检索结果-内蒙古大学图书馆

养殖与饲料 2012年第11期11卷 1-7页

作者：郭爱珍瞿明仁黄必志彭增起华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/华中农业大学动物医学院/国家肉牛牦牛产业技术体系疾病控制研究室武汉430070 江西农业大学动物科学技术学院/国家肉牛牦牛产业技术体系营养饲料研究室南昌330045 云南省草地动物科学研究院/国家肉牛牦牛产业技术体系营养饲料研究室昆明650212 南京农业大学食品科技学院/国家肉牛牦牛产业技术体系加工与质量控制研究室南京210095

近年来南方产区肉牛养殖发展迅猛,多数地区农户养殖肉牛效益显著,但仍有一些共性问题亟待解决。通过此次对南方产区肉牛标准化养殖发展调研发现,政府、养殖企业和农户均应采取一定的措施,努力探索更好的惠农政策和适宜的养殖模式,共同... 详细信息

近年来南方产区肉牛养殖发展迅猛,多数地区农户养殖肉牛效益显著,但仍有一些共性问题亟待解决。通过此次对南方产区肉牛标准化养殖发展调研发现,政府、养殖企业和农户均应采取一定的措施,努力探索更好的惠农政策和适宜的养殖模式,共同推动肉牛产业发展壮大。

关键词：肉牛养殖标准化南方产区调研

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牛病毒性腹泻-黏膜病的流行病学调查

牛病毒性腹泻-黏膜病的流行病学调查

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第四届全国牛病防制及产业发展大会

作者：邓明亮费文涛纪素坤张瑞陈颖钰韩明山吴蒙保善科郭爱珍华中农业大学动物医学院华中农业大学动物科技学院农业微生物学国家重点实验室内蒙古科尔沁牛业股份有限公司大连雪龙产业集团有限公司青海省海北藏族自治州畜牧兽医科学研究所

为了解我国北方地区牛感染牛病毒性腹泻病的情况,我们对内蒙古通辽市、辽宁大连市的两个大型屠宰场共440份肉牛血清和青海省五个县的400份牦牛血清进行了牛病毒性腹泻血清学抗原检测,三个地区均可检出抗原阳性血清,共检出抗原阳性血清6... 详细信息

为了解我国北方地区牛感染牛病毒性腹泻病的情况,我们对内蒙古通辽市、辽宁大连市的两个大型屠宰场共440份肉牛血清和青海省五个县的400份牦牛血清进行了牛病毒性腹泻血清学抗原检测,三个地区均可检出抗原阳性血清,共检出抗原阳性血清6份,平均阳性率为0.71%,最高阳性率为1.96%。选取其中的668份血清(肉牛血清392份、牦牛血清276份)进行了牛病毒性腹泻血清学抗体检测,共检出阳性血清392份,平均阳性率58.68%,最高阳性率达84.48%,最低阳性率20%。血清学抗原阳性的6份血清抗体检测均为阴性,表明肉牛、牦牛群均存在PI(持续感染)牛,PI牛检出率分别为0.77%、1.09%。结果表明,我国北方地区牛群感染牛病毒性腹泻病较为严重,且存在PI(持续感染)牛,应加强防控措施.

关键词：牛病毒性腹泻流行病学肉牛牦牛 PI

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福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良早期生长板消减cDNA文库的构建

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中国农业科学 2011年第4期44卷 829-834页

作者：宁官保田文霞王瑞覃平乔建钢李宏全李家奎毕丁仁潘思轶郭定宗山西农业大学动物科技学院华中农业大学动物医学院华中农业大学食品科技学院华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

【目的】为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减cDNA文库。【方法】将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福... 详细信息

【目的】为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减cDNA文库。【方法】将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福美双100 mg·kg-1,2 d后继续饲以基础日粮,诱发肉鸡TD。应用抑制消减杂交技术(SSH)构建正反向消减cDNA文库,用PCR验证两个文库中克隆的插入片段,随机抽取100个阳性克隆测序,对所测序列同源性分析和功能预测。【结果】从两个文库共获得2 227个有效阳性克隆,插入片段大小主要分布在200—1 000bp之间;所测序列中有97条ESTs与GenBank中的鸡基因序列同源性达到99%,且非冗余度达到68.7%;此外,有3条ESTs未找到同源序列。这些基因具有构成细胞外基质,参与软骨内骨化和骨的重构,调节骨发育,行使信号转导、血管发生,参与电子传递及能量代谢等功能。【结论】成功构建了消减cDNA文库,将为进一步点制cDNA芯片,筛选不同阶段的差异表达基因奠定了基础,也为肉鸡TD机理研究提供新线索。

关键词：消减cDNA文库胫骨软骨发育不良福美双抑制消减杂交(SSH) 差异表达基因

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表达乙型脑炎病毒PrM-E基因慢病毒载体的构建

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中国兽医科学 2011年第4期41卷 342-346页

作者：陈龙杨晓红徐敏朱碧波陈焕春曹胜波华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

利用RT-PCR方法扩增获得了乙型脑炎病毒PrM-E基因,并将之克隆至慢病毒载体系统中的转移质粒pHR-IRES-EGFP中,得到重组质粒pHR-PrM-E。将该质粒与包装质粒pCMV△8.2、囊膜质粒pVSV/G共转染293FT细胞,培养48h后收集细胞上清,并将之转导29... 详细信息

利用RT-PCR方法扩增获得了乙型脑炎病毒PrM-E基因,并将之克隆至慢病毒载体系统中的转移质粒pHR-IRES-EGFP中,得到重组质粒pHR-PrM-E。将该质粒与包装质粒pCMV△8.2、囊膜质粒pVSV/G共转染293FT细胞,培养48h后收集细胞上清,并将之转导293FT细胞。通过报告基因EGFP表达、间接免疫荧光和Western-blot检测,结果表明,上述三质粒共转染293FT细胞后,获得了假病毒,并且该假病毒可以高效转导正常293FT细胞。同时,PrM-E基因可以在被转导细胞中正确表达,从而为研制基于慢病毒载体的乙型脑炎病毒新型疫苗奠定了基础。

关键词：乙型脑炎病毒慢病毒载体 PrM-E基因

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禽多杀性巴氏杆菌脂蛋白E基因的原核表达及其对小鼠的免疫原性

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湖北农业科学 2011年第4期50卷 854-857页

作者：崔卫涛胡思顺王延昭周晓芬李自力肖运才毕丁仁华中农业大学动物医学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070

根据禽多杀性巴氏杆菌ATCC12 948株脂蛋白E基因(plpE)序列设计一对特异性引物,经PCR从禽多杀性巴氏杆菌C48-1株中扩增获得了全长plpE基因,大小约1kb。将plpE基因片段插入原核表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒pET-plpE。转化大肠杆... 详细信息

根据禽多杀性巴氏杆菌ATCC12 948株脂蛋白E基因(plpE)序列设计一对特异性引物,经PCR从禽多杀性巴氏杆菌C48-1株中扩增获得了全长plpE基因,大小约1kb。将plpE基因片段插入原核表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒pET-plpE。转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达获得了重组蛋白plpE。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白plpE约为37.8kD,与预期大小相符。Western blot检测结果表明,重组蛋白plpE能与C48-1菌体阳性血清发生特异性反应,用重组蛋白plpE免疫小鼠,二免后2周用10LD50 C48-1菌株攻毒即获得了100%的保护,表明该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步的交叉保护性试验研究和禽霍乱亚单位疫苗研制奠定了基础。

关键词：禽巴氏杆菌原核表达免疫原性

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南方产区肉牛标准化养殖发展问题调研报告

南方产区肉牛标准化养殖发展问题调研报告

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第四届全国牛病防制及产业发展大会

作者：郭爱珍瞿明仁黄必志彭增起华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院国家肉牛/牦牛产业技术体系疾病控制研究室江西农业大学动物科学技术学院国家肉牛/牦牛产业技术体系营养饲料研究室云南省草地动物科学研究院国家肉牛/牦牛产业技术体系营养饲料研究室南京农业大学食品科技学院国家肉牛/牦牛产业技术体系加工与质量控制研究室

根据农业部畜牧兽医司《关于促进畜禽标准化规模养殖发展问题调研方案》的要求以及体系办《关于促进肉牛牦牛标准化养殖发展问题调研的紧急通知》,南方产区内岗位专家和站长们根据各自分工,分别和团队成员一起组成调查小组,认真进行了... 详细信息

根据农业部畜牧兽医司《关于促进畜禽标准化规模养殖发展问题调研方案》的要求以及体系办《关于促进肉牛牦牛标准化养殖发展问题调研的紧急通知》,南方产区内岗位专家和站长们根据各自分工,分别和团队成员一起组成调查小组,认真进行了责任区内的调研工作,通过实地考察、座谈、问卷等多种形式,详细了解了南方产区肉牛标准化养殖发展的基本情况、成功做法、制约因素和问题建议等,现总结如下:

关键词：标准化养殖肉牛产业肉牛养殖场肉牛品种

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奶牛传染性鼻气管炎病毒gG基因PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医 2011年第10期38卷 94-98页

作者：王冰张敏敏邹新峰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

本试验旨在建立一种PCR技术,既能快速检测牛传染性鼻气管炎病毒,又能区分同属病毒牛疱疹病毒5型和伪狂犬病病毒。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒gG基因的特异性引物,建立PCR方法,对牛传染性鼻气管炎病毒参考毒株和阳性样本进行扩增,... 详细信息

本试验旨在建立一种PCR技术,既能快速检测牛传染性鼻气管炎病毒,又能区分同属病毒牛疱疹病毒5型和伪狂犬病病毒。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒gG基因的特异性引物,建立PCR方法,对牛传染性鼻气管炎病毒参考毒株和阳性样本进行扩增,结果均能扩增出一条463bp的特异性条带;对同属的牛疱疹病毒5型进行扩增,获得651bp和431bp两条带;对同属伪狂犬病病毒进行扩增,获得493bp的条带;而非相关病毒(如猪呼吸与繁殖综合征病毒等),不能扩增出条带。对牛传染性鼻气管炎病毒的检测灵敏度为2×10-3 PFU/mL。鉴于该方法具有良好的灵敏度和特异性,将在牛疱疹病毒感染诊断和标记疫苗免疫后的鉴别诊断方面具有良好的应用前景。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 PCR 牛疱疹病毒 gG基因

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BPIV-3和BVDV双重RT-PCR快速检测方法的建立

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动物医学进展 2011年第11期32卷 1-5页

作者：刘晓乐张敏敏陈颖钰胡长敏陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

参照GenBank中登录的牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)全基因序列,分别针对BPIV3特异性NP蛋白保守基因和BVDV保守区段E2基因设计2对引物,经优化反应条件建立了快速鉴别BPIV-3和BVDV的双重RT-PCR诊断方法。最佳扩增条件... 详细信息

参照GenBank中登录的牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)全基因序列,分别针对BPIV3特异性NP蛋白保守基因和BVDV保守区段E2基因设计2对引物,经优化反应条件建立了快速鉴别BPIV-3和BVDV的双重RT-PCR诊断方法。最佳扩增条件为94℃30s,56.2℃30s,72℃1min,循环30次;72℃延伸5min,16℃10min;BVDV引物浓度为1.0μmol/L,BPIV-3引物浓度为0.5μmol/L。采用该方法检测BPIV-3和BVDV参考病毒株,能同时扩增出预期为425bp和294bp大小的特异性片段,而扩增牛传染性鼻气管炎病毒、牛合胞体病毒、猪瘟病毒以及牛支原体、致病性大肠埃希菌、多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和鼠伤寒沙门菌等均呈阴性反应。对参考病毒株进行梯度稀释检测,结果证明该方法检测BPIV-3的灵敏度可达10-3 TCID50/0.1mL,而BVDV的灵敏度达102 TCID50/0.1mL。

关键词：双重PCR 检测方法牛副流感病毒3型牛病毒性腹泻病毒

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发达国家重大牛病防控历史和经验

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中国兽医学报 2011年第3期31卷 453-456页

作者：胡长敏郭爱珍潘志明焦新安陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学学院武汉430070 扬州大学生命科学与技术学院扬州225009

许多发达国家在重大牛病防控与消灭方面做得很成功,如已消灭牛口蹄疫,控制或消灭了牛结核,其防控策略可归纳为3个方面,即稳步控制消灭(净化)国内重大疫情,快速高效地扑灭国内突发疫情和严防外来疫情传入。随着全球经济一体化与贸易自由... 详细信息

许多发达国家在重大牛病防控与消灭方面做得很成功,如已消灭牛口蹄疫,控制或消灭了牛结核,其防控策略可归纳为3个方面,即稳步控制消灭(净化)国内重大疫情,快速高效地扑灭国内突发疫情和严防外来疫情传入。随着全球经济一体化与贸易自由化进程的深入,重大疫病防控将走向国际化,发达国家牛病防控经验对我国重大牛病和其他动物重大疫病的防控与根除具有重要借鉴意义。

关键词：牛疫病防控

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细胞凋亡的主要检测方法研究进展

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动物医学进展 2011年第8期32卷 89-92页

作者：张广智胡长敏陈颖钰刘颖李帅罗雨王金勇郭爱珍陈焕春华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室湖北武汉430070

细胞凋亡是生理性细胞死亡过程,凋亡在维持动物机体内环境平衡中扮演着极其重要的角色。细胞凋亡的准确检测是研究细胞凋亡相关机制,以及评价细胞凋亡在相应组织或疾病中影响的第一步。形态学是检测细胞凋亡的最直观的方法,至今一直作... 详细信息

细胞凋亡是生理性细胞死亡过程,凋亡在维持动物机体内环境平衡中扮演着极其重要的角色。细胞凋亡的准确检测是研究细胞凋亡相关机制,以及评价细胞凋亡在相应组织或疾病中影响的第一步。形态学是检测细胞凋亡的最直观的方法,至今一直作为细胞凋亡检测的金标准。DNA片段化检测主要有DNA ladder,TUNEL检测法和ELISA检测法。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡的早期事件。凋亡相关基因的检测包括促凋亡基因的检测和抑制凋亡基因的检测。流式细胞术检测细胞凋亡是近些年发展的简单快捷的方法,即可定性又可定量。Ca2+作为细胞内重要的信号分子其浓度和细胞凋亡关系密切相关。

关键词：细胞凋亡线粒体膜电位流式细胞术

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