检索结果-内蒙古大学图书馆

CD8^+CD28^-NRP-1^+T细胞在肾移植手术后患者外周血中的比例变化及意义

现代免疫学 2007年第3期27卷 234-239页

作者：童荔张利改周鸿敏蔡兰军徐逸吴轲李俊华陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部/卫生部重点实验室武汉430030 解放军总医院器官移植中心北京100091

用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例... 详细信息

用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例,慢性移植物肾病者20例,急性排斥者15例,取受试者外周静脉血,分离单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞在CD8^+CD28^-T细胞群中的比例。结果表明组间比较得出,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞比例在四组之间均有统计学差异(P<0.05)。其中在长期存活组表达量最高,其CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts的比例分别为16.15%±1.49%和11.90%±2.73%,其次为正常健康人(13.83%±2.38%、9.44%±2.03%),然后为慢性移植物肾病组(8.03%±2.67%、5.26%±0.65%),而急排组最低(3.34%±1.73%、2.36%±1.14%),并且四组间这两种细胞呈同一变化趋势且前者的变化幅度大于后者。组内比较显示,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞比例均高于CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞(P<0.05)。CD8^+CD28 NRP-1^+Ts细胞可以从整体水平上反映肾移植术后患者的免疫状态,它比CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞更能全面的反映术后患者的预后情况。

关键词： neuropilin-1 Foxp3 CD8^+ CD28^- Ts细胞肾移植

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扁桃体切除对肾移植术后IgA肾病复发的影响

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中华医学杂志 2018年第3期98卷 176-180页

作者：朱兰冯豪贾金东彭澍李月强邵菊芳何晓峰官阳郭晖林正斌陈刚卫生部/教育部重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科武汉大学人民医院病理科

目的初步探讨扁桃体切除治疗肾移植术后复发性IgA肾病的临床效果。方法收集11例自2014年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所行移植肾穿刺活检确诊IgA肾病复发的病例，行扁桃体切除治疗，中位随访14（4—38）个月，... 详细信息

目的初步探讨扁桃体切除治疗肾移植术后复发性IgA肾病的临床效果。方法收集11例自2014年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所行移植肾穿刺活检确诊IgA肾病复发的病例，行扁桃体切除治疗，中位随访14（4—38）个月，观察扁桃体切除前后的尿蛋白、尿红细胞、估算肾小球滤过率（eGFR）水平及血清总IgA水平变化，并统计该组病例扁桃体切除后的移植受者和移植。肾存活率。结果11例受者中，8例在扁桃体切除后蛋白尿显著减少甚至转阴，并在之后的随访期内保持良好。其余3例受者的扁桃体切除对缓解蛋白尿疗效不明显，最终移植肾均于继续随访1年内失功，患者恢复血透治疗。影响扁桃体切除治疗效果的因素可能包括：原发病为急进性肾小球肾炎合并新月体形成、二次移植IgA肾病复发、出现蛋白尿后干预时机过晚等。本组病例扁桃体切除后血清中IgA水平显著下降，切除后随访期间均无急性排斥反应或感染发生，11例受者全部存活，8例移植肾存活。结论扁桃体切除是移植肾复发性IgA。肾病比较可靠有效的治疗方式，可以在未来的临床中逐步推广应用，但需要注意进行干预的时机及原发IgA肾病的病理特点。

关键词：肾移植 IgA肾病扁桃体切除

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小鼠胰岛移植模型的系列改进

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第6期42卷 685-688页

作者：马俊磊曾怡张冬梅姜松李幸戴晓敏汪晶宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室器官移植教育部重点实验室武汉430030 中南大学湘雅医学院附属湘雅医院内分泌科长沙410008 广东东莞太平人民医院核医学科东莞523905

目的改进小鼠胰岛的分离、纯化及移植方法。方法基于传统小鼠胰岛移植模型,优化胶原酶消化液配方,标准化胰腺组织的消化过程,改用Histopaque 1077作为纯化胰岛的离心介质,改进胰岛制备物输送至肾包膜下的方法;相差显微镜下观察所获胰岛... 详细信息

目的改进小鼠胰岛的分离、纯化及移植方法。方法基于传统小鼠胰岛移植模型,优化胶原酶消化液配方,标准化胰腺组织的消化过程,改用Histopaque 1077作为纯化胰岛的离心介质,改进胰岛制备物输送至肾包膜下的方法;相差显微镜下观察所获胰岛的形态,用双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色并计算胰岛产量及纯度;采用吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法观察胰岛活性;制备糖尿病小鼠模型,设计胰岛移植组(10只)及假手术对照组(10只),检验胰岛移植物治疗糖尿病的效果。结果健康胰岛有完整包膜,DTZ染色后呈猩红色,平均每只小鼠可收获(200±30)个胰岛团,终纯度(90±5)%;荧光显微镜下,AO-PI染色后,正常胰岛显示绿色,死亡胰岛显示红色,胰岛存活率为(93±3)%;糖尿病小鼠接受同系胰岛移植后,90%的小鼠逆转糖尿病,对照组小鼠的血糖无改善。结论成功改进胰岛移植模型,简化和标准化小鼠胰岛的分离、纯化及移植过程,有助于该模型成为胰岛移植研究的常规方法。

关键词：胰岛分离纯化小鼠胰岛移植

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肥大细胞体外诱生CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的作用

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现代免疫学 2009年第6期29卷 453-457页

作者：张维娜吴轲周鸿敏何文涛高英汪理林星光方泽民蔡兰军周巧丹雒真龙陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比... 详细信息

探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1∶2、1∶1、2∶1)置于48孔培养板中培养,作为三个实验组;未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3抗体和CD28抗体各2μg/ml,IL-2 1 000U/ml,5 d后流式检测Foxp3表达情况。RT-PCR,免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。与对照组相比,实验组Foxp3表达均升高(对照组:3.37%±0.40%;实验组为:8.23%±0.80%、10.87%±1.25%、13.63%±0.55%)。RT-PCR和免疫组化均检出TGF-β1表达。肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,可能与肥大细胞表达TGF-β1有关。

关键词：小鼠肥大细胞 CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞 TGF-β1

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老年大鼠肝脏缺血再灌注损伤抑制自噬的作用机理

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中华器官移植杂志 2016年第11期37卷 677-681页

作者：何莹张季赵圆圆宫念樵朱元莉华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所武汉430030

目的探究老年大鼠肝脏缺血再灌注损伤抑制自噬的作用及其机理。方法选取鼠龄为3个月（3M）和24个月（24M）健康雄性Lewis大鼠，采用随机数字表法将大鼠分为3MIRI组、3M假手术组、24MIRI组、24M假手术组。实验组采用无创血管夹夹闭肝左... 详细信息

目的探究老年大鼠肝脏缺血再灌注损伤抑制自噬的作用及其机理。方法选取鼠龄为3个月（3M）和24个月（24M）健康雄性Lewis大鼠，采用随机数字表法将大鼠分为3MIRI组、3M假手术组、24MIRI组、24M假手术组。实验组采用无创血管夹夹闭肝左叶及中叶血流（约70％肝缺血），肝脏在常温下（37℃±0．5℃）缺血30min，再灌注6h。假手术组仅解剖分离肝十二指肠韧带。术后6h，采集各组大鼠血清样本，检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）等肝功能指标，取各组大鼠肝组织进行肝脏病理检查，共聚焦显微镜下观察各组大鼠肝组织中LC3B自噬小体的数量，并采用蛋白质印迹法分析自噬相关蛋白的变化。结果经历缺血再灌注损伤后，24MIRI组大鼠血清ALT和AST水平较3MIRI组显著升高，两组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。肝脏病理检查结果显示，3MIRI组大鼠肝脏主要表现为点灶状坏死，24MIRI组大鼠肝脏主要表现为片状坏死及混合炎症细胞浸润。共聚焦结果显示，24M假手术组大鼠肝组织中自噬小体数量较3M假手术组略有下降，但经历缺血再灌注损伤后，24MIRI组大鼠肝组织中自噬小体数量较3MIRI组显著下降（P〈0．05），并且24MIRI组大鼠肝组织自噬相关蛋白（Beclin1蛋白和ATG4B蛋白）水平较3MIRI组严重下调（P〈0．05）。结论老年大鼠肝脏缺血再灌注损伤抑制了自噬作用，其机理可能与肝脏缺血再灌注损伤使自噬相关蛋白水平的显著下降有关。

关键词：老年大鼠肝脏再灌注损伤自噬

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大鼠胰岛的分离和纯化

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第3期38卷 413-416页

作者：侯凌尹注增向莹李俊华陈实陈刚罗小平华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试... 详细信息

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

关键词：大鼠胰岛分离纯化

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补体调节蛋白CD46对CD4^＋T细胞的免疫调控

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实用医学杂志 2009年第15期25卷 2413-2415页

作者：陈栋张艳李明张弛黄亚冰刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部／教育部器官移植重点实验室武汉市430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉市430030

目的:探讨CD46分子对CD4+T细胞的免疫调控作用及其机制。方法:分离人CD4+T淋巴细胞,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共刺激对CD4+T细胞的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、... 详细信息

目的:探讨CD46分子对CD4+T细胞的免疫调控作用及其机制。方法:分离人CD4+T淋巴细胞,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/CD46、CD3/CD28/CD46共刺激对CD4+T细胞的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的水平。结果:与CD3组或阴性对照组相比,ConA、CD3/CD28、CD3/CD46和CD3/CD28/CD46共刺激后,CD4+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/CD46共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/CD46共刺激组显著增高(P<0.05)。CD3/CD28共刺激后,IL-2和IFN-γ水平较阴性对照组和CD3组显著升高(P<0.05),CD3/CD46共刺激后,IL-10和TGF-β水平较阴性对照组、ConA组、CD3组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05)。结论:补体调节蛋白CD46可以诱导CD4+T细胞的增殖反应并产生IL-10和TGF-β,有可能抑制同种移植免疫反应。

关键词：补体 CD46 CD4+T细胞

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反向克隆法大鼠anti-ERK2腺病毒载体构建

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中国现代医学杂志 2006年第1期16卷 21-23页

作者：董冲刘云宫念樵陈曦林唐莉朱国超陈知水叶启发华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部/卫生部重点实验室湖北武汉430030 中南大学湘雅三医院器官移植研究院湖南长沙410008

目的正义基因反向克隆法构建大鼠anti-ERK2腺病毒载体。方法酶切质粒p3XFLAG-CMV7.1-ERK2,得到ERK2cDNA片段,连接到T载体进行测序,经测序正确反向克隆法插入质粒pShuttle中,最后转入AdEasy(tm)XLAdenoviralVectorSystem系统中得到anti-ERK2基因腺病毒载体。结果DraI和NotI双酶切鉴定anti-ERK2基因腺病毒载体,发现插入的基因序列与插入方向均符合预期目标。结论成功构建了大鼠anti-ERK2腺病毒载体,为研究移植排斥中ERK2基因治疗的作用提供了良好工具。

关键词：反向克隆 anti—ERK2 腺病毒载体

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Nrp1^＋T细胞对淋巴细胞增殖的调节作用以及对同种异体移植物的影响

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解放军医学杂志 2009年第11期34卷 1276-1280页

作者：蔡明刘畅周鸿敏裴向克石炳毅陈忠华解放军第309医院全军器官移植中心泌尿外科北京100091 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部、卫生部重点实验室

目的探讨表达神经纤毛蛋白质1(Nrp1)的T细胞(Nrp+T细胞)对体内外反应性淋巴细胞增殖的调节作用以及对同种异体移植物的影响。方法采用流式细胞术分选近交系C57BL/6j小鼠脾脏中的Nrp1+T细胞作为调节细胞,在刀豆蛋白A(Co-nA)的刺激下与标... 详细信息

目的探讨表达神经纤毛蛋白质1(Nrp1)的T细胞(Nrp+T细胞)对体内外反应性淋巴细胞增殖的调节作用以及对同种异体移植物的影响。方法采用流式细胞术分选近交系C57BL/6j小鼠脾脏中的Nrp1+T细胞作为调节细胞,在刀豆蛋白A(Co-nA)的刺激下与标记了羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)的C57BL/6j小鼠脾脏单个核细胞等比例共培养5d,对比观察反应细胞的增殖情况。采用流式细胞术分选C57BL/6j小鼠脾脏的Nrp1+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞各1×106个,分别经尾静脉注入到以Balb/C小鼠作为供者,以C57BL/6j小鼠作为受者行皮肤移植的小鼠体内,另外建立供、受体均为C57BL/6j小鼠的同品系对照组(注入等体积的RPMI1640培养基)。对比观察各组移植皮肤的存活情况。结果加入Nrp1+T细胞的实验组增殖指数为50.92%±2.30%,明显低于未加入调节性T细胞的对照组(90.31%±1.83%,P=0.0169)。实验组移植皮肤存活时间注入Nrp1+T细胞者为20.66±1.11d,注入Nrp1-T细胞者为13.20±0.76d,注入CD4+CD25+Treg者为17.67±1.0d,均明显高于对照组(9.70±1.23d,P<0.01)。结论Nrp1作为一种新型的T细胞表面分子,在淋巴细胞增殖体系中起着重要作用;与注入CD4+CD25+Treg相比,注入Nrp1+T细胞可明显延长小鼠移植皮肤的存活时间。

关键词： T淋巴细胞,调节性皮肤移植细胞增殖神经纤毛蛋白质1

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移植病理学在器官移植供者器官评估中的应用

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武汉大学学报（医学版） 2021年第2期42卷 199-205页

作者：熊艳郭晖岳朋朋钟自彪周威叶少军王彦峰叶啟发武汉大学中南医院/武汉大学肝胆疾病研究院/武汉大学移植医学中心/移植医学技术湖北省重点实验室湖北武汉430071 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/器官移植教育部重点实验室/卫生部器官移植重点实验室/中国医学科学院器官移植重点实验室湖北武汉430030 中南大学湘雅三医院/卫生部移植医学工程技术研究中心湖南长沙410013

随着公民逝世后器官捐献供体来源标准扩大之后,移植病理学在器官质量评估中的地位越来越重要。本文参照器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)——肝移植/肾移植和相应器官移植的指南,综述了供者器官病理学评估的基本原则、活检时机... 详细信息

随着公民逝世后器官捐献供体来源标准扩大之后,移植病理学在器官质量评估中的地位越来越重要。本文参照器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)——肝移植/肾移植和相应器官移植的指南,综述了供者器官病理学评估的基本原则、活检时机、活检方法和目前国际上采用的组织病理学评估标准,为供者器官质量评估提供准确的病理学参考依据。

关键词：器官移植移植病理学供者器官质量评估肝移植肾移植供肝评估供肾评估脂肪肝活检

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