检索结果-内蒙古大学图书馆

华中农业大学学报 2003年第1期22卷 90-94页

作者：刘华珍彭克美华中农业大学动物科学与动物医学学院武汉430070

leptin是肥胖基因 (obesegene ,OB基因 )的蛋白产物 ,具有广泛的生物学功能。据现有研究发现 ,leptin具有参与调节摄食、能量代谢、激素分泌、生长、生殖和免疫等过程的功能。leptin通过其受体发挥调节作用。笔者综述了leptin的受体、... 详细信息

leptin是肥胖基因 (obesegene ,OB基因 )的蛋白产物 ,具有广泛的生物学功能。据现有研究发现 ,leptin具有参与调节摄食、能量代谢、激素分泌、生长、生殖和免疫等过程的功能。leptin通过其受体发挥调节作用。笔者综述了leptin的受体、生物学功能、调控动物体重的作用机理及leptin抵抗。

关键词：肥胖基因 leptin 受体肥胖症生物学功能调控生物体重

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表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定

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中国农业科学 2006年第8期39卷 1716-1722页

作者：琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波华中农业大学动物医学院华中农业大学动物医学院武汉430070

目的以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性。方法将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂... 详细信息

目的以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性。方法将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂犬病病毒TK-/gG-/LacZ+基因组共转染IBRS-2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行重组病毒的筛选及生物学特性测定。结果利用检测PCV2ORF2基因和LacZ基因的PCR方法筛选到重组病毒TK-/gG-/ORF2+,同时用Southernblotting证实外源基因PCV2ORF2已成功插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中。间接免疫荧光试验(IFA)和Westernblotting结果显示重组病毒中PCV2ORF2基因获得了成功表达。对重组病毒的生物学特性研究表明,重组病毒与其亲本株在不同细胞上的增殖滴度相当,且重组病毒对小鼠无致病性,免疫小鼠后可诱导机体产生抗ORF2蛋白的特异性抗体。结论重组伪狂犬病毒构建成功,且表达的ORF2蛋白具有免疫原性。

关键词：猪2型圆环病毒 ORF2基因伪狂犬病毒 TK-/gG-/ORF2+ 鉴定

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基于分子印迹膜的检测牛奶中琥珀酸氯霉素残留传感方法的研究

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分析化学 2008年第10期36卷 1380-1384页

作者：张挪威丁明星刘国艳宋巍巍柴春彦华中农业大学动物医学院上海交通大学农业与生物学院

采用光聚合法在一次性丝网印刷电极上制备琥珀酸氯霉素分子印迹膜,然后将丝网印刷电极通过电极插口与电化学分析装置相连接,组装成检测琥珀酸氯霉素残留的电化学传感仪。使用与传感装置相连接的记录仪记录响应的结果。采用本传感仪建立... 详细信息

采用光聚合法在一次性丝网印刷电极上制备琥珀酸氯霉素分子印迹膜,然后将丝网印刷电极通过电极插口与电化学分析装置相连接,组装成检测琥珀酸氯霉素残留的电化学传感仪。使用与传感装置相连接的记录仪记录响应的结果。采用本传感仪建立了检测氯霉素的标准曲线并测试了实际牛奶样品中氯霉素含量。电镜学观察表明,与非印迹膜相比,在印迹膜表面形成大量直径约为100nm的印迹微孔。本传感仪装置检测琥珀酸氯霉素具有很高的灵敏度和特异性,检出限为2×10-9mol/L,检测线性范围为1×10-8～1.2×10-5mol/L,基于牛奶样品的检测回收率介于93.5%～95.5%之间。

关键词：分子印迹膜丝网印刷电极琥珀酸氯霉素光聚合反应

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伏安免疫法检测牛奶中氯霉素残留

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分析化学 2007年第12期35卷 1731-1735页

作者：宋巍巍丁明星张挪威刘海峰徐明刚刘国艳柴春彦华中农业大学动物医学院上海交通大学农业与生物学院

为探索用于现场检测牛乳中氯霉素(CAP)残留的高灵敏度及特异性强的免疫传感器方法,本实验在制备CAP单克隆抗体的基础上,以卵清蛋白-氯霉素(OVA-CAP)偶联物为包被抗原,并将其包被到聚苯乙烯反应板上;在孵育反应中,样品中的CAP与OVA-CAP... 详细信息

为探索用于现场检测牛乳中氯霉素(CAP)残留的高灵敏度及特异性强的免疫传感器方法,本实验在制备CAP单克隆抗体的基础上,以卵清蛋白-氯霉素(OVA-CAP)偶联物为包被抗原,并将其包被到聚苯乙烯反应板上;在孵育反应中,样品中的CAP与OVA-CAP竞争结合CAP单克隆抗体,洗涤后加入碱性磷酸酶(ALP)标记的二抗,经再次孵育及洗涤后加入对硝基苯磷酸(pNPP)底物液;反应终止后用线性导数伏安法记录pNPP水解产物的氧化峰电流。实验结果表明,用免疫传感法测试CAP的灵敏度高于传统的间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA)。该方法检测CAP的检出限为0.064μg/L;检测线性范围为0.15600μg/L,测试牛奶样品的平均回收率为89.8%。另外,由于免疫电化学传感器体积较小,便于携带,操作简单,可实现牛乳样品中CAP残留的现场检测。

关键词：氯霉素微分脉冲伏安法免疫传感方法

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猪白细胞介素-6在巴斯德毕氏酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达

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微生物学报 2005年第3期45卷 387-391页

作者：严琳顾贫陈焕春华中农业大学动物医学院武汉430070

白细胞介素6 (Interleukin_6 ,IL_6 )是一种具有多种生物学效应的细胞因子,在疾病诊断与疫苗佐剂领域有广阔的应用前景。在本试验中,猪白细胞介素_6 (pIL_6 )的cDNA序列被克隆入甲醇酵母(Pichiapastoris)分泌表达载体pPIC9K中,并转化入P... 详细信息

白细胞介素6 (Interleukin_6 ,IL_6 )是一种具有多种生物学效应的细胞因子,在疾病诊断与疫苗佐剂领域有广阔的应用前景。在本试验中,猪白细胞介素_6 (pIL_6 )的cDNA序列被克隆入甲醇酵母(Pichiapastoris)分泌表达载体pPIC9K中,并转化入P .pastorisGS115菌株。其重组菌株GS115 pPIC9K_IL6经1%甲醇诱导后,能分泌表达分子量约为2 4 5KD的重组蛋白,Westernblot确证为pIL_6。该酵母表达产物无N端糖基化修饰。用依赖IL6生长的B9细胞株检测提纯后的pIL_6 ,其生物学活性可达8×10 4 IU mg。

关键词：猪白细胞介素6 Pichia pastoris 酵母表达生物学活性

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M蛋白共表达的自杀性DNA疫苗的构建及其免疫应答

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中国农业科学 2006年第5期39卷 1011-1017页

作者：江云波方六荣肖少波张辉陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070

目的探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自杀性DNA疫苗的免疫效果。方法将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游,获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。结果Westernblot检测证实O... 详细信息

目的探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自杀性DNA疫苗的免疫效果。方法将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游,获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。结果Westernblot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达,并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c小鼠,首免后4周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周的中和抗体最高可达1﹕32,同时还可检测到较高的特异性细胞免疫应答。进一步将pSFV-56免疫断奶仔猪,二免后4周即可产生1:8～1:16的中和抗体,直到二免后6周仍维持这种高水平的中和抗体,而且也可检测到较高的特异性细胞免疫应答。结论上述研究结果表明pSFV-56具有良好的免疫原性和诱发免疫动物产生较高免疫应答的能力。

关键词： “自杀性”DNA疫苗猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5和M蛋白共表达

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7~12周龄京粉6号蛋鸡氨基酸需要量动态预测模型研究

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动物营养学报 2024年第11期36卷 7015-7027页

作者：武佳玉王亚楠安钰田昌宇王凌峰齐德生华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070

本试验基于析因法原理,通过将营养需要分为生长需要和维持需要2部分,建立7~12周龄京粉6号蛋鸡氨基酸需要量动态预测模型。生长需要试验选取96只7周龄京粉6号蛋鸡,随机分为6个重复,每个重复16只鸡,均饲喂基础饲粮;试验期为7~12周龄,用于... 详细信息

本试验基于析因法原理,通过将营养需要分为生长需要和维持需要2部分,建立7~12周龄京粉6号蛋鸡氨基酸需要量动态预测模型。生长需要试验选取96只7周龄京粉6号蛋鸡,随机分为6个重复,每个重复16只鸡,均饲喂基础饲粮;试验期为7~12周龄,用于建立氨基酸生长需要量模型。维持需要试验分别于7~8周龄、9~10周龄和11~12周龄各进行1次,每次选取60只蛋鸡,随机分为限饲组和无氮饲粮组,每组6个重复,每个重复5只鸡;每次试验期为7 d,建立氨基酸维持需要量模型。综合氨基酸生长需要量和维持需要量,建立氨基酸需要量动态预测模型。结果表明:1)7~12周龄蛋鸡生长曲线拟合方程为:BW_(t)=3224.649exp[-3.561exp(-0.012 t)](R^(2)=0.999)。式中:BW_(t)为t日龄体重(g);t为日龄。2)随着日龄的增长,7~12周龄京粉6号蛋鸡胴体和羽毛氨基酸模式无显著差异(P>0.05)。3)7~12周龄蛋鸡氨基酸需要量模型为:TAAR={14.207exp[-3.561exp(-0.012 t)-0.012 t]+53.321exp[-7.122exp(-0.012 t)-0.012 t]}×1000×AAc/NPU+{-1.033exp[-3.561exp(-0.012 t)-0.012 t]+44.434exp[-7.122exp(-0.012 t)-0.012 t]}×1000×AAf/NPU+{19.67×{3224.649exp[-3.561exp(-0.012 t)]}^(0.75)×AAm+C}/SID;TAAR=(8×10^(-7)BW^(2)+0.004 BW+0.706)×1000×AAc/NPU+(-4×10^(-6)BW^(2)+0.009 BW-2.936)×1000×AAf/NPU+(19.67×BW^(0.75)×AAm+C)/SID。式中:TAAR为氨基酸需要量(mg/d);AAc为胴体氨基酸模式(%);AAf为羽毛氨基酸模式(%);NPU为蛋白质净利用率(%);AAm为用于维持的氨基酸模式(%);C为肌酐排泄量(mg/d);SID为氨基酸消化率(%);t为日龄;BW为体重(g);BW^(0.75)为代谢体重(g)。综上所述,本试验利用析因法建立了7~12周龄京粉6号蛋鸡氨基酸需要量动态预测模型。

关键词：京粉6号蛋鸡析因法氨基酸需要量动态预测模型

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13~17周龄京粉6号蛋鸡微量元素需要量和动态预测模型研究

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4316-4328页

作者：米小梅王凌峰程千惠武佳玉安钰许璐镕齐德生华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070

本试验旨在基于析因法原理,通过饲养试验和比较屠宰试验确定13~17周龄京粉6号蛋鸡微量元素需要量,并建立动态预测模型。试验选用健康且初始体重为(845.47±28.65)g的13周龄京粉6号蛋鸡198只,随机选取102只,分为6个重复,每个重复17只... 详细信息

本试验旨在基于析因法原理,通过饲养试验和比较屠宰试验确定13~17周龄京粉6号蛋鸡微量元素需要量,并建立动态预测模型。试验选用健康且初始体重为(845.47±28.65)g的13周龄京粉6号蛋鸡198只,随机选取102只,分为6个重复,每个重复17只,用于生长需要的测定;另外96只蛋鸡用于维持需要的测定。维持需要试验根据不同采食量分为100%自由采食组、70%自由采食组和40%自由采食组,其中100%自由采食组数据与生长需要试验数据共用,70%自由采食组和40%自由采食组每组6个重复,每个重复8只鸡。试验期5周。结果表明:1)蛋鸡生长曲线为y=1925.600exp-4.347exp(-0.02 t);体增重与日龄的动态关系为y′=1180.25exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02]。式中:y表示体增重(g);t表示日龄。2)每只蛋鸡每天铜、铁、锌、锰的生长需要量分别为0.01~0.02 mg/d、0.28~0.47 mg/d、0.21~0.32 mg/d、0.01~0.03 mg/d,维持需求量分别为0.01、0.20、0.08、0.02 mg/d。3)蛋鸡铜、铁、锌、锰需要量与日龄的动态预测模型为:N_(铜)={0.011[1925.600exp-4.347exp(-0.02 t)]^(0.75)-2.242exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+4.545exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]-0.118exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+0.455exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]}/ADFI/A;N_(铁)={0.211[1925.600exp-4.347exp(-0.02 t)]^(0.75)-42.371exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+136.361exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]-22.661exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+40.908exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]}/ADFI/B;N锌={0.084[1925.600exp-4.347exp(-0.02 t)]^(0.75)+12.747exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+4.545exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]-24.785exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+45.454exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]}/ADFI/C;N_(锰)={0.021[1925.600exp-4.347exp(-0.02 t)]^(0.75)-0.236exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+2.273exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]+0.590exp[-4.347exp(-0.02 t)-0.02 t]+0.045exp[-8.694exp(-0.02 t)-0.02 t]}/ADFI/D。式中:N表示每只蛋鸡每天饲粮中微量元素需要量(mg/kg);t表示日龄;ADFI表示平均日采食量(kg);A、B、C、D分别表示铜、铁、锌、锰的消化率(%)。4)蛋鸡铜、铁、锌、锰需要量与体重的动态预测模型为:N_(铜)=(3.05×10^(-7) LBW^(2)-0.000703 LBW+0.3642+0.011 BW^(0.75))/ADFI/A;N_(铁)=(3.4×10^(-6))LBW^(2)-0.0072 LBW+4.3268+0.211 BW^(0.75))/ADFI/B;N锌=(0.0012 LBW-0.2953+0.084 BW^(0.75))/ADFI/C;N_(锰)=(-1.8×10^(-6) LBW^(2)+0.0039 LBW-1.897+0.021 BW^(0.75))/ADFI/D。式中:N表示每只蛋鸡每天饲粮中微量元素需要量(mg/kg);LBW表示活体重(g);BW^(0.75)表示代谢体重(kg);ADFI表示平均日采食量(kg);A、B、C、D分别表示铜、铁、锌、锰的消化率(%)。综上所述,本试验得出13~17周龄京粉6号蛋鸡铜、铁、锌、锰需求量分别为0.02~0.03 mg/d、0.48~0.67 mg/d、0.29~0.40 mg/d、0.03~0.05 mg/d,并建立了动态预测模型。

关键词：蛋鸡微量元素需要量动态预测模型

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口蹄疫病毒P1基因在大肠杆菌中的高效表达及其生物活性的初步分析

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生物工程学报 2005年第1期21卷 163-166页

作者：余晓岚肖少波方六荣胡梦雨严琳董晓辉陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070

将口蹄疫病毒 (FMDV)结构蛋白基因P1的完整cDNA序列插入原核表达性载体pGEX KG中 ,使P1基因与GST融合 ,获得融合表达质粒pKG P1,转化E .coliBL2 1 (DE3) ,经IPTG诱导 ,SDS PADE结果表明GST P1融合蛋白获得高效表达 ,Western blot检测证... 详细信息

将口蹄疫病毒 (FMDV)结构蛋白基因P1的完整cDNA序列插入原核表达性载体pGEX KG中 ,使P1基因与GST融合 ,获得融合表达质粒pKG P1,转化E .coliBL2 1 (DE3) ,经IPTG诱导 ,SDS PADE结果表明GST P1融合蛋白获得高效表达 ,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有免疫学活性 ,表达产物主要存在于细菌裂解液上清中。进一步采用GST纯化试剂盒纯化P1蛋白并作为诊断抗原 ,建立了P1 ELISA诊断方法 ,与FMD间接血凝 (IHA)检测方法平行检测 86 4份血清样品 ,总的符合率达87%。

关键词：口蹄疫病毒(FMDV) P1基因高效表达生物活性分析

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乳胶凝集试验检测H5亚型禽流感病毒血凝素抗体的研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 942-946页

作者：喻正军金梅林徐晓娟张瑞华陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070

利用原核表达并经过纯化的H5亚型禽流感病毒的血凝素蛋白做为抗原,经碳二亚胺(EDAC)将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的蛋白量和偶联时间进行合理选择,建立H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白乳胶凝集试验的方法。临床检测H5亚... 详细信息

利用原核表达并经过纯化的H5亚型禽流感病毒的血凝素蛋白做为抗原,经碳二亚胺(EDAC)将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的蛋白量和偶联时间进行合理选择,建立H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白乳胶凝集试验的方法。临床检测H5亚型禽流感病毒实验免疫鸡血清126份,同血凝抑制试验相比,其敏感性为87.03%,特异性为88.8%,两者的符合率为87.30%。结果证明建立的方法可用于H5亚型禽流感抗体水平监测和流行病学调查。

关键词：禽流感病毒血凝素(HA)蛋白羧化乳胶乳胶凝集试验(LAT)

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