胶原诱导性关节炎小鼠模型中,Flk-1+骨髓间充质干细胞移植不但未取得预期的治疗效果,还在加强免疫后细胞移植组观察到显著地关节炎症状恶化现象,其可能通过上调白细胞介素6血清浓度加重类风湿关节炎小鼠的行为症状。

关键词：免疫调节胶原诱导性关节炎白细胞介素6 Flk-1+骨髓间充质干细胞干细胞

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