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微生物学报 2022年第10期62卷 3732-3740页

作者：李海新寇秀颖谢新强张菊梅吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 无限极(中国)有限公司广东广州510405

食源性致病菌严重威胁人类的生命健康。服用抗生素是目前最有效的治疗手段。但不规范使用抗生素,导致耐药性细菌日趋普遍。乳酸菌是公认的食品级安全微生物,因其具有拮抗致病菌、增强免疫功能、加强肠道屏障、平衡肠道菌群等功能而具有... 详细信息

食源性致病菌严重威胁人类的生命健康。服用抗生素是目前最有效的治疗手段。但不规范使用抗生素,导致耐药性细菌日趋普遍。乳酸菌是公认的食品级安全微生物,因其具有拮抗致病菌、增强免疫功能、加强肠道屏障、平衡肠道菌群等功能而具有良好的应用前景,有望成为下一代安全、稳定、经济的生物抗菌剂,以减少甚至替代抗生素的使用。本文通过阐述乳酸菌抗菌物质、抗菌机制及抗菌功能特性等,以促进乳酸菌的研究和应用。

关键词：乳酸菌食源性致病菌抗菌机制抗菌物质

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肺炎克雷伯菌对头孢菌素类抗生素异质性耐药研究

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浙江海洋大学学报（自然科学版） 2024年第3期43卷 268-276页

作者：史梦兰李文茹朱爱意张建设谢小保浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心浙江舟山316022 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室农业农村部农业微生物组学重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)常引发临床细菌性感染,其对抗生素的异质性耐药(heteroresistance,HR)经常导致治疗失败。研究KP对头孢菌素类抗生素的异质性耐药情况,可为治疗KP感染提供参考。收集100株临床分离的KP,采用微量... 详细信息

肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)常引发临床细菌性感染,其对抗生素的异质性耐药(heteroresistance,HR)经常导致治疗失败。研究KP对头孢菌素类抗生素的异质性耐药情况,可为治疗KP感染提供参考。收集100株临床分离的KP,采用微量肉汤稀释法、Kirby-Bauer(K-B)药敏纸片法、菌群谱型分析法(population analysis profile,PAP)、耐药稳定性试验以及适应成本试验探究KP的异质性耐药特征。微量肉汤稀释法测定KP对头孢他啶(ceftazidime,CAZ)和头孢吡肟(cefepime,FEP)的耐药率分别为23%和25%。K-B药敏纸片法初筛得到KP对CAZ和FEP的异质性耐药率为33%和23%。PAP试验复筛确认了9株FEP异质性耐药菌株,检出率为9%,耐药亚群发生频率为1×10^(-6)~4×10^(-2)。在无抗生素条件下传代50代后,异质性耐药菌株KS38耐药亚群的耐药水平发生部分回复,异质性耐药菌株KR9耐药亚群的耐药水平保持稳定。适应成本试验结果表明,KS38耐药亚群比原始菌株生长速度快(4~8 h),且有显著差异(P<0.05),KR9耐药亚群和亲本菌株的生长速率之间均无统计学差异(P>0.05)。肺炎克雷伯菌对头孢菌素类抗生素的异质性耐药率相对偏低,但耐药亚群的发生频率较高。耐药亚群的稳定性不同,但经过50代传代后都保持在临床耐药水平,均未产生生长适应成本。因此在用头孢菌素治疗KP感染时要注意HR的发生,防止出现更高水平的耐药亚群,导致治疗失败。

关键词：肺炎克雷伯菌异质性耐药头孢菌素适应成本耐药稳定性

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我国食源性诺如病毒GⅡ.2[P2]型毒株基因组结构与衣壳蛋白功能研究

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现代食品科技 2022年第12期38卷 169-175页

作者：梁燕惠高珺珊薛亮王林平孟洛冰蔡伟程李贻静张菊梅王涓陈谋通叶青华吴诗刘细霞吴清平湖北师范大学生命科学学院食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室湖北黄石435002 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

食源性诺如病毒(Norovirus)是引起全球食品安全事件的主要微生物病原,具有丰富的遗传多样性,基因型较复杂,近年来GⅡ.2逐渐成为我国主要流行基因型之一。为了解食源性诺如病毒GⅡ.2型变异特点,该研究以2015年在广州地区检出的GⅡ.2[P2]... 详细信息

食源性诺如病毒(Norovirus)是引起全球食品安全事件的主要微生物病原,具有丰富的遗传多样性,基因型较复杂,近年来GⅡ.2逐渐成为我国主要流行基因型之一。为了解食源性诺如病毒GⅡ.2型变异特点,该研究以2015年在广州地区检出的GⅡ.2[P2]型GZ2015-L335毒株为对象,对其基因组结构及衣壳蛋白功能进行了系统表征。该毒株基因全长为7 496 bp,在线基因分型结果表明其为GⅡ.2[P2]基因型。通过克隆其衣壳蛋白VP1基因,借助杆状病毒表达系统获取重组VP1蛋白,并采用氯化铯密度梯度离心法进行纯化。SDS-PAGE和Western blot实验结果表明重组VP1蛋白分子量约为58 ku;透射电镜结果显示该蛋白可自组装形成直径约为30 nm的病毒样颗粒(Virus-like Particle,VLP);ELISA结果显示该VLP与抗GⅡ.2[P]衣壳P颗粒血清具有较高结合活性。此外,受体结合实验证实该VLP与A/B/O等分泌型及非分泌型唾液呈现出广泛的结合作用。该研究对GⅡ.2[P2]型GZ2015-L335毒株基因组结构进行了系统分析,成功制备并表征了其病毒样颗粒,结果将为食源性诺如病毒的高效抗体研制及新型检测技术研发提供支撑。

关键词：食源性诺如病毒 GⅡ.2[P2] 基因组结构病毒样颗粒受体结合功能

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灰树花活性多糖构效关系研究进展

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微生物学通报 2022年第8期49卷 3401-3419页

作者：谢渟肖春王涓黄龙花吴清平华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 蕉岭铁汉大健康产业投资有限公司广东蕉岭514100

灰树花是一种珍贵的食药用菌,具有降血糖、抗肿瘤、免疫调节和抗病毒等多种生物活性。灰树花多糖是其主要的活性成分,多糖的生物活性与多糖的结构密切相关。本文综述了从20世纪80年代起国内外已报道的灰树花活性多糖的结构表征。部分研... 详细信息

灰树花是一种珍贵的食药用菌,具有降血糖、抗肿瘤、免疫调节和抗病毒等多种生物活性。灰树花多糖是其主要的活性成分,多糖的生物活性与多糖的结构密切相关。本文综述了从20世纪80年代起国内外已报道的灰树花活性多糖的结构表征。部分研究认为多糖的降血糖活性可能与β-1,6-葡聚糖主链化学结构相关,而灰树花多糖结构为β-1,6主链或β-1,3主链葡聚糖时具有较好的抗肿瘤活性。然而多糖结构异常复杂,精细结构的解析困难,导致目前灰树花多糖结构表征一般止步于单糖组成、分子量、糖苷键类型、分支结构和粗略分子链构象,但二维核磁(two dimensional nuclear magnetic resonance,2D-NMR)和高分辨质谱联用等技术的发展将有助于解开灰树花多糖构效关系,并为灰树花活性多糖的开发利用提供理论依据。

关键词：灰树花多糖降血糖抗肿瘤结构表征构效关系

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广州地区GII.4 Sydney 2012[P31]型诺如病毒GZ2013-L10毒株病毒样颗粒功能和免疫原性鉴定

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微生物学通报 2022年第6期49卷 2256-2265页

作者：王林平高珺珊薛亮梁燕惠洪晓静张菊梅任羽吴清平喀什大学生命与地理科学学院新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室新疆喀什844000 广东省科学院微生物研究所广东省科学院华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

【背景】诺如病毒(Norovirus,NoV)是全球范围内引起急性胃肠炎暴发的主要病原体之一,其中GII.4型通过不断变异在人群中持续存在并占据诺如病毒感染的主导地位,尤其GII.4 Sydney 2012[P31]变异株自2012年出现以来在全球各地持续流行至今... 详细信息

【背景】诺如病毒(Norovirus,NoV)是全球范围内引起急性胃肠炎暴发的主要病原体之一,其中GII.4型通过不断变异在人群中持续存在并占据诺如病毒感染的主导地位,尤其GII.4 Sydney 2012[P31]变异株自2012年出现以来在全球各地持续流行至今。【目的】制备广州地区GII.4 Sydney 2012[P31]型诺如病毒毒株GZ2013-L10的病毒样颗粒(virus like particle,VLP),并系统表征其功能及免疫原性特点。【方法】从毒株GZ2013-L10中扩增ORF2基因并克隆构建重组转座载体PFast Bac1-L10-ORF2,进一步转化至大肠杆菌DH10Bac构建重组杆状病毒质粒,进而在昆虫细胞sf9中表达病毒样颗粒并通过超速离心纯化,最后经透射电镜、Western blotting和受体结合实验对病毒样颗粒进行表征。此外,将免疫小鼠获得的病毒抗血清通过间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和受体结合阻断试验进行验证。【结果】成功构建了重组杆状病毒质粒Bacmid-L10-ORF2并获得病毒样颗粒,电镜结果表明病毒样颗粒直径约为30 nm,SDS-PAGE和Western blotting显示蛋白大小约为58 k Da。受体结合实验结果显示,病毒样颗粒能与A/B/O等分泌型唾液受体及猪胃黏膜蛋白结合,而与非分泌型唾液受体均不结合。免疫小鼠获得效价为1.3×10^(5)的抗血清,但ELISA结果显示其与不同基因型诺如病毒衣壳蛋白无交叉免疫活性。此外,抗血清对同型病毒样颗粒具有受体中和阻断作用,但对不同型别病毒样颗粒(包括GII.8、GII.17和GII.3)无中和效果。【结论】本研究制备并系统表征了广州地区GZ2013-L10毒株的病毒样颗粒及其抗血清,其研究结果可为解析其流行原因以及疫苗研发提供参考。

关键词：诺如病毒病毒样颗粒功能鉴定免疫原性抗血清

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绣球菌属菌类多糖的提取、结构特征和生物活性研究进展

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中国食用菌 2025年第1期44卷 1-10页

作者：郝宇凡胡惠萍沈若琳王玥婷施心雨米云冲刘轩姜明刘远超牡丹江师范学院生命科学与技术学院黑龙江牡丹江157012 广东省科学院微生物研究所/华南应用微生物国家重点实验室/广东省微生物安全与健康重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

绣球菌属菌类,以其丰富的营养价值和显著的生物活性,近年来在全球范围内受到食品与医药科学界的广泛关注。多糖作为绣球菌属菌类的主要活性成分之一,具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等作用。通过对近年来国内外有关绣球菌属菌类多糖的提... 详细信息

绣球菌属菌类,以其丰富的营养价值和显著的生物活性,近年来在全球范围内受到食品与医药科学界的广泛关注。多糖作为绣球菌属菌类的主要活性成分之一,具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等作用。通过对近年来国内外有关绣球菌属菌类多糖的提取方法、化学结构和生物活性的文献进行总结,以期为绣球菌属菌类开发利用提供参考。

关键词：绣球菌多糖提取工艺化学结构生物活性

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噬菌体作为指示病毒的研究和应用进展

噬菌体作为指示病毒的研究和应用进展

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ASTF 2023（第五届）抗菌科学与技术论坛

作者：孙廷丽谢小保广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室农业农村部农业微生物组学重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室

近年来,病毒性疾病的高发频发已经成为了世界性的公共卫生问题,给经济和社会造成了巨大的影响。加强对病毒的生命周期、传播规律、环境抗性等的研究,对于病毒性疾病的预防、控制、疫苗开发及消毒等都具有积极的意义。在对上述问题进行... 详细信息

近年来,病毒性疾病的高发频发已经成为了世界性的公共卫生问题,给经济和社会造成了巨大的影响。加强对病毒的生命周期、传播规律、环境抗性等的研究,对于病毒性疾病的预防、控制、疫苗开发及消毒等都具有积极的意义。在对上述问题进行研究时,直接以相关病毒为研究对象是是非常理想的,但在实际实施过程中却受到各种限制。此时,使用指示病毒或模式生物进行替代性的研究,从中获得相关可迁移的信息,是非常有效的技术手段。噬菌体是一种细菌病毒,以特定的细菌为宿主,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,因此将噬菌体作为高等生物病毒的指示生物或替代生物,已成为新的研究趋势并受到广泛关注。本文通过对目前国内外以噬菌体作为指示生物的研究和应用的情况进行总结分析,综述了噬菌体作为指示病毒的优势及可行性,以及病毒在各领域的研究现状和应用要点,对进一步以噬菌体作为指示病毒的研究和应用进行了展望,为下一步研究提供建议和参考。

关键词：噬菌体指示生物应用研究标准化

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洗手产品除菌效果评价的离体试验方法研究

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工业微生物 2022年第6期52卷 10-15页

作者：孙廷丽李彩玲陈静叶一均林小涵杨义熙谢小保广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室/农业农村部农业微生物组学重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

本文以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,以仿真皮为实验载体,以四种洗手产品为试验对象,验证了仿真皮离体试验与在体试验的相关性,建立了一种洗手产品离体洗手除菌效果评价的试验方法,并建立以统计学为基础的评价方法。结果显示,离... 详细信息

本文以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,以仿真皮为实验载体,以四种洗手产品为试验对象,验证了仿真皮离体试验与在体试验的相关性,建立了一种洗手产品离体洗手除菌效果评价的试验方法,并建立以统计学为基础的评价方法。结果显示,离体仿真皮为试验载体时,与在体试验相关性好;离体实验方法适用于多种洗手产品,具有良好的可重复性,是一种简单可行的洗手产品除菌效果的评价方法,具有较好的应用价值。

关键词：离体洗手模型洗手产品除菌效果试验方法

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嗜碱芽孢杆菌细胞破碎方法比较及其功效成分分析

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工业微生物 2024年第4期54卷 188-195页

作者：蒙金廖刘新琳谢小保施庆珊余旭亚广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点试验室/农业农村部农业微生物组学重点试验室/广东省菌种保藏与应用重点试验室广东广州510070 昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 广东迪美新材料科技有限公司广东肇庆526238

极端微生物是最适合生活在极端环境中的微生物的统称,体内富含多种功效成分,在化妆品领域具有相当广阔的应用前景,所以获取极端微生物中的活性成分十分重要。对此,文章以开发极端微生物中的活性成分为目的,以期为嗜碱微生物在化妆品领... 详细信息

极端微生物是最适合生活在极端环境中的微生物的统称,体内富含多种功效成分,在化妆品领域具有相当广阔的应用前景,所以获取极端微生物中的活性成分十分重要。对此,文章以开发极端微生物中的活性成分为目的,以期为嗜碱微生物在化妆品领域的开发和利用提供可靠的依据。研究选用嗜碱芽孢杆菌进行单因素试验以确定其培养条件,通过三种常见的破碎方法确定嗜碱芽孢杆菌的最佳破碎方式,然后测定溶胞物中的功效成分并评估相应成分的抗氧化功效。试验结果表明,嗜碱芽孢杆菌的最佳培养条件为接种量3%,培养温度30℃,培养时间26 h,转速180 r/min。通过对比三种常用的破碎法得出,高压细胞破碎法的效果最佳,破碎后的菌体浓度最低,得到的蛋白质含量最高。此外,研究还测定了溶胞物中活性物质的含量,并进行了抗氧化效果评估。结果表明,溶胞物中多糖、多酚和多肽的含量分别为2.43 mg/mL、6.27 mg/mL和0.607 mg/mL。嗜碱芽孢杆菌对DPPH自由基、ABTS自由基的清除率随着溶胞物质量分数的升高而逐渐增强,当质量分数为20%时能够达到较好的效果,此时DPPH自由基、ABTS自由基的清除率分别为43.3%、37%,铁原子还原能力为33.9%。

关键词：嗜碱芽孢杆菌溶胞物细胞破碎抗氧化

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1株半乳糖地质杆菌分离筛选及其对畜禽养殖固体有机废弃物的处理效果研究

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山东农业科学 2025年第1期57卷 96-102页

作者：谢小林陈猛李成江周莲刘玉敏王勇姚青朱红惠广东省科学院微生物研究所/华南应用微生物国家重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室/农业农村部农业微生物组学重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 广东博沃特生物技术有限公司广东韶关512000 华南农业大学园艺学院广东广州510642

为获得畜禽养殖固体有机废弃物的高效降解菌株,本研究采用稀释涂布高温培养方法从东莞市中心定点屠宰场的猪粪泥堆肥中分离得到一株嗜热高温菌株BWTGW1.1,经形态学、生理生化、16S rRNA基因序列建树分析鉴定,初步确定为半乳糖地质杆菌(G... 详细信息

为获得畜禽养殖固体有机废弃物的高效降解菌株,本研究采用稀释涂布高温培养方法从东莞市中心定点屠宰场的猪粪泥堆肥中分离得到一株嗜热高温菌株BWTGW1.1,经形态学、生理生化、16S rRNA基因序列建树分析鉴定,初步确定为半乳糖地质杆菌(Geobacillus galactosidasius),并进一步对BWTGW1.1菌株的耐盐、耐高温、产耐高温蛋白酶能力和畜禽养殖固体有机废弃物的处理效果进行研究。结果表明:在耐盐方面,BWTGW1.1菌株在盐浓度为1.5%的条件下生长良好,培养48 h后OD_(600)=1.1;在耐高温和产耐高温蛋白酶能力方面,BWTGW1.1菌株85℃培养12 h依然能存活,60℃培养48 h后可产生水解的透明圈,且水解圈直径/菌落直径大于2.0。在116 m^(3)大型立式固体发酵罐中,BWTGW1.1菌液+普通菌剂能使堆体温度发酵24 h就达到58℃,较普通菌剂单独处理提高13℃,且60~70℃高温持续时间达108 h,而普通菌剂处理仅持续60 h。BWTGW1.1菌液+普通菌剂处理猪粪泥发酵168 h后黄瓜种子发芽指数达到86.75%,较普通菌剂处理提高26.24%,表明BWTGW1.1在猪粪泥等畜禽养殖固体有机废弃物堆肥发酵过程中具有潜在的应用价值。

关键词：半乳糖地质杆菌嗜热高温菌畜禽养殖固体废弃物堆肥

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