检索结果-内蒙古大学图书馆

应用与环境生物学报 2005年第3期11卷 388-392页

作者：林晓燕李林孙明喻子牛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心武汉430070

核苷酸序列分析和全基因组序列分析表明,细菌的进化通常是由于不同种属之间遗传物质水平转移而推进.基因转移的主要方式有转化、转导和接合.本文综述了有关自然界不同生态系统中细菌遗传物质转移的研究,这些研究可以促使更好地评估基因... 详细信息

核苷酸序列分析和全基因组序列分析表明,细菌的进化通常是由于不同种属之间遗传物质水平转移而推进.基因转移的主要方式有转化、转导和接合.本文综述了有关自然界不同生态系统中细菌遗传物质转移的研究,这些研究可以促使更好地评估基因的水平转移.同时在农业生产或环境补救时人们会特意向环境中释放天然或重组细菌,了解环境中基因的水平转移对于安全评估这些细菌造成的后果也是必需的.

关键词：细菌遗传物质基因水平转移生态系统

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土曲霉植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达

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湖北农业科学 2005年第3期44卷 21-24页

作者：伍洛夫周俊初赵述淼华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

参考已报道的植酸酶基因phyA全序列设计一对引物,用PCR方法从土曲霉穴Aspergillusterreus雪总DNA中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4kb的phyA基因编码区片段,对该片段进行了克隆与序列测定。进一步用该片段构建了pPIC9K-phyA分泌型表达... 详细信息

参考已报道的植酸酶基因phyA全序列设计一对引物,用PCR方法从土曲霉穴Aspergillusterreus雪总DNA中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4kb的phyA基因编码区片段,对该片段进行了克隆与序列测定。进一步用该片段构建了pPIC9K-phyA分泌型表达载体,并转化毕赤酵母穴Pichiapastoris雪GS115。通过表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳分析,植酸酶在重组转化子中得到了有效分泌和高效表达。摇瓶诱导发酵132h后发酵液中植酸酶的活性可达167u·mL-1;表达产物在pH2.0～8.0均有活性,最适pH为5.5,最适温度为55℃。

关键词：土曲霉植酸酶 phyA基因毕赤酵母表达

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口蹄疫病毒多抗原基因VP_1-VP_3-3C在大肠杆菌中的融合表达

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湖北农业科学 2005年第2期44卷 17-20页

作者：李任峰何启盖洪琦华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

应用PCR扩增技术获得1564bp的片段,包含口蹄疫病毒VP1全长基因、VP3部分基因和编码3C裂解酶全长基因,连接到pMD-18T载体上,在获得重组质粒pMD-18T-P13C后,进行序列分析;并成功地构建了重组表达质粒PGEX-KG-P13C,将其转化大肠杆菌BL21(D... 详细信息

应用PCR扩增技术获得1564bp的片段,包含口蹄疫病毒VP1全长基因、VP3部分基因和编码3C裂解酶全长基因,连接到pMD-18T载体上,在获得重组质粒pMD-18T-P13C后,进行序列分析;并成功地构建了重组表达质粒PGEX-KG-P13C,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,收集菌体进行SDS-PAGE电泳。结果表明,P13C基因在大肠杆菌中获得成功表达,其表达产物为分子量83kDa的融合蛋白;能与猪抗FMDV血清发生反应,并为口蹄疫病的诊断及其基因工程疫苗的研究提供了依据。

关键词：口蹄疫病毒基因工程亚单位疫苗诊断抗原

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苏云金芽胞杆菌cry26Aa和cry28Aa基因共表达可在芽胞外壁内侧形成伴胞晶体

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微生物学报 2005年第6期45卷 955-958页

作者：张睿赵昌明喻子牛孙明华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

苏云金芽胞杆菌幕虫亚种的伴胞晶体在预芽胞外壁内侧形成,呈现晶体芽胞粘连的现象。根据已发表的cry26Aa1和cry28Aa1基因序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌幕虫亚种T02中扩增得到cry26Aa和cry28Aa基因,通过穿梭载体将这两个基因分别和同时... 详细信息

苏云金芽胞杆菌幕虫亚种的伴胞晶体在预芽胞外壁内侧形成,呈现晶体芽胞粘连的现象。根据已发表的cry26Aa1和cry28Aa1基因序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌幕虫亚种T02中扩增得到cry26Aa和cry28Aa基因,通过穿梭载体将这两个基因分别和同时转化到苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171后,透射电镜下可在芽胞外壁内侧和外侧同时观察到伴胞晶体,而单独表达时可在芽胞外壁外侧观察到伴胞晶体。结果表明,伴胞晶体在芽胞外壁内侧表达不单独依赖于启动子的时空调控,可能还受到晶体蛋白相互作用的影响。

关键词：苏云金芽胞杆菌芽胞外壁胞晶粘连 cry26 cry28

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苏云金芽胞杆菌拟步行甲亚种YBT-1765中稳定质粒

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微生物学报 2005年第6期45卷 832-836页

作者：韩冬梅黄军艳喻子牛孙明华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

从苏云金芽胞杆菌拟步行甲亚种YBT_1765中克隆得到一个大小约15.2kb的质粒pBMB175,构建了该质粒的限制性图谱,通过功能验证,将其最小的复制区定位在一个1151bp的片段上。分析了包含有这个复制区的一个大小为4152bp的核苷酸序列,该片段... 详细信息

从苏云金芽胞杆菌拟步行甲亚种YBT_1765中克隆得到一个大小约15.2kb的质粒pBMB175,构建了该质粒的限制性图谱,通过功能验证,将其最小的复制区定位在一个1151bp的片段上。分析了包含有这个复制区的一个大小为4152bp的核苷酸序列,该片段包含有3个编码框(ORF1、OFR2和ORF3)。氨基酸序列同源性比较发现,ORF1(767AA)与UvrD_旋促酶、重组酶RecD和RecB家族具有20%～30%的相似性;ORF2(149AA)没有发现与任何已知序列具有同源性;ORF3(83AA)与pGI3中一个未知功能的蛋白(ORF7)具有34%的相似性。通过缺失及序列比较分析推测ORF2可能编码一种新的复制蛋白。因此pBMB175的复制类型可能属于一类新的复制家族。利用最小复制区构建的重组质粒在无抗生素选择压力下可稳定遗传40多代,具备构建稳定遗传质粒载体的潜力。

关键词：苏云金芽胞杆菌质粒pBMB175 复制区序列分析质粒载体

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日本血吸虫22．6kD基因重组抗原的研究

日本血吸虫22．6kD基因重组抗原的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会

作者：付媛张雪娟赵俊龙何永强刘恩勇陈志权卢福庄彭公宽冯尚连李晓华浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江省农业科学院畜牧兽医研究所华中农业大学农业微生物学国家重点实验室浙江省进出口检验检疫局湖北省兽疫防治站湖北省潜江市畜牧局浙江省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省潜江市畜牧局浙江省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省潜江市畜牧局

为了得到重组的日本血吸虫22．6 kD膜相关蛋白,本研究设计了一对引物,以日本血吸虫mRNA 为模板,RT-PCR方法克隆了576 bp的Sj22．6 kD片段,测序结果表明该片段与已公布的Sj22．6基因序列 (U75510)同源性达到99％,将该基因片段克隆人原核... 详细信息

为了得到重组的日本血吸虫22．6 kD膜相关蛋白,本研究设计了一对引物,以日本血吸虫mRNA 为模板,RT-PCR方法克隆了576 bp的Sj22．6 kD片段,测序结果表明该片段与已公布的Sj22．6基因序列 (U75510)同源性达到99％,将该基因片段克隆人原核表达载体pGEX-KG并在大肠杆菌BL21 codon plus中表达,SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白分子量约48 kD,Western blot检测证实该重组抗原有良好的免疫原性,该研究为进一步研制日本血吸虫分子诊断试剂奠定了基础。

关键词：日本血吸虫 Sj22．6 kD 克隆表达

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细菌鞭毛研究概况及进展

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微生物学通报 2005年第6期32卷 124-127页

作者：李任峰何启盖周锐陈焕春华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室

鞭毛是细菌的一种特殊结构,约半数的杆菌、极少数球菌和所有的螺旋菌及弧菌都有鞭毛。鞭毛与细菌的运动有关,并在感染与免疫以及分类鉴定等方面发挥重要的作用,受到细菌研究者的高度重视。从细菌鞭毛的结构以及它在细菌致病性和免疫中... 详细信息

鞭毛是细菌的一种特殊结构,约半数的杆菌、极少数球菌和所有的螺旋菌及弧菌都有鞭毛。鞭毛与细菌的运动有关,并在感染与免疫以及分类鉴定等方面发挥重要的作用,受到细菌研究者的高度重视。从细菌鞭毛的结构以及它在细菌致病性和免疫中的作用最新研究进展加以概述,以供细菌研究者参考。

关键词：细菌鞭毛运动性抗原毒力相关因子

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B交配型因子对香菇双核体核型分离比的影响

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Acta Genetica Sinica 2005年第12期32卷 1301-1304页

作者：程水明林芳灿湖北黄岗师范学院黄岗436100 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室应用真菌研究所武汉430070

通过探明A或B交配型因子对双核体回收核型的影响,探讨了香菇双核体经原生质体形成和再生后两个成员核偏分离现象的遗传基础。结果表明,B因子或某些假定的与B因子连锁的基因明显影响去双核化后核的存活力,而A因子对此无明显影响。B因子... 详细信息

通过探明A或B交配型因子对双核体回收核型的影响,探讨了香菇双核体经原生质体形成和再生后两个成员核偏分离现象的遗传基础。结果表明,B因子或某些假定的与B因子连锁的基因明显影响去双核化后核的存活力,而A因子对此无明显影响。B因子的特异性与分离自两类异核体(A≠B≠和A=B≠)回收的成员核的存活比例密切相关。可以根据这种功能将B因子排成一个分级的序列。两个参试菌株中的4个B因子的特异性顺序为B1>B3>B4>B2。

关键词：香菇 B交配型因子原生质体偏分离

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香菇交配型因子偏分离现象的遗传分析

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自然科学进展 2005年第4期15卷 486-490页

作者：程水明林范学徐学锋李安政林芳灿华中农业大学应用真菌研究所农业微生物学国家重点实验室

以28个香菇菌株为材料,用统计学方法分析了菌丝原生质体单核体和孢子单核体的交配型比例.结果表明,菌丝原生质体单核体的两种交配型不呈预期的1:1之比的有17个,占总数的60.71％;孢子单核体的4种交配型不呈预期的1:1:1:1之比,占总数的4... 详细信息

以28个香菇菌株为材料,用统计学方法分析了菌丝原生质体单核体和孢子单核体的交配型比例.结果表明,菌丝原生质体单核体的两种交配型不呈预期的1:1之比的有17个,占总数的60.71％;孢子单核体的4种交配型不呈预期的1:1:1:1之比,占总数的47.06％.在两类交配型偏分离中,野生菌株的偏离程度均低于栽培菌株;正反亲本结实结果显示,无论在双核菌丝体所产生的F1代担孢子中,还是在由其F1代重组型担孢子配制而成的双核菌丝体所产生的F2代担孢子中,均以与相应双核菌丝体交配型相同的两种亲本型担孢子数量居多.在双-单杂交中,当受体交配型不同时,供体先导核可能相同,也可能不同,表明供体的核迁移既受B因子控制,也与细胞质有关.杂交双核体裂解后受体核比例显著偏多,表明细胞质中存在着与核选择有关的因子.

关键词：交配型因子遗传分析分离现象原生质体单核体孢子单核体统计学方法担孢子菌丝体香菇菌株栽培菌株偏离程度野生菌株孢子数量 F1代细胞质双核偏分离 F2代 B因子比例预期亲本杂交受体供体结实

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亚洲香菇Lentinula edodes系统发育学地位的重新评估与遗传多样性分析

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自然科学进展 2005年第10期15卷 1204-1210页

作者：徐学锋李安政程水明林范学林芳灿华中农业大学应用真菌研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070

测定了60个中国野生香菇菌株的rDNA的内转录间区(ITS)序列,结合GenBank已有的48个其他地区不同种的菌株的序列数据,构建Lentinula属内的系统发育树。结果将该属分成了两大支共7个谱系,西半球一支2个谱系,东半球一支5个谱系,聚类结果与... 详细信息

测定了60个中国野生香菇菌株的rDNA的内转录间区(ITS)序列,结合GenBank已有的48个其他地区不同种的菌株的序列数据,构建Lentinula属内的系统发育树。结果将该属分成了两大支共7个谱系,西半球一支2个谱系,东半球一支5个谱系,聚类结果与形态种的划分明显相关。亚洲菌株在东半球的5个谱系中占两席,系统发育关系分析表明这两大谱系所代表的种质资源的地位特殊,不可缺少。谱系Ⅴ的菌株数量明显扩大,覆盖范围的地理空白也得以填补,成为了亚洲香菇的主流谱系之一;谱系Ⅰ的菌株数量庞大,覆盖了绝大部分被研究区域,有进一步分化成两类的趋势。这表明中国(亚洲)是重要的香菇自然群体遗传多样性中心。将谱系Ⅰ分成Ⅰa和Ⅰb 两个亚类,与谱系Ⅴ一起进行亚洲范围内香菇的遗传多样性分析,发现中国东部沿海、西北高原和中国西南及喜马拉雅地区的多样性最为丰富,是亚洲香菇的3个多样性重点保护区域。

关键词：亚洲香菇 ITS序列系统发育遗传多样性遗传多样性分析香菇菌株系统发育学 GenBank 群体遗传多样性

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