检索结果-内蒙古大学图书馆

中华器官移植杂志 2009年第10期30卷 616-619页

作者：宫念樵陈知水曾凡军明长生张伟杰林正斌周平陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其... 详细信息

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其中术后1～3年者14名，3～5年者11名，5年以上者5名）。以GFR作为评估供、受者肾功能的主要指标，比较供、受者手术前后的肾功能以及血压和尿蛋白。GFR的计算采用同位素发射计算机辅助断层显像法（GFRECT法）、24h尿肌酐（Cr）清除率法（GFR-24h Urine法）及Cockcroft-Gault公式法（GFR-Cr法）。结果取肾前106名供者的GFR-ECT和GFR—Cr分别为（1．51±0．13）和（1．99±0．42）ml／s，GFR-ECT是GFR—Cr的75．8％；术后第5天，供者的GFR—Cr为（1．40±0．33）ml／s，为术前的70．5％；术后3个月内、3个月至1年和1年以上者的GFR-Cr分别为（1．47±0．28）、（1．36±0．24）和（1．37±0．23）ml／s，分别为取肾术前的73．7％、68．0％和68．6％；术后1～3年者、3～5年者及5年以上者的GFR-Cr与超过1年者整体的GFR-Cr比较，差异无统计学意义（P〉O．05）。4名供者术后尿蛋白为±，均为术后超过1年者；4名供者血压升高。术后3个月、1年及1年以上，受者的GFR-Cr分别为（1．09±0．26）、（1．20±0．31）和（1．07±0．29）ml／s。结论术后近期供者的GFR会下降，并小幅波动，术后中长期其GFR接近术前70％的水平，并趋于稳定。亲属活体供肾移植术后供、受者具有良好的安全性。

关键词：肾移植活体供者手术后期间肾功能试验

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西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较

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中华器官移植杂志 2009年第2期30卷 100-102页

作者：何凡陈知水蔡明徐胜元吴敏华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β... 详细信息

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β（TGF-β）；TGF-β＋白细胞介素6（IL-6）；TGF-β＋IL-6＋SRL；TGF-β＋IL-6＋CsA。72h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平，观察CD4^＋T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4^＋T淋巴细胞体外分化的影响。结果在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后，TGF-β可诱导Foxp3^＋细胞（调节性T淋巴细胞，Treg）的增殖与分化，而TGF-β＋IL6可诱导Th17细胞的增殖与分化。在培养体系中加入SRL和CsA，均可使Th17细胞的增殖与分化减少；SRL可促进Treg的增殖与分化，而CsA抑制Treg的增殖与分化。结论SRL可以促进CD4^＋T淋巴细胞向Treg增殖与分化，而抑制Th17细胞的增殖与分化；CsA既抑制Treg的增殖与分化，又抑制Th17细胞的增殖与分化。

关键词：西罗莫司环孢菌素 T淋巴细胞细胞分化

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门静脉输注诱导耐受中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的不同作用

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武汉大学学报（医学版） 2009年第3期30卷 290-293,F0002页

作者：何凡陈知水徐胜元蔡明吴敏李红洲华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并... 详细信息

目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并比较心脏移植物存活时间。结果:过继输注PVI鼠T细胞后,可以转移耐受;过继输注PVI鼠CD4+T细胞,可使供体来源的C57供心存活时间延长,而对第三系C3H供心存活时间无明显延长。过继输注PVI鼠CD8+T细胞无此效应。结论:在门静脉输注诱导耐受的模型中,CD4+T细胞可以转移耐受,且此耐受为抗原特异性,CD8+T细胞无此效应。

关键词： T细胞门静脉输注免疫耐受

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反义ERK2基因对结缔组织生长因子诱导肾小管上皮细胞向间充质转化的调控效应

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第2期38卷 153-157页

作者：丁召陈知水宫念樵陈曦林蔡明郭晖华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的研究细胞外信号调节激酶2(ERK2)信号转导通路对结缔组织生长因子(CTGF)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转化的调控效应。方法腺病毒介导的反义ERK2基因(Adanti-ERK2)按感染强度50、100、200转染HK-2细胞,确定最适感染强度... 详细信息

目的研究细胞外信号调节激酶2(ERK2)信号转导通路对结缔组织生长因子(CTGF)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转化的调控效应。方法腺病毒介导的反义ERK2基因(Adanti-ERK2)按感染强度50、100、200转染HK-2细胞,确定最适感染强度。按作用因素的不同将HK-2细胞分为对照组、Ad-LacZ组、CTGF组和Adanti-ERK2组。免疫组织化学检测E-Cadherin和Vi mentin的表达,Western blot法检测E-Cadherin、Vi mentin及ERK2的表达变化;细胞接种Boyden小室1、3、5 d时检测各组HK-2细胞迁移数目的变化。结果①Adanti-ERK2转染HK-2细胞最适感染强度为100。②HK-2细胞在CTGF刺激下E-Cadherin蛋白表达明显减少,Vi mentin表达增加,同时细胞内的ERK2蛋白表达显著增加;而Adanti-ERK2组E-Cadherin和Vi mentin表达变化不明显,ERK2蛋白表达较对照组明显减少。③接种5 d,HK-2细胞在CTGF刺激下细胞运动能力显著高于其他各组,而Adanti-ERK2组与对照组和Ad-LacZ组相比差异无显著性意义。结论以反义ERK2基因治疗可以有效阻断CTGF诱导的肾小管上皮细胞向间充质转化。提示ERK2信号转导通路在该转化中发挥重要作用。

关键词：反义ERK2基因结缔组织生长因子上皮细胞-间充质转化纤维化

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CD3/CD46共刺激通路调控同种移植免疫反应的实验研究

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中国免疫学杂志 2009年第1期25卷 68-71页

作者：陈栋张驰张艳黄亚冰朱珉刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉430030

目的:探讨CD3/CD46共刺激通路对同种移植免疫反应的调控作用及其机制。方法:分离转人CD46的C57BL/6小鼠的脾脏淋巴细胞,采用MACS免疫磁珠分选CD4+T细胞,以阴性对照组作为对照,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共... 详细信息

目的:探讨CD3/CD46共刺激通路对同种移植免疫反应的调控作用及其机制。方法:分离转人CD46的C57BL/6小鼠的脾脏淋巴细胞,采用MACS免疫磁珠分选CD4+T细胞,以阴性对照组作为对照,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素2(IL-2),γ-干扰素(γ-IFN),白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGFβ-)的水平,并以BALB/c小鼠的脾细胞作为刺激细胞,以转人CD46的C57BL/6小鼠的淋巴细胞作为反应细胞进行同种混合淋巴细胞培养,MMT法检测淋巴细胞增殖活性。结果:与CD3组或阴性对照组相比,ConA、CD3/CD28、CD3/CD46和CD3/CD28/CD46共刺激后,CD4+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/CD46共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/CD46共刺激组显著增高(P<0.05)。CD3/CD28共刺激后,IL-2和γ-IFN水平较阴性对照组和CD3组显著升高(P<0.05),CD3/CD46共刺激后,IL-10和TGFβ-水平较阴性对照组、ConA组、CD3组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05)。CD3/CD46共刺激后可以显著地抑制同种混合淋巴细胞的增殖反应(P<0.05)。结论:CD3/CD46共刺激通路可以诱导CD4+T细胞产生IL-10和TGFβ-,抑制同种移植免疫反应的发生。

关键词： CD46 共刺激分子同种移植

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肝窦内皮细胞在肝脏免疫耐受中的作用

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现代免疫学 2009年第1期29卷 85-88页

作者：徐胜元何凡陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室教育部器官移植实验室武汉430030

LSEC是一群独一无二的器官常驻抗原提呈细胞。它们位于一个理想的解剖位置,能够高效而迅速地摄取外源性抗原,并通过其表面的MHC II和I类分子将处理后的抗原肽分别提呈给CD4+T细胞和CD8+T细胞,使CD4+T细胞不能向Th1表型分化,甚至变为调节... 详细信息

LSEC是一群独一无二的器官常驻抗原提呈细胞。它们位于一个理想的解剖位置,能够高效而迅速地摄取外源性抗原,并通过其表面的MHC II和I类分子将处理后的抗原肽分别提呈给CD4+T细胞和CD8+T细胞,使CD4+T细胞不能向Th1表型分化,甚至变为调节性T细胞;使CD8+T细胞缺乏特异性的细胞毒作用,不能大量分泌IFN-γ和IL-2。同时,LSEC还可以通过多条途径诱导活化的T细胞发生凋亡和影响DC的功能。LSEC的这些功能最终使机体达到对某一抗原的特异性免疫耐受。

关键词：肝窦内皮细胞免疫耐受肝脏

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大鼠胰岛的分离和纯化

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第3期38卷 413-416页

作者：侯凌尹注增向莹李俊华陈实陈刚罗小平华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试... 详细信息

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

关键词：大鼠胰岛分离纯化

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单肺移植治疗肺淋巴管平滑肌瘤病一例

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中华器官移植杂志 2009年第8期30卷 499-500页

作者：昌盛孙威严华汤应雄陈孝平朱学海周鸿敏付向宁周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院普胸外科武汉430030

2006年11月，我院对1例肺淋巴管平滑肌瘤病患者成功施行了右侧单肺移植，目前受者存活良好，现报道如下。

关键词：肺淋巴管平滑肌瘤病单肺移植移植治疗

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利用DIGE和RP-HPLC-ESI/MS技术寻找慢性移植肾失功患者血清标志物

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实用医学杂志 2009年第20期25卷 3363-3366页

作者：高英吴轲徐逸周鸿敏何文涛张维娜林星光蔡兰军雒真龙方泽民郭晖周绍棠昌盛杜敦峰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部卫生部器官移植重点实验室武汉市430030

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组... 详细信息

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组)、急性排斥组(AR组)和健康对照组(N组)。血清样本经多重亲和排除柱去除高丰度蛋白处理后,使用2-DDIGE技术找到差异蛋白点。切下这些差异蛋白点,胰蛋白酶消化,经RP-HPLC-ESI/MS分析鉴定,在另一独立样本中对鉴定出的差异蛋白Galectin-7进行ELISA验证。结果:在CGD组患者血清中差异表达的蛋白共有39个,质谱鉴定出22个,包括载脂蛋白A-I前体,补体C4-A前体,Galectin-7等。ELISA结果提示CGD组患者血清中Galectin-7的表达较SRF组和N组有明显增高。结论:找到的这些差异蛋白具有不同的生物功能,为大样本、多中心的验证奠定了基础。Galectin-7可能是CGD的血清标志物,并对CGD的发病机制和治疗策略提供新的思路。

关键词：肾移植慢性移植物失功蛋白组学血清

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肥大细胞体外诱生CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的作用

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现代免疫学 2009年第6期29卷 453-457页

作者：张维娜吴轲周鸿敏何文涛高英汪理林星光方泽民蔡兰军周巧丹雒真龙陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比... 详细信息

探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1∶2、1∶1、2∶1)置于48孔培养板中培养,作为三个实验组;未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3抗体和CD28抗体各2μg/ml,IL-2 1 000U/ml,5 d后流式检测Foxp3表达情况。RT-PCR,免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。与对照组相比,实验组Foxp3表达均升高(对照组:3.37%±0.40%;实验组为:8.23%±0.80%、10.87%±1.25%、13.63%±0.55%)。RT-PCR和免疫组化均检出TGF-β1表达。肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,可能与肥大细胞表达TGF-β1有关。

关键词：小鼠肥大细胞 CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞 TGF-β1

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