检索结果-内蒙古大学图书馆

ICOS—ICOSL和CD28-B7共刺激信号对大鼠角膜移植排斥反应调控效应的比较

中华器官移植杂志 2009年第8期30卷 456-459页

作者：宫念樵王海灏丁召明长生张伟杰陈知水陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察阻断可诱导性共刺激分子及其配体（ICOS-ICOSL）或CD28B7共刺激信号对大鼠角膜移植排斥反应的影响，并比较其差异。方法制备腺病毒载体介导的诱导性共刺激分子融合蛋白（AdICOSIg）和腺病毒介导的细胞毒T淋巴细胞抗原4融合蛋白... 详细信息

目的观察阻断可诱导性共刺激分子及其配体（ICOS-ICOSL）或CD28B7共刺激信号对大鼠角膜移植排斥反应的影响，并比较其差异。方法制备腺病毒载体介导的诱导性共刺激分子融合蛋白（AdICOSIg）和腺病毒介导的细胞毒T淋巴细胞抗原4融合蛋白（AdCTLA4Ig）。以DA大鼠为供者，Lewis大鼠为受者，进行角膜移植：受者分别接受经Adβ-Gal、AdICOSIg和AdCTLA4Ig转染的角膜移植，分别为局部Adβ-Gal组、局部AdICOSIg组和局部AdCTLA4Ig组；受者分别接受未经处理的角膜移植，并于移植前24h腹腔注射Adβ-Gal、移植后48h腹腔注射AdICOSIg或移植前24h腹腔注射AdCTLA4Ig，分别为全身Adβ-Gal组、全身AdICOSIg组和全身AdCTLA4Ig组；以接受未经处理的角膜移植者为空白对照。术后每日于手术显微镜下观察移植角膜的透明度，以判断排斥反应的发生情况。基因转染后7d，检测受者血清ICOSIg和CTLA41g的浓度以及抗腺病毒抗体水平。结果空白对照组移植角膜存活时间为（13．1±0．3）d，局部AdICOSIg组、局部AdCTLA4Ig组和全身AdCTLA4Ig组移植角膜的存活时间长于空白对照组，分别为（14．2±0．8）d（P〈0．05）、（15．8±0．6）d（P〈0．01）和（22．7±4．3）d（P〈0．01），局部AdCTLA4Ig组和全身AdCTLA4Ig组各有1例未发生排斥反应。全身AdCTLA4Ig组受者的血清CTLA4Ig浓度较高，其抗腺病毒载体抗体水平则较低。结论CD28137与ICOS-ICOSL共刺激信号在免疫调节效应上存在差异，阻断CD28B7信号所获得的延长移植角膜存活时间的效果优于阻断ICOS-ICOSL者。

关键词：基因疗法角膜移植腺病毒科抗原,CD28 抗原,CD80

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门静脉输注供者脾细胞诱导的供者特异性免疫低反应性

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中华器官移植杂志 2009年第8期30卷 465-468页

作者：徐胜元何凡吴敏蔡明丁召郑翔陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨经门静脉输注供者脾细胞能否诱导皮肤移植小鼠产生供者特异性的免疫低反应性及其可能机制。方法取Balb／c小鼠，随机分为空白对照组（经小鼠门静脉输注RPMI1640培养液）、受者脾细胞组（经小鼠门静脉输注Balb／c小鼠脾细胞）、... 详细信息

目的探讨经门静脉输注供者脾细胞能否诱导皮肤移植小鼠产生供者特异性的免疫低反应性及其可能机制。方法取Balb／c小鼠，随机分为空白对照组（经小鼠门静脉输注RPMI1640培养液）、受者脾细胞组（经小鼠门静脉输注Balb／c小鼠脾细胞）、供者脾细胞组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞）、空白移植对照组（经小鼠门静脉输注RPMI1640培养液，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）、实验对照组（经小鼠门静脉输注Balb／c小鼠脾细胞，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）、实验组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）以及第三方移植组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞，7d后移植C3H小鼠的皮肤）。记录空白移植对照组、实验对照组、实验组和第三方移植组移植皮肤的存活时间，并观察移植皮肤的病理学变化；脾细胞输注后7d，分别获取空白对照组、受者脾细胞组和供者脾细胞组小鼠的外周血、脾脏和肝脏，用流式细胞仪测定样本中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞（CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞）的比例。结果实验组移植皮肤的存活时间为（19．8±4．6）d，明显长于空白移植对照组、实验对照组和第三方移植组，但仍未达到长期存活。皮肤移植后7d，空白移植对照组和实验对照组的移植皮肤呈现重度急性排斥反应的病理学改变，而实验组移植皮肤呈现中度急性排斥反应的病理学改变。供者脾细胞组外周血、肝脏和脾脏中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞比例明显高于空白对照组和受者脾细胞组。结论门静脉输注供者脾细胞可特异性地延长供者皮肤移植物的存活时间，减轻移植物的排斥反应，该效应可能与受者体内的CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞增加有关。

关键词： T淋巴细胞,调节门静脉免疫耐受抗原,CD4 抗原,CD25

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抑制Caspase-8基因表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用

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中华器官移植杂志 2009年第11期30卷 678-681页

作者：陈栋朱珉郭晖刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8（Caspase-8）基因的表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法构建针对大鼠Caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。将Lewis大鼠随机分为3组，每组8只。（1）假手术组：麻... 详细信息

目的观察抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8（Caspase-8）基因的表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法构建针对大鼠Caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。将Lewis大鼠随机分为3组，每组8只。（1）假手术组：麻醉后，取腹部正中切口，缝合关腹；（2）磷酸盐缓冲液（PBS液）组：阻断肝门血流前48h经门静脉注射PBS液1ml，然后行肝脏缺血再灌注；（3）shRNA组：阻断肝门血流前48h经门静脉注射Caspase-8 shRNA 50μg（总体积为1m1），然后行肝脏缺血再灌注。肝脏缺血再灌注的方法为阻断大鼠70％入肝血流40min。于再灌注6h、12h、24h、3d、5d、7d时检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；检测肝组织中Caspase-8 mRNA的表达、细胞凋亡情况、丙二醛（MDA）以及超氧化物岐化酶（SOD）的含量。结果与PBS液组比较，shRNA组再灌注6、12、24h，血清中A11、和AST水平显著降低（P〈0．05）；肝组织中Caspase-8mRNA水平、肝细胞凋亡指数（shRNA组和PBS液组分别为22．33％±4．28％和35．24％±2．33％）以及肝组织中MDA含量[shRNA组和PBS液组分别为（94．5±11．2）nmol／mg和（133．5±12．4）nmol／mg]均显著降低（P〈0．05），而肝组织中SOD活性显著升高[shRNA组和PBS液组分别为（21．6±3．7）U／mg和（12．2±3．1）U／mg，P〈0．05]。结论通过RNA干扰Caspase-8基因的表达可以抑制肝细胞凋亡的发生，减轻肝脏缺血再灌注损伤。

关键词：肝脏再灌注损伤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8 RNA干扰

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猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学特点

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中华器官移植杂志 2009年第9期30卷 515-518页

作者：陈松李俊华向莹钟山郭晖王虹吴瑛朱建国陈实陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反... 详细信息

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反应时对移植肾进行免疫组织化学（测定补体、抗体的沉积及各类型淋巴细胞浸润情况）及病理学分析。结果3只受者均发生了加速性排斥反应。其中2只受者在预致敏后血清中供者特异性抗体明显增加，对供者的淋巴毒反应明显升高；肾移植后受者血清中供者特异性抗体及针对供者的淋巴毒进一步升高。苏木精－伊红染色显示排斥反应的移植肾内有明显的动脉坏死、血栓形成、间质出血、中性粒细胞浸润；免疫组织化学及荧光染色显示移植肾内有大量的补体、抗体沉积（主要为IgG），而各种类型的淋巴细胞浸润少见。另1只受者体内的供者特异性抗体及对供者淋巴毒反应的升高程度不如前2只明显，病理学变化以肾小管损伤为主。结论皮肤移植预致敏可以诱导受者产生程度不等的预存抗体，导致大多数移植肾在术后早期发生主要由抗体和补体介导的严重的急性体液性排斥反应。

关键词：猴肾移植皮肤移植抗体

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实体器官移植术后新生恶性肿瘤23例的临床分析

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中华器官移植杂志 2009年第8期30卷 487-489页

作者：杜敦峰陈孝平陈知水曾凡军明长生林正斌魏来宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的提高对文体器官移植术后新生恶性肿瘤的认识、诊断和治疗水平。方法回顾性分析1977年至2009年5月期间21例肾移植和2例肝移植患者术后新生恶性肿瘤的随访资料。结果实体器官移植术后新生恶性肿瘤的23例患者中，男性16例，女性7例；... 详细信息

目的提高对文体器官移植术后新生恶性肿瘤的认识、诊断和治疗水平。方法回顾性分析1977年至2009年5月期间21例肾移植和2例肝移植患者术后新生恶性肿瘤的随访资料。结果实体器官移植术后新生恶性肿瘤的23例患者中，男性16例，女性7例；发病年龄21～72岁，平均51．26岁。从器官移植到发生肿瘤的时间为3～216个月不等，平均70．65个月。肿瘤组织学类型包括：膀胱癌和肾盂输尿管移行细胞癌5例；肾癌2例；肝癌6例（其中3例乙型肝炎病毒血清标志阳性，3例丙型肝炎病毒血清标志阳性）；乳腺癌2例；胃癌2例；直肠癌、结肠癌、肺癌、鼻咽癌、宫颈癌和移植后淋巴组织增生性疾病各1例。肿瘤确诊后，首先调整患者的免疫抑制方案；文体器官肿瘤首选根治性手术，切除肿瘤；辅以全身、介入或局部灌注化疗和放疗。共13例接受手术治疗，11例接受化疗或介入性化疗栓塞治疗，2例接受放疗。随访至2009年5月，仅有7例患者存活，其中长期存活5例。结论实体器官移植术后新生恶性肿瘤是严重影响移植患者远期存活的危险因素；早期诊断，早期治疗有助于改善预后；肿瘤发牛后，应调整免疫抑制方案，对于合并肝炎等病毒感染的患者，术后应常规行抗病毒治疗。

关键词：器官移植手术后并发症肿瘤

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亲属活体供肾移植后近期及中长期供者和受者的安全性分析

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中华器官移植杂志 2009年第10期30卷 616-619页

作者：宫念樵陈知水曾凡军明长生张伟杰林正斌周平陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其... 详细信息

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其中术后1～3年者14名，3～5年者11名，5年以上者5名）。以GFR作为评估供、受者肾功能的主要指标，比较供、受者手术前后的肾功能以及血压和尿蛋白。GFR的计算采用同位素发射计算机辅助断层显像法（GFRECT法）、24h尿肌酐（Cr）清除率法（GFR-24h Urine法）及Cockcroft-Gault公式法（GFR-Cr法）。结果取肾前106名供者的GFR-ECT和GFR—Cr分别为（1．51±0．13）和（1．99±0．42）ml／s，GFR-ECT是GFR—Cr的75．8％；术后第5天，供者的GFR—Cr为（1．40±0．33）ml／s，为术前的70．5％；术后3个月内、3个月至1年和1年以上者的GFR-Cr分别为（1．47±0．28）、（1．36±0．24）和（1．37±0．23）ml／s，分别为取肾术前的73．7％、68．0％和68．6％；术后1～3年者、3～5年者及5年以上者的GFR-Cr与超过1年者整体的GFR-Cr比较，差异无统计学意义（P〉O．05）。4名供者术后尿蛋白为±，均为术后超过1年者；4名供者血压升高。术后3个月、1年及1年以上，受者的GFR-Cr分别为（1．09±0．26）、（1．20±0．31）和（1．07±0．29）ml／s。结论术后近期供者的GFR会下降，并小幅波动，术后中长期其GFR接近术前70％的水平，并趋于稳定。亲属活体供肾移植术后供、受者具有良好的安全性。

关键词：肾移植活体供者手术后期间肾功能试验

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利用DIGE和RP-HPLC-ESI/MS技术寻找慢性移植肾失功患者血清标志物

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实用医学杂志 2009年第20期25卷 3363-3366页

作者：高英吴轲徐逸周鸿敏何文涛张维娜林星光蔡兰军雒真龙方泽民郭晖周绍棠昌盛杜敦峰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部卫生部器官移植重点实验室武汉市430030

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组... 详细信息

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组)、急性排斥组(AR组)和健康对照组(N组)。血清样本经多重亲和排除柱去除高丰度蛋白处理后,使用2-DDIGE技术找到差异蛋白点。切下这些差异蛋白点,胰蛋白酶消化,经RP-HPLC-ESI/MS分析鉴定,在另一独立样本中对鉴定出的差异蛋白Galectin-7进行ELISA验证。结果:在CGD组患者血清中差异表达的蛋白共有39个,质谱鉴定出22个,包括载脂蛋白A-I前体,补体C4-A前体,Galectin-7等。ELISA结果提示CGD组患者血清中Galectin-7的表达较SRF组和N组有明显增高。结论:找到的这些差异蛋白具有不同的生物功能,为大样本、多中心的验证奠定了基础。Galectin-7可能是CGD的血清标志物,并对CGD的发病机制和治疗策略提供新的思路。

关键词：肾移植慢性移植物失功蛋白组学血清

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CD3/CD46共刺激通路调控同种移植免疫反应的实验研究

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中国免疫学杂志 2009年第1期25卷 68-71页

作者：陈栋张驰张艳黄亚冰朱珉刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉430030

目的:探讨CD3/CD46共刺激通路对同种移植免疫反应的调控作用及其机制。方法:分离转人CD46的C57BL/6小鼠的脾脏淋巴细胞,采用MACS免疫磁珠分选CD4+T细胞,以阴性对照组作为对照,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共... 详细信息

目的:探讨CD3/CD46共刺激通路对同种移植免疫反应的调控作用及其机制。方法:分离转人CD46的C57BL/6小鼠的脾脏淋巴细胞,采用MACS免疫磁珠分选CD4+T细胞,以阴性对照组作为对照,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素2(IL-2),γ-干扰素(γ-IFN),白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGFβ-)的水平,并以BALB/c小鼠的脾细胞作为刺激细胞,以转人CD46的C57BL/6小鼠的淋巴细胞作为反应细胞进行同种混合淋巴细胞培养,MMT法检测淋巴细胞增殖活性。结果:与CD3组或阴性对照组相比,ConA、CD3/CD28、CD3/CD46和CD3/CD28/CD46共刺激后,CD4+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/CD46共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/CD46共刺激组显著增高(P<0.05)。CD3/CD28共刺激后,IL-2和γ-IFN水平较阴性对照组和CD3组显著升高(P<0.05),CD3/CD46共刺激后,IL-10和TGFβ-水平较阴性对照组、ConA组、CD3组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05)。CD3/CD46共刺激后可以显著地抑制同种混合淋巴细胞的增殖反应(P<0.05)。结论:CD3/CD46共刺激通路可以诱导CD4+T细胞产生IL-10和TGFβ-,抑制同种移植免疫反应的发生。

关键词： CD46 共刺激分子同种移植

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西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较

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中华器官移植杂志 2009年第2期30卷 100-102页

作者：何凡陈知水蔡明徐胜元吴敏华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β... 详细信息

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β（TGF-β）；TGF-β＋白细胞介素6（IL-6）；TGF-β＋IL-6＋SRL；TGF-β＋IL-6＋CsA。72h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平，观察CD4^＋T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4^＋T淋巴细胞体外分化的影响。结果在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后，TGF-β可诱导Foxp3^＋细胞（调节性T淋巴细胞，Treg）的增殖与分化，而TGF-β＋IL6可诱导Th17细胞的增殖与分化。在培养体系中加入SRL和CsA，均可使Th17细胞的增殖与分化减少；SRL可促进Treg的增殖与分化，而CsA抑制Treg的增殖与分化。结论SRL可以促进CD4^＋T淋巴细胞向Treg增殖与分化，而抑制Th17细胞的增殖与分化；CsA既抑制Treg的增殖与分化，又抑制Th17细胞的增殖与分化。

关键词：西罗莫司环孢菌素 T淋巴细胞细胞分化

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门静脉输注诱导耐受中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的不同作用

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武汉大学学报（医学版） 2009年第3期30卷 290-293,F0002页

作者：何凡陈知水徐胜元蔡明吴敏李红洲华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并... 详细信息

目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并比较心脏移植物存活时间。结果:过继输注PVI鼠T细胞后,可以转移耐受;过继输注PVI鼠CD4+T细胞,可使供体来源的C57供心存活时间延长,而对第三系C3H供心存活时间无明显延长。过继输注PVI鼠CD8+T细胞无此效应。结论:在门静脉输注诱导耐受的模型中,CD4+T细胞可以转移耐受,且此耐受为抗原特异性,CD8+T细胞无此效应。

关键词： T细胞门静脉输注免疫耐受

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